一種同時(shí)測(cè)定固體保健食品中非法添加的多種化學(xué)藥物的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種醫(yī)藥非法添加品的測(cè)定,具體地說(shuō),是涉及一種同時(shí)測(cè)定固體保 健食品中非法添加的多種化學(xué)藥物的方法,屬于醫(yī)藥檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前我國(guó)已批準(zhǔn)的保健食品的保健功能有減肥、緩解體力疲勞、輔助降血脂、輔助 降血壓、輔助降血糖、輔助改善記憶力等27種,近年來(lái),隨著社會(huì)競(jìng)爭(zhēng)壓力的不斷增大和老 年化社會(huì)的擴(kuò)大,輔助改善記憶力類保健品正步入人們的學(xué)習(xí)、工作和生活中,常見(jiàn)功能有 改善記憶力、補(bǔ)充大腦營(yíng)養(yǎng)等。"輔助改善記憶"的保健功能主要通過(guò)補(bǔ)充大腦正常運(yùn)行所 必須的物質(zhì)、增加大腦細(xì)胞對(duì)氧氣的利用、提供能夠促進(jìn)腦部新陳代謝排出的物質(zhì)等功效。 然而不法商家為了使保健品起效快,以達(dá)到增加銷(xiāo)售量目的,會(huì)在保健品中非法添加化學(xué) 藥物,但化學(xué)藥物的副作用往往會(huì)嚴(yán)重影響人們的身體健康。
[0003] 目前用于輔助改善記憶力類保健食品非法添加的篩查方法較少,同時(shí)檢測(cè)多種非 法添加藥物的方法更是少之又少。因此,針對(duì)此類保健食品中潛在的、可能添加化學(xué)藥物建 立一種有效的、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法,預(yù)防輔助改善記憶類保健食品進(jìn)入市場(chǎng)后導(dǎo)致的不良事 件發(fā)生,確保其安全性。本研宄依據(jù)相關(guān)發(fā)明通過(guò)對(duì)17種促智類化學(xué)藥品(多奈哌齊、石 杉?jí)A甲、依達(dá)拉奉、倍他司汀、煙酸占替諾、吡拉西坦、加蘭他敏、咖啡因、茴拉西坦、氟馬西 尼、雌三醇、氟桂利嗪、萘普生、己烯雌酚、尼莫地平、阿米三嗪、雙氯芬酸鈉)建立高效液相 色譜分析方法,應(yīng)用于改善記憶力類保健食品中非法添加化學(xué)藥物的篩查。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 針對(duì)上述問(wèn)題,本發(fā)明的目的是提供一種同時(shí)測(cè)定固體保健食品中非法添加的多 種化學(xué)藥物的方法,該方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速測(cè)定固體保健食品中17種非法添加化學(xué) 物,可用于輔助改善記憶類保健食品中非法添加化學(xué)藥品的定性篩查和定量檢測(cè)。
[0005] 本發(fā)明提供的的技術(shù)方案是這樣的:
[0006] -種同時(shí)測(cè)定固體保健食品中非法添加的多種化學(xué)藥物的方法,依次包括下述步 驟:
[0007] 1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
[0008] 分別精密稱取17種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)適量,加30%甲酰胺水溶液使成濃度為0. 5mg/mL,檢 測(cè)17種化學(xué)藥物單標(biāo)色譜和混標(biāo)色譜圖;
[0009] 2)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線
[0010] 取標(biāo)準(zhǔn)溶液適量加30%甲酰胺水溶液,分別配制成40 μ g/mL、80 μ g/mL、100 μ g/ mL、200 μ g/mL、400 μ g/mL,作為標(biāo)準(zhǔn)工作曲線溶;
[0011] 3)樣品前處理
[0012] 稱取相當(dāng)于一次口服劑量,置于IOOmL瓶子中,精密加入30ml 30%甲酰胺水溶 液,稱其重量,超聲提取20分鐘,冷卻,用30 %甲酰胺-水溶液補(bǔ)足重量,過(guò)濾,濾液待用;
[0013] 4)凈化
[0014] 精密量取上述濾液2mL以約lmL/min流速通過(guò)C18-SPE柱,用3mL30%甲酰胺-水 洗脫,合并流出液與洗脫液,用0. 22 μ m有機(jī)濾膜過(guò)濾即得待測(cè)樣品。
[0015] 進(jìn)一步的,上述的同時(shí)測(cè)定固體保健食品中非法添加的多種化學(xué)藥物的方法,所 述色譜條件為:
[0016] 色譜柱:Thermo AccliaimTM Mixed-Mode WCX-1 柱;流動(dòng)相:A :水;B :200mmol/L 磷酸二氫鈉緩沖鹽,pH 6. 4 ;C:乙腈;梯度洗脫程序:3-6min,85%~45% A、10% B、5%~ 45% C ;10 ~12min,45% A、10% B、45% C ;8 ~15min,45%~31% A、10%~14% B、45% C ;15 ~15. lmin,31%~0% A、14%~50% B、50% C ;15· 1 ~17min,0% A、50% B、50% C ; 17 ~17. lmin,0%~85% A、50%~10% B、50%~5% C ;17. I ~20min,85% A、10% B、 5% C ;在 85% A、10% B、5% C 下平衡 3min。流速:lmL/min ;柱溫:50°C ;進(jìn)樣量:1 μ I ;檢 測(cè)波長(zhǎng):220nm為主要檢測(cè)波長(zhǎng);254nm、280nm輔助定性。
[0017] 與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明提供的技術(shù)方案建立了使用同一種色譜條件同時(shí)測(cè)定輔 助改善記憶類保健食品中可能添加的17種化學(xué)藥物含量的高效液相方法,在20min內(nèi)完成 了對(duì)各化合物的分析測(cè)定,在保證分離度的情況下,實(shí)現(xiàn)了快速有效的高通量分析,可為監(jiān) 測(cè)輔助改善記憶類保健食品非法添加藥物提供強(qiáng)有力的技術(shù)支持。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面通過(guò)實(shí)施例的方式進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明,但并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制,任 何人在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍內(nèi)所做的有限次的修改仍在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍內(nèi)。
[0019] 實(shí)施例1
[0020] 1材料與方法
[0021] 1.1 材料
[0022] I. I. 1樣品來(lái)源
[0023] 輔助改善記憶力類保健食品來(lái)源于市場(chǎng)銷(xiāo)售樣品。
[0024] I. 1. 2主要儀器與試劑
[0025] Agilent 1260高效液相色譜儀(二極管陣列檢測(cè)器,美國(guó)Agilent),XA20OTU電 子分析天平(瑞士梅特勒公司),Classic UVF超純水器(英國(guó)ELGA公司),P300H超聲 波清洗器(德國(guó)Elma公司),Sigma 3K15高速離心機(jī)(德國(guó)賽多利斯公司),C18-SPE柱 (60mg/3mL,天津博納艾杰爾科技有限公司)。
[0026] 多奈哌齊、石杉?jí)A甲、依達(dá)拉奉、倍他司汀、煙酸占替諾、吡拉西坦、加蘭他敏、咖啡 因、茴拉西坦、氟馬西尼、雌三醇、氟桂利嗪、萘普生、己烯雌酚、尼莫地平、阿米三嗪、雙氯 芬酸鈉對(duì)照品均購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研宄院,純度均多98. 5% ;甲醇和乙腈(液質(zhì)級(jí), B&J),其它試劑均為分析純。實(shí)驗(yàn)用水為經(jīng)ELGAPURELAB Classic UVF凈化系過(guò)濾的去離 子水。
[0027] 1. 2 方法
[0028] 1. 2. 1標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
[0029] I. 2. I. 1標(biāo)準(zhǔn)溶液:分別精密稱取17種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)適量,加30%甲酰胺水溶液使成 濃度為0. 5mg/mL ;17種化學(xué)藥物:其中:1吡拉西坦;2萘普生;3咖啡因;4依達(dá)拉奉;5雙 氯酚酸鈉;6茴拉西坦;7佛馬西尼;8煙酸占替諾;9雌三醇;10石杉?jí)A甲;11尼莫地平;12 加蘭他敏;13倍他司??;14己烯雌酚;15阿米三嗪;16 ;多奈哌齊;17,佛桂利嗪;b固體制 劑。
[0030] 1. 2. 1. 2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線:取標(biāo)準(zhǔn)溶液適量加30%甲酰胺水溶液,分別配制成 40 μ g/mL、80 μ g/mL、100 μ g/mL、200 μ g/mL、400 μ g/mL,作為標(biāo)準(zhǔn)工作曲線溶液。
[0031] 1.2. 2樣品前處理
[0032] 稱取相當(dāng)于一次口服劑量,置于IOOmL瓶子中,精密加入30ml 30%甲酰胺