專利名稱：一種甘油三酯化合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種甘油三酯及其應(yīng)用。具體而言，涉及一種甘油三酯的制備及其作為殺蟲劑在儲(chǔ)糧害蟲玉米象(Sitophilus zeantais(Motschulky))和谷蠹(Rhyzopertha dominica(Fabricius))等防治方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
儲(chǔ)糧害蟲的危害是威脅糧食安全儲(chǔ)藏的主要原因，目前我國防治儲(chǔ)糧害蟲主要采用化學(xué)農(nóng)藥防治，長(zhǎng)期而單一地使用化學(xué)農(nóng)藥產(chǎn)生了許多嚴(yán)重的后果，3R(Resistance，Residue，Resurgence)問題日益突出，很多的化學(xué)農(nóng)藥被禁止用于防治儲(chǔ)糧害蟲，因而各國研究人員致力于開發(fā)出高效、低毒、低殘留、無污染、安全性高的農(nóng)藥品種，植物源殺蟲劑對(duì)高等動(dòng)物的毒性通常比較低，有些甚至基本無毒；它們?cè)谧匀唤缰械姆纸廨^快，一般不易殘毒，不易對(duì)環(huán)境造成污染，在殺蟲方面具有其它化學(xué)藥物所無法替代的優(yōu)勢(shì)。在植物性殺蟲劑防治儲(chǔ)藏物害蟲方面，人們做了大量的研究開發(fā)和應(yīng)用工作。據(jù)Prakash和Rao(1997)統(tǒng)計(jì)，世界各地用于防治儲(chǔ)藏物害蟲試驗(yàn)的植物種類達(dá)200種以上，供試害蟲的種類三十余種，幾乎包括了所有重要的儲(chǔ)藏物害蟲，從二十世紀(jì)七十年代起，人們已經(jīng)合成了多種除蟲菊類殺蟲劑，被稱為擬除蟲菊酯。其中對(duì)害蟲毒力最大的是溴氰菊酯，它們已經(jīng)在農(nóng)業(yè)害蟲和儲(chǔ)藏物害蟲的防治中發(fā)揮了巨大作用。印楝素也是被發(fā)現(xiàn)的一種比較成功的殺蟲劑。此外，近幾年研究較多的植物種類還有花椒、山蒼子、女貞子、煙草、薄荷葉、金盞花、水蓼、姜黃、柑橘皮、桂皮、丹皮、蛇床子、艾葉、銀杏葉、半夏、檳榔等，它們當(dāng)中有些有效殺蟲成分已被提取和鑒定，但多數(shù)種類有效成分的化學(xué)鑒定工作還在進(jìn)行中。葫蘆巴是一種著名中藥，其種子具有溫腎、散寒、止痛的功效，其嫩莖葉是暢銷的新型蔬菜，其植株干后置于衣柜內(nèi)可防蟲、滅虱，目前對(duì)葫蘆巴的利用多集中在醫(yī)藥、工業(yè)、食品等方面的研究，作為生物農(nóng)藥進(jìn)行開發(fā)利用，研究其對(duì)我國主要的儲(chǔ)糧害蟲玉米象、谷蠹等的殺蟲活性尚未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一提供能防治儲(chǔ)糧害蟲玉米象、谷蠹的植物源活性的一種甘油三酯。
本發(fā)明的目的之二提供這種化合物的制備方法。
本發(fā)明的目的之三提供這種活性化合物在儲(chǔ)糧害蟲玉米象、谷蠹防治中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供的化合物為甘油三酯。1，2-二亞油酸-3-硬脂酸-甘油三酯(C54H98O6)(1，2-di-linoleic acid-3-stearic acid-triglyceride)，其結(jié)構(gòu)式如式I?；衔锏墓庾V數(shù)據(jù)見實(shí)施例七。
