專利名稱：一種從黃芪中提取黃芪皂苷的新方法
技術(shù)領(lǐng)域：
:本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種黃芪皂苷的純化方法，特別是涉及一種利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法富集純化黃芪中黃芪皂苷的方法。
背景技術(shù)：
:黃芪:又名黃耆，為植物和中藥材的統(tǒng)稱。植物黃芪產(chǎn)于內(nèi)蒙古、山西、甘肅、黑龍江等地，為國家三級保護(hù)植物。中藥材黃芪為豆科草本植物蒙古黃芪、膜莢黃芪的根，具有補(bǔ)氣固表、利水退腫、托毒排膿、生肌等功效。黃芪的藥用迄今已有2000多年的歷史，現(xiàn)代研究，黃芪含皂甙、蔗糖、多糖、多種氨基酸、葉酸及硒、鋅、銅等多種微量元素。有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗應(yīng)激、降壓和較廣泛的抗菌作用。但表實(shí)邪盛，氣滯濕陽，食積停滯，癰疽初起或潰后熱毒尚盛等實(shí)證，以及陰虛陽亢者，均須禁服。黃芪皂苷是一種對人類健康有顯著保健作用的天然活性物質(zhì)，已引起國際社會(huì)的普遍關(guān)注。經(jīng)科學(xué)研究及臨床應(yīng)用證明，黃芪皂苷調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，有促進(jìn)骨髓造血機(jī)能，使骨髓生長旺盛的作用，對腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞代謝有明顯改善作用。近年來，人們發(fā)現(xiàn)天然植物黃芪中含有大量的黃芪皂苷，由于其原料黃芪為中藥，來源較廣，從中提取黃芪皂苷并且取得了可喜進(jìn)展。名稱為“黃芪總皂苷的制備方法”的專利申請中便公開了將黃芪經(jīng)水提樹脂吸附后脫糖脫色得黃芪皂苷工藝流程。上述專利文獻(xiàn)中的黃芪皂苷提取工藝主要是經(jīng)過水提、脫糖、脫色純化等步驟提取而成，其工藝復(fù)雜且分離效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)不如利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔 吸附樹脂耦合法處理后在進(jìn)行硅膠柱層析分離的效果
發(fā)明內(nèi)容
:本發(fā)明的目的在于克服常規(guī)技術(shù)提取率相對較低、提取純度低等缺點(diǎn)，提供一種利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法富集純化黃芪中黃芪皂苷的方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一種利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法富集純化黃芪中黃芪皂苷的方法，其步驟如下:(I)將干黃芪粉碎，加入體積為黃芪粉碎體積的10 20倍的純化水，進(jìn)行水蒸汽回流提取，提取2 3次，提取時(shí)間2 3小時(shí)；(2)將經(jīng)(I)處理后的黃芪提取液合并，經(jīng)過微濾，孔徑范圍在0.1 I微米，壓力控制在01 0.7MPa，得過濾液；(3)將經(jīng)微濾的過濾液再經(jīng)過超濾，溫度控制在20 40°C，壓力控制在0.1
0.6MPa，得黃芪皂苷粗提物；(4)將所得黃芪皂苷粗提物用人孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，吸附為靜態(tài)吸附或動(dòng)態(tài)吸附；
(5)用40% 80%不同濃度的乙醇對大孔吸附樹脂進(jìn)行洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集黃芪皂苷各階段洗脫液；(6)將黃芪皂苷各階段洗脫液濃縮，回收乙醇，得黃芪皂苷半成品，其含量在30%以上；(7)將所得黃芪皂苷半成品上硅膠層析柱，并以甲醇與濃縮液的體積比為I 7: I的比例進(jìn)行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集黃芪皂苷各階段洗脫液；(8)將所收集的黃芪皂苷洗脫液，采用活性炭脫色、重結(jié)晶方法精制得黃芪皂苷，其含量在95%以上。所述的步驟(I)中，干黃芪粉碎后過40 80目篩。所述的步驟(4)中，所用的大孔吸附樹脂為天津南開大學(xué)所產(chǎn)生的X-5、NKA-9、S-8、D3520、D4006、H103、D4020、AB-8H 和 NKA-1I 型樹脂中的一種。本發(fā)明應(yīng)用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法分離純化黃芪皂苷，對黃芪皂苷提取完全，沒有污染，分離效果好，純度高，大孔樹脂吸附選擇性良好，吸附快解析也快，吸附容量較大，分離效果明顯，提取純度高，可以得到含量30%以上的黃芪皂苷半成品和含量95%以上的黃芪皂苷終產(chǎn)品，克服了常規(guī)提取率相對較低、提取純度低的缺點(diǎn)。
具體實(shí)施方式
