專利名稱：一種飼料添加劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種飼料添加劑，尤其是含有低聚糖，益生菌的飼料添加劑及制備生產(chǎn)這種飼料添加劑的方法。
背景技術(shù)：
人們現(xiàn)在已經(jīng)認(rèn)識到在飼料中長期濫用抗生素，不僅造成了飼養(yǎng)動物抗病能力的減弱，肉蛋產(chǎn)品質(zhì)量和肉味的下降，而且大幅度地提高了病原菌中攜帶抗藥因子的機率。因此，開發(fā)不含抗生素的飼料添加劑勢在必行。微生態(tài)制劑作為最有可能代替抗生素的綠色飼料添加劑，受到人們的關(guān)注。一般認(rèn)為微生態(tài)制劑包括益生菌和益生元兩類。常用畜禽類用益生菌包括，芽胞桿菌屬，乳酸桿菌屬，雙岐桿菌屬，鏈球菌屬和光合細(xì)胞中的部份菌株。飼料中添加益生菌能夠競爭性地抑制病原菌在動物腸道內(nèi)的繁殖，并產(chǎn)生維生素消化酶等有益物質(zhì)，被動物吸收和利用。
益生元是指不被動物體所消化的一系列碳水化合物。通常由2-10個相同或不相同的單位組成。能選擇性地促進(jìn)腸內(nèi)有益菌群的活性和生長繁殖，從而達(dá)到增進(jìn)寄主健康和促生長的作用。畜禽類用的益生元包括低聚果糖，低聚甘露糖，低聚異麥芽糖等多種類型。其中低聚甘露糖及其單糖分子甘露糖以其獨特的生理活性受到人們的重視，成為最有可能代替抗生素的新型飼料添加劑。甘露糖和低聚甘露糖的作用機理包括①能競爭性地和病原菌，例如大腸桿菌，沙門氏菌待細(xì)菌表面的受體結(jié)合，從而阻止病原菌和腸壁表面的受體結(jié)合，加快細(xì)菌從腸道排出體外的速度，減少細(xì)菌的繁殖。所以在雞飼料中添加甘露糖可以有效地減少雞腸道內(nèi)沙門氏菌的感染(US6080442，US6374220)。②可以刺激和促進(jìn)動物的免疫機能。(《中國飼料》2001，6，20)。在母豬飼料中添加低聚甘露糖或甘露糖可以提高母豬和仔豬的生產(chǎn)性能(《飼料廣角》，2001，20，23)和免疫功能(《中國獸醫(yī)學(xué)報》，2000，20，257)。③可以作為雙歧桿菌因子促進(jìn)雙歧桿菌的生長(《天津微生物》1996，2，1)。
趙國琦等在《中國飼料》5，14中報道在蛋雞中添加適當(dāng)水平的β-甘露聚糖酶可以有效地提高產(chǎn)蛋能力和飼料轉(zhuǎn)化率，β-甘露聚糖酶即β-葡甘聚糖酶。Pettey等人在《動物科學(xué)雜志，Journal of AnimalScience》80，1012中報道在仔豬飼料中添加β-甘露聚糖酶可以有效地增進(jìn)仔豬的肉料比。而且進(jìn)一步在育肥階段添加不僅可以改善日增重，還可以增加瘦肉比。中國專利公開說明書CN1264547A公開了一種微生物飼料添加劑，是以正常菌群為主要成分再加入賦形劑，使之加工成粉狀微生物飼料添加劑。這種飼料添加劑含益生菌且使用方便，但效果單一，價格昂貴。
中國專利公開說明書CN1262880A公開了一種復(fù)合益生素飼料添加劑，由益生素和低聚糖組成，這里的益生素即上面所說的益生菌，是在益生菌的基礎(chǔ)上添加有低聚糖。它雖然使益生菌功能更為有效強大，但由于所加入的低聚糖本身為提取物，成本較高，使該飼料添加劑的成本也很高。同時這種益生素飼料添加劑不含β-甘露聚糖酶，對提高飼料轉(zhuǎn)化率沒有幫助，其效果單一。
