l/100mlo
[0021]再次，本發(fā)明還公開一種上述汞離子的納米金-DNA復合檢測試紙在檢測溶液中汞離子上的用途，該試紙可直接用于水體中汞離子的檢測，當水體中含有足夠量OlOppb)汞離子時，試紙顏色從藍色及時轉變?yōu)榧t色，并可通過眼睛完成可視化識別。
[0022]在使用時，可將該試紙置入水體中，若水體中含有汞離子，試紙上納米金-DNA上的雙鏈堿基序列對汞離子具有特異性識別功能并與汞離子結合致使DNA雙鏈開環(huán)，聚集的納米金顆粒分散，試紙由藍色變成紅色，達到便攜式探針的目的。
[0023]本發(fā)明提供的離子的納米金-DNA復合檢測試紙，與現(xiàn)有技術相比，具有以下有益效果:快速、靈敏、低價、便捷的特性，可廣泛適用與家居、旅游、軍工、實驗檢測等領域水安全檢測使用，保障消費者的健康。
【具體實施方式】
[0024]實施例1:納米金試紙的制備
[0025]取白色纖維素試紙5片(長8cm，寬Icm)用去離子水洗滌，并置于烘箱烘干。取N-乙烯吡咯烷酮0.2ml及3-氨基丙基三乙氧基硅烷0.2ml于50毫升去離子水中，室溫下攪拌10分鐘，緩慢升溫至80度，將試紙置入反應溶液中，快速滴入氯金酸溶液2毫升(20mM)，攪拌反應10分鐘，發(fā)現(xiàn)試紙變紅，納米金試紙制備完成。
[0026]實施例1:納米金-DNA復合試紙
[0027]DNA 喊基序列，序列 A:3’ -HS-GTA AAGAAAGAA-5f,序列 B:5’ -HS-GGGGAACAAACA-3’ 及序列 C:5’ -CAT TTC TTT CTT CCC CTT GTT TGT TTC-3’，分別取序列 A 及序列B 0.5nmol溶于50毫升PH = 7.5的磷酸緩沖液中，室溫下攪拌10分鐘，將4片上述實施案例I中的納米金試紙置入溶液中浸漬5小時，將試紙取出，試紙依然顯紅色；再取序列C 0.5nmol溶于50毫升PH = 7.5的磷酸緩沖液中，將上述4片試紙置入序列C溶液中浸漬12小時，試紙染色逐漸由紅變藍，獲得納米金-DNA復合汞離子檢測試紙。
[0028]實施例3:納米金-DNA復合試紙對汞離子的檢測
[0029]分別配置不同濃度的氯化萊水溶液(3ppb，1ppb, 50ppb, 400ppb) 50升，將實施例2中所制備的納米金-DNA復合試紙置入，浸漬約5分鐘，四張試紙上顯示顏色分別為藍，微紅，紅，紅；由此可看出該試紙可通過肉眼便可有效探測出超過1ppb汞離子水溶液中含有汞離子。
【主權項】
1.一種汞離子的納米金-DNA復合檢測試紙，其特征在于，包括試紙及通過偶聯(lián)劑與其連接的納米金-DNA顆粒。2.如權利要求1所述的汞離子的納米金-DNA復合檢測試紙，其特征在于，所述試紙的基質材料由羥基或胺基的材料組成。3.如權利要求2所述的汞離子的納米金-DNA復合檢測試紙，其特征在于，所述試紙的基質材料為纖維素或黏膠。4.如權利要求1所述的汞離子的納米金-DNA復合檢測試紙，其特征在于，所述偶聯(lián)劑為3-(巰基丙基)三甲氧基硅烷、雙【3-(三乙氧基甲硅烷基)丙基】四硫化物、3-(氨基丙基)三乙氧基硅烷、3-(氨基丙基)三甲氧基硅烷、3-氨基丙基甲基二乙氧基硅烷、N-(2-氨基乙基)-3-氨基丙基三甲氧基硅烷、N- (2-氨基乙基)-3-氨基丙基甲基二甲氧基硅烷、(3-三甲氧基甲硅烷基)二亞乙基三胺、N-【3-(三甲基硅基)丙基】正丁胺、N-乙基氨基異丁基三甲氧基硅烷、N-甲基氨基異丁基三甲氧基硅烷、N-苯基氨基異丁基三甲氧基硅烷、雙(3-三乙氧基硅)胺、雙(3-三甲氧基硅)胺、雙【3-(三甲氧基甲硅烷基)丙基】乙二胺、N-(3-三乙氧基甲硅烷基丙基)_4，5- 二氫咪唑、脲丙基三乙氧基硅烷、3-異氰基酸酯基三乙氧基硅烷、異氰基酸酯、甲苯二異氰酸酯、六亞甲基二異氰酸酯、N-乙烯吡咯烷酮、3-氨基丙基三乙氧基硅烷中的至少一種。5.