:實(shí)施例1:一種利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法富集純化黃芪中黃芪皂苷的方法，其步驟如下:(I)將IOOg干黃芪粉碎后過60目篩，加入體積為黃芪粉碎體積的10倍的純化水，進(jìn)行水蒸汽回流提取，提取2次，提取時(shí)間2小時(shí)；(2)將經(jīng)(I)處理后的黃芪提取液合并，經(jīng)過微濾，孔徑范圍在0.1 I微米，壓力控制在0.1MPa，得過濾液；(3)將經(jīng)微濾的過濾液再經(jīng)過超濾，超濾截留分子量在3000 300000，溫度控制在20°C，壓力控制在0.1MPa，得黃芪皂苷粗提物；(4)將所得黃芪皂苷粗提物用大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，所用的大孔樹脂為天津南開大學(xué)所生產(chǎn)的NKA-1I型樹脂，吸附為靜態(tài)吸附或動(dòng)態(tài)吸附；(5)用用40%、50%、60%、70%、80%的乙醇在大孔吸附樹脂層柱中依次進(jìn)行梯度洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集黃芪皂苷各階段洗脫液；(6)將黃芪皂苷備階段洗脫液濃縮回收乙醇，得到含量為306%黃芪皂苷半成品；(7)將所得黃芪皂苷半成品上硅膠層析柱，并用甲醇與濃縮液的體積比依次為1: 1、2: 1、3: 1、4: 1、5: 1、6: 1、7: I進(jìn)行梯度洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集黃芪皂苷各階段洗脫液:(8)將所收集的黃芪皂苷洗脫液，采用活性炭脫色、重結(jié)晶方法精制得到含量
95.4%黃芪皂苷實(shí)施案例2:—種利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法富集純化黃芪中黃芪皂苷的方法，其步驟如下:(I)將IOOg干黃芪粉碎后過40目篩，加入體積為黃芪粉碎體積的15倍的純化水，進(jìn)行水蒸汽回流提取，提取2次，提取時(shí)間2小時(shí)；(2)將經(jīng)(I)處理后的黃芪提取液合并，經(jīng)過微濾，孔徑范圍在0.1 I微米，壓力控制在0.2MPa，得過濾液；(3)將經(jīng)微濾的過濾液再經(jīng)過超站，超濾截留分子量在3000 300000，溫度控制在30°C，壓力控制在0.2MPa，得黃芪皂苷粗提物；(4)將所得黃芪皂苷粗提物用大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，所用的大孔樹脂為天津南開大學(xué)所生產(chǎn)的D4006型樹脂，吸附為靜態(tài)吸附或動(dòng)態(tài)吸附；(5)用40%、50%、60%、70%、80%的乙醇在大孔吸附樹脂層柱中依次進(jìn)行梯度洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集黃芪皂苷各階段洗脫液；(6)將黃芪皂苷各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得到含量為31.2%的黃芪皂苷半成品;(7)將所得黃芪皂苷半成品上硅膠層析柱，并用甲醇與濃縮液的體積比依次為1: 1、2: 1、3: 1、4: 1、5: 1、6: 1、7: I進(jìn)行梯度洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集黃芪皂苷各階段洗脫液；(8)將所收集的黃芪皂苷洗脫液，采用活性炭脫色、重結(jié)晶方法精制得到含量
96.6%的黃芪皂苷。實(shí)施案例3:—種利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法富集純化黃芪中黃芪皂苷的方法，其步驟如下:(1)將IOOg干黃芪粉碎后過80目篩，加入體積為黃芪粉碎體積的20倍的純化水，進(jìn)行水蒸汽回流提取，提取3次，提取時(shí)間2小時(shí)；(2)將經(jīng)(I)處理后的黃芪提取液合并，經(jīng)過微濾，孔徑范圍在0.1 I微米，壓力控制在0.2MPa，得過濾液；(3)將經(jīng)微濾的過濾液再經(jīng)過超濾，超濾截留分子量在3000 300000，溫度控制在40°C，壓力控制在0.2MPa，得黃芪皂苷粗提物；(4)將所得黃芪皂苷粗提物用大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，所用的大孔樹脂為天津南開大學(xué)所生產(chǎn)的NKA-9型樹脂，吸附為靜態(tài)吸附或動(dòng)態(tài)吸附；(5)用40%、50%、60%、70%、80%的乙醇在大孔吸附樹脂層柱中依次進(jìn)行梯度洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集黃芪皂苷各階段洗脫液；(6)將黃芪皂苷各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得到含量為31.7%的黃芪皂苷半成品;(7)將所得黃芪皂苷半成品上硅膠層析柱，并用甲醇與濃縮液的體積比依次為1: 1、2: 1、3: 1、4: 1、5: 1、6: 1、7: I進(jìn)行梯度洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集黃芪皂苷各階段洗脫液；(8)將所收集的黃芪皂苷洗脫液，采用活性炭脫色、重結(jié)晶方法精制得到含量
97.8%的黃芪皂苷。實(shí)施案例4:一種利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和人孔吸附樹脂耦合法富集純化黃芪中黃芪皂苷的方法，其步驟如下:(1)將IOOg干黃芪粉碎后過50目篩，加入體積為黃芪粉碎體積的12倍的純化水，進(jìn)行水蒸汽回流提取，提取3次，提取時(shí)間2小時(shí)；