美國專利公開說明書US 5429828和US 6162473公開了在飼料中添加β-甘露聚糖酶的方法。并強調(diào)尤其是在玉米豆粕飼料中添加β-甘露聚糖酶可以有效地提高飼料轉(zhuǎn)化率，分解飼料豆粕中含有的β-甘露聚糖酶，提高飼料的營養(yǎng)價值。但由于所加入的β-甘露聚糖酶本身為純化后的酶粉，成本較高，限制了該飼料添加劑的使用。
另外美國專利公開說明書US 6374220公開了一種用酶法部分分解椰子粕中的β-甘露聚糖得到甘露糖并作為飼料添加劑的方法，發(fā)現(xiàn)在飼料中加入含有甘露糖的酶解椰子粕可以有效地降低雞腸道內(nèi)沙門氏菌的含量。但是這種在飼料中直接加入酶或甘露糖和低聚甘露糖的方法所生產(chǎn)出的產(chǎn)品價格比較貴，而且做為飼料添加劑不含益生菌，其效果單一。三、發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種能促進(jìn)畜禽類健康生長的綠色飼料添加劑及生產(chǎn)制備這種綠色飼料添加劑的方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中生產(chǎn)綠色飼料添加劑成本高價格昂貴、費工費時的缺點。為此，本發(fā)明采取以下技術(shù)方案一種飼料添加劑，采用如下方法制成益生菌菌株發(fā)酵，產(chǎn)生β-甘露聚糖酶，所述的β-甘露聚糖酶分解被分解后能產(chǎn)生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物生成甘露低聚糖和甘露糖，最后生成含有β-甘露聚糖酶、甘露低聚糖，甘露糖及益生菌的混合物用作飼料添加劑；該方法包括下述步驟(1)分別選擇益生菌、適合所選益生菌生長的氮源混合，再加入被分解后能產(chǎn)生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物混合發(fā)酵，所述多聚碳水化合物加量為1g/L-20g/L，所述發(fā)酵液中所述益生菌的接種量量控制在1％-10％之間；(2)用酸或堿將發(fā)酵液pH調(diào)至5.5-7.5，溫度控制在25℃-42℃，開始發(fā)酵反應(yīng)；(3)發(fā)酵終止時間以多聚碳水化合物被分解成低聚糖為止，時間為8-72小時；(4)發(fā)酵終止時，發(fā)酵液即為最終產(chǎn)品。
所述的飼料添加劑，所述益生菌至少含有下式之一①芽孢桿菌；②曲霉。
所述芽孢桿菌可以是下式之一①枯草芽孢桿菌②地衣芽孢桿菌③遲緩芽孢桿菌。
所述曲霉可以是下式之一①黑曲霉②米曲霉。
所述多聚碳水化合物至少含有下式之一①魔芋粉；②角豆膠；③瓜膠。
進(jìn)一步，所述的飼料添加劑，其優(yōu)選多聚碳水化合物為魔芋粉，最終產(chǎn)物含甘露糖和甘露低聚糖、β-甘露聚糖酶。
再進(jìn)一步，所述的飼料添加劑，其優(yōu)選益生菌為枯草芽孢桿菌，所述的多聚碳水化合物為魔芋粉，即枯草芽孢桿菌菌株發(fā)酵產(chǎn)生β-甘露聚糖酶分解魔芋粉，最終產(chǎn)物含甘露糖和甘露低聚糖、β-甘露聚糖酶及枯草芽孢桿菌。
所述的飼料添加劑，在發(fā)酵過程中加食品級消泡劑。
所述的飼料添加劑，可將發(fā)酵液直接加入到動物的飲用水中飲用，也可將發(fā)酵終止時的發(fā)酵液適當(dāng)濃縮，加入飼料用賦形劑，用干燥法制成小顆粒或粉狀。所述賦形劑可以是動物飼料的某一組分或食品添加劑中的某一組分。
所述的飼料添加劑的使用方法可以加入動物的飲用水中飲用，亦可拌入飼料中飼用。
