yL石墨烯分散液滴涂于烘干的玻碳電極表面，在45°C真空干燥箱中烘干。
[0043] (5)將步驟(4)得到的玻碳電極在緩沖溶液中，在pH=4.91的緩沖溶液(Na2HP〇4和 KH2P〇4)中，0~1.0V電位區(qū)間內，循環(huán)伏安掃描60圈至基線穩(wěn)定，洗凈，得到石墨烯修飾電極 備用。（見圖2)。
[0044] 2、配制白藜蘆醇溶液：
[0045]用電子天平稱量白藜蘆醇4.6mg，溶于2mL水中，制備0.0 lmo VL的白藜蘆醇溶液， 逐級稀釋至濃度為1.0 X 10-3mol/L、1.0 X 10-4mol/L、1.0 X 10-5mol/L。
[0046] 3、白藜蘆醇測定：
[0047] 配制pH值為4 · 91、5 · 39、5 · 91、6 · 47、6 · 98、7 · 39的0 · lmo 1/L磷酸緩沖溶液，移取 10mL于燒杯中，加入事先配制的白藜蘆醇溶液使白藜蘆醇濃度為2.5ymol/L，采用方波伏安 法，以石墨烯修飾電極為工作電極，在0.2~0.8V范圍內考察pH值對白藜蘆醇電流響應的影 響，發(fā)現(xiàn)最佳pH值為5.91(見圖3)。
[0048] 當富集時間為1〇8、4〇8、8〇8、12〇8、16〇8、20〇8時，2.5以111〇1/1白藜蘆醇的電流響應 如圖4,可知最佳富集時間為120s。
[0049] 富集電位分別為-0.8￥、-0.6￥、-0.4￥、-0.2￥、(^、0.2￥時，2.54111〇1/1白藜蘆醇的電 流響應如圖5,可知最佳富集電位為-0.2V。
[0050] 利用石墨烯修飾電極采用電化學方法對上述制備的不同濃度的白藜蘆醇溶液進 行含量測定，考察電流響應(I)與白藜蘆醇濃度(c)的關系可知，在0.03~5ymol/L范圍內二 者具有良好的線性關系，其線性方程為：
[0051] 1 = 0.00158+1.04916c,
[0052] 相關系數(shù)為0.999(見圖6,7)，表明具有良好的線性，檢測限為0.01以111〇1/1(5/^ = 3)〇
[0053] 實施例2
[0054]本實施例基本與實施例1相同，區(qū)別在于:石墨烯修飾電極的制備方法中石墨粉、 沒食子酸及氫氧化鈉的用量分別為24mg、10mg和2mg。
[0055] 后續(xù)依然和實施例1相同，利用石墨烯修飾電極對上述制備的不同濃度的白藜蘆 醇溶液進行含量測定，結果表明具有良好的線性，檢測限為0.01ym 〇l/L(S/N=3)。
[0056] 實施例3
[0057]本實施例基本與實施例1相同，區(qū)別在于:石墨烯修飾電極的制備方法中石墨粉、 沒食子酸及氫氧化鈉的用量分別為60mg、1 Omg和2mg，DMF用量為15mL。
[0058] 后續(xù)依然和實施例1相同，利用石墨烯修飾電極對上述制備的不同濃度的白藜蘆 醇溶液進行含量測定，結果表明具有良好的線性，檢測限為0.01ym 〇l/L(S/N=3)。
[0059] 試驗例
[0060] 按照實例1的方法，將本發(fā)明方法中制備的石墨烯修飾電極、N-甲基吡咯烷酮 (匪P)法（剝離條件：剝離溶劑為匪P，超聲時間：24h，未加剝離助劑，其它條件與本發(fā)明相 同）制備的石墨稀修飾電極和Hmiimers氧化-還原法制備的石墨稀電極在同樣的條件下分別 對白藜蘆醇的模擬樣品進行分析，在水樣中添加不同濃度的白藜蘆醇，測量三次取平均值。
[0061] 采用本發(fā)明石墨烯修飾電極的測定結果見下表，結果顯示回收率為97.0~ 102.0%，相對偏差范圍為2.0~3.0%，說明利用本發(fā)明石墨烯修飾電極測定白藜蘆醇的方 法重現(xiàn)性好、靈敏度高。而另外兩種電極均未獲得滿意結果。其中，添加量在1.5ymol/L條件 下，采用本發(fā)明石墨烯修飾電極、NMP法制備的石墨烯電極測得白藜蘆醇的電流響應信號分 別為1.5μΑ和0.9μΑ，采用Hummers氧化-還原法制備的石墨稀電極對白藜蘆醇無明顯響應信 號。
[0062]
[0063]在此基礎上對實際樣品進行測定，測定對象為市售某品牌的紅葡萄酒，該葡萄酒 預先采用高效液相色譜測定其中白藜蘆醇含量為3.59ymol/L，而采用本發(fā)明石墨烯修飾電 極的三次測定結果的平均值為3.68ymol/L，相對誤差為2.5%，說明該方法十分可靠，可應 用于實際樣品的測定。
