一種用于放流統(tǒng)計(jì)的牙鲆生態(tài)標(biāo)記方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種放流牙鲆的評(píng)估方法，具體涉及一種用于放流統(tǒng)計(jì)的牙鲆生態(tài)標(biāo) 記方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 牙鮮(Paralichthys olivaceus)主要分布于我國(guó)渤海、黃海、東海、南海和朝鮮、 日本海域。生活環(huán)境多為靠近沿岸水深20-50m潮流暢通的海域。其棲息底質(zhì)多為砂泥、砂石 或巖礁地帶。牙鲆是名貴的暖溫性、底棲海產(chǎn)經(jīng)濟(jì)魚類，也是我國(guó)北方沿海重要的海水經(jīng)濟(jì) 魚類之一。
[0003] 由于之前的過度拖網(wǎng)捕撈，導(dǎo)致我國(guó)的牙鲆野生資源曾衰退嚴(yán)重，為此，各級(jí)政府 高度重視，每年動(dòng)用大量人力、物力在不同海域開展牙鲆增殖放流活動(dòng)。通過這些年牙鲆增 殖放流活動(dòng)的開展，野生牙鲆資源量有了一定程度的增加。
[0004] 近些年我國(guó)十分重視牙鲆種質(zhì)資源的恢復(fù)，1998年至2003年我國(guó)農(nóng)業(yè)部漁業(yè)局和 日本國(guó)水產(chǎn)廳，分別委派全國(guó)水產(chǎn)技術(shù)推廣總站(本申請(qǐng)人)和日本栽培漁業(yè)協(xié)會(huì)在全國(guó)水 產(chǎn)技術(shù)推廣總站日照海水良種示范基地開展為期5年的"中日水產(chǎn)增殖技術(shù)合作項(xiàng)目"，專 門從事牙鲆魚的苗種培育和種質(zhì)資源恢復(fù)工作。在合作項(xiàng)目的帶動(dòng)下，全國(guó)沿海省開始了 牙鲆的增殖放流。以山東省為例，2005年之前放流規(guī)模較小，不足20萬尾，到2007年放流數(shù) 量已近每年1000萬尾。
[0005] 然而，這些年，我們只片面的追求了牙鲆魚苗培育數(shù)量和放流規(guī)模，卻輕視了增殖 放流的后期評(píng)估，即到底增加了多少?放流牙鲆的成活率又如何?多少體長(zhǎng)的牙鲆魚苗最適 宜于放流等問題卻一直沒有讓人信服的答案。究其原因，主要是因?yàn)闆]有找到合適的牙鲆 放流標(biāo)記方法。即使進(jìn)行放流效果評(píng)估，也因選擇的標(biāo)記方法的諸多缺陷，很難推廣應(yīng)用， 不同標(biāo)記方法的優(yōu)缺點(diǎn)詳見表1所示。
[0006] 表1.增殖放流中不同標(biāo)記技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)
[0008] 現(xiàn)行最常用的是"τ"型標(biāo)記法，由上表可知，放流魚苗個(gè)體太小就不能用，還易造 成繼發(fā)感染，也不易于大規(guī)模放流使用;切除標(biāo)記雖能大規(guī)模使用，但切的少了只能作為短 期標(biāo)記，切得多了又影響放流魚苗的運(yùn)動(dòng)和捕食;分子標(biāo)記、熒光染色標(biāo)記等"高、大、上"方 法，不僅費(fèi)用昂貴，而且不易于后期回捕辨識(shí)。
[0009] 針對(duì)以上諸多問題，本發(fā)明申請(qǐng)人全國(guó)水產(chǎn)技術(shù)推廣總站，發(fā)明人李剛等認(rèn)真總 結(jié)多年牙鲆魚苗培育和增殖放流經(jīng)驗(yàn)。于2007年，提出了牙鲆生態(tài)標(biāo)記的理念，得到了黃渤 海區(qū)漁政局有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)的認(rèn)可，并在隨后的幾年中一直從事生態(tài)標(biāo)記的研究，開展了牙鲆生 態(tài)標(biāo)記放流試驗(yàn)，旨在通過對(duì)牙鲆魚苗變態(tài)前后的攝入營(yíng)養(yǎng)進(jìn)行人為干預(yù)，使放流牙鲆魚 苗在無眼側(cè)出現(xiàn)黑色素沉積斑以此和野生牙鲆無眼純白形成鮮明對(duì)比，達(dá)到標(biāo)記的目的。 并且這種標(biāo)記方法不增加死亡率，不影響生長(zhǎng)，保持時(shí)間長(zhǎng)，不易脫標(biāo)，技術(shù)成本低、易于量 化操作且回捕易辨識(shí)，具有廣闊的推廣和應(yīng)用前景。2012年開始，本申請(qǐng)的申請(qǐng)人分別與多 家企業(yè)及個(gè)體老板合作進(jìn)行了生態(tài)標(biāo)記牙鲆的培育試驗(yàn)，試驗(yàn)成果得到了日照市海洋與漁 業(yè)局漁業(yè)分管局長(zhǎng)的高度肯定。