本發(fā)明所述的飼料添加劑含有如下特點第一，本發(fā)明中的飼料添加劑同時含有飼用益生菌和甘露糖、甘露低聚糖、β-甘露聚糖酶。
第二，本發(fā)明中的飼料添加劑含有的甘露糖、甘露低聚糖由益生菌分解多聚碳水化合物而制成。
第三，本發(fā)明中的益生菌發(fā)酵可以產(chǎn)生β-甘露聚糖酶來分解，所以本發(fā)明中的飼料添加劑含有高活性的β-甘露聚糖酶。
本發(fā)明中所指的益生菌是特指美國FDA批準(zhǔn)用作直接飼喂的微生物和中國農(nóng)業(yè)部1999年6月批準(zhǔn)可直接飼喂動物的飼料級微生物添加劑收載范圍內(nèi)，凡可以產(chǎn)生β-甘露聚糖酶分解生成甘露糖、甘露低聚糖的益生菌都在使用范圍之內(nèi)，如芽孢桿菌中的枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌和遲緩芽孢桿菌。再如曲霉中的黑曲霉和米曲霉。本發(fā)明優(yōu)先使用的菌株是枯草芽胞桿菌。
本發(fā)明中所使用的多聚碳水化合物優(yōu)選魔芋粉，魔芋粉是特指魔芋球莖(Amorpliorli allus Konjac)干燥后制成的白色或灰白色顆粒狀粉末，對魔芋粉的質(zhì)量沒有特別要求。發(fā)酵液中磨芋粉的加量，從1g/L到20g/L都可以，只要益生菌能夠快速生長，分泌足夠能量的β-甘露聚糖酶，分解磨芋粉中的葡甘聚糖。其它可以促進(jìn)可分解甘露糖和甘露低聚糖的益生菌生長的多聚碳水化合物都在使用范圍之內(nèi)，如角豆膠、瓜膠。角豆膠或瓜膠是從Sigma(Sigma Co.Ltd)得到的白色粉末，對角豆膠或瓜膠的質(zhì)量沒有特別要求。本發(fā)明中所選用的氮源是指能促進(jìn)可分解甘露糖及甘露低聚糖的益生菌生長的培養(yǎng)基的組份，包括①玉米漿；②蛋白胨；③酵母膏；④微量元素；⑤磷酸緩沖液；⑥維生素；⑦氨基酸；⑧牛肉膏等，可根據(jù)不同益生菌生長和分解多聚碳水化合物的要求增添和重新組合。在發(fā)酵過程中根據(jù)生長要求可使用食品級消泡劑。
發(fā)酵過程中PH值可根據(jù)不同益生菌株的要求用酸和堿調(diào)整到合適的水平。通常控制在5.5-7.5。
發(fā)酵過程中的溫度控制可根據(jù)不同益生菌菌株的要求調(diào)整。一般在25℃～42℃之間。發(fā)酵終止時間以碳源分解成甘露糖、甘露低聚糖為止，一般為8-72小時。
發(fā)酵液中益生菌的含量根據(jù)不同菌株有所區(qū)別，但益生菌的接種量可控制有1％10％之間，一般β-甘露聚糖酶含量達(dá)到70單位/毫升。
發(fā)酵終止時的發(fā)酵液即為最終產(chǎn)品。也可根據(jù)需要進(jìn)行適當(dāng)濃縮。并可混入適當(dāng)賦形劑，用干燥的方法制成小顆粒狀或粉狀。賦形劑可選用動物飼料中所添加的各種組份或食品添加劑中的組分，也可以是干燥時所添加的包埋劑。
本發(fā)明中所涉及的含有甘露糖、甘露低聚糖和益生菌的微生態(tài)制劑可以以液體形式加入到蛋雞，肉雞，鴿，鴨，鵝，豬，牛，羊的飲水中，或給動物灌服或拌入飼料中飼用。也可以以干燥后的顆?；蚍蹱钚问剑砑拥筋A(yù)混飼料，全價飼料中。
