光學(xué)斷層攝影裝置和方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種光學(xué)斷層攝影裝置，其包括：多色光源(SLM)、一維光學(xué)傳感器(CIM)、干涉顯微鏡(MI)、一維共焦空間過濾系統(tǒng)(FS)、致動系統(tǒng)(PR、TR1、TR2、TR3)以及處理器(PR)；所述致動系統(tǒng)(PR、TR1、TR2、TR3)可以執(zhí)行待觀察目標(biāo)的深度方面的單向掃描；所述處理器(PR)用于根據(jù)所述單向掃描期間由所述圖像傳感器獲取的多個一維干涉圖像來重構(gòu)所述目標(biāo)的截面的二維圖像。本發(fā)明還涉及一種使用這樣的裝置的光學(xué)斷層攝影方法。
【專利說明】
光學(xué)斷層攝影裝置和方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種光學(xué)斷層攝影裝置和方法，特別但不唯一地旨在用于生物學(xué)和醫(yī) 學(xué)(尤其是組織學(xué))的應(yīng)用。其他可能的應(yīng)用涉及例如材料的特性。
【背景技術(shù)】
[0002] 在臨床實(shí)踐中廣泛應(yīng)用了通過活組織檢查而進(jìn)行的組織的組織學(xué)研究，例如，用 于診斷腫瘤。但是，由于其要求活組織檢查（即，對待研究的組織進(jìn)行取樣，將其切成薄片而 利用顯微鏡進(jìn)行觀察，并且由解剖病理學(xué)家進(jìn)行分析），因此該技術(shù)在實(shí)施上較慢且較復(fù) 雜。整個過程還要求樣品的固定、基質(zhì)中樣品的遮蓋(occlusion)以及樣品的染色。這提出 了這樣的問題:尤其在外科手術(shù)期間進(jìn)行檢查的情況中，速度是最重要的。另外，對于患者 而言，采樣步驟是令人討厭甚至是危險(xiǎn)的（例如，腦部采樣的情況）。因此，已經(jīng)研發(fā)了非侵 入性(尤其是光學(xué))成像技術(shù)來觀察生物組織的內(nèi)部結(jié)構(gòu)(或更概括而言，來觀察半透明目 標(biāo)的內(nèi)部結(jié)構(gòu)）。為了與傳統(tǒng)的組織學(xué)檢查競爭，這些技術(shù)必須可以在原處獲取組織表面下 毫米水平的深度，并且展示出微米水平的分辨率。執(zhí)行的速度、簡易度和成本也都是要考慮 的重要因素。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中已知的成像技術(shù)不能滿足所有要求。
[0004] 掃描光學(xué)相干斷層攝影(0CT)是基于"白"（寬波段）光干涉法的技術(shù)。在其方案 (version)中，在時域中，白光束被分為兩部分，一部分聚焦于待研究的組織，另一部分聚焦 于參考鏡。將由所觀察的目標(biāo)所反射(后散射)的光與由參考鏡所反射并且由光電檢測器來 檢測的光相結(jié)合。僅當(dāng)光路差大部分為輻射的相干長度的水平時發(fā)生干涉;通過修正干涉 計(jì)的參考臂的光學(xué)長度，在目標(biāo)中獲取不同的深度。可以使用干涉測量法(其允許根據(jù)軸向 維度(也即深度）的采集)來構(gòu)建2維甚至3維中的圖像并且進(jìn)行掃描(其允許根據(jù)一個或兩 個橫向維度的采集）。在掃描0CT中，在頻域中，參考臂具有固定的光學(xué)長度，并且對干涉信 號進(jìn)行頻譜分析。對此，參見A. F. Fercher的文章 "Optical coherence tomography-principles and applications"，Reports on Progress in Physics 66(2003)239-303。 在實(shí)踐中，OCT難以獲取優(yōu)于大約幾微米的橫向分辨率。
[0005] 更近期的技術(shù)(全場0CT)使用二維圖像傳感器來檢測干涉信號。該技術(shù)與低時間 和空間相干的光源(例如，鹵鎢燈）的使用相結(jié)合，相比于掃描0CT可以實(shí)質(zhì)改善空間分辨率 (橫向和深度方向（軸向）兩者）。但是，該技術(shù)不適合應(yīng)用于很可能會移動的目標(biāo)(尤其對于 在體內(nèi)的應(yīng)用），這會導(dǎo)致干涉信號受到干擾。另外，其提供了 "相對(en face)"的截面(平 行于所觀察目標(biāo)的表面），然而垂直截面通常更有用。另外，其穿透深度小于掃描0CT中的深 度。該技術(shù)在例如文獻(xiàn)EP1364181和A.Dubois，K.Grieve，G.Moneron，R.Lecaque，L. Vabre， 以及A · C · Boccara的文章 "Ultrahigh -resolution full-field optical coherence tomography"Applied Optics 43，p.2874(2004)中所描述的。
[0006] 由S.Kim等所著的文章 "Simultaneous measurement of refractive index and thickness by combining low-coherence interferometry and confocal optics"， Optics Express，Vol. 16，No. 8，5516(2008年4月14日）描述了這樣的方法:其將共焦光學(xué)和 干涉測量法與低相干長度進(jìn)行結(jié)合，以通過確定其厚度和其折射率來描述樣本。這不是成 像方法，更不是斷層攝影。
[0007] 共焦顯微觀測使用空間過濾來選擇從被觀察的目標(biāo)的小區(qū)域發(fā)出的光;可以隨后 通過掃描來重構(gòu)二維或三維圖像。文獻(xiàn)EP 2 447 754描述了一種狹縫有色共焦顯微觀測裝 置和方法。該系統(tǒng)要求：