式I本發(fā)明第二方面提供一種根據(jù)本發(fā)明第一方面的甘油三酯化合物的制備方法，其特征是先通過以下(1)～(3)方法中的一種進(jìn)行提取(1)以胡蘆巴種子為原料，原料經(jīng)粉碎后，按重量體積比于胡蘆巴種子粉碎物中加入3-5倍胡蘆巴種子粉碎物的乙醇或丙酮，在回流條件下提取得乙醇或丙酮提取物；(2)按重量體積比用5-8倍的胡蘆巴種子粉碎物重的乙醇或丙酮，浸提，得乙醇或丙酮提取物；(3)按重量體積比用0.1-0.2倍胡蘆巴種子粉碎物重的乙醇作為夾帶劑，使用二氧化碳超臨界萃取儀，萃取，得超臨界二氧化碳萃取物；然后，將所得到的乙醇或丙酮提取物或超臨界二氧化碳萃取物，按重量體積比，用5-10倍的石油醚萃取，石油醚萃取液經(jīng)濃縮得到石油醚萃取物，用100-200目硅膠柱層析、200-300目硅膠柱層析和薄層層析硅膠柱層析分離得到所述化合物。
本發(fā)明第三方面提供一種根據(jù)第二方面的方法，其中，回流條件下提取溫度為60-80℃，提取時(shí)間為為24-48小時(shí)；所述浸提的時(shí)間為72小時(shí)以上；所述萃取的時(shí)間為1-2小時(shí)；所述石油醚萃取次數(shù)為3次以上。
本發(fā)明第四方面提供一種根據(jù)第一方面所述的化合物作為殺蟲劑的應(yīng)用。
本發(fā)明第五方面提供一種根據(jù)第四方面所述的應(yīng)用，所述化合物是作為儲(chǔ)糧害蟲的殺蟲劑。
本發(fā)明第六方面提供一種根據(jù)第五方面所述的應(yīng)用，按化合物與糧食的重量比，所述化合物的使用量≥50mg/kg。
本發(fā)明第七方面提供一種根據(jù)第五方面所述的應(yīng)用，所述儲(chǔ)糧害蟲為玉米象或谷蠹。
本發(fā)明第八方面提供一種根據(jù)第一方面所述的化合物抑制儲(chǔ)糧害蟲增長(zhǎng)的應(yīng)用。
本發(fā)明第九方面提供一種根據(jù)第八方面所述的應(yīng)用，所述儲(chǔ)糧害蟲為玉米象或谷蠹。
本發(fā)明第十方面提供一種根據(jù)第一方面所述的化合物與儲(chǔ)糧害蟲的殺蟲劑的組合在抑制或殺滅儲(chǔ)糧害蟲中的應(yīng)用。
本發(fā)明第十一方面提供一種根據(jù)第十方面所述的應(yīng)用，所述儲(chǔ)糧害蟲的殺蟲劑是安糧仙。
本發(fā)明第十二方面提供一種乙醇或丙酮提取物抑制或殺滅儲(chǔ)糧害蟲的應(yīng)用，所述提取物按如下方法制備以胡蘆巴種子為原料，原料經(jīng)粉碎后，按重量體積比于胡蘆巴種子粉碎物中加入3-5倍胡蘆巴種子粉碎物的乙醇或丙酮，在回流條件下提取得乙醇或丙酮提取物，其中提取溫度為60-80℃，提取時(shí)間為24-48小時(shí)；或所述提取物按下述方法制備按重量體積比用5-8倍的胡蘆巴種子粉碎物重的乙醇或丙酮，浸提72小時(shí)以上，得乙醇或丙酮提取物。
本發(fā)明第十三方面提供一種萃取物抑制或殺滅儲(chǔ)糧害蟲的應(yīng)用，所述萃取物按如下方法制備按重量體積比用0.1-0.2倍胡蘆巴種子粉碎物重的乙醇作為夾帶劑，使用二氧化碳超臨界萃取儀，萃取1-2小時(shí)，得超臨界二氧化碳萃取物。
本化合物是以豆科植物葫蘆巴(Trigonella foenum-graecum L.)的種子為原料，通過乙醇浸泡或超臨界二氧化碳萃取、有機(jī)溶劑分部萃取、硅膠柱層析等方法分離得到的，其具體分離制備步驟為(1)按重量體積比于葫蘆巴種子粉碎物中加入3-5倍的乙醇或丙酮，在回流條件下提取，提取溫度為60-80℃，提取時(shí)間為24-48小時(shí)?；虬粗亓矿w積比用5-8倍的葫蘆巴種子粉碎物重的乙醇或丙酮，浸提72小時(shí)以上，得乙醇或丙酮提取物。或按重量體積比用0.1-0.2倍葫蘆巴種子粉碎物重的乙醇作為夾帶劑，使用二氧化碳超臨界萃取儀，萃取1-2小時(shí)，得超臨界二氧化碳萃取物；(2)乙醇或丙酮提取物或超臨界二氧化碳萃取物，按重量體積比，用5-10倍的石油醚、氯仿和乙酸乙酯依次分部萃取3次以上，各萃取液經(jīng)濃縮干燥得相應(yīng)的萃取物；(3)將石油醚萃取物，用100-200目硅膠柱層析、200-300目硅膠柱層析分離和薄層層析檢測(cè)得到本化合物。
