一種白芍紅棗檸檬功能飲料中芍藥苷含量的檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物含量檢測技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種功能飲料中芍藥苷的檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002]白芍為常用中藥，具有平肝止痛、養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、斂陰止汗之功能。芍藥苷是白芍的主要有效成分。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，芍藥苷含量的常規(guī)測定方法有比色法、薄層掃描法、氣相色譜法、液相色譜法和毛細(xì)管區(qū)帶電泳法等。以上方法均只針對(duì)藥品中的芍藥苷進(jìn)行測定。
[0003]然而，近年來在歐美和日本等發(fā)達(dá)國家風(fēng)靡著一種健康飲品一一功能飲料，該功能飲料主要含有鉀、鈉、鈣、鎂等電解質(zhì)，成分與人體體液相似，飲用后更能迅速被身體吸收，及時(shí)補(bǔ)充人體因大量運(yùn)動(dòng)出汗所損失的水分和電解質(zhì)(鹽分)，使體液達(dá)到平衡狀態(tài)。常見的功能飲料主要有以下幾種:多糖類飲料、維生素飲料、礦物質(zhì)飲料、運(yùn)動(dòng)類飲料、益生菌飲料、免疫類飲料和低能量飲料。
[0004]當(dāng)飲用功能性飲料成為一種時(shí)尚時(shí)，這一產(chǎn)業(yè)及鄰近產(chǎn)業(yè)也隨之欣欣向榮。由于功能飲料中常加入有中藥成分，比如添加有白芍，因而檢測添加有白芍的功能飲料中芍藥苷的含量就顯得尤為重要，而現(xiàn)有的文獻(xiàn)中還沒有任何一篇文獻(xiàn)公開有從功能飲料中測定芍藥苷的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的發(fā)明目的在于:針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，提供一種用于測量白芍紅棗檸檬功能飲料中芍藥苷含量的檢測方法，從而嚴(yán)格控制功能飲料中芍藥苷的含量，確保功能飲料的功效。
[0006]為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為:
一種白芍紅棗檸檬功能飲料中芍藥苷含量的檢測方法，其中所述白芍紅棗檸檬功能飲料的配方為:
白芍漿170-210份，紅棗汁550-620份，膳食纖維檸檬汁450-520份，白砂糖200-250份，茯苓60-140份，大麥300-500份，白蘿卜籽100-200份，冬瓜40-80份，檸檬酸1-2份，阿斯巴甜20-40份，維生素C10-20份，檸檬酸鈉30-50份，水10000-20000份；將白芍漿、紅棗汁、膳食纖維檸檬汁、茯苓、大麥、白蘿卜籽、冬瓜混合，粉碎，加入水煎煮，過濾，除去渣滓，在濾液中加入阿斯巴甜、維生素C、檸檬酸鈉、梓檬酸，得到飲料；其檢測方法為:
檢測儀器與試劑=HPllOO高效液相色譜儀、RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、超聲波清洗器、分液漏斗、二次蒸餾水、芍藥苷由中國藥品生物制品檢定所提供；
色譜條件:色譜柱Kromasil C18 (150mmX 4.6mm);流動(dòng)相:乙腈:0.01mol/L磷酸水溶液=13:87 ;流速:1.0mL/min ;檢測波長:230nm ;柱溫:35° C ;進(jìn)樣量為5uL，色譜柱的理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算大于3000 ;
對(duì)照品溶液的制備:精密稱取芍藥苷對(duì)照品20.2mg，置50mL容量瓶中，加甲醇溶解至刻度線，搖勻，精密吸取5.0mL置1mL容量瓶中，加甲醇至刻度線； 供試品溶液的制備:精密吸取10.0mL白芍紅棗檸檬功能飲料至分液漏斗中，用水飽和正丁醇萃取3次-5次，水飽和正丁醇萃取液用RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器減壓蒸發(fā)至干，用甲醇分3次-5次超聲洗滌殘?jiān)?，洗液移?5mL容量瓶中加甲醇至刻度線，經(jīng)0.45um濾膜過濾；測定法:分別精密吸取上述兩種對(duì)照品溶液和供試品溶液各5uL，注入HPllOO高效液相色譜儀，測定，既得。