[0008] -偏振光照明；
[0009] -目標(biāo)具有強(qiáng)烈色差；以及
[0010] -用于測量在顯微鏡的輸出處的光的光譜的分光計(jì)，該測量可以獲取在目標(biāo)中探 測的深度。
[0011]在該裝置中，狹縫用于產(chǎn)生光譜線(其寬度限定光譜分辨率，并因此限定目標(biāo)中的 空間分辨率深度方向）。其不具有共焦過濾作用。
[0012] 文獻(xiàn)EP 1 586 931描述了另一種狹縫共焦顯微觀測裝置和方法，其通過允許同時 沿線采集大量像素來簡化圖像重構(gòu)的過程。共焦顯微觀測(不使用熒光標(biāo)記)提供基本小于 掃描0CT和全場0CT的穿透深度。
[0013] 由Yu Chen等所著的文章"High-resolution line-scanning optical coherence microscopy"，0ptics Letters Vol ·32，Νο· 14,2007年7月15日，第1971-1973頁描述了一種 將狹縫共焦顯微觀測和掃描0CT相結(jié)合的裝置和方法，其可以利用高于全場0CT的敏感度來 獲取樣本的"相對"的截面。獲取的軸向分辨率大約為3μπι，橫向分辨率大約為2μπι，通過將非 常昂貴的飛秒脈沖激光用作光源來獲取這些結(jié)果。
[0014] 非線性顯微觀測技術(shù)(雙光子顯微觀測法、諧波顯微觀測法和其他這樣形式的顯 微觀測法)展示出這樣的性能水平:其穿透深度、空間分辨率和采集率可以與全場0CT的穿 透深度、空間分辨率和采集率相比，但是其成本更高并且一般采集時間更長。
[0015] 實(shí)施的成本和復(fù)雜度也是非光學(xué)成像技術(shù)的主要缺陷，非光學(xué)成像技術(shù)為例如X 射線微斷層攝影(其也展示出低采集率）和磁共振成像IRM(相比于光學(xué)方法，磁共振成像 IRM的空間分辨率為中等）。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0016] 本發(fā)明旨在克服現(xiàn)有技術(shù)的上述缺點(diǎn)的至少一部分。更具體而言，其旨在提供這 樣的技術(shù):其用于觀察半透明目標(biāo)(例如生物組織)的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，從而可以以高速率(每秒多 個截面)獲取垂直截面(正交于目標(biāo)的表面），具有高空間分辨率(軸向和橫向均為1Μ1水平） 和令人滿意的穿透深度(毫米水平）。本發(fā)明還旨在提供一種適合于在體內(nèi)以及在原位應(yīng)用 的技術(shù)。
[0017] 可以實(shí)現(xiàn)該目標(biāo)的本發(fā)明的一個方案是一種光學(xué)斷層攝像裝置，該光學(xué)斷層攝像 裝置包括:多色光源;一維光學(xué)傳感器;干涉顯微鏡，該干涉顯微鏡包括:第一臂，其稱為參 考臂，在其端部設(shè)置有所謂的參考鏡;第二臂，其稱為目標(biāo)臂;分束器，其將所述第一臂和第 二臂聯(lián)接至所述多色光源和所述傳感器；以及至少一個物鏡，將所述參考鏡設(shè)置為對應(yīng)于 所述物鏡的聚焦平面或?qū)?yīng)于設(shè)置于參考臂中的一個所述物鏡的聚焦平面;一維共焦空間 過濾器系統(tǒng)，其與所述多色光源配合以沿稱為觀察線的線來對設(shè)置于所述目標(biāo)臂的端部的 待觀察的目標(biāo)進(jìn)行照明，觀察線位于所述物鏡的聚焦平面或位于設(shè)置于目標(biāo)臂中的一個所 述物鏡的聚焦平面，所述一維共焦空間過濾系統(tǒng)也設(shè)置為選擇由所述目標(biāo)后散射的光和從 所述觀察線發(fā)出的光，并且于所述傳感器形成所述線的一維圖像;其特征在于，其還包括： 致動系統(tǒng)，其配置為將所述觀察線設(shè)置為平行于所述物鏡的光學(xué)軸線或平行于放置于目標(biāo) 臂的一個所述物鏡的光學(xué)軸線，從而執(zhí)行所述目標(biāo)的單程掃描，同時在第一軌跡和第二軌 跡之間保持零光路差，在一方面，所述第一軌跡是指從所述分束器至所述參考鏡并且通過 沿所述參考臂行進(jìn)而返回，在另一方面，所述第二軌跡是指從所述分束器至所述觀察線并 且通過沿所述目標(biāo)臂行進(jìn)而返回；以及處理器，其編程或配置為，根據(jù)所述單程掃描期間通 過所述傳感器獲取的對應(yīng)于所述觀察線的不同位置的多個一維干涉圖像，重構(gòu)待觀察的所 述目標(biāo)的截面的二維圖像(定向?yàn)槠叫杏谒鑫镧R的所述光學(xué)軸線或平行于放置于目標(biāo)臂 的一個所述物鏡的所述光學(xué)軸線）。
[0018] 根據(jù)這樣裝置的不同的實(shí)施方案：
[0019] -所述致動器系統(tǒng)可以配置為引起待觀察的所述目標(biāo)相對于所述干涉顯微鏡的相 對位移，而不修正所述參考臂和所述目標(biāo)臂的光學(xué)長度，該位移平行于所述物鏡的所述光 學(xué)軸線或者平行于放置于目標(biāo)臂的一個所述物鏡的所述光學(xué)軸線。
[0020] -所述致動器系統(tǒng)可以配置為在所述觀察線所在的聚焦平面上移動物鏡，并且修 改所述參考臂的光學(xué)長度從而保持所述第一軌跡和所述第二軌跡之間的零光路差。
[0021] -裝置還可以包括色散補(bǔ)償裝置，該色散補(bǔ)償裝置至少一個設(shè)置于所述目標(biāo)臂和 所述參考臂外部，所述致動裝置配置為在所述單程掃描期間也作用于所述色散補(bǔ)償裝置。 [0022]-所述干涉顯微鏡可以為Linnik顯微鏡，其包括設(shè)置于所述參考臂的第一物鏡和 設(shè)置于所述目標(biāo)臂的第二物鏡，所述參考臂和所述目標(biāo)臂是分開的。其變型可以從包括單 物鏡的Michel son顯微鏡和Mirau顯微鏡中進(jìn)行選擇。
