治療三周后的頭皮肩患者中的黃嘌呤含量相比于基線顯著減少（0.15倍變化（即，85%的 降低），p〈0. 05)。當(dāng)比較經(jīng)頭皮肩治療的受試者與健康受試者的黃嘌呤含量時(shí)，倍數(shù)變化 從用ZPT治療前的13. 72減少到治療后的2. 19,并且從用硫化硒治療前的15. 96減少到治 療后的2. 37。這代表顯著的治療后歸一化。
[0069] 脂質(zhì)代謝中間體
[0070] 脂質(zhì)具有多種生物學(xué)功能并且這也反映在它們的代謝模式中。許多脂質(zhì)顯示在頭 皮肩受試者和無頭皮肩受試者以及用去頭皮肩洗發(fā)劑治療過的頭皮肩受試者之間的顯著 差異（表5)。觀察到的總體趨勢是頭皮肩受試者比無頭皮肩受試者有更高的脂肪酸含量， 并且頭皮肩受試者在用去頭皮肩洗發(fā)劑治療后脂肪酸含量降低。例如，亞油酸在頭皮肩受 試者中顯著高于無頭皮肩受試者（ZPT和硫化硒基線頭皮肩組分別展示出比非頭皮肩組提 高了 2. 45和1. 6倍）。在用去頭皮肩洗發(fā)劑治療后，頭皮肩患者中的含量降低導(dǎo)致在與基 線頭皮肩含量進(jìn)行比較時(shí)，用ZPT洗發(fā)劑治療情況下0. 18的倍數(shù)變化（即，82%的降低） 和用硒洗發(fā)劑治療情況下〇. 22的倍數(shù)變化（即，78%的降低）；二者具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異。 這一觀察結(jié)果有點(diǎn)違反直覺，因?yàn)榻Y(jié)構(gòu)脂質(zhì)通常在頭皮肩受試者中減少，這是屏障削弱的 結(jié)果。這一觀察結(jié)果的一個(gè)合理的解釋是由于在頭皮表面取樣，主要取得的樣品是皮脂中 的甘油三酯，它們被轉(zhuǎn)化成脂肪酸，用作頭皮微生物區(qū)系（鱗斑霉屬（Malassezia))的食物 來源。另外的一個(gè)解釋是過多的脂肪酸是修復(fù)細(xì)胞損傷、包括恢復(fù)皮膚屏障完整性所必需 的。因此，降低的脂肪酸含量指示頭皮健康的改善以及有效的去頭皮肩洗發(fā)劑的功能。
[0071] 多種脂質(zhì)化合物對于炎性信號在細(xì)胞和組織中的啟動和傳播是重要的。這些脂 質(zhì)信號炎性調(diào)節(jié)劑由磷脂酶^釋放自質(zhì)膜磷脂?；ㄉ南┧岬尼尫趴捎山M織損傷引發(fā)，組 織損傷在炎性過程的早期階段增加。用1%的ZPT或1%的硫化硒洗發(fā)劑治療過的頭皮肩 受試者具有比頭皮肩基線顯著更低的花生四烯酸含量。對于ZPT，觀察到0. 56的倍數(shù)變化 (即，44 %的降低，P值為〈0. 05)，并且對于硫化硒，觀察到0. 30的倍數(shù)變化（即，70 %的降 低，P值為〈〇. 05)，這與頭皮肩病癥的炎性表型的改善一致。
[0072] 脂質(zhì)對頭皮健康重要性的另外的證據(jù)是檢測到氧化形式的亞油酸，脂肪酸13-和 9_羥基十八碳二烯酸（13-H0DE，9-H0DE)。H0DE的含量在頭皮肩患者中比無頭皮肩患者相 對更高（倍數(shù)變化：對于ZPT洗發(fā)劑為1. 93,對于硒洗發(fā)劑為1. 41)。在用去頭皮肩洗發(fā)劑 治療三周后，13-H0DE+9-H0DE的含量與匹配的基線樣品相比有顯著變化。13-H0DE+9-H0DE 的倍數(shù)變化對于ZPT治療為0. 26 (即，74%的降低，0. 05彡p彡0. 10)，并且對于硫化硒治 療為0. 34(即，66%的降低，p < 0. 05)。