[0010]所謂牙鲆生態(tài)標(biāo)記就是在人工養(yǎng)殖過程中通過人為干預(yù)使放流牙鲆魚苗無眼側(cè) 出現(xiàn)黑色素沉積斑，以此與野生牙鲆無眼側(cè)純白進(jìn)行區(qū)別達(dá)到標(biāo)記目的牙鲆增殖放流標(biāo)記 方法。本申請(qǐng)人研究發(fā)現(xiàn)，牙鲆孵出后3天，眼色素加深，視覺系統(tǒng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)形成，呈正趨 光性，開始主動(dòng)攝食。隨著視覺器官的進(jìn)一步發(fā)育，視網(wǎng)膜通過視紫紅質(zhì)將視覺傳遞到中樞 神經(jīng)系統(tǒng)，中樞神經(jīng)再通過酪氨酸酶先將酪氨酸氧化成二羥苯丙氨酸(DOPA);二羥苯丙氨 酸生成多巴奎寧；多巴奎寧在酪氨酸酶的作用下聚合成黑色素。
[0011]正常情況下牙鲆幼魚變態(tài)前，成色素細(xì)胞分布在身體兩側(cè)，二羥苯丙氨酸(DOPA) 陽(yáng)性細(xì)胞均勻分布。一開始變態(tài)，有眼側(cè)的黑色素細(xì)胞具有許多液胞，內(nèi)含酪氨酸酶，逐步 移向皮膚的表面，迅速擴(kuò)散;變態(tài)后數(shù)量增加;而無眼側(cè)的成色素細(xì)胞則逐漸溶解，數(shù)量減 少，因此形成的牙鲆魚苗有眼側(cè)呈褐色或棕褐色，無眼側(cè)因缺少黑色素細(xì)胞而呈白色。然 而，通過大量實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)某些營(yíng)養(yǎng)元素、營(yíng)養(yǎng)元素的量以及攝入的時(shí)間，能夠達(dá)到抑制其無眼 側(cè)成色素細(xì)胞的減少，進(jìn)而形成褐色或棕褐色的斑塊，達(dá)到生態(tài)標(biāo)記的目的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 本發(fā)明的目的是提供一種用于放流統(tǒng)計(jì)的牙鲆生態(tài)標(biāo)記方法，解決了現(xiàn)有技術(shù)中 提到的不足。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)：
[0013] -種用于放流統(tǒng)計(jì)的牙鲆生態(tài)標(biāo)記方法，所述用于放流統(tǒng)計(jì)的牙鲆生態(tài)標(biāo)記方法 包括以下步驟：
[0014] Sl:在消毒處理后的培養(yǎng)池中加水，在15 °C下，布牙鲆魚卵，其養(yǎng)殖密度為0.2~2 萬尾/m3;
[0015] S2:仔魚3日齡時(shí)，仔魚開口，開始投喂?fàn)I養(yǎng)強(qiáng)化后的輪蟲，投喂至仔魚26~30日齡 為止；
[0016] 輪蟲中營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑的添加量為:3日齡~11日齡，每1億輪蟲用13~18g的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化 劑強(qiáng)化營(yíng)養(yǎng)；12日齡-20日齡每1億輪蟲用20~30g的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑強(qiáng)化營(yíng)養(yǎng);20日齡以后為1 億輪蟲13~18g營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑的用量；
[0017] S3:仔魚12日齡時(shí)，開始投喂?fàn)I養(yǎng)強(qiáng)化后的鹵蟲，投喂至仔魚35~50日齡為止； [0018]步驟S2和S3中進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑的成份包括DHA、EPA、維生素和氨基酸； [0019] S4:仔魚15~19日齡時(shí)，開始投喂配合飼料，用量為仔魚體重的3~10% ;
[0020]由此，得到生態(tài)標(biāo)記型牙鲆，該牙鲆無眼側(cè)出現(xiàn)形態(tài)、特征穩(wěn)定的黑色素沉積斑， 其用于放流牙鲆統(tǒng)計(jì)研究。
[0021 ]進(jìn)一步地，輪蟲中營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑的添加量為：3日齡~11日齡，每1億輪蟲用15g的營(yíng) 養(yǎng)強(qiáng)化劑強(qiáng)化營(yíng)養(yǎng)；12日齡-20日齡每1億輪蟲用25g的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑強(qiáng)化營(yíng)養(yǎng);20日齡以后又 恢復(fù)至1億輪蟲15g營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑的用量。