[0023]本發(fā)明的另一個主題為一種光學(xué)斷層攝影方法，其包括以下步驟：
[0024] a)提供多色光源；
[0025] b)使用分束器，以將由所述源發(fā)射出的光的第一部分沿第一軌跡(稱為參考軌跡） 進(jìn)行指引并且將由所述源發(fā)射出的光的第二部分沿第二軌跡(稱為目標(biāo)軌跡)進(jìn)行指引；
[0026] c)使用與一維共焦空間過濾系統(tǒng)配合的物鏡來聚焦光的所述第二部分，從而沿位 于所述物鏡的聚焦平面上的線(稱為觀察線)對待觀察的半透明目標(biāo)進(jìn)行照明，并且通過所 述適當(dāng)照明的目標(biāo)來收集后散射光；
[0027] d)使用所述物鏡或另一個物鏡來將光的所述第一部分聚焦于設(shè)置在所述參考軌 跡的參考鏡，并且收集由所述鏡反射的光；
[0028] e)使用所述分束器來將由所述目標(biāo)后散射的光與由所述鏡反射的光相結(jié)合，并且 將其指引向一維光學(xué)傳感器；
[0029] f)使用所述一維共焦空間過濾系統(tǒng)來選擇從所述觀察線發(fā)出的光，并且由此在所 述傳感器處形成一維圖像；
[0030] g)使用致動系統(tǒng)來對平行于所述物鏡的光學(xué)軸線的所述觀察線進(jìn)行位移，從而沿 所述目標(biāo)軌跡來執(zhí)行待觀察物體的單程掃描，同時保持所述參考軌跡和所述目標(biāo)軌跡之間 的零光路差；以及
[0031] h)使用處理器來根據(jù)所述單程掃描期間由所述傳感器獲取的對應(yīng)于所述觀察線 的不同位置的多個一維干涉圖像而重構(gòu)待觀察的所述目標(biāo)平行于所述光學(xué)軸線而定向的 的截面的二維圖像。
[0032]根據(jù)這樣方法的不同的實(shí)施方案：
[0033]-所述步驟g)可以這樣實(shí)施:通過引起待觀察的所述目標(biāo)相對于所述干涉顯微鏡 的平行于所述光學(xué)軸線的相對位移，而不修改所述參考臂和所述目標(biāo)臂的光學(xué)長度。
[0034] -可選地，所述步驟g)可以這樣實(shí)施:通過在所述觀察線所在的聚焦平面上移動物 鏡并且修改所述參考臂的光學(xué)長度，從而保持所述第一軌跡和所述第二軌跡之間的零光路 差。
[0035] -本方法還可以包括步驟i )，其對所述單程掃描期間待觀察的所述目標(biāo)內(nèi)的觀察 線的位移所導(dǎo)致的色散的修正進(jìn)行補(bǔ)償。
【附圖說明】
[0036] 將參考所附附圖，通過舉例而在閱讀說明書時給出本發(fā)明的其他特征，細(xì)節(jié)和優(yōu) 點(diǎn)，其分別表不為：
[0037]-圖1A為基于Linnik干涉顯微鏡的根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案的光學(xué)斷層攝影裝置的 示意圖；
[0038]-圖1B示出了根據(jù)本發(fā)明的所述實(shí)施方案的變型的光學(xué)斷層攝影裝置的細(xì)節(jié)； [0039]-圖2A、2B為基于Michel son和Mirau干涉顯微鏡的配置的本發(fā)明的其他可能實(shí)施 方案；
[0040]-圖3A和3B示出了狹縫共焦過濾的原理；
[0041]-圖4A和4B分別示出了通過使用根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)的光學(xué)相干斷層攝影裝置而獲得的 圖像以及通過使用根據(jù)本發(fā)明的光學(xué)斷層攝影裝置而獲得的相同目標(biāo)的圖像；
[0042]-圖5A至5G不出了基于Michelson和Mirau干涉顯微鏡和使用浸沒介質(zhì)的本發(fā)明的 不同的實(shí)施方案；以及
[0043]-圖6示出了基于Linnik干涉顯微鏡和使用浸沒介質(zhì)的本發(fā)明的另一個實(shí)施方案。
【具體實(shí)施方式】
[0044] 圖1A示出了根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案的光學(xué)斷層攝影裝置。該裝置實(shí)質(zhì)上包括： "Linnik"干涉顯微鏡、系統(tǒng)(DCD)、一維光學(xué)傳感器((ΠΜ)以及處理器(PR);所述"Linnik"干 涉顯微鏡通過添加空間過濾裝置(FE，F(xiàn)S)而進(jìn)行修正；系統(tǒng)(DCD)用于補(bǔ)償干涉計(jì)的兩個臂 之間的色散差;處理器(PR)被適當(dāng)?shù)剡M(jìn)行編程或配置。
[0045] 該裝置包括多色光源SLP。后者示意性地由白熾燈泡表示，但是其可以優(yōu)選地為更 高亮度的源，例如發(fā)光二極管或發(fā)光二極管的組合、超輻射發(fā)光二極管或超輻射發(fā)光二極 管的組合、鹵素白熾燈、電弧燈、甚至激光器或基于激光器的源(例如由"超連續(xù)譜"產(chǎn)生的 源）。在所有情況下，其光譜寬度(在中間高度處)將優(yōu)選地大于或等于l〇〇nm;該光譜越寬， 裝置的軸向分辨率越好；帶中心波長可以為可見的或可以位于近紅外；在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)應(yīng) 用中，一般優(yōu)選為近紅外，通常地在600nm和1500nm之間。源可以為極化或非極化的，空間相 干或不相干的?？臻g相干源（激光或超輻射發(fā)光二極管類型的空間相干源）可以為有利的 (由于其具有更好的照明），但是其會引入相干"噪聲"：雜散干擾現(xiàn)象導(dǎo)致有用干涉信號的 相對幅值的減小并且使照明缺乏均勻性。另外，空間相干源的使用大體上增加了裝置的整 體成本。