本發(fā)明的化合物具有觸殺玉米象和谷蠹等儲(chǔ)糧害蟲的活性，可作為殺蟲劑用于殺死儲(chǔ)糧害蟲。用濾紙藥膜法對(duì)玉米象和谷蠹等儲(chǔ)糧害蟲進(jìn)行生物活性跟蹤測(cè)試證明化合物對(duì)玉米象24h觸殺的致死中濃度(LC50)為99.14μg/cm2，化合物對(duì)玉米象48h觸殺的致死中濃度(LC50)為95.95μg/cm2，化合物對(duì)玉米象72h觸殺的致死中濃度(LC50)為90.22μg/cm2，化合物對(duì)玉米象7d觸殺的致死中濃度(LC50)為8.93μg/cm2；化合物對(duì)谷蠹24h觸殺的致死中濃度(LC50)為154.02μg/cm2，化合物對(duì)谷蠹48h觸殺的致死中濃度(LC50)為123.94μg/cm2，化合物對(duì)谷蠹72h觸殺的致死中濃度(LC50)為82.24μg/cm2，化合物對(duì)谷蠹10d觸殺的致死中濃度(LC50)為47.28μg/cm2，化合物對(duì)谷蠹17d觸殺的致死中濃度(LC50)為46.87μg/cm2。用拌糧法對(duì)化合物進(jìn)行玉米象、谷蠹防治試驗(yàn)證明濃度為50mg/kg的化合物藥液，用拌糧的方法能殺死玉米象、谷蠹，對(duì)儲(chǔ)糧害蟲玉米象、谷蠹具有明顯的防治效果。
本發(fā)明的化合物可作為有效成分單獨(dú)、組合或與防治儲(chǔ)糧害蟲的殺蟲劑(如凱安保、防蟲磷)復(fù)配，用于抑制或殺滅玉米象、谷蠹等儲(chǔ)糧害蟲。使用含有本發(fā)明甘油三酯的植物提取物、分部提取物和分離部位亦可。
具體實(shí)施例下面結(jié)合實(shí)例來說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。
實(shí)施例一以葫蘆巴種子為原料，原料經(jīng)粉碎后，按葫蘆巴種子粉重量(kg)和溶劑體積(L)比于葫蘆巴種子粉碎物中加入3-5倍葫蘆巴種子粉碎物的乙醇或丙酮，在回流條件下提取，提取溫度為60-80℃，提取時(shí)間為24-48小時(shí)。提取結(jié)束后，采用抽濾法，收集濾液，負(fù)壓蒸除溶劑后，得乙醇或丙酮提取物；回收的溶劑可反復(fù)使用，提取率因溶劑種類不同而不同，溶劑乙醇的提取率為11.49％，溶劑丙酮的提取率為5.29％，粗提物無需分離純化，可直接用于配制植物殺蟲劑乳油，也可將粗提物用作分離的起始材料。
實(shí)施例二以葫蘆巴種子為原料，原料經(jīng)粉碎后，按葫蘆巴種子粉重量(kg)和溶劑體積(L)比于葫蘆巴種子粉碎物中加入5-8倍葫蘆巴種子粉碎物的乙醇或丙酮，浸提，提取溫度為室溫，每批原材料采用相同溶劑連續(xù)提取3次以上，每次提取時(shí)間為24小時(shí)，總提取時(shí)間為72小時(shí)以上。提取結(jié)束后，采用抽濾法，收集濾液，負(fù)壓蒸除溶劑后，得乙醇或丙酮提取物；回收的溶劑可反復(fù)使用，提取率因溶劑種類不同而不同，溶劑乙醇的提取率為8.24％，溶劑丙酮的提取率為4.03％，粗提物無需分離純化，可直接用于配制植物殺蟲劑乳油，也可將粗提物用作分離的起始材料。
實(shí)施例三化合物的粗提取和分離葫蘆巴種子干粉20kg，用超臨界二氧化碳萃取儀萃取1.5h，萃取壓力為25Mpa，萃取溫度為55℃，夾帶劑為95％乙醇，夾帶劑的體積為3000ml。將萃取液減壓濃縮得棕色粘稠油油狀物1192g，將該濃縮物用石油醚、氯仿和乙酸乙酯依次分部萃取，減壓濃縮得各分部提取物，將石油醚提取物100g，上硅膠(100-200目，1500g)柱，用石油醚和乙酸乙酯混合液進(jìn)行梯度洗脫，石油醚和乙酸乙酯混合體積比為100∶1；95∶5；9∶1；8∶2；7∶3；6∶4；5∶5；1∶2；0∶100，按400ml為一個(gè)餾分接收，并用濾紙藥膜法對(duì)玉米象進(jìn)行生物活性跟蹤測(cè)試，得27-38餾分75.13g、50-55餾分3.90g和66-75餾分3.46g三活性部分。