據(jù)信提高的脂質(zhì)過氧化是氧化應(yīng)激反應(yīng)影響質(zhì)膜 升高的標(biāo)志。包括來源于亞油酸氧化的13-H0DE、9-H0DE的一羥基脂肪酸的形成指示脂質(zhì) 過氧化和氧化應(yīng)激反應(yīng)。用去頭皮肩洗發(fā)劑治療頭皮肩導(dǎo)致13-H0DE/9-H0DE與頭皮肩樣 品相比顯著減少。這符合較高水平的嘌呤降解的觀察結(jié)果，并且共同表明頭皮肩表型顯示 炎性和氧化應(yīng)激反應(yīng)組分，以及用去頭皮肩洗發(fā)劑治療提供治療改善。
[0073] 表現(xiàn)出不同類型的代謝模式、對于頭皮健康重要的脂質(zhì)的另一個(gè)示例是棕櫚?；?乙醇酰胺（PEA)。與13-H0DE/9-H0DE不同，用去頭皮肩洗發(fā)劑治療過的頭皮肩患者顯示比 頭皮肩患者顯著更高的（PEA)含量。PEA含量在頭皮肩和無頭皮肩組之間大致相同（ZPT倍 數(shù)變化：1. 44 ;硫化硒倍數(shù)變化：0. 79 ;二者無統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異）。然而，在用ZPT治療三周 后，PEA含量對于ZPT洗發(fā)劑上升3. 08倍，并且對于硫化硒洗發(fā)劑上升6. 69倍，p < 0. 05。 同樣地，兩種去頭皮肩治療顯著提高了 PEA含量在三周治療和無頭皮肩組之間的倍數(shù)變化 (對于ZPT和硫化硒分別為4. 43和5. 26倍，p < 0. 05)。PEA作為一種內(nèi)源性脂肪酸酰胺， 已顯示具有廣泛多種生物學(xué)功能，涉及慢性疼痛、瘙癢和炎癥。作為治療機(jī)制的一部分，有 效的去頭皮肩洗發(fā)劑治療可促進(jìn)PEA的抗炎和止癢功能。這符合相同臨床受試者的自我評 估數(shù)據(jù)，他們在用去頭皮肩洗發(fā)劑治療后報(bào)告較輕的頭皮過敏和較輕的頭皮瘙癢（表8)。 觀察到在三周治療和無頭皮肩組之間的顯著倍數(shù)變化數(shù)據(jù)（對于ZPT，倍數(shù)變化為4. 43,并 且對于硫化硒，倍數(shù)變化為5. 26,二者p < 0. 05。）假定在第三周的治療時(shí)間點(diǎn)，頭皮肩頭 皮仍表現(xiàn)出一些炎癥，則需要額外量的PEA。
[0074] 表6列出的代謝物涉及碳水化合物及它們的代謝物、能量循環(huán)中的中間體、和酶 輔因子。顯示的是在頭皮肩和非頭皮肩樣品之間、或者在用包含吡啶硫酮鋅（ZPT)或硫化 硒的多種去頭皮肩治療劑治療三周之前和之后展示顯著差異的生物分子，兩種治療為具有 不同去頭皮肩活性物質(zhì)的有效去頭皮肩制劑。結(jié)果表明在頭皮肩和正常頭皮狀況之間以及 在頭皮肩基線和治療后的頭皮肩病癥之間的差異，并且用于評估去頭皮肩治療的功效。
[0075] 代謝組學(xué)技術(shù)包括兩個(gè)主要的技術(shù)方面：代謝物分離和代謝物鑒定。雖然一些代 謝物和小分子化合物的名稱此時(shí)未知，但對于鑒定來自受試者的生物樣品的代謝物或小分 子化合物來說，此類名稱不是必需的，因?yàn)?未命名"化合物已經(jīng)通過分析技術(shù)進(jìn)行充分的 表征，從而允許此類鑒定。所有此類"未命名"化合物的分析表征在表7中列出。此類"未命 名"代謝物和小分子化合物在本文中如下命名：使用命名"X"，后接一個(gè)特定的化合物編號。 表7列出45種代謝物，它們具有在頭皮肩和非頭皮肩樣品之間、或者在用包含吡啶硫酮鋅 (ZPT)或硫化硒或兩種治療劑的多種去頭皮肩治療劑治療三周之前和之后的統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著 的差異。這些化合物也可用作用于區(qū)分頭皮肩與非頭皮肩的標(biāo)記物和/或用于去頭皮肩洗 發(fā)劑治療的功效指示劑。
