專利名稱：一種植物源農(nóng)藥的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植物源農(nóng)藥及其配制方法，特別是涉及一種以白喉烏頭總生物堿提取物 為原料的兼有抑菌和殺蟲活性的植物源農(nóng)藥及其配制。
背景技術(shù)：
多年來，化學(xué)農(nóng)藥因其高效、速效、廉價(jià)和使用方便而在全世界范圍內(nèi)被廣泛使用，在
植物保護(hù)中處于壟斷地位。然而，20世紀(jì)80年代以后，隨著大眾對(duì)健康和環(huán)境問題的日益重 視，化學(xué)農(nóng)藥因其殘留，環(huán)境污染等問題而備受人們質(zhì)疑。植物源農(nóng)藥成了較為理想的替代 產(chǎn)品之一。植物源農(nóng)藥，就是直接利用或提取植物的根、莖、葉、花、果、種子等或利用其 次生代謝物質(zhì)制成具有殺蟲或殺菌作用的活性物質(zhì)。目前，魚藤、雷公藤、除蟲菊、印楝、 苦參、烏柏、龍葵、鬧羊花、馬桑、大蒜等的殺蟲、殺菌特性相繼被發(fā)現(xiàn)和利用，其中魚藤 酮、除蟲菊酯、印楝素等已研究的較為成功。
白喉烏頭C4cow'加附fewcoWo/m/加Worosch)為毛茛科烏頭屬多年生草本植物，在我國主 要分布于新疆及甘肅西北部。近年來，由于過度放牧、草場(chǎng)退化等原因，烏頭類植物在新疆 的伊犁草原上滋生蔓延，僅白喉烏頭的分布面積就達(dá)600萬畝，是當(dāng)?shù)刈钪饕挠卸局参铩?以白喉烏頭為代表的毒害草的過度生長，既嚴(yán)重危害牲畜的健康又排擠牧草的生長，給畜牧 業(yè)生產(chǎn)造成嚴(yán)重?fù)p失。目前對(duì)烏頭類毒草的防治主要是采取人工采挖，對(duì)為害最嚴(yán)重的白喉 烏頭缺乏利用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于發(fā)明一種植物源農(nóng)藥，其特征在于該農(nóng)藥主要由白喉烏頭總生物堿 提取物添加非離子表面活性劑吐溫80配制而成。
其配制方法為將白喉烏頭根部洗凈后自然晾干，粉碎過篩后取根粉用95%乙醇冷浸3 次，每次48小時(shí)；合并浸提液，減壓濃縮回收乙醇，所得浸膏用2%鹽酸溶解；酸水液用石 油醚脫脂后加濃氨水堿化至pH9 10,用氯仿萃取多次，合并萃取液回收氯仿得粘稠浸膏； 自然干燥后用0.1%的吐溫80水溶液溶解，配成合適濃度的原液，室溫下保存?zhèn)溆?，使用時(shí) 可根據(jù)實(shí)際需要，加水稀釋成不同濃度施用。以上操作均可在室溫下進(jìn)行。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于1.對(duì)環(huán)境安全，主要原料來源于植物；2.原料易得，變害為利，加
工簡單，對(duì)設(shè)備要求低；3.生產(chǎn)過程所用有機(jī)溶劑如酒精和氯仿等皆可回收重復(fù)使用，節(jié)約
成本；4.由多種烏頭生物堿共同發(fā)揮作用，害蟲或病原真菌不易產(chǎn)生抗藥性；5.兼有殺蟲 和抑菌作用；6.可與其他生物農(nóng)藥或化學(xué)農(nóng)藥混配，增強(qiáng)效果。
具體實(shí)施例方式
以下結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明的內(nèi)容，但本發(fā)明并不限制于如下實(shí)施例的范圍。 實(shí)施例一
