專利名稱：嚙齒類的生物和化學結(jié)合防治的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有致病性單細胞生物和抗凝血劑的組合物，及其防治嚙齒類的用途。
已知2，3-二氫-1，3-茚二酮衍生物和4-羥基香豆素是維生素K的拮抗物并可降低血中的凝血酶原水平。這樣降低了血的凝結(jié)力。而且，這些化合物提高了毛細管的通透性。特別是，嚙齒類對這些物質(zhì)高度敏感。因此，將這些衍生物用作殺嚙齒動物活性化合物(參見，例如，DE-OS(德國公開說明書)25 06 769，JP-A 48 023 942，CH-OS(瑞士公開說明書)481 580，Tammes PML等1967 Acta Physiol.Pharmacol.Neer.14，423-433，Paposci L 1974 Beihefte Z.Angew.Zool.，155，DE 2 506 769)。
目前銷售的該類活性化合物的急性毒性是0.2mg/kg-30mg/kg(LD50鼠)。對于殺鼠醚，例如，LD50約為16.5mg/kg。第二代抗凝血劑的急性LD50為0.2mg/kg(溴敵拿鼠)至2.0mg/kg(溴敵鼠)。對于抗性鼠，各自的LD50高至10-100倍。(所有數(shù)據(jù)都是指褐家鼠的口服急性LD50)。
還已知選自肉孢子蟲目的原生動物(原生動物門，孢子蟲綱，球蟲亞綱，真球蟲目，艾美亞目)對嚙齒類(鼠屬，板齒鼠屬，田鼠屬，地鼠屬，小家鼠屬)有致病性以及在足夠高劑量條件下，可導致動物死亡(Rzepczyk 1974，Intern.J.Parasitol.4，447-449；Brehm，F(xiàn)rank1980，Z.Parasitenkd.62，15-30)。特別對鼠類中的多數(shù)種類具有致病性的該類寄生物是Sarcocystis singaporensis(Zamann等1975，Z.Parasitenkd.47，169-185)。
寄生物的終宿主是食肉動物或雜食動物；在為S.Singaporensis情況下，終宿主是蛇，例如網(wǎng)紋蟒蛇。在終宿主的腸內(nèi)，寄生物形成孢子囊。休眠期隨糞便排泄出來。如果中間宿主，在S.Singaporensis情況下例如是鼠時，上述孢子囊經(jīng)口侵染，子孢子在鼠的腸內(nèi)孵化并穿透腸壁。通過血液循環(huán)，該階段轉(zhuǎn)移至其它器官，在那里通過分裂增殖(裂體生殖)。
證實存在2次裂體生殖，第一次大約第六天p.i.以及第二次大約14-16天p.i.。裂殖體特別大量地發(fā)生于肺，其中它們在內(nèi)皮細胞中增殖。
如果，由于嚴重侵染，裂殖性孢子在肺中大量增殖，則約第16天p.i.，在寄生物第二次裂體生殖過程中鼠類發(fā)病，然后大多數(shù)情況下在幾小時內(nèi)死亡。
可用上述肉孢子蟲目的孢子囊喂食嚙齒類，以使后者由于感染而死亡。該機理可利用于防治嚙齒類(Wood 1985，J.PlantProtect.Trop.2，67-69)。應用Sarcocystis singaporensis可成功地防治鼠類(Jkel等1996，J.Parasitol.82，280-287)。
對屋頂鼠和褐家鼠大于20 000個孢子囊的侵染通常是致死量的。多達14天p.i.，動物沒有表現(xiàn)癥狀。然后，由于侵染的原因它們很快地變得虛弱并在約第16天p.i.死亡。