[0007]綜上所述，由于采用了上述技術(shù)方案，本發(fā)明的有益效果是:
本發(fā)明經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)對(duì)流動(dòng)相的組成、流速、色譜柱進(jìn)行篩選；根據(jù)芍藥苷的化學(xué)性質(zhì)，對(duì)流動(dòng)相的組成進(jìn)行了大量篩選，最終確定米用體積被為13:87的乙臆-0.0lmol/L磷酸水溶液作為緩沖液，保證芍藥苷和其他組分能很好的分離效果；流動(dòng)相流速設(shè)置為
1.0mL/min，茍藥苷的峰形最好、分離度最好，色譜柱在35° C條件下分離效果最好；本發(fā)明所采用的檢測方法可以靈敏、準(zhǔn)確的檢測芍藥苷的含量，且采用該檢測方法的分離效果好，檢測靈敏度高，穩(wěn)定性好，可以客觀、全面、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)功能飲料中芍藥苷的含量及質(zhì)量，對(duì)控制功能飲料生產(chǎn)過程中的質(zhì)量、保證功能飲料的功效有重要作用。
【具體實(shí)施方式】
[0008]下面對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)的說明。
[0009]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0010]實(shí)施例1
一種白芍紅棗檸檬功能飲料中芍藥苷含量的檢測方法，其中所述白芍紅棗檸檬功能飲料的配方為，按重量份計(jì):
白芍漿180份，紅棗汁580份，膳食纖維檸檬汁460份，白砂糖220份，茯苓80份，大麥340份，白蘿卜籽120份，冬瓜45份，檸檬酸I份，阿斯巴甜22份，維生素C12份，檸檬酸鈉32 份，水 120000 份；
其中，制備白芍漿時(shí)，將去皮稱重后的白芍切片迅速放入亞硫酸氫鈉0.05%、檸檬酸0.15%、抗壞血酸0.15%的混合液中護(hù)色20min，將白芍切片取出，并按照白芍切片:水=1:4的比例放入打漿機(jī)中制得白芍漿備用。
[0011]紅棗汁分兩次浸提制得:第一次浸提時(shí)，紅棗經(jīng)清水反復(fù)淘洗、去核、瀝干水分后，在120° C的溫度下烘烤Ilmin ;然后在鍋中預(yù)先加入4倍紅棗重量的飲用水并加熱至96° C，將紅棗放入鍋中并恒溫保持Ih后自然冷卻放置，待紅棗中可溶性固形物達(dá)8%時(shí)用120目細(xì)度的濾布濾出紅棗汁；第二次浸提時(shí)，在第一次浸提后的紅棗中加入0.5倍原紅棗重量的熱水，一并倒入榨汁機(jī)中壓榨取汁，并用120目細(xì)度的濾布濾出紅棗汁，最后將兩次浸提的紅棗汁混合備用。
[0012]制備膳食纖維檸檬汁時(shí)，共可分五步走:步驟一，將新鮮無腐爛的檸檬洗凈、去皮、去核、切薄片，將薄片檸檬放入榨汁機(jī)榨汁，將榨取的檸檬汁在82° C的溫度下水浴6min，檸檬汁放入4° C的冰箱中密封保存?zhèn)溆?；步驟二，檸檬皮切成小條并與步驟一中榨汁后的檸檬廢渣依次經(jīng)42° C的干燥箱中干燥4h、粉碎機(jī)粉碎、100目篩分、4° C的冰箱中密封保存?zhèn)溆?；步驟三，將步驟二中的粉碎粉末按料液比1:25加入蒸餾水得混合溶液，調(diào)節(jié)混合溶液PH值為2.0，混合溶液在81° C的環(huán)境中酸解lOOmin，冷卻過濾，濾渣烘干備用，濾液以3100 r/min離心處理16min，取上清液，并用4倍上清液體積的無水乙醇沉淀，靜置24h后過濾，濾渣于52° C的環(huán)境中干燥3h，粉碎并過100目篩得到檸檬水溶性膳食纖維；步驟四，將酸解烘干后的濾渣粉碎過100目篩，篩下粉末按料水比1:15加入蛋白酶5g/kg得蛋白混合液，蛋白混合液依次經(jīng)用磷酸緩沖液調(diào)節(jié)PH值至6.0、46° C恒溫水浴水解lh、升溫至65° C、按料水比1:10加入淀粉酶20g/kg酶解3h，酶解后的溶液依次經(jīng)以5000r/min的轉(zhuǎn)速離心lOmin、蒸餾水清洗沉淀3次、過濾沉淀、濾渣于42° C的干燥箱中干燥4h、粉碎、過100目篩即得檸檬非水溶性膳食纖維；步驟五，將步驟一中的檸檬汁、步驟三中的檸檬水溶性膳食纖維、步驟四中的檸檬非水溶性膳食纖維、穩(wěn)定劑和白砂糖以一定比例混合調(diào)配成膳食纖維檸檬汁，膳食纖維檸檬汁再依次經(jīng)41MPa的壓力條件下均質(zhì)兩次、裝罐、于87° C殺菌處理16min。