Smith試劑在檢測液體檢材中GHB中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于檢測領(lǐng)域，具體涉及Smith試劑在檢測液體檢材中GHB中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 臨床顯示，口服GHB10mg，會產(chǎn)生暫時性記憶喪失，而一次使用達(dá)20g就會造成中 毒。中毒癥狀包括惡心、嘔吐、頭痛、反射作用喪失、失去意識、昏迷甚至死亡，與酒精并用會 更加劇其危險性。其有可能被應(yīng)用于犯罪，如：添加到常見的酒類飲品（伏特加、白酒、紅葡 萄酒、啤酒）或者飲料（橙汁、綠茶、雪碧、可樂）而給予被害人飲用，達(dá)到不法目的，也有一 些人為了追求感官刺激而服用GHB。
[0003] 因此，如何快速檢測檢測液體檢材中GHB成分，控制其被非法濫用，需要一種快速 準(zhǔn)確的檢測方法，目前針對GHB的顏色反應(yīng)原理均為將GHB內(nèi)酯化成GBL后的雙鍵氧化，當(dāng) 前，GHB在我國為管制藥品，而GBL作為一種應(yīng)用廣泛的香料、醫(yī)藥中間體不受管制，因而， 無法規(guī)避GBL對GHB檢測結(jié)果的干擾，可能造成假陽性的產(chǎn)生。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種Smith試劑在檢測液體檢材中GHB(y-羥丁酸）中的應(yīng) 用。
[0005] 本發(fā)明的再一個目的是提供一種液體檢材中GHB的快速顏色反應(yīng)輔助檢測方法。
[0006] 本發(fā)明所提供的檢測方法，包括如下步驟：向待檢測液體檢材中滴加Smith試劑 (顏色呈橙紅色），若待檢測液體檢材顏色變?yōu)榫G色，則證明待檢測液體檢材中候選含有 GHB，反之，則候選不含或者含量低于檢測限。
[0007]上述檢測方法中，所述待檢測液體檢材與Smith試劑的體積比為1:(0. 2-0. 6)，具 體可按如下方法：向〇. 5ml的所述待檢測液體檢材中滴加2-6滴的所述Smith試劑，其中， 每滴的體積約為〇.〇5ml。
[0008] 上述檢測方法中，所述滴加Smith試劑之前，還包括對所述待檢測液體檢材調(diào)節(jié) 其pH值至中性或弱酸性的步驟，具體可先用pH計測定所述待檢測液體檢材的pH值，據(jù)此 pH值，向其中加入0. 5-0. 15mol/L鹽酸或氫氧化鈉進(jìn)行調(diào)節(jié)。
[0009] 為了便于對比觀察，區(qū)分顏色，還可完全按所述檢測方法，僅將所述待檢測液體檢 材換為去離子水，向去離子水中滴加Smith試劑，作為陰性對照，觀察顏色變化。
[0010] 上述檢測方法中，當(dāng)所述待檢測液體檢材為簡單基質(zhì)時，所述GHB的檢測限為 5mg/ml;當(dāng)所述待檢測液體檢材為復(fù)雜基質(zhì)時，所述GHB的檢測限為10mg/ml，其中，所述簡 單基質(zhì)為成分單一的物質(zhì)，如：水等；所述復(fù)雜基質(zhì)為多成分組成的物質(zhì)，如：酒、茶水、果 汁、碳酸飲料等。
[0011] 上述檢測方法中，所述Smith試劑按照如下方法制備得到：
[0012] (1)制備改良Schweppes試劑：將葡萄糖和鹽酸苯胺混合，得到改良Schweppes試 劑；
[0013] (2)將溴甲酚綠和甲基橙混合，得到混合溶液A;
[0014] (3)將改良Schweppes試劑和混合溶液A混合，得到Smith試劑。
[0015] 上述制備方法中，步驟（1)中，所述葡萄糖是以葡萄糖水溶液的形式存在，所述葡 萄糖水溶液的質(zhì)量濃度為（0. 5-0. 15)g/ml，具體可為0.lg/ml。
[0016] 所述鹽酸苯胺是以鹽酸苯胺乙醇溶液的形式存在，所述鹽酸苯胺乙醇溶液的質(zhì)量 濃度為（〇? 10-0. 15)g/ml，具體可為 0? 12g/ml。
[0017] 所述改良Schweppes試劑中葡萄糖的質(zhì)量濃度為（0? 02-0. 03)g/ml，具體可為 0.025g/ml〇
[0018] 所述改良Schweppes試劑中鹽酸苯胺的質(zhì)量濃度為（0? 02-0. 04)g/ml，具體可為 0.03g/ml〇
[0019] 為了保持所述改良Schweppes試劑中葡萄糖和鹽酸苯胺的所述質(zhì)量濃度，可選用 溶劑進(jìn)行稀釋，所述溶劑具體可為甲醇。
