專利名稱：柳桉組培育苗方法
技術(shù)領(lǐng)域：
柳桉組培育苗方法涉及植物組織培養(yǎng)，具體是一種桉樹(shù)的組培育苗方法。
背景技術(shù)：
柳桉(Eucalyptus saligna)為姚金娘科桉屬植物，是一種速生、材質(zhì)優(yōu)良的造林樹(shù)種。由于柳桉是異花授粉樹(shù)種，用種子繁殖，個(gè)體分化大，難以保持柳桉個(gè)體的優(yōu)良種性；同時(shí)，種子苗不耐寒，-4℃時(shí)絕大多數(shù)凍死；而采用常規(guī)的扦插繁殖成活率較低，苗木生產(chǎn)成本高，在生產(chǎn)中沒(méi)有應(yīng)用價(jià)值。采用組培方法是探索柳桉快速無(wú)性繁殖的主要途徑，國(guó)內(nèi)外對(duì)柳桉的組培研究也做了一些工作，但是由于一些技術(shù)問(wèn)題沒(méi)有突破，因此不能投入規(guī)模生產(chǎn)；已研究成功的鄧恩桉與耐寒赤桉的組培方法也尚未能解決柳桉的組培技術(shù)問(wèn)題，因此需要探索柳桉規(guī)?；缒旧a(chǎn)的組培方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在研究一種柳桉組培育苗方法，提高柳桉試管苗的增殖系數(shù)、生根率及移栽成活率，并結(jié)合其它相關(guān)的技術(shù)措施，使柳桉苗木的規(guī)模生產(chǎn)得以實(shí)現(xiàn)。
實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的的技術(shù)方案是柳桉組培方法包括外植體消毒、初培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)與試管苗移栽幾部分，經(jīng)HgCl2消毒后的外植體，用CaCl2在無(wú)菌條件下清洗，在MS+BA+IBA培養(yǎng)基上進(jìn)行初培養(yǎng)，試管苗移栽到黃心土加糠殼灰的混合基質(zhì)中培育，繼代培養(yǎng)與擴(kuò)大繁殖的培養(yǎng)基為MS+BA0.1～0.5mg/l+IBA0.5～1.2mg/l+NAA0.1～0.5mg/l，光照條件為自然散射光3000Lux以內(nèi)加人工輔助光1500±200Lux；生根培養(yǎng)基為MS+IBA0.5～1.2mg/l+NAA0.1～0.5mg/l，光照條件為5000～10000Lux的自然散射光或者5000Lux以下的自然散射光加人工輔助光源2500～3000Lux；經(jīng)在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)兩周左右，移至大棚練苗，又經(jīng)兩周左右再移至混合基質(zhì)中培育。
下面進(jìn)一步詳述本發(fā)明。
柳桉組培的材料要選擇柳桉優(yōu)良單株的腋芽作外植體，外植體用清水沖洗30分鐘后，用0.25％HgCl2消毒15分鐘，然后在無(wú)菌條件下用0.25～1％的CaCl2清洗3次，以置換出殘留在外植體上的汞離子，再用無(wú)菌水清洗3次。經(jīng)過(guò)消毒的外植體，在無(wú)菌條件下，接種到MS+BA0.1～0.5mg/l+IBA0.5～1.2mg/l的培養(yǎng)基上，在1000±200Lux光照條件下初培養(yǎng)，培養(yǎng)一個(gè)月左右，腋芽生長(zhǎng)至1～2cm時(shí)，進(jìn)入繼代培養(yǎng)與擴(kuò)繁；繼代培養(yǎng)與擴(kuò)繁采用的培養(yǎng)基為MS+BA0.1～0.5mg/l+IBA0.5～1.2mg/l+NAA0.1～0.5mg/l，光照條件為自然散射光3000Lux以內(nèi)加人工輔助光源1500±200Lux，在這樣的培養(yǎng)條件下，試管苗20天的增殖系數(shù)達(dá)3～4，為柳桉苗木的規(guī)模生產(chǎn)打下了基礎(chǔ)；待擴(kuò)繁的試管苗增殖到一定數(shù)量后，選取有一定高度的試管苗進(jìn)行生根培養(yǎng)，生根培養(yǎng)基為MS+IBA0.5～1.2mg/l+NAA0.1～0.5mg/l，光照條件為5000～10000Lux的自然散射光或者5000Lux以下的自然散射光加人工輔助光源2500～3000Lux，在這種培養(yǎng)條件下，生根率可達(dá)95％以上；繼代培養(yǎng)與生根培養(yǎng)使用部分自然散射光，既可節(jié)省能源，又可使試管苗在接近自然環(huán)境條件下生長(zhǎng)，提高移栽成活率。在用于耐寒赤桉的繼代培養(yǎng)基與生根培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上加入了NAA，才使柳桉的繼代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)的培養(yǎng)條件得到滿足，使柳桉的規(guī)?；a(chǎn)最終實(shí)現(xiàn)。