一種含二甲雙胍和五味子甲素的治療糖尿病藥物組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種治療糖尿病的藥物組合物，特別涉及一 種含有二甲雙胍或其可藥用鹽和五味子甲素的藥物組合物。
【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病是一種以高血糖為特征的常見內(nèi)分泌代謝性疾病。近年來，隨著人民生活 水平的提高、生活方式的改變及人口老齡化，糖尿病的發(fā)病率不斷升高。根據(jù)國際糖尿病聯(lián) 盟（International Diabetes Federatio，IDF)統(tǒng)計(jì)，2014 年全球的糖尿病患者有 3. 87 億， 全球發(fā)病率為8. 3%，估計(jì)到2035年，全球糖尿病人數(shù)會(huì)達(dá)到5. 92億。中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病 學(xué)分會(huì)于2007至2008年在我國部分地區(qū)開展的糖尿病流行病學(xué)調(diào)查顯示：我國20歲以上 人群糖尿病患病率為9. 7%，糖尿病前期的比例為15. 5%。糖尿病是一種慢性疾病，伴隨著 病程的延長，各種代謝紊亂能導(dǎo)致各種組織，特別是眼、腎、心臟、血管、神經(jīng)的慢性損害和 功能障礙，由此引發(fā)的心腦血管病變、腎功能衰竭、失明、下肢壞疽等成為糖尿病致殘致死 的主要原因。2014年全球有490萬人死于糖尿病。糖尿病不僅給患病個(gè)體帶來了肉體和精 神上的損害并導(dǎo)致壽命的縮短，還給個(gè)人、國家?guī)砹顺林氐慕?jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。預(yù)防糖尿病前期向 糖尿病轉(zhuǎn)化以及對(duì)已診斷患者進(jìn)行良好的治療是糖尿病防治指南中最重要的策略。
[0003] 2型糖尿病占所有糖尿病90%以上，其發(fā)病機(jī)制有兩個(gè)基本環(huán)節(jié)：胰島素抵抗和 胰島0細(xì)胞胰島素分泌相對(duì)不足。胰島素抵抗是指肝、肌肉、脂肪等胰島素作用的靶器官 對(duì)正常濃度的胰島素產(chǎn)生反應(yīng)不足的病理生理狀態(tài)。在這種狀態(tài)下，胰島0細(xì)胞需要分泌 更多的胰島素（高胰島素血征）來抵抗高血糖。胰島0細(xì)胞不能夠產(chǎn)生足夠的胰島素來 抵抗越發(fā)嚴(yán)重的胰島素抵抗，最終導(dǎo)致胰島0細(xì)胞衰竭。
[0004] 2型糖尿病是一種慢性進(jìn)行性的疾病，絕大部分患者需要終身用藥。傳統(tǒng)的抗糖尿 病藥物單藥治療策略并不能保持血糖控制的長期達(dá)標(biāo)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，單藥治療3年后，約50%的 糖尿病患者需聯(lián)合治療，而9年后該比例升至75%。隨著治療時(shí)間的延長，大多數(shù)患者需通 過多種藥物聯(lián)合治療才能使血糖控制達(dá)標(biāo)。與單藥治療相比，聯(lián)合治療降糖幅度較大，有助 于提高患者的血糖控制達(dá)標(biāo)率，進(jìn)一步降低糖尿病各類并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，改善患者的長 期預(yù)后。聯(lián)合治療是2型糖尿病治療趨勢(shì)。
[0005] 二甲雙胍是2型糖尿病治療的一線藥物，是常見的促胰島素敏感藥物，能夠減少 肝葡萄糖的輸出和改善外周胰島素抵抗。二甲雙胍常見的不良反應(yīng)有消化道不適，劑量過 大有導(dǎo)致乳酸中毒的危險(xiǎn)，因此應(yīng)用聯(lián)合治療，可以更好地控制糖尿病，降低單個(gè)藥物的劑 量，降低糖尿病患者的藥物耐受，減少可能的不良反應(yīng)。
[0006] 五味子為木蘭科植物五味子Schisandrachinensis (Turcz. )Baill?或華中五味 子Schisandrasphenanthera Rehd. et Wils.的干燥成熟果實(shí)。五味子的功效是斂肺，滋腎， 生津，收汗，澀精。中醫(yī)稱糖尿病為消渴癥，基本病機(jī)為陰津虧耗，燥熱偏盛。很多治療糖尿 病中藥方劑中都含有五味子，一些研究表明五味子的提取物有降低糖尿病血糖的作用。五 味子的主要有效成分為木脂素類，五味子甲素就是五味子中的木脂素類化合物。不過五味 子甲素與糖尿病藥物聯(lián)用的報(bào)道未見任何報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明提供了一種以二甲雙胍或其可藥用鹽和五味子甲素為有效成分的藥物組 合物。利用該藥物組合物可有效控制血糖，其效果顯著優(yōu)于任意單一組分。
