試劑 a-淀粉酶檢測(cè)試劑包括試劑R1和試劑R2,所述試劑R1包括以下組分：pH值為 6.0 的MES緩沖液 80mmol/L、NH4Cl120mmol/L、CaCl2 10mm〇l/L、聚乙二醇 5g/ L、對(duì)羥基苯甲酸酯6g/L; 所述試劑R2包括以下組分： pH值為6. 0的MES緩沖液80mmol/L、2-氯-4-硝基苯-麥芽三糖30mmol/L、對(duì)羥基 苯甲酸酯5g/L。
[0025] 實(shí)施例3、a-淀粉酶檢測(cè)試劑 a-淀粉酶檢測(cè)試劑包括試劑R1和試劑R2,所述試劑R1包括以下組分：pH值為 6. 5 的MES緩沖液 100mmol/L、NH4C1160mmol/L、CaCl2 30mmol/L、聚乙二醇 10g/L、對(duì)羥基苯甲酸酯8g/L; 所述試劑R2包括以下組分： pH值為6. 5的MES緩沖液100mmol/L、2-氯-4-硝基苯-麥芽三糖80mmol/L、對(duì)羥基 苯甲酸酯8g/L。
[0026] 試驗(yàn)例一、a-淀粉酶檢測(cè)試劑的相關(guān)性試驗(yàn) 1、試驗(yàn)試劑：實(shí)施例2制備的a_淀粉酶檢測(cè)試劑，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)可的DiaSysDiagnosticSystemsGmbH公司的a-淀粉酶測(cè)定試劑。
[0027] 2、試驗(yàn)方法：利用實(shí)施例2制備的a_淀粉酶檢測(cè)試劑，與國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理 總局認(rèn)可的DiaSysDiagnosticSystemsGmbH公司的a-淀粉酶測(cè)定試劑盒（EPS-G7法 )，采用日立7170自動(dòng)生化分析儀同時(shí)測(cè)定20個(gè)臨床血清樣品進(jìn)行對(duì)照檢測(cè)，得兩種試劑 的相關(guān)性曲線。立7170自動(dòng)生化分析儀設(shè)定的參數(shù)為：溫度為37°C，延遲60s開(kāi)始讀點(diǎn)， 讀數(shù)時(shí)間約120s，檢測(cè)波長(zhǎng)分別為主波長(zhǎng)405nm，副波長(zhǎng)505nm。
[0028] 3、試驗(yàn)結(jié)果： 試驗(yàn)結(jié)果如圖1所示，經(jīng)測(cè)定結(jié)果計(jì)算，兩個(gè)試劑盒的相關(guān)系數(shù)為0.9997,說(shuō)明了兩 者有極大的相關(guān)性，從而證明本發(fā)明提供的a-淀粉酶檢測(cè)試劑具有很好的實(shí)用性。
[0029] 試驗(yàn)例二、a_淀粉酶檢測(cè)試劑的穩(wěn)定性試驗(yàn) 1、試驗(yàn)試劑：實(shí)施例2制備的a-淀粉酶檢測(cè)試劑，標(biāo)準(zhǔn)品：瑞士羅氏cfas定標(biāo)血清， 質(zhì)控品：由美國(guó)Bio-Rad公司提供的高、低質(zhì)控品。
[0030] 2、試驗(yàn)方法：采用日立7170自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，其設(shè)定的參數(shù)為：溫度為37°C， 延遲60s開(kāi)始讀點(diǎn)，讀數(shù)時(shí)間約120s，檢測(cè)波長(zhǎng)分別為主波長(zhǎng)405nm，副波長(zhǎng)505nm。先用標(biāo) 準(zhǔn)品定標(biāo)，再使用實(shí)施例2制備的a-淀粉酶檢測(cè)試劑測(cè)定高、低兩水平的質(zhì)控品，持續(xù)測(cè) 定半年，根據(jù)測(cè)定數(shù)據(jù)，計(jì)算測(cè)試均值和變異系數(shù)。
[0031] 3、試驗(yàn)結(jié)果 試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。
[0032] 表1高、低質(zhì)控品的試驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)_
由表1得出，本發(fā)明提供的a-淀粉酶檢測(cè)試劑檢測(cè)的高、低質(zhì)控品的變異系數(shù)小于 5%，證明本發(fā)明的a_淀粉酶檢測(cè)試劑的測(cè)定結(jié)果具有良好的穩(wěn)定性。
[0033] 試驗(yàn)例三、a_淀粉酶檢測(cè)試劑的重復(fù)性試驗(yàn) 1、試驗(yàn)試劑：實(shí)施例2制備的a_淀粉酶檢測(cè)試劑，標(biāo)準(zhǔn)品：瑞士羅氏才發(fā)生定標(biāo)血 清，樣品：收集臨床高、低水平的血清。
[0034] 2、試驗(yàn)方法：采用日立7170自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，其設(shè)定的參數(shù)為：溫度為37°C， 延遲60s開(kāi)始讀點(diǎn)，讀數(shù)時(shí)間約120s，檢測(cè)波長(zhǎng)分別為主波長(zhǎng)405nm，副波長(zhǎng)505nm。先用 標(biāo)準(zhǔn)品定標(biāo)，再使用實(shí)施例2制備的a-淀粉酶檢測(cè)試劑測(cè)定臨床收集的高、低水平的血清 20次，進(jìn)行批內(nèi)重復(fù)性試驗(yàn)，根據(jù)檢測(cè)數(shù)據(jù)，計(jì)算測(cè)試均值和變異系數(shù)。
