一種醋酸曲普瑞林緩釋微球的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及醋酸曲普瑞林緩釋微球制備方法及由其制備的醋酸曲普瑞林緩釋微球。
【背景技術(shù)】
[0002]醋酸曲普瑞林(Triptorelin)是人工合成的十肽，是天然GnRH(促性腺激素釋放激素)的類似物。研究表明，醋酸曲普瑞林長(zhǎng)期使用可使促性腺激素分泌，從而抑制睪丸和卵巢的功能。醋酸曲普瑞林臨床上用于治療轉(zhuǎn)移性前列腺癌、性早熟、生殖器內(nèi)外的子宮內(nèi)膜異位癥。
[0003]根據(jù)醋酸曲普瑞林臨床適應(yīng)癥的用藥特點(diǎn)，患者往往需要長(zhǎng)期給藥，因此為了提高患者的順應(yīng)性，被開發(fā)成長(zhǎng)效緩釋制劑。常見的緩釋微球制備方法有溶劑蒸發(fā)法、相分離法和噴霧干燥法，其中溶劑蒸發(fā)法又包括水包油法、油包油法和復(fù)乳法。復(fù)乳法是目前制備水溶性多肽、蛋白質(zhì)藥物微球最常用的方法，該法是將活性成分水溶液與乙交酯丙交酯共聚物(PLGA)有機(jī)溶液混合在一起打成初乳，該初乳投入到冷的含有乳化劑水溶液中固化形成微粒，過濾收集微粒干燥。但是突釋是采用復(fù)乳法制備水溶性藥物過程中最常見問題，如專利CN104010629中醋酸曲普瑞林微球突釋作用過大，會(huì)帶來很多副作用。而用復(fù)乳法制備醋酸曲普瑞林微球時(shí)，活性成分容易從球內(nèi)部向外部擴(kuò)散，在球的表面形成很多孔洞，大量空洞會(huì)導(dǎo)致突釋的產(chǎn)生并且微球本身會(huì)快速降解。處理突釋的常用方法是洗滌球外部，但是此做法會(huì)導(dǎo)致藥物的損失。由于醋酸曲普瑞林較為昂貴，因此采用洗滌的方法會(huì)使制藥成本大幅提升。
[0004]因此，需要對(duì)醋酸曲普瑞林微球生產(chǎn)工藝進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化工作，解決藥品突釋作用及提高微球表面的平滑度從而使得血藥濃度更加穩(wěn)定平滑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明提供了一種醋酸曲普瑞林微球的制備方法，一方面能夠克服醋酸曲普瑞林微球由于突釋作用大導(dǎo)致的藥物不良反應(yīng)增大的問題，另一方面使用該法制備的微球表面平滑，血藥濃度穩(wěn)定，有利于長(zhǎng)期用藥。
[0006]本發(fā)明涉及的一種醋酸曲普瑞林緩釋微球的制備方法，包括以下步驟:
[0007]步驟I)將醋酸曲普瑞林加水配成藥物溶液A ;將PLGA加有機(jī)溶劑配成溶液B ；
[0008]步驟2)將溶液A和溶液B混合超聲形成初乳，初乳加入到用有機(jī)混合溶劑飽和過的PVA水溶液中，均質(zhì)乳化得復(fù)乳。
[0009]步驟3)將復(fù)乳室溫?cái)嚢鐸小時(shí)后升溫至40°C?45°C保持I小時(shí)，再降溫至10°C，過篩收集顆粒，凍干。
[0010]具體地，步驟I)所述的藥物溶液A的濃度為35% -45%，溶液B的濃度為20% -30%，有機(jī)溶劑選自乙酸乙酯、苯甲醇混合溶液和二氯甲烷、苯甲醇混合溶液中的一種；
[0011]優(yōu)選地，步驟I)中的乙酸乙酯和苯甲醇的體積比為2.5?7: I; 二氯甲烷和苯甲醇的體積比為2.5?7: 10
[0012]優(yōu)選地，PLGA為 PLGA5050。
[0013]具體地，步驟2)中的PVA水溶液濃度為0.1 %?2.5 %。
[0014]優(yōu)選地，PVA水溶液濃度為0.5%。
[0015]具體地，步驟2)中的有機(jī)混合溶劑為苯甲醇和乙酸乙酯，有機(jī)混合溶劑的濃度為1% -2% ；
[0016]優(yōu)選地，苯甲醇和乙酸乙酯的體積比為1:1，苯甲醇濃度為1%，乙酸乙酯濃度為
[0017]具體地，步驟3)中的復(fù)乳室溫?cái)嚢鐸小時(shí)后升溫至45°C保持I小時(shí)，再降溫至ΙΟ。。。
[0018]本發(fā)明的有益效果是:
[0019]I)本發(fā)明采用二氯甲烷/乙酸乙酯添加苯甲醇溶解PLGA的同時(shí)，外水相用有機(jī)溶劑飽和，能夠獲得突釋作用小、緩釋曲線平緩的醋酸曲普瑞林緩釋微球。
[0020]2)本發(fā)明采用降低復(fù)乳的固化速率的方式來降低醋酸曲普瑞林的擴(kuò)散，同時(shí)在固化后期控制水溶液溫度在微球的玻璃化溫度以上，保持一定時(shí)間讓微球高分子骨架進(jìn)行重排從而融合掉孔洞，使醋酸曲普瑞林微球表面光滑，解決因?yàn)榇罅靠斩磳?dǎo)致突釋的產(chǎn)生并且微球本身會(huì)快速降解的難題。
