4°C條件下靜置化，然后放入離屯、機(jī)中離屯、分離，離屯、力為5500g，離屯、時(shí)間為lOmin，得大 豆分離蛋白水解產(chǎn)物沉淀；
[0040] 步驟4):將離屯、后的大豆分離蛋白水解產(chǎn)物沉淀與蒸饋水按照質(zhì)量比為1:99配成 溶液，用2mol/L的化0H溶液調(diào)節(jié)溶液抑值至7.0，然后放入噴霧干燥機(jī)(北京北化研石化設(shè) 計(jì)院，QP-3kg型）中噴霧干燥(氣體壓力為0.1M化，進(jìn)風(fēng)溫度為180°C，出風(fēng)溫度為70°C)，得 到高αα/亞基含量的大豆分離蛋白水解產(chǎn)物粉末，產(chǎn)品得率為88%。
[0041 ] 實(shí)施例3
[0042] 步驟1):稱取大豆分離蛋白（山東臨邑禹王植物蛋白有限公司，蛋白質(zhì)含量為 89.8%，氮溶解指數(shù)為66.1%)溶解于蒸饋水中，配制質(zhì)量濃度為8%的大豆分離蛋白溶液， 用2mol/L的鹽酸將溶液的pH值調(diào)至2.5;
[0043] 步驟2):胃蛋白酶(美國SIGMA公司，酶活為3900units/mg)與大豆分離蛋白按質(zhì)量 比為2.5:100進(jìn)行酶解反應(yīng)，酶解反應(yīng)溫度為40°C，酶解反應(yīng)時(shí)間為45min;
[0044] 步驟3):酶解反應(yīng)完畢后，立即用2mol/L的化OH溶液調(diào)節(jié)酶解液的抑值至7.0，在 95°C水浴中加熱15min，然后將溶液冷卻至25~28°C，調(diào)節(jié)溶液pH值至4.5，接著將溶液放在 4°C條件下靜置化，然后放入離屯、機(jī)中離屯、分離，離屯、力為8000g，離屯、時(shí)間為lOmin，得大豆 分離蛋白水解產(chǎn)物沉淀；
[0045] 步驟4):將離屯、后的大豆分離蛋白水解產(chǎn)物沉淀與蒸饋水按照質(zhì)量比為1:99配成 溶液，用2mo 1/L的化0扣容液調(diào)節(jié)溶液pH值至6.5，然后放入冷凍干燥機(jī)(德國化riSt公司， ALPHAl-2 LD plus型）中冷凍干燥(物料的厚度為45mm，預(yù)凍溫度為-45°C，預(yù)凍時(shí)間為化； 凍干制品溫度為-25°C，凍干時(shí)間為2地;解吸溫度為35°C，解吸時(shí)間為lOh)，得到高αα/亞基 含量的大豆分離蛋白水解產(chǎn)物粉末，產(chǎn)品得率為86.5%。
[0046] 實(shí)施例4
[0047] 步驟1):稱取大豆分離蛋白（山東臨邑禹王植物蛋白有限公司，蛋白質(zhì)含量為 89.8%，氮溶解指數(shù)為66.1%)溶解于蒸饋水中，配制質(zhì)量濃度為2%的大豆分離蛋白溶液， 用2mol/L的鹽酸將溶液的pH值調(diào)至2.2;
[004引步驟2):胃蛋白酶(美國SIGMA公司，酶活為3900units/mg)與大豆分離蛋白按質(zhì)量 比為2.5:100進(jìn)行酶解反應(yīng)，酶解反應(yīng)溫度為35 °C，酶解反應(yīng)時(shí)間為45min;
[0049] 步驟3):酶解反應(yīng)完畢后，立即用2mol/L的化OH溶液調(diào)節(jié)酶解液的抑值至6.5，在 100°C水浴中加熱lOmin，然后將溶液冷卻至25~28°C，調(diào)節(jié)溶液抑值至4.5，接著將溶液放 在4°C條件下靜置化，然后放入離屯、機(jī)中離屯、分離，離屯、力為lOOOOg，離屯、時(shí)間為lOmin，得 大豆分離蛋白水解產(chǎn)物沉淀；
[0050] 步驟4):將離屯、后的大豆分離蛋白水解產(chǎn)物沉淀與蒸饋水按照質(zhì)量比為1:95配成 溶液，用2mol/L的化0H溶液調(diào)節(jié)溶液抑值至7.5，然后放入噴霧干燥機(jī)(北京北化研石化設(shè) 計(jì)院，QP-3kg型）中噴霧干燥(氣體壓力為0.1M化，進(jìn)風(fēng)溫度為180°C，出風(fēng)溫度為70°C)，得 到高αα/亞基含量的大豆分離蛋白水解產(chǎn)物粉末，產(chǎn)品得率為84%。
[0化1] 實(shí)施例5
