得到絲素蛋白溶液。
[0074](2)絲素蛋白溶液置于40°C恒溫水浴中，在轉(zhuǎn)速為1300rpm的攪拌下，加入1.7997g無水磷酸二氫鈉，溶解后加入2.7745g無水氯化鈣，此時投入的前驅(qū)鹽中Ca/P = 5:3(物質(zhì)的量之比)，天然高分子的質(zhì)量與兩種前驅(qū)鹽中鈣離子和磷酸根離子的質(zhì)量和的比值為
0.516。5分鐘后，一次性加入301^氨水(冊3濃度為25-28%)，并將攪拌轉(zhuǎn)速調(diào)成650印111，攪拌3h使其充分反應(yīng)。
[0075](3)反應(yīng)完成后停止攪拌，反應(yīng)產(chǎn)物在反應(yīng)容器內(nèi)40°C恒溫條件下陳化24h，期間間隔間隔4.5h就向反應(yīng)體系中添加6mL氨水(NH3濃度為25-28 % )，共添加5次，以保持體系pH值在11左右。
[0076](4)陳化完成后，去除上清液，將得到的羥基磷灰石-絲素蛋白復(fù)合材料沉淀轉(zhuǎn)入離心管中，用去離子水清洗6次，清洗液用pH計測為中性。
[0077](5)將洗凈的羥基磷灰石-絲素蛋白復(fù)合材料沉淀倒出、鋪平在玻璃表面皿上，厚度大概0.2cm,轉(zhuǎn)入烘箱中烘干，烘箱溫度設(shè)置為40 0C，烘干時間為48h。
[0078](6)將干燥的羥基磷灰石-絲素蛋白復(fù)合物取出，初步敲碎，依次過10#篩子(孔徑2mm)、18#篩子(孔徑0.5mm)、35#篩子(孔徑lmm)和60#篩子(孔徑0.25mm)，以區(qū)分出0.25-
0.5mm、0.5-lmm和1-2mm這三種規(guī)格，每次過篩后分別封裝三種規(guī)格的輕基磷灰石-絲素蛋白納米復(fù)合顆粒，并將>2mm規(guī)格的顆粒在研缽中稍加研磨、繼續(xù)過篩，循環(huán)進(jìn)行多次過篩、研磨的操作后，得到三種規(guī)格的羥基磷灰石-絲素蛋白納米復(fù)合顆粒。
[0079]由圖2(4)和圖3(下半部分)可知實(shí)施例4獲得的羥基磷灰石-絲素蛋白納米復(fù)合顆粒的顯微形貌是針狀結(jié)晶，長度約為50nm。由圖4可知材料結(jié)晶良好，與羥基磷灰石對照樣的特征峰吻合度高。由圖5可知材料中鈣與磷的摩爾質(zhì)量比為1.647。
[0080]實(shí)施例5
[0081 ] (I)將8g質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12wt %的殼聚糖溶液(其中殼聚糖的分子量為2.I X I O5Da，脫乙酰度為92%)加去離子水在40°C恒溫水浴下稀釋成40mL的殼聚糖溶液，在轉(zhuǎn)速為1300rpm的攪拌下，攪拌3h得到均一的殼聚糖溶液，此時的濃度為24g/L。
[0082](2)殼聚糖溶液置于40°C恒溫水浴中，在轉(zhuǎn)速為1300rpm的攪拌下，加入1.58g磷酸氫二銨固體，溶解后加入2.22g無水氯化鈣，此時投入的前驅(qū)鹽中Ca/P = 5:3(物質(zhì)的量之比)，天然高分子的質(zhì)量與兩種前驅(qū)鹽中鈣離子和磷酸根離子的質(zhì)量和的比值為0.521。5分鐘后，加入20mL氨水(NH3濃度為25-28 % )，并將攪拌轉(zhuǎn)速調(diào)成650rpm，攪拌24h使其充分反應(yīng)。
[0083](3)反應(yīng)完成后停止攪拌，反應(yīng)產(chǎn)物在反應(yīng)容器內(nèi)40°C恒溫條件下陳化14h，期間間隔間隔3h就向反應(yīng)體系中添加5mL氨水(NH3濃度為25-28 % )，共添加4次，以保持體系pH值在11左右。
[0084](4)陳化完成后，去除上清液，將得到的羥基磷灰石-殼聚糖復(fù)合材料沉淀轉(zhuǎn)入離心管中，用去離子水清洗5次，清洗液用pH計測為中性。
[0085](5)將洗凈的羥基磷灰石-殼聚糖復(fù)合材料沉淀倒出、鋪平在玻璃表面皿上，厚度大概0.2cm,轉(zhuǎn)入烘箱中烘干，烘箱溫度設(shè)置為40 0C，烘干時間為48h。
[0086](6)將干燥的羥基磷灰石-殼聚糖復(fù)合物取出，初步敲碎，依次過10#篩子(孔徑2mm)、18#篩子(孔徑lmm)、35#篩子(孔徑0.5mm)和60#篩子(孔徑0.25mm)，以區(qū)分出0.25-
0.5mm,0.5_lmm和l_2mm這三種規(guī)格，每次過篩后分別封裝三種規(guī)格的羥基磷灰石-殼聚糖復(fù)合物，并將>2mm規(guī)格的顆粒在研缽中稍加研磨、繼續(xù)過篩，循環(huán)進(jìn)行多次過篩、研磨的操作后，得到三種規(guī)格的羥基磷灰石-殼聚糖復(fù)合材料粒狀產(chǎn)品。
[0087]由圖4可知材料結(jié)晶良好，與羥基磷灰石對照樣的特征峰吻合度高。由圖5可知材料中鈣與磷的摩爾質(zhì)量比為1.683。