稱取白喉烏頭根粉100g，分別加500ml、 400ml、 300ml95。/。乙醇冷浸3次，每次48小時(shí)； 合并浸提液，減壓濃縮回收乙醇，所得浸膏用2%鹽酸溶解；酸水液用石油醚脫脂后加濃氨水 堿化至pH9 10，用氯仿萃取多次，合并萃取液回收氯仿得粘稠生物堿浸膏。
實(shí)施例二-
將實(shí)施例一中的生物堿浸膏自然干燥后用100ml 0.1%的吐溫80水溶液溶解，得到lg/ml 的原液。
按實(shí)施例二配制的原液進(jìn)行室內(nèi)活性測(cè)定 抑菌活性測(cè)定
1. 平皿法抑制病原真菌菌絲生長試驗(yàn)在無菌條件下，定量吸取原液加入已滅菌的PDA培養(yǎng)
基中，搖勻后趁熱倒入直徑為卯mm的培養(yǎng)皿中制成平板，分別配成100mg/ml、 20mg/ml、
4mg/ml的含藥培養(yǎng)基，以不含藥液的處理為空白對(duì)照；用直徑7mm的無菌打孔器切取菌餅置
平板中央，每皿一片，每處理3次重復(fù)，置2『C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；定期觀察并以十字交叉法測(cè)量
菌落直徑，計(jì)算生長抑制率。
，,帛=對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑:: 對(duì)照菌落直徑-7
2. 凹玻片法抑制孢子萌發(fā)試驗(yàn)將供試病原菌培養(yǎng)一定時(shí)間后使其產(chǎn)孢，刮取孢子配成適當(dāng)
濃度的孢懸液(以10xl0低倍鏡下，每視野40 50個(gè)孢子為宜)，定量吸取與原液混合使藥液 終濃度為20mg/ml，以孢懸液中加入無菌水為對(duì)照，每處理3次重復(fù)；吸取上述混合液滴到凹 玻片上，然后架放于帶有淺層水的培養(yǎng)皿中，加蓋保濕培養(yǎng)于適宜溫度的培養(yǎng)箱中；8h、 24h 后檢查孢子萌發(fā)率(孢子芽管長度大于孢子短半徑視為萌發(fā))。
孢子萌發(fā)抑制率=對(duì)照孢子萌發(fā)率—處艦子萌發(fā)率xl00%
對(duì)照孢子萌發(fā)率
殺蟲活性測(cè)定(棉蚜)
1. 觸殺活性測(cè)定采用載蚜葉片浸漬法。于溫室用營養(yǎng)液培育棉苗，每杯兩株，于子葉期每 株接無翅成蚜數(shù)頭，罩上籠罩，待兩真葉期自然繁殖近百頭，剔除多余的蚜蟲，僅保留大小 均勻的無翅成蚜；將原液稀釋成不同濃度，取出棉苗在藥液中浸蘸5S，吸去多余藥液，立即 計(jì)數(shù)莖葉上的岈蟲數(shù)為處理前蟲口基數(shù)，每杯為一重復(fù)，每處理3次重復(fù)，以蒸餾水為空白對(duì) 照，40%氧化樂果800倍液為陽性對(duì)照；于處理后24h、 48h、 72h記錄存活蟲數(shù)，計(jì)算死亡率 并以Abbott公式校正。
2. 拒食活性測(cè)定將原液稀釋成不同濃度并以蒸餾水為空白對(duì)照，40%氧化樂果800倍液為 陽性對(duì)照；選取面積一致的棉苗子葉，以中間葉脈為界分別在處理和對(duì)照溶液中浸蘸5s，取 出晾干后，在其葉背轉(zhuǎn)接30頭3 4齡的無翅頓，將棉葉葉背朝下放入培養(yǎng)皿并用濕棉球縛葉柄保濕培育；每處理4次重復(fù)，24和48h后檢査各處理葉片上棉蚜的棲息情況，計(jì)算拒食 率。
拒食宇=對(duì)照葉面蟲數(shù)-處理葉面蟲數(shù)::100% 對(duì)照葉面蟲數(shù)
試驗(yàn)結(jié)果 抑菌活性結(jié)果
1. 對(duì)真菌菌絲生長的抑制作用
供試藥液對(duì)稻瘟病菌、意大利青霉、甜瓜枯萎病菌、瓜類腐皮鐮孢菌、黃瓜疫霉病菌5 種病原菌的菌絲生長均有一定的抑制作用，并且隨時(shí)間增加抑制率有所提高，持效較好。在