[0020] 上述制備方法中，步驟（2)中，所述溴甲酚綠是以溴甲酚綠甲醇溶液的形式存在， 所述溴甲酚綠甲醇溶液的質(zhì)量濃度為（〇. 2-0. 4)g/L，具體可為0. 3g/L。
[0021] 所述甲基橙是以甲基橙甲醇溶液的形式存在，所述甲基橙甲醇溶液的質(zhì)量濃度為 (0? 05-0. 2)g/L，具體可為 0?lg/L。
[0022] 所述溴甲酚綠和甲基橙的體積比為（0. 5-1. 5) :1，具體可為1:1。
[0023] 上述制備方法中，步驟（2)中，還包括對所述混合溶液A調(diào)節(jié)pH值至7. 0的步驟， 如：可用〇?lmol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至7. 0〇
[0024] 上述制備方法中，步驟⑶中，所述混合溶液A和所述改良Schweppes試劑的體積 比為（2-4) :1，具體可為3:1。
[0025] 本發(fā)明通過研宄Smith試劑的顏色反應(yīng)試劑穩(wěn)定性與專屬性、顏色反應(yīng)檢測限、 復(fù)雜基質(zhì)對顏色反應(yīng)結(jié)果影響，發(fā)現(xiàn)Smith試劑對液體檢材中GHB成分具有很好的快速檢 測效果。
[0026] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：
[0027] 1)本發(fā)明所采用的Smith試劑和相應(yīng)的檢測方法具有顏色反應(yīng)檢測靈敏度較高， 專屬性較好；
[0028] 2)在簡單基質(zhì)中，GHB的檢測限可達(dá)到5mg/ml;在復(fù)雜基質(zhì)中，GHB的檢測限也基 本可以達(dá)到l〇mg/ml。
[0029] 3)本發(fā)明直接是和GHB產(chǎn)生顏色反應(yīng)，通過顏色變化來檢測GHB的存在與否，避免 GBL的干擾。
[0030] 4)低溫保存下，Smith試劑至少在半年時間內(nèi)性質(zhì)保持穩(wěn)定，反應(yīng)結(jié)果可靠。
【具體實(shí)施方式】
[0031] 下面通過具體實(shí)施例對本發(fā)明的方法進(jìn)行說明，但本發(fā)明并不局限于此。
[0032] 下述實(shí)施例中所述實(shí)驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法；所述試劑和材料，如 無特殊說明，均可從商業(yè)途徑獲得。
[0033] 實(shí)施例1、Smith試劑在檢測液體檢材中GHB成分中的應(yīng)用：
[0034]1、制備Smith試劑：
[0035] (a)改良Schweppes試劑：將試劑A(2g葡萄糖溶解在20ml水中）和試劑B(2. 4g 鹽酸苯胺溶解在20ml乙醇中）混合并用甲醇稀釋至80ml;
[0036] (b)將溴甲酚綠和甲基橙等體積混合，得到混合溶液A，其中，溴甲酚綠：將0. 03g 溴甲酯綠溶解在l〇〇ml80%的甲醇溶液中，用0.IN氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值至7. 0而得到，甲基 橙：將0.Olg甲基橙溶解在100ml甲醇中，用0. 1N氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值至7. 0而得到；
[0037] (c)將步驟（b)中的混合溶液A與步驟（a)中的改良Schweppes試劑以3 :1 (體 積比）的比例混合，得到Smith試劑。
[0038] 2、應(yīng)用：
[0039] 1)標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備：稱取Y-羥基丁酸內(nèi)酯（GBL)標(biāo)準(zhǔn)樣品約lg，用20%氫氧 化鈉調(diào)節(jié)pH值大于12,振蕩5min，用水定容至10ml，配制成100mg/mlGHB(鈉鹽）溶液。 移取100mg/mlGHB(鈉鹽）溶液適量，加水逐級稀釋成20mg/ml、10mg/ml、5mg/ml、lmg/ml、 0? 5mg/mlGHB(鈉鹽）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液；
[0040] 2)顏色反應(yīng)實(shí)驗：分別移取不同濃度GHB標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液各約0. 5ml置于試管中， 調(diào)節(jié)pH值使待測溶液（即不同濃度GHB標(biāo)準(zhǔn)物