[0046] 狹縫FE和透鏡LE形成了與源SLP和干涉顯微鏡進(jìn)行協(xié)作以沿線對待觀察的目標(biāo) OBJ進(jìn)行照明的照明光學(xué)系統(tǒng)。如果多色光源為空間相干的，則狹縫FE可以由束形成鏡片來 代替，結(jié)合例如會聚或發(fā)散的圓柱形透鏡，從而沿具有微米水平的寬度的線來對目標(biāo)進(jìn)行 照明（更具體地，線的寬度為成像系統(tǒng)的橫向分辨率的量級水平）。
[0047] 由透鏡LE形成的照明束指向分束器SF(在此情況下為立方分束器）。該分束器沿干 涉顯微鏡的第一臂BREF(稱為"參考臂"）而指引入射束的第一部分，并且沿第二臂B0BJ(稱 為"目標(biāo)臂"）而指引入射束的第二部分。將第一顯微鏡物鏡L01和所謂的"參考"鏡MR設(shè)置于 參考臂;該物鏡將光聚焦于鏡，從而隨后收集鏡反射的光并且在相反方向上沿參考臂或軌 跡而指引反射光。第二顯微鏡物鏡L02(其焦距等于所述第一物鏡L01的焦距)設(shè)置于目標(biāo) 臂;物鏡將光聚焦于待觀察的目標(biāo)0BJ，從而隨后收集后散射的光，并且在相反方向上沿目 標(biāo)臂或軌跡而指引后散射的光。通常地，物鏡具有0.1和1.0之間的數(shù)值孔徑(與傳統(tǒng)的掃描 0CT相反，不存在將會限制待使用的數(shù)值孔徑的場深度限制）。值得注意，這些物鏡可以在空 氣中或是被浸沒的;通過對比，對于全場0CT，使用了浸沒物鏡，這在特定應(yīng)用中可以為受限 的。
[0048]分束器SF將由兩個物鏡發(fā)出的光束再次結(jié)合，使得其進(jìn)行干涉，并且沿所謂的"觀 察"臂BOBS對其進(jìn)行再指引。
[0049] 當(dāng)干涉的兩個束展現(xiàn)出相同的強(qiáng)度時，干涉條紋的對比是最大的；因此，可以有利 地于參考軌跡設(shè)置衰減器或使用弱反射參考鏡。
[0050] -維空間過濾器FS設(shè)置于觀察臂。在圖1A的實(shí)施方案中，共焦過濾器包括兩個透 鏡LF1、LF2。狹縫F0設(shè)置于透鏡LF1的后焦平面。透鏡LF2在一維光學(xué)傳感器CM處形成狹縫 F0的圖像。狹縫F0與狹縫FE (其與源SLP相關(guān)聯(lián))光學(xué)地共輒;換言之，干涉顯微鏡于狹縫F0 形成狹縫FE的圖像，反之亦然。如后文所將解釋的，參考圖3A和3B，其為"共焦"配置；實(shí)際 上，源SLP、狹縫FE、透鏡LE、分束器SF、物鏡L02、空間過濾器SF形成狹縫共焦顯微鏡。
[0051] -維光學(xué)傳感器CM (線性攝像機(jī))包括單行像素（正方形或矩形)或幾行像素（一 般不超過10或20,最多100)，一維光學(xué)傳感器(ΠΜ檢測在過濾器的輸出處的光。還可以使用 矩陣圖像傳感器的單行像素或毗鄰或接近的幾行像素(一般不超過10或20)的結(jié)合。
[0052] 如圖1B中示出的變型，通過將一維光學(xué)傳感器CIM設(shè)置于單透鏡LF的焦平面，可以 不使用過濾系統(tǒng)FS而執(zhí)行空間過濾。
[0053]另外，如果狹縫F0存在于檢測器的側(cè)方(或檢測器自身用作上述的狹縫，圖1B)，則 可以省略照明狹縫FE(或代替狹縫FE的束形成系統(tǒng)），其代價為潛在更低的檢測敏感度。 [0054] 裝置還包括致動系統(tǒng)，該致動系統(tǒng)包括多個平移臺（stages de translation) (TR1、TR2、TR3和TR0)和驅(qū)動平移臺的處理器PR。不是所有平移臺都需要同時存在;具體而 言，如果TR0存在，則可以省略TR1和TR2，并且，相反地，如果存在TR1和TR2，則可以省略TR0。 [00 55]通過所述致動系統(tǒng)的第一平移臺TR1而軸向移動參考鏡MR和物鏡L01組件；由此， 也必須通過也形成所述致動系統(tǒng)的一部分的各自的平移臺TR2而移動物鏡L02。當(dāng)物鏡L02 減少（即，朝目標(biāo)平移)距離"e"時，參考鏡MR和物鏡L01位移
，nim為物鏡的浸 沒介質(zhì)(凝膠、液體或空氣(nim=l))的折射率，并且na標(biāo)為目標(biāo)的折射率。
[0056]通過留下靜止的干涉顯微鏡的不同元件，其變型可以僅改變目標(biāo)OBJ和干涉顯微 鏡之間的軸向距離。因此，可以通過平移臺TR0而移動所有干涉顯微鏡(不代表位移系統(tǒng))或 目標(biāo)OBJ;這可以尤其考慮到浸沒物鏡。
[0057]在所有情況下，其效果為修改目標(biāo)OBJ被探測的深度:觀察線LD0(其位于物鏡L02 的焦平面(更普遍地，位于聚焦平面））進(jìn)行所述目標(biāo)"深度方向"（也就是說，沿所述物鏡的 光學(xué)軸線的方向）的掃描。致動系統(tǒng)必須同時移動該觀察線并且保證參考軌跡和目標(biāo)軌跡 (直到被認(rèn)為構(gòu)成目標(biāo)臂的端部的觀察線)之間的光路差保持為零，或者至少小于多色光源 的相干長度和物鏡的場深度。該掃描修正沿目標(biāo)臂B0BJ傳播的光所經(jīng)過的物體的厚度，并 因此使其經(jīng)受色散。裝置DCD設(shè)置為對該色散修正進(jìn)行補(bǔ)償。裝置DCD包括恒定色散的元件 m)l(例如，塊狀玻璃，其材料的色散接近于目標(biāo)OBJ的色散)和可變色散的元件ED2,元件EDI 設(shè)置于干涉計(jì)的臂的一個，元件Η)2設(shè)置于干涉計(jì)的另一個臂。元件ED2包括兩個棱鏡，所述 棱鏡設(shè)置為面向彼此;通過將一個所述棱鏡相對于另一個棱鏡進(jìn)行移動而修改穿過的玻璃 厚度，并由此修改該臂中的光學(xué)軌跡。還可以使用相對于光學(xué)軌跡傾斜的玻璃板;通過作用 于傾斜角度而修改經(jīng)過的玻璃厚度?？梢钥紤]其他的系統(tǒng)；總體想法是需要改變一個臂中 的光學(xué)厚度，從而無論成像深度如何均使干涉計(jì)的兩個臂中的色散相等（或至少減小差 異)。