[0008] -種用于治療糖尿病的藥物組合物，包含作為有效成分的二甲雙胍或其可藥用鹽 和五味子甲素。
[0009] 研究發(fā)現(xiàn)，該藥物組合物可顯著改善胰島素抵抗，增加胰島素抵抗肝細(xì)胞的葡萄 糖吸收。
[0010] 作為優(yōu)選，所述的二甲雙胍可藥用鹽為鹽酸二甲雙胍和硫酸二甲雙胍中的一種。
[0011] 作為優(yōu)選，所述二甲雙胍或其可藥用鹽以二甲雙胍計(jì)與五味子甲素的濃度比為 100:1 ~400:1〇
[0012] 作為優(yōu)選，所述二甲雙胍或其可藥用鹽以二甲雙胍計(jì)的濃度為ImM~2mM。
[0013] 作為優(yōu)選，所述五味子甲素的濃度為5 yM~10 yM。
[0014] 作為優(yōu)選，藥物組合物包括可藥用輔料。藥物輔料可以賦予藥物一定劑型，有效保 證藥物有效成分的釋放和吸收。
[0015] 作為優(yōu)選，所述藥物組合物為口服給藥的劑型?？诜o藥方式簡便，不直接損傷皮 膚或黏膜，減少感染風(fēng)險(xiǎn)。由于糖尿病患者需要長期用藥，故口服給藥是一種經(jīng)濟(jì)安全的方 式。
[0016] 更為優(yōu)選，所述口服給藥的劑型為溶液劑、片劑、膠囊劑或顆粒劑。
[0017] 本發(fā)明具備的有益效果：二甲雙胍或其可藥用鹽和五味子甲素的聯(lián)合用藥產(chǎn)生協(xié) 同降低血糖的效果，顯著提高治療糖尿病的效果。
【附圖說明】
[0018] 圖1是實(shí)施例1中各實(shí)驗(yàn)組葡萄糖相對(duì)消耗量對(duì)比圖；
[0019] 圖2是實(shí)施例2中各實(shí)驗(yàn)組葡萄糖相對(duì)消耗量對(duì)比圖；
[0020] 其中，顯著性檢驗(yàn)方法為t檢驗(yàn)，與模型組比較，#P〈0. 01，*#P〈0. 001 ;與藥物組 合物組比較，###P〈〇. 001〇
【具體實(shí)施方式】
[0021] 下面結(jié)合具體實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
[0022] 實(shí)施例1
[0023] 小鼠胚胎肝細(xì)胞BNL CL. 2用含10%胎牛血清的低糖型DMEM培養(yǎng)基于37°C、5% C02細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育，隔天更換新鮮培養(yǎng)液。待細(xì)胞生長至80-90%時(shí)，棄去培養(yǎng)液，加 入3mLPBS潤洗一次，加入lmL 0. 05 %胰蛋白酶-EDTA溶液消化約2min，加入三倍量培養(yǎng)液 終止消化，將細(xì)胞液900r/min離心5min，棄去上清液，加入一定量培養(yǎng)液，將細(xì)胞吹散，取 10 y L計(jì)數(shù)，將BNL CL. 2細(xì)胞接種于96孔板，每孔2萬細(xì)胞，并設(shè)無細(xì)胞空白對(duì)照孔。培養(yǎng) 24小時(shí)后，棄去原培養(yǎng)基，用磷酸鹽緩沖液（PBS)洗一遍，換上無血清無酚紅的低糖DMEM培 養(yǎng)液，分組加受試藥。
[0024] 設(shè)空白對(duì)照組（加入正常細(xì)胞培養(yǎng)液100yL)，模型組（加入含liiM的胰島素 的細(xì)胞培養(yǎng)液100 y L)，五味子甲素組（加入含1 yM的胰島素及10 yM的五味子甲素的 細(xì)胞培養(yǎng)液100 y L)，二甲雙胍組（加入含1 y M的胰島素及ImM的二甲雙胍的細(xì)胞培養(yǎng)液 100 yL)，以及五味子甲素與二甲雙胍的組合物組（加入含1 yM的胰島素及含有10 yM五 味子甲素+lmM二甲雙胍的細(xì)胞培養(yǎng)液100 y L)。作用24小時(shí)后，用葡萄糖氧化酶法測(cè)定每 孔培養(yǎng)液的葡萄糖含量，即每孔取5 y L培養(yǎng)液于另一 96孔板中，加入200 y L葡萄糖氧化 酶測(cè)試液，37°C孵育30min，于492nm波長下測(cè)定每孔吸光度。在葡萄糖0-10mm〇l/L濃度范 圍內(nèi)按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算每孔葡萄糖含量。每孔葡萄糖消耗量=無細(xì)胞空白孔培養(yǎng)液葡萄糖 含量-每孔培養(yǎng)液葡萄糖含量，每組設(shè)3個(gè)或3個(gè)以上復(fù)孔，相同實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。
[0025] 葡萄糖測(cè)定后，原培養(yǎng)孔棄去原培養(yǎng)液，每孔加入含有0.5mg/mL MTT溶液的培 養(yǎng)液，于37°C、5% C02的條件下孵育4h。棄去上清液，每孔加入100yl DMS0