實(shí)施例四化合物的提取和分離將實(shí)施例一所述的第27-38餾分60g，上硅膠(200-300目，800g)柱，用石油醚和乙酸乙酯進(jìn)行洗脫，石油醚和乙酸乙酯體積比為10∶1；9∶1；8∶1；4∶1，按200ml為一個(gè)餾分接收，并用濾紙藥膜法對(duì)玉米象進(jìn)行觸殺生物活性跟蹤測(cè)試，得8-12餾分23.46g活性部。將該活性部上硅膠(200-300目，500g)柱，用石油醚和乙酸乙酯混合液洗脫，石油醚和乙酸乙酯體積比為8∶1；4∶1；2∶1；1∶2，按50ml為一個(gè)餾分接收，并用濾紙藥膜法對(duì)玉米象進(jìn)行觸殺生物活性跟蹤測(cè)試，得12-15餾分7.58g活性部，將該活性部上硅膠(200-300目，80g)柱，用石油醚和乙酸乙酯混合液洗脫，石油醚和乙酸乙酯體積比為8∶1，按2ml為一個(gè)餾分接收，得8-10餾分23.51mg，即為化合物。
實(shí)施例五化合物對(duì)玉米象觸殺活性測(cè)定先將化合物，配成濃度為100μg/ml的原液，取丙酮稀釋，依次從高濃度到低濃度稀釋為不同濃度的藥液。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析得化合物對(duì)玉米象24h觸殺的致死中濃度(LC50)為99.14μg/cm2，化合物對(duì)玉米象48h觸殺的致死中濃度(LC50)為95.95μg/cm2，化合物對(duì)玉米象72h觸殺的致死中濃度(LC50)為90.22μg/cm2，化合物對(duì)玉米象7d觸殺的致死中濃度(LC50)為8.93μg/cm2。結(jié)果如表1。
表1為化合物對(duì)玉米象的觸殺活性

實(shí)施例六化合物對(duì)玉米象觸殺活性測(cè)定先將化合物，配成濃度為100μg/ml的原液，取丙酮稀釋，依次從高濃度到低濃度稀釋為不同濃度的藥液。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析得化合物對(duì)谷蠹24h觸殺的致死中濃度(LC50)為154.02μg/cm2，化合物對(duì)谷蠹48h觸殺的致死中濃度(LC50)為123.94μg/cm2，化合物對(duì)谷蠹72h觸殺的致死中濃度(LC50)為82.24μg/cm2，化合物對(duì)谷蠹10d觸殺的致死中濃度(LC50)為47.28μg/cm2，化合物對(duì)谷蠹17d觸殺的致死中濃度(LC50)為46.87μg/cm2。結(jié)果如表2。
表2為化合物對(duì)玉米象的觸殺活性

實(shí)施例七甘油三酯的結(jié)構(gòu)鑒定化合物為無色油，分子式為C54H98O6。核磁共振氫譜(300MHz，氘代氯仿)核磁共振碳譜(300MHz，氘代氯仿)

C57H102O6
IR(KBr)υ(cm-1)3008，2922，2852，1744，1652，11591H NMR(CDCl3，TMS，300MHz)δ(ppm)5.30(m，8H，C2，1，43，58，26，27，44，52)，4.22(m，5H，C12，13，14)，2.80(t，4H，C42，41)，2.30(t，6H，C9，19，30)，2.0(m，8H，C3，25，59，53)，1.30(m，62H)，0.90(t，9H，C63，57，51)13C NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)173(d，C10，18，29)，130(t，C1，43，27，44)，127(d，C2，58，26，52)69(s，C13)，62(s，C12，14)，34(d，C42，41)，31.6(d，C9，19，30)29(m，C3，25，52，59)，14(d，C63，57，51)MS分子量太大，沒有分子離子峰。
權(quán)利要求
1.一種甘油三酯化合物，其名稱為1，2-二亞油酸-3-硬脂酸-甘油三酯(1，2-di-linoleic acid-3-stearic acid-triglyceride)其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下