[0058]在其他實(shí)施方案中，色散補(bǔ)償裝置可以包括更簡單的浸沒介質(zhì)，所述浸沒介質(zhì)(通 常，液滴的折射率接近于目標(biāo)的折射率)在目標(biāo)臂中的厚度隨著物鏡接近待觀察的目標(biāo)而 減小(見圖5A至5F)。浸沒介質(zhì)厚度的減小由目標(biāo)中穿過厚度的增加而進(jìn)行補(bǔ)償：因此，目標(biāo) 臂中的色散保持為恒定，等于參考臂中的色散。
[0059]在圖1的實(shí)施方案中，裝置DCD由第三平移臺TR3進(jìn)行致動，第三平移臺TR3也形成 所述致動系統(tǒng)的一部分。這使得可以產(chǎn)生色散的動態(tài)補(bǔ)償，與其他位移同步。
[0060] 作為變型，可以使用可變厚度的透明色散材料(例如，玻璃），該透明色散材料放置 于干涉計(jì)的一個臂，從而修正光路和色散兩者。可以使用例如雙棱鏡（如圖1中的裝置DCD) 或簡單可定向板來產(chǎn)生該可變厚度。在這種情況下，不需要移動物鏡L01和鏡MR組件。
[0061] 檢測器CIM獲取線圖像，該線圖像對應(yīng)于目標(biāo)中多個不同位置的成像的線?？梢詫?這成堆的線圖像進(jìn)行數(shù)字處理，以獲取目標(biāo)的垂直截面的圖像。
[0062] 簡單方法包括使用所謂的相移干涉法，該相移干涉法包括將大量經(jīng)相移的線圖像 數(shù)字結(jié)合。例如，可以將四個線圖像相結(jié)合，所述四個線圖像對應(yīng)于沿軸向方向分開λ/8的 觀察線的位置，λ為目標(biāo)中的照明光的中心波長。這對應(yīng)于兩個相鄰圖像之間的V2相位移。 如果使用E 1、E2、E3、E4來表示這些圖像，則(E1-E 3)2+(E2-E4)2對應(yīng)于干涉信號的幅度(也就是 說，重構(gòu)圖像的幅度），并且[|5|}對應(yīng)于干涉信號的相位。該相位可以提供除了目標(biāo)的結(jié) 構(gòu)和斷層攝影信息之外的信息。需要注意，相位偏置(或相位偏移）的概念和上述的觀察線 總是對應(yīng)于目標(biāo)和參考臂之間的光路差(其等于零)的事實(shí)并不沖突。事實(shí)上，不僅在目標(biāo) 的任何結(jié)構(gòu)(可能會將光后散射)與觀察線一致時對目標(biāo)的任何結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察，而且在之前 和之后也會進(jìn)行觀察（由于由寬度大于λ的共焦過濾而引起的相干"門"）。因此，在軸向掃描 期間，該結(jié)構(gòu)對連續(xù)獲取的圖像的作用之間實(shí)際上存在相位偏置。
[0063] 作為變型，可以通過傅里葉分析對成堆的線圖像進(jìn)行處理，從而提取干涉條紋的 包絡(luò)(干涉信號的幅度)并且消除信號的非調(diào)制部分(非干涉信號）。
[0064] 應(yīng)當(dāng)強(qiáng)調(diào)的是，根據(jù)本發(fā)明，為了產(chǎn)生軸向橫截面的圖像，覆蓋所有成像深度的目 標(biāo)的單程掃描還使得可以同時獲取干涉信號（顯然，可以隨后沿相對方向執(zhí)行第二單程掃 描）。但是，在上述的Yu Chen等的技術(shù)和在全場0CT兩者中，不存在獲取干涉信號的目標(biāo)深 度掃描。其使用沿總范圍通常小于1微米的參考鏡的位移而產(chǎn)生的可變的和周期的相位偏 移來獲取干涉信號。
[0065]可以通過使相鄰截面圖像并列而獲取目標(biāo)的三維圖像。這要求沿相對于物鏡L02 的光學(xué)軸線和采集線兩者均為直角的方向進(jìn)行掃描。可以通過由橫向平移臺進(jìn)行的目標(biāo) (或者，采用等價方法，干涉顯微鏡，或照明線）的位移來獲取該掃描。
[0066] 相同的處理器PR可以驅(qū)動致動器TR1、TR2、TR3以及在需要時驅(qū)動致動器TR0(其可 以不是或可以不完全是平移臺）并且對由傳感器(ΠΜ獲取的成堆的線圖像進(jìn)行處理，這些任 務(wù)是相互依賴的。處理器PR可以為專用裝置，其包括一個或多個微處理器，或裝配有適當(dāng)?shù)?接口卡的計(jì)算機(jī)。作為變型，可以使用兩個不同的處理器來驅(qū)動致動系統(tǒng)和重構(gòu)圖像。 [0067]已經(jīng)參考基于Linnik干涉顯微鏡的特定實(shí)施方案來描述了本發(fā)明。但是，存在其 他類型的干涉顯微鏡，并且適合于實(shí)施本發(fā)明?？梢砸C的示例為Michelson顯微鏡（圖2A) 和Mirau顯微鏡（圖2B)，其包括具有參考鏡MR的單物鏡L0和固定至所述物鏡并且沿其光學(xué) 軸線對齊的分束器。這些設(shè)置比Linnik更簡單緊湊，但是更難以引入可調(diào)整的色散補(bǔ)償裝 置（以及干涉計(jì)的元件的可能的位移）。基于Michelson和Mirau配置(其使用浸沒介質(zhì)IM來 補(bǔ)償干涉計(jì)的兩個臂之間的色散差而不需要移動干涉計(jì)內(nèi)部的部件)的實(shí)施方案的示例示 出于圖5A(具有空氣中的物鏡的Michelson配置）、圖5B(具有浸沒物鏡的Michelson配置）、 圖5C(具有觀察窗口 H0和空氣中的物鏡的Michelson配置，注意窗口可以由孔代替和/或物 鏡可以為浸沒物鏡;如果存在窗口，必須在參考臂中設(shè)置相同厚度的透明板）、圖5D(具有空 氣中的物鏡的Mirau配置）、圖5E(具有浸沒物鏡和窗口的Mirau配置）、圖5F(具有空氣中的 物鏡和窗口的Mirau配置)和圖5G(具有浸沒物鏡而不具有窗口的Mirau配置）。