本發(fā)明還提供飼料添加劑的制備方法益生菌菌株發(fā)酵，產(chǎn)生β-甘露聚糖酶，所述的β-甘露聚糖酶分解被分解后能產(chǎn)生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物生成甘露低聚糖和甘露糖，最后生成含有β-甘露聚糖酶、甘露低聚糖，甘露糖及益生菌的混合物用作飼料添加劑；該方法包括下述步驟①分別選擇益生菌、適合所選益生菌生長的氮源混合，再加入被分解后能產(chǎn)生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物混合發(fā)酵，所述多聚碳水化合物加量為1g/L-20g/L，所述發(fā)酵液中所述益生菌的接種量控制在1％-10％之間；②用酸或堿將發(fā)酵液pH調(diào)至5.5-7.5，溫度控制在25℃-42℃，開始發(fā)酵反應(yīng)；③發(fā)酵終止時間以多聚碳水化合物被分解成低聚糖為止，時間為8-72小時；④發(fā)酵終止時，發(fā)酵液即為最終產(chǎn)品。
本發(fā)明的實際效果是以發(fā)酵終止液所產(chǎn)生的還原糖含量來評價的，如用3，5-2硝基水楊酸比色法測定發(fā)酵終止液中甘露糖及甘露低聚糖的總還原糖含量，并計算β-甘露聚糖酶活性，用高效液相法測定發(fā)酵終止液中甘露糖含量或測定甘露糖，另外用紫外分光光度法在波長600毫米處測量益生菌的生長情況。
本發(fā)明相對于現(xiàn)有的微生態(tài)制劑具有以下優(yōu)點1、制做工藝簡單，通過一步發(fā)酵可生產(chǎn)含有益生菌，甘露糖及甘露低聚糖，和β-甘露聚糖酶的全價微生態(tài)制劑。不需要提純，精制。
2、成本大大降低，原材料來源廣泛，適合大批量工業(yè)化生產(chǎn)。
3、省工省時，飼料轉(zhuǎn)化率高。
四

圖1是本發(fā)明中枯草芽胞桿菌在含有0.1％魔芋粉培養(yǎng)基中的生長曲線。
五具體實施例方式
實施例1多聚碳水化合物選用魔芋粉，益生菌選用枯草芽胞桿菌，氮源選用蛋白胨及牛肉膏。通過發(fā)酵方法利用枯草芽胞桿菌自身所產(chǎn)生的β-甘露聚糖酶分解魔芋粉產(chǎn)生甘露糖，甘露低聚糖而制成。最終產(chǎn)品中含有甘露糖，甘露低聚糖，β-甘露聚糖酶和枯草芽胞桿菌。本實施例使用的魔芋粉是含有80％以上β-葡甘聚糖的魔芋精粉，其中淀粉的含量占2.4％。
制備方法5％枯草芽胞桿菌XL13菌種接種于含有0.1％磨芋粉(含量1g/L)的培養(yǎng)其中。培養(yǎng)基選用牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，氯化鈉5g/L。PH值7.0～7.2；37℃搖床培養(yǎng)24小時。用紫外分光光度計在波長600毫米處測量生長，枯草芽胞桿菌XL13在磨芋培養(yǎng)基中的生長曲線如圖1所示。發(fā)酵終止液用HPLC檢測甘露糖、甘露低聚糖含量，HPLC的分析條件SHODEX KS-801糖柱，長度300mm×8mm，700℃柱溫，1ul/min流速，示差檢測器(RID，350C)。24小時發(fā)酵終止液中甘露糖含量達(dá)到0.17mg/ml。
實施例2益生菌、多聚碳水化合物、氮源選擇如實施例1，制備方法如下5％枯草芽胞桿菌XL13，接種在含有2.0％磨芋粉(含量20g/L)的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基組份如實施例1中所述。在0小時、8小時、27小時、62小時、72小時取樣，用3，5-2硝基水楊酸比色法測定發(fā)酵液中還原糖含量(AppliedMicrobiology and Biotechnology 26，323)。酶活性定義為每分鐘釋放1μmol相當(dāng)于D-甘露糖的還原糖所需的酶量為1個酶活力單位。結(jié)果見表1。酶活力最高達(dá)到162IU/ml.