所述穩(wěn)定劑為CMC-Na和黃原膠，膳食纖維檸檬汁的各組分的混合比例按質(zhì)量百分比設(shè)置為:檸檬汁:白砂糖:檸檬水溶性膳食纖維:檸檬非水溶性膳食纖維:CMC-Na:黃原膠=28:11:0.35:0.17:0.13:0.07。
[0013]待白芍漿、紅棗汁和膳食纖維檸檬汁制備完畢后，將茯苓、大麥、白蘿卜籽、冬瓜依次進(jìn)行混合、粉碎處理，并將粉碎后的混合粉料與白芍漿、紅棗汁、膳食纖維檸檬汁混合，并向混合液中加入適量水，依次進(jìn)行煎煮、過濾、除去渣滓得到濾液，然后再濾液中加入阿斯巴甜、維生素C、檸檬酸鈉、檸檬酸，混合均勻即得到飲料。其檢測方法為:
檢測儀器與試劑=HPllOO高效液相色譜儀、RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、超聲波清洗器、分液漏斗、二次蒸餾水、芍藥苷由中國藥品生物制品檢定所提供；
色譜條件:色譜柱Kromasil C18 (150mmX 4.6mm);流動(dòng)相:乙腈:0.0lmol/L磷酸水溶液=13:87 ;流速:1.0mL/min ;檢測波長:230nm ;柱溫:35° C ;進(jìn)樣量為5uL，色譜柱的理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算大于3000 ;
對(duì)照品溶液的制備:精密稱取芍藥苷對(duì)照品20.2mg，置50mL容量瓶中，加甲醇溶解至刻度線，搖勻，精密吸取5.0mL置1mL容量瓶中，加甲醇至刻度線；
供試品溶液的制備:精密吸取10.0mL白芍紅棗檸檬功能飲料至分液漏斗中，用水飽和正丁醇萃取3次-5次，水飽和正丁醇萃取液用RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器減壓蒸發(fā)至干，用甲醇分3次-5次超聲洗滌殘?jiān)?，洗液移?5mL容量瓶中加甲醇至刻度線，經(jīng)0.45um濾膜過濾；測定法:分別精密吸取上述兩種對(duì)照品溶液和供試品溶液各5uL，注入HPllOO高效液相色譜儀，測定，既得。
[0014]實(shí)施例2
一種白芍紅棗檸檬功能飲料中芍藥苷含量的檢測方法，其中所述白芍紅棗檸檬功能飲料的配方為，按重量份計(jì):
白芍漿190份，紅棗汁600份，膳食纖維檸檬汁490份，白砂糖230份，茯苓100份，大麥420份，白蘿卜籽150份，冬瓜60份，檸檬酸I份，阿斯巴甜31份，維生素C15份，檸檬酸鈉41份，水15000份。
[0015]其中，制備白芍漿時(shí)，將去皮稱重后的白芍切片迅速放入亞硫酸氫鈉0.05%、檸檬酸0.15%、抗壞血酸0.15%的混合液中護(hù)色20min，將白芍切片取出，并按照白芍切片:水=1:4的比例放入打漿機(jī)中制得白芍漿備用。
[0016]紅棗汁分兩次浸提制得:第一次浸提時(shí)，紅棗經(jīng)清水反復(fù)淘洗、去核、瀝干水分后，在125° C的溫度下烘烤13min ;然后在鍋中預(yù)先加入4倍紅棗重量的飲用水并加熱至98° C，將紅棗放入鍋中并恒溫保持Ih后自然冷卻放置，待紅棗中可溶性固形物達(dá)9%時(shí)用120目細(xì)度的濾布濾出紅棗汁；第二次浸提時(shí)，在第一次浸提后的紅棗中加入0.5倍原紅棗重量的熱水，一并倒入榨汁機(jī)中壓榨取汁，并用120目細(xì)度的濾布濾出紅棗汁，最后將兩次浸提的紅棗汁混合備用。
[0017]制備膳食纖維檸檬汁時(shí)，共可分五步走:步驟一，將新鮮無腐爛的檸檬洗凈、去皮、去核、切薄片，將薄片檸檬放入榨汁機(jī)榨汁，將榨取的檸檬汁在85° C的溫度下水浴8min，檸檬汁放入4° C的冰箱中密封保存?zhèn)溆茫徊襟E二，檸檬皮切成小條并與步驟一中榨汁后的檸檬廢渣依次經(jīng)45° C的干燥箱中干燥4h、粉碎機(jī)粉碎、100目篩分、4°