即使14天p.i.后，亞致死侵染的鼠幾乎沒有表現(xiàn)出任何發(fā)病的癥狀并幸免于侵染而不喪失活力。甚至侵染后幾天內(nèi)，這些動物對病原物產(chǎn)生了免疫力。因此這些動物對采用Sarcocystis singaporensis制劑的任何其它防治都是不敏感的。
令人驚奇的是，目前已發(fā)現(xiàn)通過抗凝血劑的單獨給藥可殺死亞致死侵染的動物。
這里，特別值得注意的是明顯低于普通敏感動物LD50的抗凝血劑劑量對本發(fā)明目的來說是足夠的(參見實施例)。需要小于LD50一半(口服急性)劑量可獲得100％死亡率。應用例如殺鼠醚的情況下，甚至6mg/kg對于褐家鼠是足夠的。
此處應特別強調(diào)的是甚至通常攝食一次以上才有效的單一低劑量的抗凝血劑可足以獲得100％死亡率。
令人驚奇的是，應用肉孢子蟲的孢子囊侵染的效果可通過亞致死劑量的抗凝血劑而增效。因此提供了一種顯著地更有效地防治有害嚙齒類的新的且意料不到的可能性。
一般，適合的致病生物體是選自孢子綱的所有原生動物。特別適合的是選自球蟲亞綱(coccidia)的種類。更特別適合的是艾美亞目(Eimeriina)的代表性種類。舉例來說，但并不限于此，可提及的是肉孢子蟲屬的種類，如Sarcocystis singaporensis。
通常，用于本發(fā)明體系中的肉孢子蟲目侵染的適合的增效劑是所有抗凝血劑殺嚙齒動物活性化合物。本發(fā)明中，可提及的特別是抗凝血劑物質(zhì)，如4-羥基香豆素衍生物(1-苯基-2-乙?；?-3-乙基-4-羥基香豆素(“殺鼠靈”)，3-(α-丙酮基-4-氯芐基)-4-羥基香豆素(“氯殺鼠靈”)，3-(4’-羥基-3’-香豆素基)-3-苯基-1-(4’-溴-4’-聯(lián)苯基)-丙-1-醇(“溴敵鼠”)，3-(3’-對聯(lián)苯基-1’，2’，3’，4’-四氫-1’-萘基)-4-羥基香豆素(“敵拿鼠”)，溴敵拿鼠，氟鼠酮和3-(1’，2’，3’，4’-四氫-1’-萘基)-4-羥基香豆素(“殺鼠醚”)，二氫茚二酮衍生物，如1，1-二苯基-2-乙酰基-茚滿-1，3-二酮(“敵鼠”)和(1’-對氯苯基-1’-苯基)-2-乙酰基-茚滿-1，3-二酮(“氯鼠酮(chlorodiphacinone)”)，以及羥基-4-苯并噻喃酮，例如噻鼠酮。
其它可提及的適于制備本發(fā)明組合物的抗凝血劑是以下的2-氮雜環(huán)烷基甲基-取代的二苯甲酮和二苯甲醇公開在DT-OS(德國公開說明書)2 417 783中的1-苯基-3-(2-哌啶基)-1-(對甲苯基)-2-丙酮，3，3-二苯基-1-(2-吡咯烷基)-2-戊酮，1，1-二苯基-3-[2-(六氫-1H-氮雜基)]-2-丙酮，1-(4-氟-苯基)-1-苯基-3-(2-哌啶基)-2-丙酮，1-(4-甲硫基苯基)-1-苯基-3-(5，5-二甲基-2-吡咯烷基)-2-丙酮，1-(對異丙苯基)-1-苯基-3-(4-叔丁基-2-哌啶基)-2-丙酮，3，3-二苯基-1-[2-(六氫-1H-氮雜基)]-2-丁酮，3-(2，4-二氯苯基)-3-苯基-1-(2-哌啶基)-2-庚酮，1，1-二苯基-3-(5-甲基-2-吡咯烷基)-2-丙酮，3，3-二苯基-1-(2-哌啶基)-2-丁酮，α-(α-甲基-α-苯基芐基)-2-哌啶乙醇，α-(α-乙基-α-苯基芐基)-2-吡咯烷乙醇，(2，5-二甲基-α-苯基芐基)-2-哌啶乙醇和α-(二苯基甲基)-2-(六氫-1H-氮雜)乙醇以及它們的鹽，以及公開在DT-OS(德國公開說明書)2 