表1

實施例3益生菌、多聚碳水化合物、碳源選擇如實施例1，制備方法如下5％地衣芽胞桿菌XL42，接種在含有2.0％磨芋粉的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基組份如實施例一中所述。在0小時、8小時、27小時、62小時、72小時取樣，用3，5-2硝基水楊酸比色法測定發(fā)酵液中還原糖含量(AppliedMicrobiology and Biotechnology 26，323)。酶活性定義為每分鐘釋放1μmol相當(dāng)于D-甘露糖的還原糖所需的酶量為1個酶活力單位。結(jié)果見表2。酶活力最高達(dá)到38IU/ml。
表2


實施例4益生菌、多聚碳水化合物、碳源選擇如實施例1，制備方法如下5％遲緩芽胞桿菌XL12，接種在含有2.0％磨芋粉的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基組份如例一中所述。在0小時、8小時、27小時、62小時、72小時取樣，用3，5-2硝基水楊酸比色法測定發(fā)酵液中還原糖含量(AppliedMicrobiology and Biotechnology 26，323)。酶活性定義為每分鐘釋放1μmol相當(dāng)于D-甘露糖的還原糖所需的酶量為1個酶活力單位。結(jié)果見表1。酶活力最高達(dá)到83.3IU/ml。表3

實施例5多聚碳水化合物選用魔芋粉，益生菌選用地衣芽孢桿菌，氮源如實施例1，地衣芽孢桿菌XL42接種在含有1.0％磨芋粉(10g/L)培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基組份如例1中所述。23小時發(fā)酵液樣品進(jìn)一步用HPLC分析甘露糖，甘露低聚糖含量。HPLC的分析條件SHODEX KS-801糖柱，長度300mm×8mm，700C柱溫，1ul/min流速，示差檢測器(RID，350C)。23小時樣品中甘露糖含量達(dá)到0.95mg/ml.
實施例6多聚碳水化合物選用角豆膠，益生菌選用枯草芽胞桿菌，氮源如實施例1。本實施例使用的角豆膠是從Sigma(Sigma Co.Ltd)得到的含有95％以上純度的白色粉末。通過發(fā)酵方法利用枯草芽胞桿菌自身所產(chǎn)生的β-甘露聚糖酶分解底物生成含有甘露低聚糖β-甘露聚糖酶和枯草芽胞桿菌的最終產(chǎn)品。制備方法以1％的角豆膠(含量10g/L)做為多聚碳水化合物，發(fā)酵培養(yǎng)基中的其它組份如實施例1中所述；5％的枯草芽胞桿菌XL13菌種接種于含有角豆膠的培養(yǎng)其中，經(jīng)過在37℃搖床上培養(yǎng)24小時，測量菌體的生長和還原糖含量。同時取其發(fā)酵0小時、8小時、24小時、72小時發(fā)酵液測量菌體的生長和還原糖含量。結(jié)果見表4?？莶菅堪麠U菌可以利用角豆膠作為多聚碳水化合物生長，產(chǎn)生B-甘露聚糖酶分解底物生成含有甘露糖、甘露低聚糖的產(chǎn)品表4


實施例7多聚碳水化合物選用瓜膠，益生菌選用枯草芽胞桿菌，氮源如實施例1。本實施例使用的瓜膠是從Sigma(Sigma Co.Ltd)得到的含有95％以上純度的白色粉末。通過發(fā)酵方法利用枯草芽胞桿菌自身所產(chǎn)生的β-甘露聚糖酶分解底物生成含有甘露低聚糖、β-甘露聚糖酶和枯草芽胞桿菌最終產(chǎn)品。制備方法以1％的瓜膠(含量1g/L)做為多聚碳水化合物，發(fā)酵培養(yǎng)基中的其它組份如實施例1中所述；5％的枯草芽胞桿菌XL13菌種接種于含有瓜膠的培養(yǎng)其中，經(jīng)過在37℃搖床上培養(yǎng)24小時，測量菌體的生長和還原糖含量。同時取其發(fā)酵0小時、8小時、24小時、72小時發(fā)酵液測量菌體的生長和還原糖含量。結(jié)果見表4。枯草芽胞桿菌可以利用瓜膠做為多聚碳水化合物生長，產(chǎn)生β-甘露聚糖酶分解底物生成含有甘露糖、甘露低聚糖的產(chǎn)品。表5