[0088]上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一鍋法制備羥基磷灰石-天然高分子納米復(fù)合物的方法，其特征在于包括如下步驟:按物質(zhì)的量比Ca/P = 5:3，往天然高分子溶液中投加鈣鹽和磷酸鹽，用堿溶液調(diào)節(jié)體系的pH為10-12，體系中的鈣離子、磷酸根離子、氫氧根離子與天然高分子發(fā)生原位共沉淀反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物清洗至中性后干燥得到羥基磷灰石-天然高分子納米復(fù)合物;所述的天然高分子為帶電的天然多糖、帶電的天然蛋白質(zhì)中的一種或兩種以上的混合物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的帶電的天然多糖包括甲殼素、殼聚糖、殼寡糖、海藻酸、纖維素、透明質(zhì)酸、果膠或它們的衍生物;所述的帶電的天然蛋白包括膠原蛋白、絲素蛋白、絲膠蛋白或它們的衍生物。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的鈣鹽包括硝酸鈣、氯化鈣;所述的磷酸鹽包括磷酸二氫鉀、磷酸氫鉀、磷酸鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸氫二銨。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的天然高分子的質(zhì)量與兩種鹽中鈣離子和磷酸根咼子的質(zhì)量和的比值為I: (0.10-0.93)。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的堿溶液包括氫氧化鈉稀溶液和氨水。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的干燥的方法為冷凍干燥或烘干。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:包括如下步驟: (1)稱取天然高分子，在37-40°C恒溫水浴下溶于200體積份去離子水，其中天然高分子的量為1.00-9.04質(zhì)量份;或?qū)⑻烊桓叻肿尤芤涸?7-40°C恒溫水浴下稀釋為200體積份天然高分子水溶液，天然高分子水溶液的濃度為5_45g/L; (2)反應(yīng)體系置于37-40°(:恒溫水浴中，在轉(zhuǎn)速為1000-1500印111的攪拌下，加入含5.7質(zhì)量份的磷酸根的磷酸鹽;待磷酸鹽溶解后，按物質(zhì)的量比Ca/P = 5:3，向體系中加入含4質(zhì)量份鈣離子的鈣鹽;5-10分鐘后，一次性加入50-150體積份濃度為25-28 %的氨水;將攪拌轉(zhuǎn)速調(diào)成600-700rpm，攪拌使其充分反應(yīng)； (3)反應(yīng)完成后停止攪拌，反應(yīng)產(chǎn)物在反應(yīng)容器內(nèi)37-40°C恒溫條件下陳化，陳化時間為l-48h，期間分多次向反應(yīng)體系中添加氨水，保持體系pH值為10-12; (4)陳化完成后，去除上清液，沉淀用去離子水清洗至中性； (5)將洗凈的沉淀干燥得到羥基磷灰石-天然高分子納米復(fù)合物； 上述體積份與質(zhì)量份對應(yīng)的關(guān)系為mL與g。8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于還包括如下步驟:將得到羥基磷灰石-天然高分子納米復(fù)合物經(jīng)后續(xù)加工制成不同規(guī)格的羥基磷灰石-天然高分子納米復(fù)合顆粒;所述的后續(xù)加工的方式為多次重復(fù)的研磨和過篩。9.一種羥基磷灰石-天然高分子納米復(fù)合物，其特征在于:通過權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的方法制備得到。10.權(quán)利要求9所述的羥基磷灰石-天然高分子納米復(fù)合物在骨組織工程材料和醫(yī)療器械領(lǐng)域中的應(yīng)用，其特征在于:包括口腔種植科、口腔修復(fù)科、骨科中的骨缺損修復(fù)。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種一鍋法制備羥基磷灰石-天然高分子納米復(fù)合物的方法。本發(fā)明方法的核心特征為原料粉末直接投入，主要包括如下步驟：按物質(zhì)的量比Ca/P=5:3，往天然高分子溶液中投加鈣鹽和磷酸鹽，用堿溶液調(diào)節(jié)體系的pH為10-12，體系中的鈣離子、磷酸根離子、氫氧根離子與天然高分子發(fā)生原位共沉淀反應(yīng)，反應(yīng)產(chǎn)物清洗至中性后干燥得到羥基磷灰石-天然高分子納米復(fù)合物；再研磨、過篩可制成不同規(guī)格的納米復(fù)合顆粒產(chǎn)品。本發(fā)明方法簡單、反應(yīng)條件溫和、耗能小，得到的羥基磷灰石-天然高分子納米復(fù)合物具有良好的粒度、硬度、顯微形貌和結(jié)晶性，可廣泛應(yīng)用于口腔科、骨外科等骨缺損修復(fù)組織工程材料和醫(yī)療器械等領(lǐng)域。
【IPC分類】A61L27/58, A61L27/46
【公開號】CN105597155
【申請?zhí)枴緾N201511022032
【發(fā)明人】鄧紅兵, 詹穎菲
【申請人】湖北賽羅生物材料有限責(zé)任公司
【公開日】2016年5月25日
【申請日】2015年12月30日