100mg/ml濃度下，藥液對(duì)各病原菌的抑制率均高于50%， 7d后對(duì)黃瓜疫霉病菌的抑制率達(dá) 87.72%，對(duì)稻瘟病菌和意大利青霉的抑制率也分別達(dá)70.18%和69.68%;在濃度為4mg/ml時(shí)， 7d后對(duì)各病原菌的抑制率也均高于25%，對(duì)甜瓜枯萎病菌和黃瓜疫霉病菌的抑制率分別為 43.50%和43.83%。
2. 對(duì)真菌孢子萌發(fā)的抑制作用
' 在20mg/ml濃度下藥液對(duì)瓜類腐皮鐮孢菌及黃瓜疫霉病菌有強(qiáng)烈的抑制作用，抑制率為 100%，但藥效隨時(shí)間增加而下降；對(duì)甜瓜枯萎病菌也有較好的抑制作用。
殺蟲活性結(jié)果
1. 對(duì)棉釾的觸殺活性
供試藥液對(duì)棉蜂有較好的觸殺活性，死亡率隨濃度的增大而提高，200mg/ml濃度下48h 死亡率達(dá)100%， 100mg/ml濃度下72h死亡率達(dá)100。/。。 50mg/ml濃度下藥后48h、 72h的校正死 亡率與40%氧化樂果800倍液無顯著差異，但藥效作用要比氧化樂果遲緩，這也是生物農(nóng)藥的 普遍特點(diǎn)。但在72h內(nèi)，各濃度藥液處理的死亡率逐漸增大，藥后24h、 48h、 72h的LCso分別 為14.301118/1111、 9.30mg/ml、 7.84mg/ml，表明藥液毒力不斷增強(qiáng)。
2. 對(duì)棉蚜的拒食活性
100mg/ml濃度下藥后24和48h拒食率分別為87.63W和93.8P/。，與40%氧化樂果800倍液無 顯著差異；濃度為4mg/ml時(shí)拒食率顯著下降，不足20%。各濃度下藥后48h比24h的拒食率有 所提高，但增幅不大。試驗(yàn)期間未觀察到各處理藥液對(duì)棉苗生長有不良影響。
權(quán)利要求
1. 一種植物源農(nóng)藥，由白喉烏頭(Aconitum leucostomum Worosch)根或莖的總生物堿提取物，加入表面活性劑配制而成。
2. 如權(quán)利要求l所述的植物源農(nóng)藥，其特征在于活性成分為白喉烏頭中的總生物堿。
3. 如權(quán)利要求1所述的植物源農(nóng)藥的配置方法，其特征在于將粉碎的白喉烏頭根或莖粉用95%乙醇冷浸3次，每次48小時(shí)；合并浸提液，減壓濃縮回收乙醇，所得浸膏用2%鹽酸溶 解；酸水液用石油醚脫脂后加濃氨水堿化至pH9 10，用氯仿萃取多次，合并萃取液回收氯 仿得粘稠浸膏；自然干燥后用0.1%的吐溫80水溶液溶解，配成水乳劑原液，室溫下保存。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種植物源農(nóng)藥及其配制方法。該農(nóng)藥是由從白喉烏頭根或莖中提取的總生物堿加工而成。其中的烏頭總生物堿與水和表面活性劑配制成水乳劑，稀釋后即可使用。其對(duì)棉蚜和菜青蟲均具較好防治效果，并對(duì)植物病原菌有良好療效。本發(fā)明具有原料易得、加工簡單、成本低廉、對(duì)環(huán)境安全、兼有殺蟲和抑菌作用、并可與其它農(nóng)藥混配等優(yōu)點(diǎn)，是一種適于生產(chǎn)無公害農(nóng)產(chǎn)品的植物源農(nóng)藥。
文檔編號(hào)A01P7/04GK101502275SQ20091011325
公開日2009年8月12日 申請(qǐng)日期2009年3月12日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月12日
發(fā)明者迪 劉, 冠 李 申請(qǐng)人:新疆大學(xué)