實施例8多聚碳水化合物選用魔芋粉，益生菌選用黑曲霉，氮源選用酵母膏、蛋白胨。制備方法5％的黑曲霉XLn-1種液接種于含有1％魔芋粉(含量10g/L)的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基中的其它組份包括(克/立升)酵母膏5，蛋白胨5。在37℃培養(yǎng)72小時之后，取上清液測量還原糖含量。結(jié)果見表6。
實施例9多聚碳水化合物選用角豆膠，益生菌選用黑曲霉，氮源氮源選用酵母膏、蛋白胨。制備方法5％的黑曲霉XLn-1種液接種于含有1％角豆膠(含量10g/L)的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基中的其它組份包括(克/立升)酵母膏5，蛋白胨5。在37℃培養(yǎng)72小時之后，取上清液測量還原糖含量。結(jié)果見表6。
實施例10多聚碳水化合物選用瓜膠，益生菌選用黑曲霉，氮源氮源選用酵母膏、蛋白胨。制備方法5％的黑曲霉XLn-1種液接種于含有1％瓜膠(含量10g/L)的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基中的其它組份包括(克/立升)酵母膏5，蛋白胨5。在37℃培養(yǎng)72小時之后，取上清液測量還原糖含量。結(jié)果見表6。
實施例11多聚碳水化合物選用魔芋粉，益生菌選用米曲霉，氮源選用酵母膏、蛋白胨。制備方法5％的米曲霉XLn-1種液接種于含有1％魔芋粉(含量10g/L)的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基中的其它組份包括(克/立升)酵母膏5，蛋白胨5。在37℃培養(yǎng)72小時之后，取上清液測量還原糖含量。結(jié)果見表6。
實施例12多聚碳水化合物選用角豆膠，益生菌選用米曲霉，氮源氮源選用酵母膏、蛋白胨。制備方法5％的米曲霉XLn-1種液接種于含有1％角豆膠(含量10g/L)的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基中的其它組份包括(克/立升)酵母膏5，蛋白胨5。在37℃培養(yǎng)72小時之后，取上清液測量還原糖含量。結(jié)果見表6。
實施例13多聚碳水化合物選用瓜膠，益生菌選用米曲霉，氮源氮源選用酵母膏、蛋白胨。制備方法5％的米曲霉XLn-1種液接種于含有1％瓜膠(含量10g/L)的培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基中的其它組份包括(克/立升)酵母膏5，蛋白胨5。在37℃培養(yǎng)72小時之后，取上清液測量還原糖含量。結(jié)果見表6。表6

權(quán)利要求
1.一種飼料添加劑，其特征在于所述飼料添加劑采用如下方法制成益生菌菌株發(fā)酵，產(chǎn)生β-甘露聚糖酶，所述的β-甘露聚糖酶分解被分解后能產(chǎn)生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物生成甘露低聚糖和甘露糖，最后生成含有β-甘露聚糖酶、甘露低聚糖、甘露糖及益生菌的混合物用作飼料添加劑；該方法包括下述步驟(1)分別選擇益生菌、適合所選益生菌生長的氮源混合，再加入被分解后能產(chǎn)生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物混合發(fā)酵，所述多聚碳水化合物加量為1g/L-20g/L，上述發(fā)酵液中所述益生菌的接種量控制在1％-10％之間；(2)用酸或堿將發(fā)酵液pH調(diào)至5.5-7.5，溫度控制在25℃-42℃，開始發(fā)酵；(3)發(fā)酵終止時間以多聚碳水化合物被分解成低聚糖為止，時間為8-72小時；(4)發(fā)酵終止時，發(fā)酵液即為最終產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述的飼料添加劑，其特征在于所述益生菌至少含有下式之一①芽孢桿菌 ②曲霉。