[0052] 步驟1):稱取大豆分離蛋白（山東臨邑禹王植物蛋白有限公司，蛋白質(zhì)含量為 89.8%，氮溶解指數(shù)為66.1%)溶解于蒸饋水中，配制質(zhì)量濃度為2%的大豆分離蛋白溶液， 用2mol/L的鹽酸將溶液的pH值調(diào)至2.4;
[0053] 步驟2):胃蛋白酶(美國SIGMA公司，酶活為3900units/mg)與大豆分離蛋白按質(zhì)量 比為2.5:100進(jìn)行酶解反應(yīng)，酶解反應(yīng)溫度為35 °C，酶解反應(yīng)時(shí)間為45min;
[0054] 步驟3):酶解反應(yīng)完畢后，立即用2mol/L的化OH溶液調(diào)節(jié)酶解液的抑值至7.5，在 95°C水浴中加熱lOmin，然后將溶液冷卻至25~28°C，調(diào)節(jié)溶液pH值至4.5，接著將溶液放在 4°C條件下靜置化，然后放入離屯、機(jī)中離屯、分離，離屯、力為6000g，離屯、時(shí)間為lOmin，得大豆 分離蛋白水解產(chǎn)物沉淀；
[0055] 步驟4):將離屯、后的大豆分離蛋白水解產(chǎn)物沉淀與蒸饋水按照質(zhì)量比為1:20配成 溶液，用2mo 1/L的化0扣容液調(diào)節(jié)溶液pH值至7.0，然后放入冷凍干燥機(jī)(德國化riSt公司， ALPHAl-2 LD plus型）中冷凍干燥(物料的厚度為45mm，預(yù)凍溫度為-45°C，預(yù)凍時(shí)間為化； 凍干制品溫度為-25°C，凍干時(shí)間為2地;解吸溫度為35°C，解吸時(shí)間為lOh)，得到高αα/亞基 含量的大豆分離蛋白水解產(chǎn)物粉末，產(chǎn)品得率為83.7%。
[0056] 實(shí)施例6
[0057]步驟1):稱取大豆分離蛋白（山東臨邑禹王植物蛋白有限公司，蛋白質(zhì)含量為 89.8%，氮溶解指數(shù)為66.1%)溶解于蒸饋水中，配制質(zhì)量濃度為7%的大豆分離蛋白溶液， 用2mol/L的鹽酸將溶液的pH值調(diào)至2.2;
[005引步驟2):胃蛋白酶(美國SIGMA公司，酶活為3900units/mg)與大豆分離蛋白按質(zhì)量 比為2.5:100進(jìn)行酶解反應(yīng)，酶解反應(yīng)溫度為35°C，酶解反應(yīng)時(shí)間為40min;
[0059] 步驟3):酶解反應(yīng)完畢后，立即用2mol/L的化OH溶液調(diào)節(jié)酶解液的抑值至7.0，在 100°C水浴中加熱lOmin，然后將溶液冷卻至25~28°C，調(diào)節(jié)溶液抑值至4.5，接著將溶液放 在4°C條件下靜置化，然后放入離屯、機(jī)中離屯、分離，離屯、力為7000g，離屯、時(shí)間為15min，得大 豆分離蛋白水解產(chǎn)物沉淀；
[0060] 步驟4):將離屯、后的大豆分離蛋白水解產(chǎn)物沉淀與蒸饋水按照質(zhì)量比為1:99配成 溶液，用2mol/L的化0H溶液調(diào)節(jié)溶液抑值至7.5，然后放入噴霧干燥機(jī)(北京北化研石化設(shè) 計(jì)院，QP-3kg型）中噴霧干燥(氣體壓力為0.1M化，進(jìn)風(fēng)溫度為180°C，出風(fēng)溫度為70°C)，得 到高αα/亞基含量的大豆分離蛋白水解產(chǎn)物粉末，產(chǎn)品得率為89.5%。
[0061] 上述實(shí)施方式旨在舉例說明本發(fā)明可為本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員實(shí)現(xiàn)或使用，對(duì)上述 實(shí)施方式進(jìn)行修改對(duì)本領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)人員來說將是顯而易見的，故本發(fā)明包括但不限于 上述實(shí)施方式，任何符合本權(quán)利要求書或說明書描述，符合與本文所公開的原理和新穎性、 創(chuàng)造性特點(diǎn)的方法、工藝、產(chǎn)品，均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種提高大豆分離蛋白水解產(chǎn)物中αα'亞基的方法，其特征是:該方法包括以下工藝 步驟： 步驟（1)溶解一一將大豆分離蛋白加入到反應(yīng)容器中，添加蒸餾水，調(diào)整至溶液狀態(tài)， 調(diào)整pH至2.0~2.5，即得大豆分離蛋白溶液； 