418 480中的4’-(氟苯基)-2-(2-吡咯烷基)-苯乙酮，4’-苯基-2-(5，5-二甲基-2-吡咯烷基)-苯乙酮，4’-[對-(三氟甲基)-苯基]-2-(2-哌啶基)-苯乙酮，4’-(對丁氧基苯基)-2-(4-叔丁基-2-哌啶基)-苯乙酮，2’-苯氧基-2-(2-哌啶基)-苯乙酮，4’-(對氟苯氧基)-2-(5，5-二甲基-2-吡咯烷基)-苯乙酮，4’-(對氯苯氧基)-2-(2-哌啶基)苯乙酮，4’-[間-(三氟甲基)-苯氧基]-2-(2-哌啶基)-苯乙酮，4’-(對丁氧基苯氧基)-2-(2-吡咯烷基)-苯乙酮，2-(2-哌啶基)-4’-(反式-對甲苯基亞乙烯基)-苯乙酮，2-(2-六氫-1H-氮雜基)-4’-(反式-苯乙烯基)-苯乙酮，4’-(間甲氧基苯基亞乙烯基)-2-(2-吡咯烷基)-苯乙酮，2-(2-哌啶基)-4’-[(對甲硫基)-苯基亞乙烯基]-苯乙酮，4’-(3-苯氧基丙氧基)-2-(2-哌啶基)-苯乙酮，4’-(4-苯基丁基)-2-(2-哌啶基)-苯乙酮，4’-(α，α-二甲基芐基)-2-(哌啶基)-苯乙酮，4’-苯乙基-2-(3，5-二乙基-2-哌啶基)-苯乙酮，4’-苯基-2-(2-吡咯烷基)-苯乙酮，α-[2-(2-苯基-乙氧基)-苯基]-2-哌啶乙醇，α-(對苯氧基苯基)-2-吡咯烷乙醇，α-[4-(4-溴苯氧基)-苯基]-6-甲基-2-哌啶乙醇，α-(對苯乙基)-苯基-2-吡咯烷乙醇，α-對聯(lián)苯基-2-(六氫-1H-氮雜)-乙醇，α-[3-(4-苯氧基丁氧基)-苯基]-2-哌啶乙醇和α-(4-芐基)-苯基-2-哌啶乙醇以及它們的鹽。
尤其是，但并不限制于此，可提及的實例包括第一代活性化合物氯鼠酮，殺鼠靈和殺鼠醚，以及早期第二代活性化合物溴敵鼠和敵拿鼠。
可將本發(fā)明組合物混入常用于制備嚙齒類食物誘餌的各種配料中，例如基于谷物、漿糊、膠和蠟段以及谷物和助劑的擠出混合物誘餌中。還可將病原物加入含水的飲用誘餌中。本發(fā)明誘餌如同用于防治有害嚙齒類的常規(guī)誘餌一樣使用。根據(jù)靶標動物種類以及誘餌點密度，可將它們以每誘餌點5g-500g數(shù)量放置在室內(nèi)和戶外。還可以將它們放置在需要防治的嚙齒類洞穴入口處。
誘餌中病原物的劑量應為每克誘餌500-200 000個孢子囊。優(yōu)選濃度為每克2000-50 000個孢子囊，并特別優(yōu)選每克10 000個孢子囊。還可以使用更高的劑量，但通常是沒有必要的。既可以使用僅一種病原物的孢子囊也可以使用不同病原物的孢子囊混合物。
抗凝血劑活性化合物的濃度應為常規(guī)應用和/或登記濃度的約10％-150％，例如如下所示濃度殺鼠靈30-600ppm殺鼠醚30-400ppm溴敵鼠5-60ppm敵拿鼠5-60ppm溴敵拿鼠3-50ppm氟鼠酮3-50ppm噻鼠酮3-50ppm優(yōu)選使用常規(guī)應用和/或登記濃度的約10％-25％的活性化合物。本發(fā)明可以應用單一活性化合物或適合的不同活性化合物的混合物。
寄生物和抗凝血劑活性化合物或活性化合物混合物可同時或分幾次在各自誘餌中提供。然而，還可將它們一起混合在一個誘餌中并應用該混配誘餌防治有害嚙齒類。在一個誘餌中的混劑是一種特別有用的溶液。
對于本發(fā)明目的來說，需要防治的嚙齒類或有害嚙齒類是嚙齒目嚙齒類。特別優(yōu)選鼠屬，小家鼠屬，板齒鼠屬，地鼠屬和田鼠屬。更特別優(yōu)選鼠屬和板齒鼠屬中的代表性種類，例如屋頂鼠，褐家鼠，Bandicota.bengalensis，板齒鼠。