[0022]進(jìn)一步地，鹵蟲中營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑的添加量為：12日齡-15日齡，每1億鹵蟲用50g的營(yíng) 養(yǎng)強(qiáng)化劑強(qiáng)化營(yíng)養(yǎng)；15日齡以后為每1億齒蟲用100g的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑強(qiáng)化營(yíng)養(yǎng)，直至35~50日 齡，優(yōu)選40~46日齡。
[0023] 進(jìn)一步地，步驟S2中，營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化后的輪蟲的投喂量為:仔魚3~4日齡，每日的投喂 量為0.4~0.6億個(gè)/50m3，再由5日齡每日1.2~1.8億個(gè)/50m 3 (本發(fā)明中提到的50m3均指 50m3的培養(yǎng)池)逐漸增加至21日齡或22日齡或23日齡的18~19億個(gè)/50m 3，此后，再由18~19 億個(gè)/50m3遞減至投喂結(jié)束時(shí)的6~7億個(gè)/50m3。
[0024] 進(jìn)一步地，5~6日齡每日1.5或1.6億個(gè)/50m3培養(yǎng)池，7~8日齡每日2.8~3.1億 個(gè)/50m 3，9~13日齡每日4 · 8~5 · 2億個(gè)/50m3，14~15日齡每日8 · 0~8 · 2億個(gè)/50m3，16~17 日齡每日11.8~12.0億個(gè)/50m3,18~19日齡每日15.0~15.5億個(gè)/50m 3，20~21日齡每日 17.0~17.5億個(gè)/50m3,22日齡每日18.0~18.4億個(gè)/50m 3,23~25日齡每日17.0~17.9億 個(gè)/50m3，26~28日齡每日6 · 5~7 · 0億個(gè)/50m3。
[0025] 進(jìn)一步地，5~6日齡每日1 · 5億個(gè)/50m3，7~8日齡每日3 · 0億個(gè)/50m3，9~13日齡每 日5 · 0或5 · 1億個(gè)/50m3，14~15日齡每日8 · 1或8 · 2億個(gè)/50m3，16~17日齡每日11 · 8或11 · 9或 12 ·0億個(gè)/50m3,18~19日齡每日15.2或15.3或15.4或15.5億個(gè)/50m3，20~21日齡每日17.0 或17 · 1或17 · 2或17 · 3億個(gè)/50m3，22日齡每日18 · 2億個(gè)/50m3，23日齡每日17 · 9億個(gè)/50m3，24 日齡每日17 · 7億個(gè)/50m3，25日齡每日17 · 4億個(gè)/50m3; 26~28日齡每日6 · 6~7 · 0億個(gè)/50m3。 [0026]進(jìn)一步地，步驟S3中，營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化后的鹵蟲的投喂量為：由12日齡每日0.7~0.8億 個(gè)/50m 3培養(yǎng)池逐漸增加至20~31日齡的2.9~3.1億個(gè)/50m3培養(yǎng)池，此后，再由2.9~3.1億 個(gè)/50m 3培養(yǎng)池遞減至投喂結(jié)束時(shí)的1.3~1.5億個(gè)/50m3培養(yǎng)池。
[0027] 進(jìn)一步地，從仔魚3日齡開始投喂小球藻，投喂量為：1億個(gè)/50m3,投喂至14~16日 齡，此后，其投喂量增加至:3億個(gè)/50m3，投喂至26~30日齡。
[0028]進(jìn)一步地，所述營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑中DHA的質(zhì)量百分比為:24~25 %，所述EPA的質(zhì)量百分 比分別為：17~19%，所述維生素的含量為：IU/lOOg 450~530，所述氨基酸的含量為:5000 ~6000mg/100g。優(yōu)選地，所述營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑中DHA的質(zhì)量百分比分別為:24.6%，EPA的質(zhì)量百 分比為：18.05%，維生素的含量為：IU/lOOg 460~500，氨基酸的含量為：5600~5900mg/ 100g0
[0029] 進(jìn)一步地，維生素包括VA、VD和VE，其含量為:VA: IU/100g< 100，VD: IU/lOOg 377， VE: IU/100g<0.5;所述氨基酸的成份包括丙氨酸750mg/100g;天門冬氨酸1260mg/100g;甘 氨酸640mg/100g;組氨酸240mg/100g;異亮氨酸400mg/100g;亮氨酸700mg/100g;賴氨酸 530mg/100g;苯丙氨酸420mg/100g;脯氨酸400mg/100g;絲氨酸460mg/100g。
[0030] 進(jìn)一步地，步驟S5中，所述配合飼料的用量為仔魚體重呈反比例關(guān)系，3~5日齡按 體重的8~10%投喂，5日齡以后逐漸遞減，到30日齡以后按3~5%投喂，