[0035] 3、試驗(yàn)結(jié)果 試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。
[0036] 表2 高、低水平的血清試驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)
由表2得出，本發(fā)明提供的a_淀粉酶檢測(cè)試劑檢測(cè)的高、低值血清的變異系數(shù)小于 5%，證明本發(fā)明的a-淀粉酶檢測(cè)試劑的測(cè)定結(jié)果具有良好的重復(fù)性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種a -淀粉酶檢測(cè)試劑，其特征在于，該試劑包括試劑Rl和試劑R2,所述試劑Rl 包括以下組分： MES 緩沖液 40-100mmol/L、NH4Cl 80-160mmol/L、CaCl2 5-30mmol/L、表面活性齊IJ2-12g/L 和防腐劑 2-8g/L; 所述試劑R2包括以下組分： MES緩沖液40-100mmol/L、2-氯-4-硝基苯-麥芽三糖10-80mmol/L和防腐劑2-8g/ L02. 如權(quán)利要求1所述的a -淀粉酶檢測(cè)試劑，其特征在于，該試劑包括試劑Rl和試劑 R2,所述試劑Rl包括以下組分： MES 緩沖液 80mmol/L、NH4Cl 120mmol/L、CaCl2 10mmol/L、表面活性劑 5g/L 和防腐劑 6g/L ； 所述試劑R2包括以下組分： MES緩沖液80mmol/L、2-氯-4-硝基苯-麥芽三糖30mmol/L和防腐劑5g/L。3. 如權(quán)利要求1或2所述的a -淀粉酶檢測(cè)試劑，其特征在于，所述MES緩沖液的pH 值為 5. 5-6. 5。4. 如權(quán)利要求3所述的a -淀粉酶檢測(cè)試劑，其特征在于，所述MES緩沖液的pH值為 6. 0〇5. 如權(quán)利要求1或2所述的a -淀粉酶檢測(cè)試劑，其特征在于，所述表面活性劑為聚乙 二醇。6. 如權(quán)利要求1或2所述的a -淀粉酶檢測(cè)試劑，其特征在于，所述防腐劑為對(duì)羥基苯 甲酸酯。7. -種如權(quán)利要求1-6任一所述的a -淀粉酶檢測(cè)試劑的檢測(cè)方法，其特征在于，包括 以下步驟： 將配制好的試劑Rl和試劑R2放置到全自動(dòng)生化分析儀對(duì)應(yīng)的試劑位上，在樣品盤(pán)的 對(duì)應(yīng)位置放置空白對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品，通過(guò)對(duì)照品和標(biāo)準(zhǔn)品獲得標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)的吸光度 變化，再根據(jù)全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定的樣品的吸光度，經(jīng)計(jì)算得到樣品的a -淀粉酶濃度。8. 如權(quán)利要求7所述的-淀粉酶檢測(cè)試劑的檢測(cè)方法，其特征在于，所述全自動(dòng)生化分 析儀的溫度為35-40 °C。9.如權(quán)利要求7所述的-淀粉酶檢測(cè)試劑的檢測(cè)方法，其特征在于，所述全自動(dòng)生化分 析儀的延遲時(shí)間是30-60s，讀數(shù)時(shí)間為120-150S。10. 如權(quán)利要求7所述的-淀粉酶檢測(cè)試劑的檢測(cè)方法，其特征在于，所述全自動(dòng)生化 分析儀的檢測(cè)波長(zhǎng)分別為主波長(zhǎng)405nm，副波長(zhǎng)505nm。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種α-淀粉酶檢測(cè)試劑及其應(yīng)用。該試劑包括試劑R1和試劑R2，所述試劑R1主要由MES緩沖液、NH4Cl、CaCl2、表面活性劑和防腐劑組成；所述試劑R2主要由MES緩沖液、2-氯-4-硝基苯-麥芽三糖和防腐劑組成。本發(fā)明提供的α-淀粉酶檢測(cè)試劑沒(méi)有NaN3，在測(cè)定過(guò)程中不會(huì)導(dǎo)致α-淀粉酶的變構(gòu)，可以減少測(cè)定結(jié)果的誤差；同時(shí)在檢測(cè)過(guò)程中不需要添加工具酶，延遲時(shí)間短，而且檢測(cè)結(jié)果的重復(fù)性和穩(wěn)定好，有利于該α-淀粉酶檢測(cè)試劑的臨床應(yīng)用。
【IPC分類(lèi)】G01N21/31
【公開(kāi)號(hào)】CN105021543
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510385800
【發(fā)明人】燕啟江
【申請(qǐng)人】廣州金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心有限公司
【公開(kāi)日】2015年11月4日
【申請(qǐng)日】2015年6月30日