[0068]在圖5D至圖5G的裝置中，參考鏡由在其中心處具有小反射區(qū)域的透明板形成，由 例如金屬或介電層沉積或由板自身的折射率所導(dǎo)致而產(chǎn)生所述小反射區(qū)域。在圖5C、圖5D 和圖5G的實(shí)施方案中，反射區(qū)域形成于透明板的后部面，其用于沿目標(biāo)臂通過窗口（圖5C) 或分束器（圖5D、圖5G)來補(bǔ)償引入的色散。其他情況下，反射區(qū)域形成于板的前部面。另外， 在圖5D至圖5G的實(shí)施方案中，分束器由這樣的板形成：其在其一個面處具有合適的反射系 數(shù)(通常地在10%和50%之間）；在圖5D和圖5G的情況下在該板的前部面處進(jìn)行分離，在圖 5E和圖5F的情況下在后部面進(jìn)行分離。相對入射于板的光束的傳播方向來限定"前部"面和 "后部"面。
[0069]圖6示出了發(fā)明的另一個實(shí)施方案，其中：
[0070]-干涉顯微鏡MI為Linnik類型。
[0071]-物鏡L01、L02為浸沒類型。因此，由兩滴浸沒介質(zhì)IM而產(chǎn)生色散補(bǔ)償。每一滴被夾 在物鏡（L01、L02)和透明板(LT1、LT2)之間。參考鏡以板LT1(面可以處理為調(diào)整其反射系 數(shù))的后部面(相對于物鏡L01)來制造，將目標(biāo)0BJ壓靠于板LT2的后部面。
[0072]-多色光源SLP是空間相干的。其包括主多色光源，其具體為超輻射發(fā)光二極管DSL 和單模式光學(xué)纖維FMM(可選），該超輻射發(fā)光二極管DSL展現(xiàn)出1至20μπι水平的時間相干長 度。由超福射發(fā)光二極管產(chǎn)生的光被射入纖維FMM所謂的輸入端，從所述纖維的相對(輸出） 端離開，并且由透鏡LE使其準(zhǔn)直。
[0073]-照明的空間相干可以產(chǎn)生尤其簡單共焦過濾，該簡單共焦過濾不需要任何狹縫 并且包括僅僅一個在光源的側(cè)方(實(shí)際上，在光纖的輸出端側(cè)方)使光發(fā)散的圓柱形透鏡LC 和設(shè)置于一維類型的傳感器CIM的前方的球面透鏡LF。圓柱形透鏡LC通過使光束在圖形的 平面上（而非在垂直平面上)發(fā)散而產(chǎn)生像散（點(diǎn)線ΡΡ表示沿圖形的平面的光束的截面，而 短劃線PL表示沿相對于圖形的直角的平面的光束的截面）。因此，導(dǎo)致目標(biāo)和參考鏡的照明 為根據(jù)圖形的平面定向的線的形式;透鏡LF在一維光學(xué)傳感器處產(chǎn)生所述線的圖像;不從 觀察線發(fā)出的光以經(jīng)衰減的強(qiáng)度到達(dá)傳感器的單一線像素，從而產(chǎn)生一維共焦過濾。作為 變型，可以使用會聚圓柱形透鏡，從而也使系統(tǒng)像散。
[0074]-通過將作為整體的干涉顯微鏡(包括纖維FMM的輸出端和由透鏡LE和LC形成的像 散光學(xué)系統(tǒng))相對于目標(biāo)OBJ和透明板LT2進(jìn)行移動而執(zhí)行軸向掃描。光學(xué)傳感器CIM和相關(guān) 的透鏡LF可以與干涉顯微鏡相等地移動或不相等地移動(第二個選擇顯示于圖中）；但是， 需要使傳感器CIM保持于透鏡LF的焦平面(或更一般地，保持于聚焦平面）。
[0075]圖3A和3B示出了狹縫共焦顯微鏡的操作原理。相對于空間過濾狹縫F0成直角的平 面（圖3A中的平面zy)中，狹縫F0允許從目標(biāo)的區(qū)域發(fā)出的光（由實(shí)線表示的光束）穿過，在 該目標(biāo)處，狹縫FE通過物鏡L0進(jìn)行聚焦，并且使從目標(biāo)的其他區(qū)域發(fā)出的光(例如，虛線光 束)衰減。在平行于狹縫的平面(圖3A中的平面zx)中，不進(jìn)行這樣的過濾。結(jié)果是，"觀察線" LD0限定于物鏡的聚焦平面并且方向與狹縫FE和F0-樣。聚焦平面為相對于光學(xué)軸線具有 直角的平面，如果存在的話，在這里形成輸入狹縫FE的圖像。更一般地，觀察線LD0形成于目 標(biāo)臂的聚焦平面;其共輒平面為沿觀察臂的聚焦平面;沿參考臂的照明線形成于參考臂的 聚焦平面。如果輸入光束沿正交于觀察線或照明線的平面而準(zhǔn)直(如圖1A、1B)，則聚焦平面 對應(yīng)于一個或多個物鏡的焦平面。
[0076] 根據(jù)本發(fā)明的裝置因此包括可以選擇從目標(biāo)的確定的區(qū)域發(fā)出的光的兩個裝置： 由"白"光干涉法來限定共焦過濾和"相干門"。這些裝置為互補(bǔ)的：共焦過濾通過減小由光 的散射和漫反射(reflexions parasites)而產(chǎn)生的"背景"來增強(qiáng)干涉成像的性能水平。因 此，傳感器的動態(tài)范圍的更大部分用于檢測有用的干涉信號。
[0077] 實(shí)際上，生物組織強(qiáng)烈地散射;直進(jìn)光子的數(shù)量（除了單后散射以外不發(fā)生散射） 隨深度而以指數(shù)方式減少。現(xiàn)在，干涉測量法（即使具有低相干長度)不可以區(qū)分從目標(biāo)中 的成像區(qū)域發(fā)出的直進(jìn)光子和從目標(biāo)的其他區(qū)域發(fā)出并且由于發(fā)生散射而覆蓋相同長度 的光學(xué)軌跡的光子。結(jié)果是，存在虛假干涉信號(其被加入有用的干涉信號），在圖像中產(chǎn)生 偽影并且限制可接近的成像深度。在本發(fā)明的裝置中，共焦過濾移除大量的光子(除了從成 像區(qū)域發(fā)出的直進(jìn)光子），消除該背景;事實(shí)上，狹縫共焦過濾并不是完美的，因?yàn)槠鋬H作用 于一維，但是該"背景噪聲"的減少仍然很明顯。
[0078]相比于單獨(dú)的共焦過濾，干涉檢測的使用使得有用信號可以顯著放大(在"純"共 焦顯微觀測的情況下，低信號-噪聲比限制采集深度）。在本發(fā)明的裝置中，因此在兩個涉及 的原理之間存在協(xié)同作用（而不是簡單的并列）：利用低相干長度的干涉測量的顯微觀測和 狹縫共焦顯微觀測。