[0021]2)醋酸曲普瑞林緩釋微球載藥量大則會(huì)導(dǎo)致突釋作用明顯，本發(fā)明涉及的醋酸曲普瑞林微球的突釋較小，且載藥量達(dá)到最大。
[0022]3)本發(fā)明涉及的醋酸曲普瑞林微球制備工藝的固化步驟中通過控制固化速率和水溶液溫度，減少了最初的突釋作用，而常規(guī)處理突釋的方法是洗滌球外部，但是此做法會(huì)導(dǎo)致藥物的損失。在曲普瑞林價(jià)格昂貴的情況下，本發(fā)明涉及的醋酸曲普瑞林微球極大地降低了生產(chǎn)成本。
【附圖說明】
[0023]圖1:實(shí)施例1的醋酸曲普瑞林微球體外釋放曲線圖
[0024]圖2:實(shí)施例2的醋酸曲普瑞林微球體外釋放曲線圖
[0025]圖3:實(shí)施例1的孔洞連續(xù)完整的醋酸曲普瑞林微球掃描電鏡圖
[0026]圖4:實(shí)施例18的孔洞較大、不連續(xù)的醋酸曲普瑞林微球掃描電鏡圖
[0027]圖5:實(shí)施例19的有大量孔洞的醋酸曲普瑞林微球掃描電鏡圖
【具體實(shí)施方式】
[0028]以下通過實(shí)施例和試驗(yàn)例來進(jìn)一步說明本發(fā)明，但并不限于此。
[0029]實(shí)施例1:
[0030]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號(hào)1209001)加水配成濃度為40%的藥物溶液，將8g PLGA5050用25ml乙酸乙酯和1ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質(zhì)初乳。初乳在1500rpm的均質(zhì)下通過注射器加入到6°C的100ml 0.5%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質(zhì)乳化2min得復(fù)乳。將復(fù)乳移至懸臂攪拌機(jī)上，轉(zhuǎn)速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到45°保持I小時(shí)，再降低到10°篩網(wǎng)過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為10.3%, I天突釋為9%，微球孔洞連續(xù)完整，平穩(wěn)釋放28天。
[0031]實(shí)施例2:
[0032]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號(hào)1209001)加水配成濃度為40%的藥物溶液，將8g PLGA5050用23.5ml乙酸乙酯和3.3ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質(zhì)初乳。初乳在1500rpm的均質(zhì)下通過注射器加入到6°C的100ml 0.5%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質(zhì)乳化2min得復(fù)乳。將復(fù)乳移至懸臂攪拌機(jī)上，轉(zhuǎn)速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到45°保持I小時(shí)，再降低到10°篩網(wǎng)過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為10.8%, I天突釋為8%，微球孔洞連續(xù)完整，平穩(wěn)釋放28天。
[0033]實(shí)施例3:
[0034]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號(hào)1209001)加水配成濃度為40%的藥物溶液，將8g PLGA5050用19ml乙酸乙酯和7.6ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質(zhì)初乳初乳在1500rpm的均質(zhì)下通過注射器加入到6°C的100ml 0.5%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質(zhì)乳化2min得復(fù)乳。將復(fù)乳移至懸臂攪拌機(jī)上，轉(zhuǎn)速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到40°保持I小時(shí)，再降低到10°篩網(wǎng)過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為10.6 %，I天突釋為9 %，微球孔洞連續(xù)完整，平穩(wěn)釋放28天。
[0035]實(shí)施例4:
[0036]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號(hào)1209001)加水配成濃度為40%的藥物溶液，將8g PLGA5050用28.5ml乙酸乙酯和11.5ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質(zhì)初乳。初乳在1500rpm的均質(zhì)下通過注射器加入到6°C的1000ml 0.1%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質(zhì)乳化2min得復(fù)乳。將復(fù)乳移至懸臂攪拌機(jī)上，轉(zhuǎn)速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到45°保持I小時(shí)，再降低到10°篩網(wǎng)過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為9.5%，I天突釋為10%，微球孔洞連續(xù)完整，平穩(wěn)釋放28天。
[0037]實(shí)施例5:
[0038]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號(hào)1209001)加水配成濃度為40%的藥物溶液，將8g PLGA5050用35ml乙酸乙酯和5ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質(zhì)初乳。初乳在1500rpm的均質(zhì)下通過注射器加入到6°C的1000ml 2.5%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質(zhì)乳化2min得復(fù)乳。將復(fù)乳移至懸臂攪拌機(jī)上，轉(zhuǎn)速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到45°保持I小時(shí)，再降低到10°篩網(wǎng)過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為9.6 %，I天突釋為10 %，微球孔洞連續(xù)完整，平穩(wěn)釋放28天。
[0039]實(shí)施例6:
[0040]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號(hào)1209001)加水配成濃度為45%的藥物溶液，將8g PLGA5050用25ml乙酸乙酯和1ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質(zhì)初乳。初乳在1500rpm的均質(zhì)下通過注射器加入到6°C的1000ml 0.5%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質(zhì)乳化2min得復(fù)乳。將復(fù)乳移至懸臂攪拌機(jī)上，轉(zhuǎn)速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到45°保持I小時(shí)，再降低到10°篩網(wǎng)過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為10.7%, I天突釋為9.9%，微球孔洞連續(xù)完整，平穩(wěn)釋放28天。
[0041]實(shí)施例7:
[0042]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號(hào)1209001)加水配成濃度為35%的藥物溶液，將8g PLGA5050用19ml乙酸乙酯和7.6ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質(zhì)初乳初乳在1500rpm的均質(zhì)下通過注射器加入到6°C的100ml 0.5%的PVA溶液(含1%苯甲醇和1%乙酸乙酯)中，均質(zhì)乳化2min得復(fù)乳。將復(fù)乳移至懸臂攪拌機(jī)上，轉(zhuǎn)速為600rpm，攪拌lh，然后升溫到45°保持I小時(shí)，再降低到10°篩網(wǎng)過濾，凍干得粉末狀微球。醋酸曲普瑞林微球的載藥量為10.1 %，I天突釋為9 %，微球孔洞連續(xù)完整，平穩(wěn)釋放28天。
[0043]實(shí)施例8:
[0044]稱取Ig醋酸曲普瑞林(瑞林Bachem公司，批號(hào)1209001)加水配成濃度為45%的藥物溶液，將8g PLGA5050用25ml乙酸乙酯和1ml苯甲醇溶解，將二者混合超聲2min，形成白色均質(zhì)初乳。初乳在1500rpm的均質(zhì)下通過注射器加入到6°C的100ml 0.5%的