一種高效的黃芪多糖提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及黃芪次生代謝產(chǎn)物提取領(lǐng)域，具體是一種高效的黃芪多糖提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 黃芪是我國重要的中藥材品種之一，具有補氣升陽、固表止汗、利水消腫、生津養(yǎng) 血、行滯通痹、脫毒排膿、斂瘡生肌等功效，是許多中藥復(fù)方、成藥和保健品的主要成分。根 據(jù)我國藥典規(guī)定，藥用黃苗有兩種：豆科植物膜莢黃苗Astragalusmembraneceus (Fisch.) Bge.和蒙古黃苗 Astragalus membranaceus (Fisch. ) Bge. var. mongholicus (Bge. ) Hsiao。
[0003] 黃芪多糖是黃芪中重要的活性成分，天然黃芪中多糖含量約為5~12%左右，在 國內(nèi)外的研究和應(yīng)用中，發(fā)現(xiàn)了它的多方面藥理作用和臨床功效。黃芪多糖具有較強的免 疫促進作用，能提高正常及免疫功能低下小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能，刺激細胞免疫，能 增強小鼠巨噬細胞吞噬功能，促進抗體的形成，還能增加小鼠抗體生成，提高脾臟的重量和 增加脾細胞數(shù)；黃芪多糖體內(nèi)實驗表明其可提高酸性酯酶染色陽性淋巴細胞比率，增強NK 細胞活性等生物活性作用，對數(shù)種原因?qū)е碌娜毖跣∈罂商岣咂淠腿毖跄芰Γ⒛芙档痛?鼠血小板粘附，減少血栓形成，安全無副作用。
[0004] 黃芪多糖以其所具有的多樣化生物活性以及安全無毒副作用，成為具有巨大開發(fā) 潛力的保健物質(zhì)，然而，目前黃芪多糖提取工藝尚不成熟，這主要體現(xiàn)在操作時間過長，提 取效率低下，繁瑣的步驟和冗長的耗時不利于黃芪提取工藝的工業(yè)化拓展。近幾年，許多研 究對黃芪多糖的提取工藝進行探索和優(yōu)化，除了對傳統(tǒng)的水煮醇沉法進行改良外，還采用 了堿法提取和酶法提取，但是均需要加熱回流等步驟多次，所用時間并沒有明顯變化。新采 用的微波、超聲等輔助方法雖然反應(yīng)速度較快，在時間上有所改善，但其反應(yīng)為由內(nèi)向外， 速度快、溫度高，有可能導(dǎo)致黃芪多糖斷鏈降解，對活性的影響尚需進一步探討。
[0005] 近年來，天然澄清劑逐漸被引入多糖的提取，其主要去除鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)、樹脂、蠟質(zhì) 等膠體不穩(wěn)定成分，對中藥有效成分如黃酮、生物堿、甙類、皂苷類、萜類、多糖、氨基酸、多 肽、維生素、礦物質(zhì)等不影響。澄清效率高，安全無毒，成本低廉。現(xiàn)有技術(shù)已經(jīng)開始探討 使用天然澄清劑進行黃芪多糖的提取，但是基本都是基于水煮醇沉法的基礎(chǔ)上進行局部改 良，僅對中間步驟進行替換，而前期的脫酯、藥液的浸出等步驟仍然耗時較長，且效果不佳。 故如何黃芪多糖提取的全流程進行優(yōu)化，簡化其工藝步驟和反應(yīng)時間，將是本領(lǐng)域技術(shù)人 員首要的研究方向。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種高效的黃芪多糖提取方法，它對黃芪多糖提取的全流 程進行優(yōu)化改進，顯著縮短了反應(yīng)時間，簡化了工藝步驟，降低了提取成本，是一種簡潔高 效的多糖提取方法，有利于對黃芪多糖的開發(fā)。
[0007] 本發(fā)明為實現(xiàn)上述目的，通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：
[0008] -種高效的黃芪多糖提取方法，包括以下步驟：
[0009] (1)澄清劑的配置：
[0010] A組分：將天然澄清劑ZTC-II型配成1 %的粘膠液；
[0011] B組分：用冰醋酸配成1 %的溶液；
[0012] (2)原料的預(yù)處理：
[0013] 將黃芪藥材烘干、粉碎后，過20~40目篩，加入沸程規(guī)格30°C~60°C的石油醚至 粉碎后的黃芪藥材浸潤，靜置10~30分鐘后按液固比5~lOml/g加入50°C~75°C的無 水乙醇，3~10分鐘后500~1000r/min離心烘干，得黃芪粗粉；
[0014] (3)取黃芪粗粉，按固液比加入8~10倍量的水，常壓攪拌加熱回流0. 5~3小時 后，冷卻至40°C~70°C，加入纖維素酶50~lOOu/g，水浴保溫攪拌0. 5~4小時，過濾得黃 芪酶解液；