通過應用本發(fā)明體系，可以節(jié)省抗凝血劑和致病性生物的用量。因為在誘餌中僅需要低濃度的抗凝血劑，所以降低了生物中的抗凝血劑濃度。
通過應用本發(fā)明體系，特別是可以確保即使是最初僅受亞致死侵染的有害嚙齒類能夠在防治措施過程中被殺死。這些動物不可能再被重復侵染，因為它們在第一次侵染后獲得了免疫。
需要強調(diào)的是，本發(fā)明體系提供了有效的抗性控制方法。對不同作用機制的結(jié)合產(chǎn)生抗性的概率顯著低于單一作用機制抗性選擇概率。
本發(fā)明體系的應用確保了在防治措施后存活鼠的比例低于僅采用一種作用機制的數(shù)量。特別是對于應用肉孢子蟲的防治方法，值得注意的是更少量的獲得免疫的抗肉孢子蟲動物幸免于防治措施。
本發(fā)明建立于兩種作用機制的增效活性。這種結(jié)合是為了獲得更有效地防治有害生物，同時使用更少量活性化合物的“害物綜合防治”的一個組成部分，因此可以減少對環(huán)境的不利影響。
下述試驗實施例用于解釋兩種作用機制的增效作用。實施例對野生褐家鼠的成年鼠試驗(褐家鼠)將3組野生褐家鼠進行相同劑量的下列處理1)Sarcocystissingaporensis孢子囊，2)抗凝血劑殺鼠醚和3)孢子囊和殺鼠醚的結(jié)合。測定死亡率。
經(jīng)過實驗，達到致死作用的最小孢子囊劑量是每只動物20 000個孢子囊。對于非抗性鼠，殺鼠醚的LD50是16.5mg/kg(RacuminTechnische Information Bayer AG)。
將褐家鼠在實驗室的標準條件下飼養(yǎng)。在實驗以及2周的處理期內(nèi)，將它們分別放置在由聚碳酸酯(Makrolon)制成的鼠籠中。孢子囊懸浮液和殺鼠醚是通過管飼法給藥，在給藥過程中使用乙醚將動物輕度麻醉。
組1(S)10 000個孢子囊，0.5毫升聚乙二醇300懸浮液，其中每毫升含有20 000個孢子囊組2(C)每千克體重6毫克殺鼠醚，0.06毫升的1％濃度的活性化合物的聚乙二醇300溶液組3(S+C)10 000個孢子囊+6毫克殺鼠醚/千克，類似于組1和2方式給藥。
死亡率n致死/n ％組(S) 0/6 0組(C) 1/6 17組(S+C) 6/6 100沒有發(fā)現(xiàn)出血
權(quán)利要求
1.組合物，其中含有至少一種單細胞寄生物的孢子囊和至少一種抗凝血劑活性化合物。
2.權(quán)利要求1的組合物，其特征在于，孢子囊的劑量和/或抗凝血劑的劑量很低以致于它們本身各自不具有任何致死作用。
3.包括權(quán)利要求1或2的孢子囊或至少一種抗凝血劑的兩個分離的組合物的組合。
4.權(quán)利要求1或2的組合物或權(quán)利要求3的兩個分離的組合物的組合防治有害嚙齒類的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及含有至少一種寄生性單細胞生物體的孢子母細胞和至少一種抗凝血劑的藥劑。本發(fā)明還涉及該藥劑殺滅有害嚙齒類的用途。
文檔編號A01N43/16GK1395468SQ01803880
公開日2003年2月5日 申請日期2001年1月5日 優(yōu)先權(quán)日2000年1月18日
發(fā)明者G·黑塞, T·貝克爾, S·恩德波爾斯, T·耶克爾, S·洪納克 申請人:拜爾公司