步驟(2)酶解一一對(duì)步驟（1)制得的大豆分離蛋白溶液進(jìn)行酶解處理，即得大豆分離蛋 白酶解液； 步驟(3)分離一一步驟(2)酶解完畢后，對(duì)步驟(2)制得的大豆分離蛋白酶解液進(jìn)行滅 酶，將滅酶后的大豆分離蛋白酶解液冷卻至25~28°C，調(diào)整該酶解液的pH值至4.5，離心，收 集沉淀，即得大豆分離蛋白水解產(chǎn)物沉淀； 步驟(4)純化一一將步驟(3)制得大豆分離蛋白水解產(chǎn)物沉淀添加蒸餾水復(fù)溶，調(diào)整pH 至6.5~8.0，然后進(jìn)行冷凍干燥或噴霧干燥，即得。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高大豆分離蛋白水解產(chǎn)物中αα'亞基的方法，其特征是：以 重量份計(jì)，步驟（1)所述大豆分離蛋白與蒸餾水添加量的比例為1:11.5~99;ρΗ值調(diào)整試劑 為2mol/L的鹽酸。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高大豆分離蛋白水解產(chǎn)物中αα'亞基的方法，其特征是：步 驟(2)所述酶解處理的具體方法為，以重量份計(jì)，將酶活為3900unit S/mg的胃蛋白酶與大豆 分離蛋白按照2.5:100的比例配成溶液，在pH = 2.0~2.5、反應(yīng)溫度35~40°C的調(diào)節(jié)下，酶 解反應(yīng)35~45min。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的提高大豆分離蛋白水解產(chǎn)物中αα'亞基的方法，其特征是：步 驟(3)所述滅酶的具體方法為，將步驟(2)制得的大豆分離蛋白酶解液的pH值自調(diào)整至6.5 ~8.0,于90~100 °C水浴中保溫5~20min;步驟（3)所述離心步驟的離心力為5000~ 10000g，離心時(shí)間為10~20min。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高大豆分離蛋白水解產(chǎn)物中αα'亞基的方法，其特征是：以 重量份計(jì)，步驟(4)所述大豆分離蛋白水解產(chǎn)物沉淀與蒸餾水添加量按照1:9~99的比例配 成溶液，pH值調(diào)整試劑為2mo 1 /L的NaOH;步驟(4)所述冷凍干燥條件為，物料的厚度為45mm、 預(yù)凍溫度為-45 °C、預(yù)凍時(shí)間為2h、凍干溫度為-25 °C、凍干時(shí)間為24h、解吸溫度為35 °C、解 吸時(shí)間為l〇h;步驟(4)所述噴霧干燥條件為，氣體壓力為O.IMPa、進(jìn)風(fēng)溫度為180°C、出風(fēng)溫 度為70°C。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種提高大豆分離蛋白水解產(chǎn)物中αα′亞基含量的方法；其包括以下工藝步驟：將大豆蛋白粉放入反應(yīng)容器中，加入蒸餾水，調(diào)整至溶液狀態(tài)；在大豆蛋白溶液中加入胃蛋白酶酶解；酶解完畢后，滅酶，并冷卻至25～28℃，調(diào)pH值至4.5，離心，收集沉淀；將沉淀復(fù)溶，進(jìn)行冷凍干燥或噴霧干燥，即為高αα′亞基含量的大豆蛋白水解產(chǎn)物。本發(fā)明具有成本低，產(chǎn)率高，制備時(shí)間短，反應(yīng)全過程所用試劑和原料均無毒無害等優(yōu)點(diǎn)，克服了傳統(tǒng)柱層析分離純化得到αα′亞基的方法成本高，時(shí)間長，產(chǎn)率低，可能存在有毒有害試劑殘留的缺陷，且本發(fā)明可直接應(yīng)用于食品或藥品領(lǐng)域，具有良好的發(fā)展前景。
【IPC分類】A23J3/34
【公開號(hào)】CN105594979
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610001361
【發(fā)明人】黃行健, 潘思軼, 祝祥威, 夏文杰, 王魯峰, 徐曉云
【申請(qǐng)人】華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2016年5月25日
【申請(qǐng)日】2016年1月5日