[0079] 經(jīng)由孔的共焦過濾(代替狹縫共焦過濾)的使用顯著地降低圖像的采集(需要額外 的掃描)而不提供任何關(guān)于可獲取的成像分辨率和/或深度的顯著優(yōu)點(diǎn)。
[0080] 即使共焦過濾不起作用，裝置仍展現(xiàn)出可接受的性能水平。當(dāng)使用場的相對大深 度的物鏡(一般大于或等于?〇μπ〇、和/或很寬的輸入和輸出狹縫和/或具有大尺寸像素(例 如，矩形)或多個像素行的一維檢測器時，發(fā)生上述情況。在這種情況下，具有低時間相干的 干涉檢測確定關(guān)于軸向分辨率和可獲取成像深度的性能水平。但是，沿線的照明和使用一 維傳感器的該線的檢測的益處仍然存在，這是由于其仍可以產(chǎn)生高速的垂直截面的圖像。
[0081] 本發(fā)明的技術(shù)比全場0CT更適合于在體內(nèi)的應(yīng)用。在這些應(yīng)用中，"目標(biāo)"為可能在 干涉信號采集期間移動而擾亂干涉信號的生命體(例如，患者）。根據(jù)本發(fā)明，在很短時間內(nèi) (例如10- 4秒的水平)對于每條線獲取干涉信號，這使得可以克服目標(biāo)的移動問題。相比而 言，在全場0CT中，通過將多個由陣列攝像機(jī)獲取的二維圖像結(jié)合而獲得干涉信號，這使得 時間遠(yuǎn)遠(yuǎn)變長。
[0082] 相比于Yu Chen等的上述技術(shù)，本發(fā)明提供了這樣的優(yōu)點(diǎn)：其直接提供觀察目標(biāo)的 垂直切片的圖像，通常比"相對"的圖像更加有用。
[0083]已經(jīng)生產(chǎn)出了本發(fā)明的原型機(jī)，其使用鹵素?zé)粽彰?，在空氣中的物鏡具有0.15的 數(shù)值孔徑，并且具有Linnik配置。使用紅外線，通過將顯示卡作為觀察目標(biāo)而對該原型機(jī)進(jìn) 行了測試，所述顯示卡厚度大約為500μπι，包括兩個包圍塑料顆粒(其包括微觀結(jié)構(gòu)、非散射 區(qū)域和熒光修飾層)的塑料層。通過使用出售的ThorLabs的掃描0CT裝置來對相同的目標(biāo)進(jìn) 行了成像。圖5A示出了利用出售的裝置獲取的圖像(垂直切片），圖5B顯示了利用本發(fā)明的 原型機(jī)獲取的圖像?？梢宰⒁獾?，本發(fā)明中的分辨率更好。
[0084]值得注意，利用合適的維度，根據(jù)本發(fā)明的裝置可以軸向和橫向地展現(xiàn)出實(shí)質(zhì)上 的"各向同性的"空間分辨率(Ιμπι水平）。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種光學(xué)斷層攝影裝置，其包括 -多色光源(SLP); -一維光學(xué)傳感器(CIM); -干涉顯微鏡(MI)，其包括:第一臂(BREF)，其稱為參考臂，在所述第一臂端部設(shè)置有所 謂參考鏡(MR);第二臂(BOBJ)，其稱為目標(biāo)臂;分束器(SF)，其將所述第一臂和第二臂聯(lián)接 至所述多色光源和所述傳感器；以及至少一個物鏡仏01丄02、11))，所述參考鏡設(shè)置于所述 物鏡或一個所述物鏡(L0、L01)的位于參考臂的聚焦平面； -一維共焦空間過濾系統(tǒng)(FE、FS、CIM)，其與所述多色光源配合以沿稱為觀察線（LDO) 的線來對設(shè)置于所述目標(biāo)臂(BOBJ)的待觀察的目標(biāo)(OBJ)進(jìn)行照明，并且于所述傳感器形 成所述觀察線的一維圖像，該觀察線(LD0)位于所述物鏡或一個所述物鏡(L0、L02)的聚焦 平面，該聚焦平面位于所述目標(biāo)臂； 其特征在于，其還包括： -致動系統(tǒng)01?、了1?1、了1?2、了1?3)，其配置為平行于沿所述物鏡或一個所述物鏡〇^、11)2) 的目標(biāo)臂延伸的光學(xué)軸線而移動所述觀察線，從而執(zhí)行所述目標(biāo)的單程掃描，同時保持第 一軌跡和第二軌跡之間的零光路差，在一方面，第一軌跡是指從所述分束器至所述參考鏡 并且沿所述參考臂行進(jìn)而返回，在另一方面，第二軌跡是指從所述分束器至所述觀察線并 且沿所述目標(biāo)臂行進(jìn)而返回；以及 -處理器(PR)，其編程或配置為，根據(jù)所述單程掃描期間由所述傳感器獲取的對應(yīng)于所 述觀察線的不同位置的多個一維干涉圖像，將待觀察的所述目標(biāo)的平行于所述光學(xué)軸線而 定向的截面的二維圖像重構(gòu)，所述光學(xué)軸線沿所述物鏡(L0、L02)的目標(biāo)臂延伸。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其中，一維共焦空間過濾系統(tǒng)還設(shè)置為選擇由所述目標(biāo) 后散射的光和從所述觀察線(LD0)發(fā)出的光。3. 根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的裝置，其中，所述致動系統(tǒng)配置為引起待觀察 的所述目標(biāo)相對于所述干涉顯微鏡的相對位移，而不修改所述參考臂和所述目標(biāo)臂的光學(xué) 長度，所述位移平行于所述物鏡(L0)的所述光學(xué)軸線或平行于設(shè)置于目標(biāo)臂的一個所述物 鏡(L02)的所述光學(xué)軸線。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2中的任一項(xiàng)所述的裝置，其中，所述致動系統(tǒng)配置為在所述觀察 線所在的聚焦平面中移動物鏡(L02)，并且修正所述參考臂的光學(xué)長度，從而保持所述第一 軌跡和所述第二軌跡之間的零光路差。5. 