在試管苗培養(yǎng)階段，培養(yǎng)溫度為25±3℃，培養(yǎng)基PH為5.8～6.0，光照時(shí)間為14小時(shí)。試管苗在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)一周左右，開(kāi)始生根，兩周左右即可移至大棚練苗；練苗是試管苗移栽前的過(guò)渡，幫助試管苗逐步適應(yīng)自然環(huán)境，使苗木老健，葉色變深，從而提高試管苗移栽成活率達(dá)85％以上。經(jīng)練苗2周左右后，試管苗移栽到黃心土加糠殼灰的混合基質(zhì)中培育，黃心土取自耕作層以下的熟化土壤，黃心土與糠殼灰的體積比為2∶1，混合基質(zhì)不僅透氣、透水性好，而且有苗木生長(zhǎng)必需的P、K及其他營(yíng)養(yǎng)元素，還可減少有害微生物的侵襲。試管苗移栽至混合基質(zhì)上后要用清水澆透，且每隔3天噴藥一次，以防止病蟲(chóng)害發(fā)生，噴施藥為青霉素、敵克松、多菌靈三種輪流使用。試管苗移栽場(chǎng)地以水泥地面為佳，并且蓋有塑料大棚，晴天防曬，冬天保溫。試管苗移栽時(shí)的溫度應(yīng)控制在0～30℃之間，過(guò)高過(guò)低都不利于試管苗的成活；在溫度適宜條件下，試管苗移栽20天后開(kāi)始生長(zhǎng)，以后的管理與一般苗木相同。待苗長(zhǎng)至8cm時(shí)，還可進(jìn)行組培苗的扦插擴(kuò)繁，即剪取5cm左右的半木質(zhì)化的插穗，用100mg/lIBA浸30分鐘，用常規(guī)方法扦插于上述混合基質(zhì)或純黃心土中即可。
用本發(fā)明的組培方法培育柳桉試管苗，20天增殖系數(shù)達(dá)到3～4，生根率達(dá)95％以上，移栽成活率達(dá)85％以上，柳桉苗木的規(guī)?；a(chǎn)問(wèn)題得到了根本解決；同時(shí)組培苗的扦插擴(kuò)繁既可擴(kuò)大苗木生產(chǎn)能力，又可降低苗木成本，為大面積推廣種植柳桉解決了苗木的最大的需求。
具體實(shí)施例方式下面為本發(fā)明柳桉組培育苗的最佳實(shí)施方式。
選取柳桉優(yōu)良單株的腋芽在經(jīng)清水沖洗、0.25％HgCl2消毒后，用1％CaCl2在無(wú)菌條件下清洗3次，再用無(wú)菌水清洗，外植體的初培養(yǎng)基為MS+BA0.2mg/l+IBA1.0mg/l，光照強(qiáng)度為1000Lux，繼代培養(yǎng)基為MS+BA0.2mg/l+IBA0.8mg/l+NAA0.2mg/l，光照條件為自然散射光3000Lux以內(nèi)加人工輔助光1500Lux，生根培養(yǎng)的培養(yǎng)基為MS+IBA0.8mg/l+NAA0.2mg/l，光照條件為5000～10000Lux的自然散射光或者5000Lux以下的自然散射光加人工輔助光源2500～3000Lux，試管苗在生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)約2周，移入大棚練苗，再經(jīng)2周左右移至黃心土∶老糠灰＝2∶1(體積比)的混合基質(zhì)上培養(yǎng)，在溫度適宜條件下，移栽后20天即可生長(zhǎng)。
權(quán)利要求
1.-種柳桉組培育苗方法，包括外植體消毒、初培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)與試管苗移栽，經(jīng)HgCl2消毒后的外植體，用CaCl2在無(wú)菌條件下清洗，在MS+BA+IBA培養(yǎng)基上進(jìn)行初培養(yǎng)，試管苗移栽到黃心土加糠殼灰的混合基質(zhì)中培育，其特征在于(1)繼代培養(yǎng)與擴(kuò)大繁殖的培養(yǎng)基為MS+BA0.1～0.5mg/l+IBA0.5～1.2mg/l+NAA0.1～0.5mg/l，光照條件為自然散射光3000Lux以內(nèi)加人工輔助光1500±200Lux；(2)生根培養(yǎng)基為MS+IBA0.5～1.2mg/l+NAA0.1～0.5mg/l，光照條件為5000～10000Lux的自然散射光或者5000Lux以下的自然散射光加人工輔助光源2500～3000Lux；(3)經(jīng)在生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)兩周左右，移至大棚練苗，又經(jīng)兩周左右再移至混合基質(zhì)中培育。
全文摘要
柳桉組培育苗方法屬于植物組織培養(yǎng)方法。本發(fā)明選擇柳桉優(yōu)良單株為材料，選取其腋芽做外植體，用CaCl
文檔編號(hào)A01H4/00GK1430881SQ0311806
公開(kāi)日2003年7月23日 申請(qǐng)日期2003年1月29日 優(yōu)先權(quán)日2003年1月29日
發(fā)明者彭信海, 譚柏韜, 蔣利媛, 夏曉敏, 羅先權(quán), 陳靈, 劉先芳, 饒紅欣 申請(qǐng)人:湖南省森林植物園, 郴州市林業(yè)科學(xué)研究所