如權利要求1所述的汞離子的納米金-DNA復合檢測試紙，其特征在于，所述納米金-DNA顆粒是在納米金顆粒表面修飾DNA堿基序列片段，包括序列A: 3 ’ -HS-GTAAAGAAAGAA-5’、序列 B:5’ -HS-GGG GAACAAACA-3’ 及序列 C:5’ -CAT TTC TTT CTT CCC CTTGTT TGT TTC-3’ ； 納米金-DNA表面具有兩種形態(tài)，一種納米金顆粒表面由序列A修飾，另一種納米金顆粒表面由序列B修飾，A、B片段都通過巰基與納米金顆粒表面相連； 所述兩種納米金-DNA運用DNA堿基互配原理，通過序列C與兩種納米金顆粒表面的A、B片段同時相連，納米金顆粒相互聚集，形成DNA雙鏈互配結構，納米金-DNA復合檢測試紙顯藍色。6.如權利要求5所述的汞離子的納米金-DNA復合檢測試紙，其特征在于，所述序列C對Hg2+具有特異識別性能，當液體中含有足量的Hg 2+時，Hg 2+會與堿基序列C結合，從而破壞在納米金顆粒表面上形成的DNA雙鏈互配結構，被聚集的納米金顆粒分開，納米金-DNA復合檢測試紙的顏色由藍變紅，達到檢測的目的。7.一種制備如權利要求1-5任一所述汞離子的納米金-DNA復合檢測試紙的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)制備納米金試紙:取白色纖維素試紙，用去離子水洗滌，并置于烘箱烘干，取偶聯(lián)劑于去離子水中，室溫下攪拌5-15分鐘，緩慢升溫，將試紙置入反應溶液中，快速滴入氯金酸溶液，攪拌反應5-20分鐘，發(fā)現(xiàn)試紙變紅，納米金試紙制備完成； (2)納米金-DNA復合檢測試紙:DNA堿基序列，序列A:3 ’ -HS-GTA AAGAAAGAA-5 ’，序列B:5，-HS-GGG GAACAAACA-3’及序列 C:5’-CAT TTC TTT CTT CCC CTT GTT TGT TTC-3，，分別取序列A及序列B溶于磷酸緩沖液中，室溫下攪拌5-25分鐘，將步驟(I)中制備的納米金試紙置入溶液中浸漬3-8小時，將試紙取出，試紙依然顯紅色；再取序列C溶于磷酸緩沖液中，將上述4片試紙置入序列C溶液中浸漬8-16小時，試紙染色逐漸由紅變藍，獲得納米金-DNA復合汞離子檢測試紙。8.如權利要求7所述汞離子的納米金-DNA復合檢測試紙的方法，其特征在于，所述步驟(I)中偶聯(lián)劑在去離子水中的濃度為0.2?0.8ml/100ml，升溫溫度為70?90度，氯金酸溶液與去離子水的體積比為1:100?10:100。9.如權利要求7所述汞離子的納米金-DNA復合檢測試紙的方法，其特征在于，所述步驟(2)中磷酸緩沖液的PH = 7.5，序列A、序列B和序列C在磷酸緩沖液中的濃度為0.l-3nmol/100mlo10.一種如權利要求1-5任一所述汞離子的納米金-DNA復合檢測試紙在檢測溶液中汞離子上的用途。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種汞離子的納米金-DNA復合檢測試紙，包括試紙及通過偶聯(lián)劑與其連接的納米金-DNA顆粒。還公開了其制備方法和用途，本發(fā)明利用納米金比色法開發(fā)的可負擔、使用方便、操作簡單的新型納米金-DNA復合汞離子檢測試紙可用于及時檢測水中的汞離子含量。在使用時，可將該試紙置入水體中，若水體中含有汞離子，試紙上納米金-DNA上的雙鏈堿基序列對汞離子具有特異性識別功能并與汞離子結合致使DNA雙鏈開環(huán)，聚集的納米金顆粒分散，試紙由藍色變成紅色，達到便攜式探針的目的，與現(xiàn)有技術相比，具有快速、靈敏、低價、便捷的特性，可廣泛適用與家居、旅游、軍工、實驗檢測等領域水安全檢測使用，保障消費者的健康。
【IPC分類】G01N33/532, G01N33/68
【公開號】CN105652012
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】劉洪均, 張瑾, 姜曉宇
【申請人】惠州市銀嘉環(huán)?？萍加邢薰?br>【公開日】2016年6月8日
【申請日】2014年11月28日