根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的裝置，還包括色散補(bǔ)償裝置(DCDUM)，其至少 一個設(shè)置為在所述目標(biāo)臂和所述參考臂外部，所述致動裝置配置為在所述單程掃描期間也 作用于所述色散補(bǔ)償裝置。6. 根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的裝置，其中，所述干涉顯微鏡為Linnik顯微鏡， 其包括第一物鏡(L01)和第二物鏡(L02)，所述第一物鏡(L01)設(shè)置于所述參考臂，所述第二 物鏡(L02)設(shè)置于所述目標(biāo)臂，所述參考臂和目標(biāo)臂為分開的。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的裝置，其中，所述第一物鏡和所述第二物鏡為浸沒物鏡，并且 其中，所述致動系統(tǒng)配置為引起待觀察的所述目標(biāo)相對于所述干涉顯微鏡的相對位移，而 不修改所述參考臂和所述目標(biāo)臂的光學(xué)長度，所述位移平行于設(shè)置于目標(biāo)臂的所述第二物 鏡(L02)的所述光學(xué)軸線。8. 根據(jù)權(quán)利要求1至5中的任一項(xiàng)所述的裝置，其中，從包括單物鏡(L0)的Michelson顯 微鏡和Mirau顯微鏡來選擇所述干涉顯微鏡。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的裝置，其中，所述干涉顯微鏡為Mirau顯微鏡，其包括單物鏡 (L0)和參考鏡(MR)以及固定至所述物鏡并且沿其光學(xué)軸線對齊的分束器(SF)，所述致動系 統(tǒng)配置為引起所述干涉顯微鏡相對于待觀察目標(biāo)的平行于所述光學(xué)軸線的相對位移，將浸 沒介質(zhì)（頂)一方面設(shè)置于所述分束器和所述待觀察的目標(biāo)之間，另一方面設(shè)置于所述分束 器和參考鏡之間。10. 根據(jù)前述權(quán)利要求中的任一項(xiàng)所述的裝置，其中，所述多色光源(DSL、FMM)為空間 相干的，并且所述共焦過濾系統(tǒng)包括:設(shè)置于所述多色光源和分束器(SF)之間的像散光學(xué) 系統(tǒng)(LC、LE)、設(shè)置于所述一維光學(xué)傳感器((ΠΜ)前方的透鏡(LF)以及設(shè)置于所述透鏡的聚 焦平面的一維光學(xué)傳感器自身。11. 一種光學(xué)斷層攝影方法，其包括以下步驟： a) 提供多色光源(SLM); b) 使用分束器(SF)，以將所述源發(fā)射出的光的第一部分沿稱為參考軌跡(TREF)的第一 軌跡進(jìn)行指引并且將由所述源發(fā)射出的光的第二部分沿稱為目標(biāo)軌跡(TR0B)的第二軌跡 進(jìn)行指引； c) 使用與一維共焦空間過濾系統(tǒng)(FS)配合的物鏡(L02)來聚焦光的所述第二部分，從 而沿位于所述物鏡的聚焦平面上的稱為觀察線的線來對待觀察的半透明目標(biāo)(OBJ)進(jìn)行照 明，并且通過所述適當(dāng)照明的目標(biāo)來收集后散射光； d) 使用所述物鏡或另一個物鏡(L01)來將光的所述第一部分聚焦于設(shè)置于所述參考軌 跡的參考鏡(MR)，并且收集由所述鏡反射的光； e) 使用所述分束器(SF)來將由所述目標(biāo)后散射的光與由所述鏡反射的光相結(jié)合，并且 將其指引向一維光學(xué)傳感器(cn〇; f) 使用所述一維共焦空間過濾系統(tǒng)(FS)來在所述傳感器處形成所述觀察線的一維圖 像； g) 使用致動系統(tǒng)(PR、TR1、TR2、TR3、TR0)來對平行于所述物鏡(L02)的光學(xué)軸線的所述 觀察線進(jìn)行位移，從而沿所述目標(biāo)軌跡來執(zhí)行待觀察目標(biāo)的單程掃描，同時保持所述參考 軌跡和所述目標(biāo)軌跡之間的零光路差；以及 h) 使用處理器(PR)來根據(jù)所述單程掃描期間由所述傳感器獲取的對應(yīng)于所述觀察線 的不同位置的多個一維干涉圖像，將待觀察的所述目標(biāo)的平行于所述光學(xué)軸線而定向的截 面的二維圖像重構(gòu)。12. 根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中，步驟f)還包括選擇從所述觀察線(LD0)發(fā)出的 光。13. 根據(jù)權(quán)利要求11或12中的任一項(xiàng)所述的方法，其中，通過以下方式來實(shí)施所述步驟 g):引起待觀察的所述目標(biāo)相對于所述干涉顯微鏡的平行于所述光學(xué)軸線的相對位移，而 不修正所述參考臂和所述目標(biāo)臂的光學(xué)長度。14. 根據(jù)權(quán)利要求11或12中的任一項(xiàng)所述的方法，其中，通過以下方式來實(shí)施所述步驟 g):通過在所述觀察線所在的聚焦平面中移動物鏡并且通過修正所述參考臂的光學(xué)長度， 從而保持所述第一軌跡和所述第二軌跡之間的零光路差。15. 根據(jù)權(quán)利要求11至14中的任一項(xiàng)所述的方法，還可以包括步驟i)，其對所述單程掃 描期間待觀察的所述目標(biāo)內(nèi)的觀察線的位移所導(dǎo)致的色散的修正進(jìn)行補(bǔ)償。16. 根據(jù)權(quán)利要求11至15中的任一項(xiàng)所述的方法，其中，待觀察的所述目標(biāo)為生物組 織。
【文檔編號】G02B21/00GK105980810SQ201480075374
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2014年12月19日
【發(fā)明人】A·杜布瓦
【申請人】國家科學(xué)研究中心, 高等光學(xué)學(xué)校, 巴黎第十大學(xué), 巴黎第十一大學(xué)