測(cè)定擬黑多刺蟻藥材中氨基酸成分的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于擬黑多刺蟻藥材質(zhì)量檢測(cè)評(píng)價(jià)領(lǐng)域，尤其涉及一種測(cè)定擬黑多刺蟻藥 材中氨基酸成分的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 擬黑多刺蟻(Polyrhachis vicina Roger)隸屬節(jié)肢動(dòng)物門（Arthropoda)、昆蟲綱 (Class Insecta)、膜翅目（Hymenoptera)、細(xì)腰亞目（Apocrita)、蟻總科（Formicoidae)、蟻 科(Formicidae)，主要分部于廣西、云南、貴州、浙江等省。擬黑多刺蟻在我國(guó)用藥歷史悠 久，《周禮》、《禮記》和李時(shí)珍的《本草綱目》等書籍中均有記載。傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論認(rèn)為擬黑多 刺蟻具補(bǔ)腎益精，抗炎鎮(zhèn)痛，痛經(jīng)活絡(luò)，解毒消腫等功效，用于治療風(fēng)濕與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、 失眠、痔瘡、脫發(fā)、乙肝、神經(jīng)衰弱、月經(jīng)不調(diào)等疾患。擬黑多刺蟻是我國(guó)衛(wèi)生部唯一批準(zhǔn)的 具有食藥兩用價(jià)值的螞蟻。然而，目前關(guān)于其藥材質(zhì)量檢測(cè)評(píng)價(jià)卻缺少研究和報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供了一種方便有效的測(cè)定擬黑多刺蟻藥材中氨基 酸成分的方法。
[0004] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：測(cè)定擬黑多刺蟻藥材中氨基酸 成分的方法，包括以下步驟：
[0005] 〈1>精密稱定擬黑多刺蟻粉末0.30克，置長(zhǎng)頸安瓿管中，加入6mol · L-^Cl溶液 15mL，抽真空狀態(tài)下封管，置于110°C烘箱中水解24h，取出，冷卻，過濾，精密量取lmL濾液， 水浴蒸干，殘留物用水溶解，再蒸干，反復(fù)進(jìn)行2次，最后殘留物用水定容至25mL，用0.45μπι 的膜過濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；
[0006] 〈2>利用全自動(dòng)氨基酸分析儀對(duì)擬黑多刺蟻藥材中氨基酸成分含量進(jìn)行測(cè)定。
[0007] 步驟〈2>中按以下操作制備對(duì)照品：分別精確稱取各氨基酸對(duì)照品，置于同一 100mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，備用；臨用時(shí)精密吸取2mL至10mL容量瓶中，加水至刻 度，搖勻，即得。
[0008] 步驟〈2>中測(cè)試條件為：日立L-8900全自動(dòng)氨基酸分析儀，分離柱4.6mmX40mm，離 子交換樹脂#2622SC型，分析時(shí)間為60min，緩沖液流速0.35mL · min-1，茚三酮流速0.32mL · mirT1;緩沖液栗壓力5~19 · 5MPa，茚三酮栗壓力0~4MPa;緩沖液改變次數(shù)5次，柱溫59°C，反 應(yīng)器溫度135°C;氮?dú)鈮毫?6kPa;供試品和對(duì)照品溶液進(jìn)樣量均為20yL。
[0009] 氨基酸包括Lys、Val、Thr、Met、Leu、I le、Phe、Arg、His、Tyr、Cys、Asp、Ser、Glu、 Gly、Ala、Pro〇
[0010] 為便于檢測(cè)和評(píng)價(jià)擬黑多刺蟻藥材的質(zhì)量，發(fā)明人建立了一種方便有效的測(cè)定擬 黑多刺蟻藥材中氨基酸成分的方法，該法將處理好的擬黑多刺蟻待測(cè)溶液利用全自動(dòng)氨基 酸分析儀對(duì)其氨基酸成分含量進(jìn)行測(cè)定。研究表明，不同產(chǎn)地?cái)M黑多刺蟻藥材的氨基酸成 分含量均較豐富，具有較高的藥用價(jià)值，但其含量隨產(chǎn)地不同而異。應(yīng)用該法可幫助摸清擬 黑多刺蟻不同產(chǎn)地藥材的質(zhì)量，并為評(píng)價(jià)擬黑多刺蟻藥材質(zhì)量提供了科學(xué)依據(jù)，可用于保 證擬黑多刺蟻藥材質(zhì)量。
【具體實(shí)施方式】
[0011] 由于藥材氨基酸成分含量隨產(chǎn)地不同而異，為了摸清擬黑多刺蟻不同產(chǎn)地藥材的 質(zhì)量，發(fā)明人對(duì)廣西15批不同產(chǎn)地的擬黑多刺蟻藥材中氨基酸成分的含量進(jìn)行分析，研究 情況如下：
[0012] 1儀器與方法
[0013] 日立L-8900型全自動(dòng)氨基酸分析儀；15批擬黑多刺蟻樣品采集地點(diǎn)和時(shí)間見表1。 全部樣品經(jīng)廣西藥用植物園張?jiān)略聘呒?jí)畜牧師鑒定為擬黑多刺蟻。各氨基酸對(duì)照品均為 SIGMA公司提供，含量均為99%以上。實(shí)驗(yàn)所用的試劑均為分析純或色譜純。
[0014] 表1樣品來源
[0015]
[0016]
[0017] 2方法與結(jié)果
[0018] 2.1供試品溶液的制備