[0076] 為了評估與頭皮肩相關(guān)聯(lián)的病征和癥狀，使用調(diào)查問卷。這一信息將提供頭皮健 康狀態(tài)的獨(dú)立量度。對于自我評估的問題，頭皮肩受試者回答下文列出的四個(gè)問題，這些問 題與他們基線及使用產(chǎn)品三周后的頭皮肩病征和癥狀的嚴(yán)重程度有關(guān)。受試者使用的標(biāo)度 根據(jù)下文描述表示為〇至4。
[0077] 標(biāo)度:
[0078] 1.自我評估標(biāo)度（0-4)
[0079] 〇 =無，1 =輕度，2 =中度，3 =嚴(yán)重，4 =非常嚴(yán)重
[0080] 2.專家分級標(biāo)度（0-80)
[0081] 頭皮肩彡24
[0082] 非頭皮肩彡8
[0083] 自我評估問題:
[0084] 你給你今天的瘙癢嚴(yán)重程度評幾分？
[0085] 你給你今天的過敏嚴(yán)重程度評幾分？
[0086] 你給你今天的干燥嚴(yán)重程度評幾分？
[0087] 你給你今天的片狀剝落嚴(yán)重程度評幾分？
[0088] 小分子牛物fei記與自我評估/臨床癥狀的關(guān)系
[0089] 臨床受試者報(bào)告了他們在用去頭皮肩洗發(fā)劑治療三周后頭皮肩病征和癥狀的減 少（表8)。專家分級人員也報(bào)告了在用去頭皮肩洗發(fā)劑治療后片狀剝落評分的顯著降低。 這些結(jié)果符合頭皮健康的總體改善。這些相同受試者觀察到的生物化學(xué)分子也符合頭皮健 康的總體改善。例如，過敏與炎癥和宿主免疫防御反應(yīng)高度相關(guān)。本發(fā)明揭示的多種分子 諸如高含量的游離氨基酸、二肽、核酸以及脂質(zhì)涉及頭皮肩受試者體內(nèi)的炎性信號，這強(qiáng)力 支持在頭皮肩患者遭受的過敏與這些炎癥分子指示劑之間存在聯(lián)系。這種直接關(guān)聯(lián)已經(jīng)提 供了過敏的客觀測量?？陀^測量常用于評估皮膚病癥并且通常涉及專家評估和/或自我評 估。雖然這些類型的測量是有用的，但是它們實(shí)質(zhì)上存在評估員的偏好。客觀測量不存在 偏好的可能，因此提供較嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)數(shù)據(jù)。
[0090] 總體上，這些小分子生物標(biāo)記可用作客觀量度以允許更詳細(xì)的頭皮肩病癥的病理 生理描述，以及用作指示頭皮肩治療方案程度和完成度的相關(guān)量度。
[0091 ] 在特定實(shí)施例中，此類性能評估可對于比較在用組合物治療前后受試者的皮膚健 康狀態(tài)有利。例如，如果受試者轉(zhuǎn)換并保持某一去頭皮肩組合物或治療方案，一些去頭皮肩 組合物可發(fā)揮更快的見效速度，這將被受試者體會到。允許客觀測量受試者的特定皮膚健 康有益效果的評估可允許在用特定去頭皮肩組合物或治療方案治療前以及在受試者轉(zhuǎn)換 到特定去頭皮肩組合物或治療方案后比較受試者的狀態(tài)。另外，此種評估可用作一種支持 認(rèn)證工具，其支持特定治療或治療方案聲稱提供的特定皮膚健康有益效果。例如，如果一種 特定組合物或治療方案宣稱其將減少瘙癢癥狀，如本文所公開的評估可用于支持聲稱的具 體健康有益效果，示出受試者的瘙癢不適情況已經(jīng)減少了?？傻靡嬗谌ヮ^皮肩組合