2.權(quán)利要求1所述甘油三酯化合物的制備方法，其特征是先通過以下(1)～(3)方法中的一種進(jìn)行提取(1)以葫蘆巴種子為原料，原料經(jīng)粉碎后，按重量體積比于葫蘆巴種子粉碎物中加入3-5倍葫蘆巴種子粉碎物的乙醇或丙酮，在回流條件下提取得乙醇或丙酮提取物；(2)按重量體積比用5-8倍的葫蘆巴種子粉碎物重的乙醇或丙酮，浸提，得乙醇或丙酮提取物；(3)按重量體積比用0.1-0.2倍葫蘆巴種子粉碎物重的乙醇作為夾帶劑，使用二氧化碳超臨界萃取儀，萃取，得超臨界二氧化碳萃取物；然后，將所得到的乙醇或丙酮提取物或超臨界二氧化碳萃取物，按重量體積比，用5-10倍的石油醚萃取，石油醚萃取液經(jīng)濃縮得到石油醚萃取物，用100-200目硅膠柱層析、200-300目硅膠柱層析和薄層層析硅膠柱層析分離得到所述化合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中，回流條件下提取溫度為60-80℃，提取時(shí)間為為24-48小時(shí)；所述浸提的時(shí)間為72小時(shí)以上；所述萃取的時(shí)間為1-2小時(shí)；所述石油醚萃取次數(shù)為3次以上。
4.權(quán)利要求1所述的化合物作為殺蟲劑的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，所述化合物是作為儲(chǔ)糧害蟲的殺蟲劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，按化合物與糧食的重量比，所述化合物的使用量≥50mg/kg。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，所述儲(chǔ)糧害蟲為玉米象、谷蠹、赤擬谷盜等初期性及后期性害蟲。
8.權(quán)利要求1所述的化合物抑制儲(chǔ)糧害蟲增長(zhǎng)的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，所述儲(chǔ)糧害蟲為玉米象、谷蠹、赤擬谷盜等初期性及后期性害蟲。。
10.權(quán)利要求1所述的化合物與儲(chǔ)糧害蟲的殺蟲劑的組合在抑制或殺滅儲(chǔ)糧害蟲中的應(yīng)用。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的應(yīng)用，所述儲(chǔ)糧害蟲的殺蟲劑是凱安保、防蟲磷。
12.一種乙醇或丙酮提取物抑制或殺滅儲(chǔ)糧害蟲的應(yīng)用，所述提取物按如下方法制備以葫蘆巴種子為原料，原料經(jīng)粉碎后，按重量體積比于葫蘆巴種子粉碎物中加入3-5倍葫蘆巴種子粉碎物的乙醇或丙酮，在回流條件下提取得乙醇或丙酮提取物，其中提取溫度為60-80℃，提取時(shí)間為24-48小時(shí)；或所述提取物按下述方法制備按重量體積比用5-8倍的葫蘆巴種子粉碎物重的乙醇或丙酮，浸提72小時(shí)以上，得乙醇或丙酮提取物。
13.一種萃取物抑制或殺滅儲(chǔ)糧害蟲的應(yīng)用，所述萃取物按如下方法制備按重量體積比用0.1-0.2倍葫蘆巴種子粉碎物重的乙醇作為夾帶劑，使用二氧化碳超臨界萃取儀，萃取1-2小時(shí)，得超臨界二氧化碳萃取物。
全文摘要
本發(fā)明提供一種甘油三酯化合物，該化合物對(duì)倉庫害蟲玉米象(Sitophiluszeantais(Motschulky))和谷蠹(Rhyzopertha dominica(Fabricius))具有明顯的生物活性，能夠作為殺蟲劑用于倉庫害蟲的防治。
文檔編號(hào)A01N37/06GK1887848SQ20061010416
公開日2007年1月3日 申請(qǐng)日期2006年8月3日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月3日
發(fā)明者楊長(zhǎng)舉, 謝令德, 薛東, 唐國文, 舒在習(xí) 申請(qǐng)人:謝令德, 楊長(zhǎng)舉