綠及咳喘片在制備抑制人舌癌細(xì)胞tca 8113細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種綠及咳喘片在制備抑制人舌癌細(xì)胞TCA 8113細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用及綠及咳喘片的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 綠及咳喘顆粒標(biāo)準(zhǔn)號(hào)WS-10616(ZD-0616)-2002,記載于國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編內(nèi)科 肺系(二)分冊。由小綠芨200g、雞矢藤200g、功勞木100g、通關(guān)藤100g、白及100g、虎杖100g、 透骨草l〇〇g、黃精100g作為原料藥制成，具有養(yǎng)陰潤肺、清熱解毒、化瘀止血的功效，用于 熱燥犯肺引起的咳嗽，潮熱，盜汗等癥。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中，尚未有綠及咳喘片在在制備抑制人人舌癌細(xì)胞TCA 8113細(xì)胞增殖藥 物中的應(yīng)用的報(bào)道，也未見有綠及咳喘片提取制備方面采用超臨界萃取的報(bào)道，而傳統(tǒng)水 煎煮、乙醇回流提取的方法，工藝粗糙、落后，雜質(zhì)多，導(dǎo)致患者用量過大，不方便服用，嚴(yán)重 影響了本品在臨床上應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 發(fā)明目的：本發(fā)明的目的在于提供一種綠及咳喘片在制備抑制人舌癌細(xì)胞TCA 8113細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種綠及咳喘片的制備方法。
[0006] 本發(fā)明的目的是通過如下的方案實(shí)現(xiàn)的： 綠及咳喘片在制備抑制人舌癌細(xì)胞TCA 8113細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用，所述綠及咳喘片 由小綠芨200g、雞矢藤200g、功勞木100g、通關(guān)藤100g、白及100g、虎杖100g、透骨草100g、黃 精l〇〇g作為原料藥制成，所述綠及咳喘片的制備方法包括如下步驟:取小綠芨200g、雞矢 藤200g、功勞木100g、通關(guān)藤100g、白及100g、虎杖100g、透骨草100g、黃精100g，加入到⑶2 超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4-6%，萃取壓力 15-3010^，溫度30-50°(：，〇)2流量1-31111/^生藥.1^11，萃取時(shí)間700-8001^11，得超臨界萃取 物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成200片，每片重0.50g。
[0007] 優(yōu)選的，上述的綠及咳喘片在制備抑制人舌癌細(xì)胞TCA 8113細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng) 用，所述綠及咳喘片的制備方法包括如下步驟:取小綠芨200g、雞矢藤200g、功勞木100g、通 關(guān)藤100g、白及100g、虎杖100g、透骨草100g、黃精100g，加入到C〇2超臨界萃取器中，乙醇作 為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%，萃取壓力25MPa，溫度40 °C，(：02流量 2ml/g生藥· min，萃取時(shí)間750min，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙醇制 顆粒，干燥，壓片，制成200片，每片重0.50g。
[0008] 現(xiàn)有技術(shù)中，綠及咳喘顆?？诜淮?0g，一日3-4次。綠及咳喘顆粒服藥量大。采 用本發(fā)明方法制備成的綠及咳喘片每片重〇.50g，每次僅需2片，一日服用3-4次。在具有更 多活性成分的條件下大大減少了服用量。此結(jié)論可以通過下述試驗(yàn)證明。
[0009] 試驗(yàn)一、不同方法制備的綠及咳喘片中大黃素含量的比較 1、儀器及試藥本發(fā)明綠及咳喘片:按實(shí)施例1方法制備，使用1000 g原料藥，經(jīng)提取制成 200片，每片重0.50g。原綠及咳喘顆粒，按照WS-10616(ZD-0616)-2002標(biāo)準(zhǔn)方法制備。 Agi I ent 1200高效液相色譜儀;METTLER AE240電子分析天平;大黃素對(duì)照品（中國藥品生物 制品檢定所）。
[0010] 2、方法 照高效液相色譜法(中國藥典2015年版第四部凡例十五)測定。
[0011]色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.1%磷酸 溶液(80:20)為流動(dòng)相;檢測波長為437nm。理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。
[0012] 對(duì)照品溶液的制備精密稱取大黃素對(duì)照品適量，加甲醇制成每I m 1含10μ g的溶 液，即得。
[0013] 供試品溶液的制備取本發(fā)明綠及咳喘片10片，研細(xì)，混勻，取O.lg，精密稱定，加 水20ml使溶解，加鹽酸2ml，搖勻，加熱回流30分鐘，冷卻，加氯仿30ml，超聲處理10分鐘，轉(zhuǎn) 入分液漏斗中，分取氯仿液，水液再用氯仿振搖提取2次，每次15ml，合并氯仿液，在80°C水 浴上蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至IOml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜 (0.45μηι)濾過，取濾液，即得。
[0014] 對(duì)照產(chǎn)品供試品溶液的制備取對(duì)照的綠及咳喘顆粒20g，研細(xì)，混勻，取lg，精密 稱定，加水20ml使溶解，加鹽酸2ml，搖勻，加熱回流30分鐘，冷卻，加氯仿30ml，超聲處理10 分鐘，轉(zhuǎn)入分液漏斗中，分取氯仿液，水液再用氯仿振搖提取2次，每次15ml，合并氯仿液，在 80°C水浴上蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至IOml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔 濾膜(0.45_)濾過，取濾液，即得。
[0015] 測定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液、對(duì)照產(chǎn)品供試品溶液各20μ1，注 入液相色譜儀，測定，即得。
[0016] 3、結(jié)果 結(jié)果表明，本發(fā)明綠及咳喘片中大黃素的含量為1.65-3.28mg/片;而原綠及咳喘顆粒 中大黃素的含量為1.62mg/袋(每袋含顆粒劑10g)，每次服用量2片的大黃素含量為原顆粒 劑IOg含量的2-4倍，在服用量減少的情況下，大黃素含量有很大提高。
[0017] 上述研究表明，采用本發(fā)明制備方法制備的綠及咳喘片，有效成分含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于 WS-10616 (ZD-0616 ) -2002標(biāo)準(zhǔn)記載的方法制備的綠及咳喘顆粒。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作更進(jìn)一步的說明，以便本領(lǐng)域的技術(shù)人員更了解 本發(fā)明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例，凡基于本發(fā)明上述 內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
[0019] 實(shí)施例1 取小綠芨200g、雞矢藤200g、功勞木100g、通關(guān)藤100g、白及100g、虎杖100g、透骨草 l〇〇g、黃精l〇〇g，加入到CO2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積 百分比為5%，萃取壓力25MPa，溫度40°C，CO 2流量2ml/g生藥· min，萃取時(shí)間750min，得超臨 界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成200片，每片重 O·50g〇
[0020]經(jīng)檢測，成品中大黃素的含量為3.28mg/片。
[0021] 實(shí)施例2 取小綠芨200g、雞矢藤200g、功勞木100g、通關(guān)藤100g、白及100g、虎杖100g、透骨草 l〇〇g、黃精l〇〇g，加入到CO2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積 百分比為4%，萃取壓力15MPa，溫度30°C，CO 2流量lml/g生藥· min，萃取時(shí)間900min，得超臨 界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成200片，每片重 0·50g〇
[0022]經(jīng)檢測，成品中大黃素的含量為1.65mg/片。
[0023] 實(shí)施例3 取小綠芨200g、雞矢藤200g、功勞木100g、通關(guān)藤100g、白及100g、虎杖100g、透骨草 l〇〇g、黃精l〇〇g，