[0019] 精密稱定擬黑多刺蟻粉末（過100目塞）0.30克，置長(zhǎng)頸安瓿管中，加入6mol · 1/ ^Cl溶液15mL(內(nèi)含草酸0.15g、巰基乙醇0.3mL)，抽真空狀態(tài)下封管，置于110°C烘箱中水 解24h，取出，冷卻，過濾，精密量取lmL濾液，水浴蒸干，殘留物用水溶解，再蒸干，反復(fù)進(jìn)行2 次，最后殘留物用水定容至25mL，用0.45μπι的膜過濾，取續(xù)濾液，即得。
[0020] 2.2對(duì)照品的制備
[0021] 分別精確稱取各氨基酸對(duì)照品，置于同一 100mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，備 用。臨用時(shí)精密吸取2mL至10mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。
[0022] 2.3測(cè)試條件
[0023] 儀器為日立L-8900全自動(dòng)氨基酸分析儀，分離柱4.6mm X 40mm，離子交換樹脂# 2622SC型，分析時(shí)間為60min，緩沖液流速0.35mL · min-S茚三酮流速0.32mL · min-S緩沖 液栗壓力5~19.5MPa，茚三酮栗壓力0~4MPa;緩沖液改變次數(shù)5次，柱溫59°C，反應(yīng)器溫度 135°C;氮?dú)鈮毫?6kPa;供試品和對(duì)照品溶液進(jìn)樣量均為20yL。
[0024] 2.4測(cè)試結(jié)果
[0025]含量測(cè)定的樣品以干燥品計(jì)算，各樣測(cè)試結(jié)果見表2和表3。
[0026]表2總氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定結(jié)果（％ )
[0027]
[0028]
[0029]
[00
[00
[0032]
[0033]表中可見，不同產(chǎn)地的擬黑多刺蟻均含有豐富的氨基酸，具有較高的藥用價(jià)值，但 含量隨產(chǎn)地不同而異。15個(gè)樣中均含有16種氨基酸，其中必須氨基酸和半必須氨基酸中總 氨基酸的45.67 %~47.98 %。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種測(cè)定擬黑多刺蟻藥材中氨基酸成分的方法，其特征在于包括以下步驟： 〈1>精密稱定擬黑多刺蟻粉末0.30克，置長(zhǎng)頸安瓿管中，加入6mol · L-^Cl溶液15mL，抽 真空狀態(tài)下封管，置于ll〇°C烘箱中水解24h，取出，冷卻，過濾，精密量取lmL濾液，水浴蒸 干，殘留物用水溶解，再蒸干，反復(fù)進(jìn)行2次，最后殘留物用水定容至25mL，用0.45μπι的膜過 濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液； 〈2>利用全自動(dòng)氨基酸分析儀對(duì)擬黑多刺蟻藥材中氨基酸成分含量進(jìn)行測(cè)定。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定擬黑多刺蟻藥材中氨基酸成分的方法，其特征在于步驟〈 2>中按以下操作制備對(duì)照品：分別精確稱取各氨基酸對(duì)照品，置于同一 100mL容量瓶中，加 水至刻度，搖勻，備用；臨用時(shí)精密吸取2mL至10mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定擬黑多刺蟻藥材中氨基酸成分的方法，其特征在于步驟〈 2>中測(cè)試條件為：日立L-8900全自動(dòng)氨基酸分析儀，分離柱4.6mm X 40mm，離子交換樹脂# 2622SC型，分析時(shí)間為60min，緩沖液流速0.35mL · min-S茚三酮流速0.32mL · min-S緩沖 液栗壓力5~19.5MPa，茚三酮栗壓力0~4MPa;緩沖液改變次數(shù)5次，柱溫59°C，反應(yīng)器溫度 135°C;氮?dú)鈮毫?6kPa;供試品和對(duì)照品溶液進(jìn)樣量均為20yL。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定擬黑多刺蟻藥材中氨基酸成分的方法，其特征在于:所述 氨基酸包括 Lys、Val、Thr、Met、Leu、Ile、Phe、Arg、His、Tyr、Cys、Asp、Se;r、Glu、Gly、Ala、 Pro〇
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種測(cè)定擬黑多刺蟻藥材中氨基酸成分的方法，該法將處理好的擬黑多刺蟻待測(cè)溶液利用全自動(dòng)氨基酸分析儀對(duì)其氨基酸成分含量進(jìn)行測(cè)定。研究表明，不同產(chǎn)地?cái)M黑多刺蟻藥材的氨基酸成分含量均較豐富，具有較高的藥用價(jià)值，但其含量隨產(chǎn)地不同而異。應(yīng)用該法可幫助摸清擬黑多刺蟻不同產(chǎn)地藥材的質(zhì)量，并為評(píng)價(jià)擬黑多刺蟻藥材質(zhì)量提供了科學(xué)依據(jù)，可用于保證擬黑多刺蟻藥材質(zhì)量。
【IPC分類】G01N35/00
【公開號(hào)】CN105548588
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510926826
【發(fā)明人】徐永莉, 李力, 江思華, 閆志剛, 張?jiān)略? 趙成堅(jiān), 黃勇, 谷穎樂
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)藥用植物園
【公開日】2016年5月4日
【申請(qǐng)日】2015年12月14日