3.如權(quán)利要求2所述的飼料添加劑，其特征在于所述芽孢桿菌可以是下式之一①枯草芽孢桿菌 ②地衣芽孢桿菌 ③遲緩芽孢桿菌。
4.如權(quán)利要求2所述的飼料添加劑，其特征在于所述曲霉可以是下式之一①黑曲霉 ②米曲霉
5.如權(quán)利要求1所述的飼料添加劑，其特征在于所述多聚碳水化合物至少含有下式之一①魔芋粉 ②角豆膠 ③瓜膠。
6.如權(quán)利要求2所述的飼料添加劑，其特征在于所述多聚碳水化合物至少含有下式之一①魔芋粉 ②角豆膠 ③瓜膠。
7.如權(quán)利要求3所述的飼料添加劑，其特征在于所述多聚碳水化合物至少含有下式之一①魔芋粉 ②角豆膠 ③瓜膠。
8.如權(quán)利要求4所述的飼料添加劑，其特征在于所述多聚碳水化合物至少含有下式之一①魔芋粉 ②角豆膠 ③瓜膠。
9.如權(quán)利要求1所述的飼料添加劑，其特征在于所述的多聚碳水化合物為魔芋粉，最終產(chǎn)物含甘露糖和甘露低聚糖、β-甘露聚糖酶。
10.如權(quán)利要求1所述的飼料添加劑，其特征在于所述益生菌為枯草芽孢桿菌，所述的多聚碳水化合物為魔芋粉，即枯草芽孢桿菌菌株發(fā)酵產(chǎn)生β-甘露聚糖酶分解魔芋粉，最終產(chǎn)物含甘露糖和甘露低聚糖、β-甘露聚糖酶及枯草芽孢桿菌。
11.如權(quán)利要求1-10所述的飼料添加劑，其特征在于在發(fā)酵過程中加食品級消泡劑。
12.如權(quán)利要求1-10所述的飼料添加劑，其特征在于將發(fā)酵液適當(dāng)濃縮，加入飼料用賦形劑，用干燥法制成小顆?；蚍蹱睢?br> 13.一種制備如權(quán)利要求1所述的飼料添加劑的方法，其特征在于所述制備方法如下益生菌菌株發(fā)酵，產(chǎn)生β-甘露聚糖酶，所述的β-甘露聚糖酶分解被分解后能產(chǎn)生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物生成甘露低聚糖和甘露糖，最后生成含有β-甘露聚糖酶、甘露低聚糖、甘露糖及益生菌的混合物用作飼料添加劑；該方法包括下述步驟(1)分別選擇益生菌、適合所選益生菌生長的氮源混合，再加入被分解后能產(chǎn)生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物混合發(fā)酵，所述多聚碳水化合物加量為1g/L-20g/L，上述發(fā)酵液中所述益生菌的接種量控制在1％-10％之間；(2)用酸或堿將發(fā)酵液pH調(diào)至5.5-7.5，溫度控制在25℃-42℃，開始發(fā)酵；(3)發(fā)酵終止時間以多聚碳水化合物被分解成低聚糖為止，時間為8-72小時；(4)發(fā)酵終止時，發(fā)酵液即為最終產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種綠色飼料添加劑，采用如下方法制成益生菌菌株發(fā)酵，產(chǎn)生β－甘露聚糖酶，所述的β－甘露聚糖酶分解被分解后能產(chǎn)生甘露低聚糖和甘露糖的多聚碳水化合物生成甘露低聚糖和甘露糖，最后生成含有β－甘露聚糖酶、甘露低聚糖、甘露糖及益生菌的混合物用作飼料添加劑。本發(fā)明制做工藝簡單，通過一步發(fā)酵可生產(chǎn)含有益生菌，甘露糖及甘露低聚糖，和β－甘露聚糖酶的全價微生態(tài)制劑；不需要提純，精制；成本大大降低，省工省時，飼料轉(zhuǎn)化率高；原材料來源廣泛，適合大批量工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A23K1/16GK1463613SQ0211205
公開日2003年12月31日 申請日期2002年6月11日 優(yōu)先權(quán)日2002年6月11日
發(fā)明者王欣, 顧君華 申請人:杭州利欣生物科技有限公司