(2)將經(jīng)(I)處理后的黃芪提取液合并，經(jīng)過微濾，孔徑范圍在0.1 I微米，壓力控制在0.4MPa，得過濾液；(3)將經(jīng)微濾的過濾液再經(jīng)過超站，超濾截留分子量在3000 300000，溫度控制在20°C，壓力控制在0.4MPa，得黃芪皂苷粗提物；(4)將所得黃芪皂苷粗提物用大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，所用的大孔樹脂為天津南開大學(xué)所生產(chǎn)的H103型樹脂，吸附為靜態(tài)吸附或動(dòng)態(tài)吸附；(5)用40%、50%、60%、70%、80%的乙醇在大孔吸附樹脂層柱中依次進(jìn)行梯度洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集黃芪皂苷各階段洗脫液；(6)將黃芪皂苷各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得到含量為30.4%的黃芪皂苷半成品;(7)將所得黃芪皂苷半成品上硅膠層析柱，并用甲醇與濃縮液的體積比依次為1: 1、2: 1、3: 1、4: 1、5: 1、6: 1、7: I進(jìn)行梯度洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集黃芪皂苷各階段洗脫液:(8)將所收集的黃芪皂苷洗脫液，采用活性炭脫色、重結(jié)晶方法精制得到含量90.9%的黃芪皂 苷。
權(quán)利要求
1.一種利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法富集純化黃芪中黃芪皂苷的方法，其步驟如下: (1)將干黃芪粉碎，加入純化水，進(jìn)行水蒸汽回流提取，提取2 3次，提取時(shí)間2 3小時(shí)； (2)將經(jīng)(1)處理后的黃芪提取液合并，經(jīng)過微濾，孔徑范圍在0.1 I微米，壓力控制在0.1 07MPa，得過濾液； (3)將經(jīng)微濾的過濾液再經(jīng)過超濾，溫度控制在20 40°C，壓力控制在01 0.6MPa，得黃芪皂苷粗提物； (4)將所得黃芪皂苷粗提物用大孔吸附樹脂進(jìn)行吸附，吸附為靜態(tài)吸附或動(dòng)態(tài)吸附； (5)用40% 80%不同濃度的乙醇對大孔吸附樹脂進(jìn)行洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集黃芪皂苷各階段洗脫液； (6)將黃芪皂苷各階段洗脫液濃縮，回收乙醇，得黃芪皂苷半成品，其含量在30%以上。
(7)將所得黃芪皂苷半成品上硅膠層析柱，并以甲醇與濃縮液的體積比為1 7: 1的比例進(jìn)行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集黃芪皂苷各階段洗脫液； (8)將所收集的黃芪皂苷洗脫液，采用活性炭脫色、重結(jié)晶方法精制得黃芪皂苷，其含量在95%以上。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法富集純化黃芪中黃芪皂苷的方法，其特征是:所述的步驟(1)中，黃芪粉碎后過40 80目篩。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法富集純化黃芪中黃芪皂苷的方法，其特征是:所述的步驟(1)中，加入純化水的體積為黃芪體積的10 20倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法富集純化黃芪中黃芪皂苷的方法，其特征是:所述的步驟(3)中，超濾截留分子量在3000 30000。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法富集純化黃芪中黃芪皂苷的方法，其特征是:所述的步驟(4)中，大孔吸附樹脂型號(hào)為X-5、NKA-9、S-8、D3520、D4006、H103、D4020、AB-8H 和 NKA-1I 型樹脂中的一種。
全文摘要
本發(fā)明的目的在于克服常規(guī)技術(shù)提取率相對較低、提取純度低等缺點(diǎn)，提供一種利用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法富集純化黃芪中黃芪皂苷的方法。本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)應(yīng)用水蒸汽回流提取與膜分離技術(shù)和大孔吸附樹脂耦合法分離純化黃芪皂苷，對黃芪皂苷提取完全，沒有污染，分離效果好，純度高；大孔樹脂吸附選擇性良好，吸附快解析也快，吸附容量較大，分離效果明顯，提取純度高，可以得到含量30％以上的黃芪皂苷半成品和含量95％以上的黃芪皂苷終產(chǎn)品，克服了常規(guī)提取率相對較低、提取純度低的缺點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/481GK103110689SQ20121059562
公開日2013年5月22日 申請日期2012年12月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月13日
發(fā)明者萬莉, 姚德坤, 張亞紅, 姚德利 申請人:大興安嶺林格貝有機(jī)食品有限責(zé)任公司