[0015] (4)將黃芪酶解液水浴加熱使其溫度保持在60°C~80°C，按體積比4%~8%加 入B組分，間隔20~40分鐘攪動一次，1~2小時后按體積比2%~6%加入A組分，間隔 50~70分鐘攪動一次，1. 5~2. 5小時后取出，3000~5000r/min離心4~10分鐘，棄上 清液，50 °C~60 °C減壓干燥，得類白色粗多糖。
[0016] 所述步驟（3)中攪拌的轉(zhuǎn)速為200r/min。
[0017] 所述步驟⑶中A組分與B組分的添加量按體積比為1:2。
[0018] 作為優(yōu)選方案，所述一種高效的黃芪多糖提取方法，包括以下步驟：
[0019] (1)澄清劑的配置：
[0020] A組分：將天然澄清劑ZTC-II型加入少量蒸餾水?dāng)嚢璩珊隣詈?，繼續(xù)加入蒸餾水， 溶脹24小時并攪拌，配成1 %的粘膠液；
[0021 ] B組分：用冰醋酸配成1 %的溶液；
[0022] (2)原料的預(yù)處理：
[0023] 將黃芪藥材烘干、粉碎后，過30目篩，液固比2ml/g加入沸程規(guī)格30°C~60°C的 石油醚，靜置30分鐘后按液固比lOml/g加入75°C的無水乙醇，5分鐘后800r/min離心烘 干，得黃苗粗粉；
[0024] (3)取黃芪粗粉，按固液比加入8倍量的水，常壓攪拌加熱回流1小時后，冷卻至 60°C，加入纖維素酶90u/g，水浴保溫攪拌1小時，過濾得黃芪酶解液；
[0025] (4)將黃芪酶解液水浴加熱使其溫度保持在80°C，按體積比4%加入B組分，間隔 30分鐘攪動一次，2小時后按體積比2 %加入A組分，間隔60分鐘攪動一次，2小時后取出， 4000r/min離心5分鐘，棄上清液，60°C減壓干燥，得類白色粗多糖。
[0026] 對比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果在于：
[0027] 由于酯類的存在不但使多糖不易析出，而且還會增加純化難度，故在黃芪藥材的 預(yù)處理中，除了常規(guī)的粉碎過篩等步驟，增加了脫酯環(huán)節(jié)。傳統(tǒng)的脫酯操作多采用石油醚旋 轉(zhuǎn)脫酯4小時以上，耗費大量的時間。本發(fā)明利用沸程規(guī)格30°C~60°C的石油醚與無水乙 醇（沸點78°C )沸點差距較大，通過迅速加入的高溫度無水乙醇，讓滲入物料內(nèi)的石油醚來 不及擴散就產(chǎn)生沸騰，從而迅速反應(yīng)達到脫酯效果，并溶于無水乙醇中脫去，耗時控制在半 小時左右，相比傳統(tǒng)方法具有顯著優(yōu)勢。
[0028] 本發(fā)明使用天然澄清劑ZTC-II型代替乙醇作為提取劑用于黃芪多糖的提取，使 用方便，只需要按順序加入兩種組分，靜置4小時左右即可完成反應(yīng)，不僅性能優(yōu)于乙醇， 而且大大縮減操作步驟，節(jié)省反應(yīng)時間，且天然澄清劑為天然食品提取物，不引入異味，對 黃芪多糖的終端產(chǎn)品一一例如口服液、沖劑等具有一定的矯味作用。同時其成本低廉，用量 較小，能夠明顯降低提取成本，有利于多糖提取的產(chǎn)業(yè)化運營。
[0029] 進一步的，本發(fā)明對天然澄清劑提取多糖的常規(guī)步驟進一步優(yōu)化，在黃芪藥液的 浸取步驟中引入纖維素酶的輔助，將原本需要多次加熱回流浸泡黃芪粗粉的耗時減半，且 更加利于有效成分的浸出，提高多糖提取的收率。
【具體實施方式】
[0030] 下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人 員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定 的范圍。
[0031] 下述實施例中所涉及的儀器、試劑、材料等，若無特別說明，均為現(xiàn)有技術(shù)中已有 的常規(guī)儀器、試劑、材料等，可通過正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實施例中所涉及的實驗方法，檢 測方法等，若無特別說明，均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)實驗方法，檢測方法等。
[0032] 實施例1 :一種高效的黃芪多糖提取方法的實驗
[0033] 實驗儀器：電子天平、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、真空干燥箱、恒溫水浴鍋、粉碎機、離心機；
[0034] 實驗試劑：蒸餾水、黃芪飲片（產(chǎn)地：內(nèi)蒙古）、天然澄清劑ZTC-II型、冰醋酸、石 油醚、無水乙醇、纖維素酶；<