【主權項】
1. 一種利用液相剝離石墨烯修飾電極測定白藜蘆醇含量的方法，其特征在于，該方法 步驟如下： 1) 準備含有白藜蘆醇的樣品，使其溶解于酸性或中性緩沖液，得到樣品溶液； 2) 采用方波伏安法，以石墨烯修飾電極為工作電極，測定所述樣品溶液中白藜蘆醇的 含量； 其中，所述石墨稀修飾電極的制備方法，包括如下步驟： (1) 稱取石墨粉和剝離助劑按照重量比為2~5:1的比例混合，并加入剝離溶劑，然后超 聲2~3小時，得到石墨烯分散液； 所述剝離溶劑的用量為每毫升剝離溶劑混合〇. 5~4毫克石墨粉； 所述剝離助劑為沒食子酸與氫氧化鈉的重量比為5:1的混合物； (2) 拋光玻碳電極至鏡面； (3) 依次用硝酸、乙醇、二次蒸餾水分別超聲清洗2min、2min、lmin，且每次更換洗劑前 均用蒸餾水洗凈，在二次蒸餾水洗凈之后于紅外燈下烘干； (4) 取石墨烯分散液均勻涂于烘干的玻碳電極表面，然后真空干燥； (5) 將步驟(4)得到的玻碳電極在緩沖溶液中，循環(huán)伏安法掃描預處理，得到石墨烯修 飾電極備用。2. 根據(jù)權利要求1所述利用液相剝離石墨烯修飾電極測定白藜蘆醇含量的方法，其特 征在于:所述步驟1)中酸性或中性緩沖液為PH5.91的磷酸緩沖溶液。3. 根據(jù)權利要求1所述利用液相剝離石墨烯修飾電極測定白藜蘆醇含量的方法，其特 征在于:所述步驟2)中石墨烯修飾電極的電壓為0.2~0.8V。4. 根據(jù)權利要求1所述利用液相剝離石墨烯修飾電極測定白藜蘆醇含量的方法，其特 征在于:所述步驟2)中采用方波伏安法測定時的富集時間為120s，富集電位為-0.2V。5. 根據(jù)權利要求1所述利用液相剝離石墨烯修飾電極測定白藜蘆醇含量的方法，其特 征在于:所述石墨烯修飾電極的制備方法的步驟（1)中剝離溶劑的用量為每毫升剝離溶劑 混合2~3毫克石墨粉。6. 根據(jù)權利要求1所述利用液相剝離石墨烯修飾電極測定白藜蘆醇含量的方法，其特 征在于:所述石墨烯修飾電極的制備方法的步驟(1)中剝離溶劑為N，N-二甲基甲酰胺。7. 根據(jù)權利要求1所述利用液相剝離石墨烯修飾電極測定白藜蘆醇含量的方法，其特 征在于:所述石墨稀修飾電極的制備方法的步驟(1)中超聲條件為頻率50kHz、功率220w。8. 根據(jù)權利要求1所述利用液相剝離石墨烯修飾電極測定白藜蘆醇含量的方法，其特 征在于:所述石墨稀修飾電極的制備方法的步驟(2)中拋光玻碳電極采用粒度0.05μηι的中 性氧化鋁粉。9. 根據(jù)權利要求1所述利用液相剝離石墨烯修飾電極測定白藜蘆醇含量的方法，其特 征在于:所述石墨烯修飾電極的制備方法的步驟(3)中硝酸為體積比1:1的硝酸水溶液，乙 醇為無水乙醇。10. 根據(jù)權利要求1所述利用液相剝離石墨烯修飾電極測定白藜蘆醇含量的方法，其特 征在于:所述石墨烯修飾電極的制備方法的步驟(5)為將步驟(4)得到的玻碳電極在pH為 4.91的Na 2HP〇4和KH2P〇4緩沖溶液中，于0~1.0V電位區(qū)間內，循環(huán)伏安法掃描60圈至基線穩(wěn) 定后洗凈，得到石墨烯修飾電極備用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用液相剝離石墨烯修飾電極測定白藜蘆醇含量的方法，該方法在液體介質(即剝離溶劑)中液相剝離石墨粉，獲得石墨烯分散液，并利用該石墨烯分散液制備石墨烯修飾電極，再利用石墨烯修飾電極以電化學方法測定白藜蘆醇含量。本發(fā)明方法使用時，在最優(yōu)條件下，白藜蘆醇在0.03～5μmol/L范圍內具有良好的線性，且檢測限低至0.01μmol/L。本發(fā)明方法操作簡便、省時、成本低、檢測靈敏度高，解決了現(xiàn)有液相剝離法超聲時間長、剝離效率低的問題，特別適用于測定葡萄、紅葡萄酒、虎杖等的白藜蘆醇含量，具有廣泛的應用前景。
【IPC分類】G01N27/30, G01N27/48
【公開號】CN105572209
【申請?zhí)枴緾N201510973196
【發(fā)明人】宋新建, 付菊, 譚小紅, 楊平
【申請人】湖北民族學院
【公開日】2016年5月11日
【申請日】2015年12月23日