血細胞分析儀用試劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)療診斷儀器用試劑，尤其涉及一種血細胞分析儀用試劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 傳統(tǒng)血液學常規(guī)檢查方法是借助于顯微鏡進行人工血液紅細胞、白細胞技術(shù)和血 涂片染色后顯微鏡進行肉眼人工白細胞分類，這樣操作效率低，費時費力，無發(fā)滿足市場的 需求。隨著科技的發(fā)展，自血細胞分析儀問世改變了以上的情況。
[0003] 隨著科學技術(shù)日新月異的發(fā)展，血細胞分析的技術(shù)有了很大的進步，能夠準確提 供27項檢測參數(shù)，為臨床檢查提供了更為準確有效的方法。血細胞五分類技術(shù)是當前最為 先進的分析技術(shù)，是采用了庫爾特原理、比色法及半導體激光流式細胞技術(shù)等先進技術(shù)，主 要機型有BC5100/5180/5300/5380/5310/5390,中文的操作界面，使用方便。該五分類自 動血細胞分析儀可以檢測紅細胞、白細胞、血紅蛋白、血小板和平均紅細胞體積的等等的參 數(shù)，它通過檢測人體的血液細胞的數(shù)目對各種疾病進行診斷，可及時監(jiān)測人體的身體狀況， 減少發(fā)病機率或控制病情，是目前臨床檢查的重要手段之一。
[0004]五分類全自動血細胞分析儀檢測血液細胞數(shù)目時需要與配套試劑一起使用，血細 胞分析以配套試劑的稀釋液主要是提供一個與血漿相同的滲透壓和電導率的作用；溶血劑 一方面是溶解紅細胞，進行白細胞的分類與計數(shù)，另一方面是溶解紅細胞，釋放血紅蛋白， 形成穩(wěn)定的血紅蛋白衍生物，進行血紅蛋白的測定；清洗液主要是清洗管道，避免標本之間 的污染。目前深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司的五分類血細胞分析用試劑的溶血劑 主要以季銨鹽鹽離子表面活性劑為主要成分，稀釋液主要以次黃嘌呤或黃嘌呤類化合物或 其鹽為主要成分。深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司的五分類血細胞分析用試劑(邁瑞 BC-6800五分類血細胞分析儀（國食藥監(jiān)械（準）字2007第3031324號)專用試劑)具有特 異性高、靈敏度高和高通量的優(yōu)點，具有廣闊的市場前景。但是，該五分類細胞分析儀原裝 試劑試劑成本高，供貨周期長的缺陷，無法滿足市場的需求。
[0005] 平均紅細胞體積（MCV)增多是大細胞性貧血，MCV減少是小細胞性低色素性貧血， 檢測MCV對貧血性疾病治療具有重要意義。MCV是從紅血球（RBC)數(shù)、白血球（WBC)數(shù)、白 血球分類、血紅蛋白濃度（Hb)、血細胞比容（Ht)和血小板（PLT)數(shù)這些細胞分析值中計算 得到重要項目中的一項，MCV可以是由血細胞比容本紅細胞數(shù)所除而得到，即Ht/RBC值得 至lj，MCV就是單個紅血球的平均容積，其單位為fL、飛升或10_15L。
[0006] 在制備MCV分析的全血樣品過程中，目前技術(shù)上存在的主要問題是實際的MCV會 隨著血液采集后經(jīng)歷的時間而改變。臨床診斷中MCV值是必要而又重要的，它應(yīng)在血樣采 集后立即獲得，也就是，該值應(yīng)當與原始血液的MCV值相一致。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 為了解決現(xiàn)有技術(shù)五分類細胞分析儀原裝試劑試劑成本高，供貨周期長的缺陷， 本發(fā)明目的在于自主研發(fā)一種成本低廉、試劑性能優(yōu)越的適于五分類全自動血細胞分析儀 用試劑。
[0008] 本發(fā)明提供的血細胞分析儀用試劑，包括稀釋液，其特征在于所述的稀釋液的組 分及含量為：磷酸二氫鉀1. 0-5. Og/L、磷酸氫二鈉3. 0-6. Og/L、硫酸鈉2. 0-7. Og/L、氯化 鈉 2. 0-7. Og/L、Proclin 300 0? 1-0. 5g/L、EDTA-2K 0? 3-0. 8g/L ;所述稀釋液的 pH 值為 6. 0~7. 0,所述稀釋液的電導率為15. 0~20. 0 ms/cm，所述稀釋液的滲透壓270~320 mOsm/ kg。
[0009] 本發(fā)明的上述血細胞分析儀用試劑，它還包括E0I溶血劑，所述的E0I溶血劑的組 分及含量為：十四烷基三甲基氯化銨L 0-4. 0g/L、HEPES 2. 0-10. 0g/L、硫酸鈉1. 0-7. 0g/ L、氯化鈉2.0-8.0g/L ;所述E0I溶血劑的pH值為4.0~5.0,所述E0I溶血劑的電導率 10. 0~15. 0 ms/cm，所述 E0I 溶血劑的滲透壓 330~380 m0sm/kg。
[0010] 本發(fā)明的上述血細胞分析儀用試劑，它還包括LH溶血劑，所述的LH溶血劑的組分 及含量為：0P-10 1. 0-5. 0g/L、十二烷基三甲基氯化銨5. 0-20. 0g/L、苯甲酸1. 0-6. 0g/L、 氯化鈉 15. 0-25. 0g/L、Proclin 300 0? 2-0. 9g/L ;所述 LH 溶血劑的 pH 值為 2. 0~3. 0,所述 LH溶血劑的電導率30. 0~40. 0 ms/cm，所述LH溶血劑的滲透壓400~700 m0sm/kg。
[0011] 本發(fā)明的上述血細胞分析儀用試劑，它還包括E0II染色液，所述的E0II染色液 的組分及含量為：八烷基三甲基氯化銨〇? 5-3. 0g/L、TRIS 2. 0-8. 0g/L、甲酸0? 5-3. 0g/L、 硫酸鈉2. 0-8. 0g/L、氯化鈉4. 0-10. 0g/L、酸性紅73 3-6mg/L ;所述E0II染色液的pH值 10. 0~11.0,所述E0II染色液的電導率為20. 0~25. 0 ms/cm，所述E0II染色液的滲透壓為 450~500 m0sm/kg。
[0012] 本發(fā)明的上述血細胞分析儀用試劑，它還包括清洗液，所述的清洗液的組分及含 量為：NP-10 0? 1-3. 0g/L、L-64 0? 1-2. 0g/L、硼酸 1. 0-3. 0g/L、十水合四硼酸鈉 0? l-o. 5g/ L、Proclin 300 0.1-0. 5g/L、氯化鈉 8. 0-12. 0g/L、無水硫酸鈉 3. 0-10. 0g/L;所述清 洗液的pH值7. 0~7. 5，所述清洗液的電導率15. 0~20. 0 ms/cm，所述清洗液的滲透壓 250~350m0sm/kg。
[0013] 作為本發(fā)明的一個優(yōu)選實施例，本發(fā)明提供的五分類全自動血細胞分析儀用試 劑由稀釋液、E0I溶血劑、LH溶血劑、E0II染色液和清洗液組成，所述的稀釋液的組分 及含量為：磷酸二氫鉀1. 0-5. 0g/L、磷酸氫二鈉3. 0-6. 0g/L、硫酸鈉2. 0-7. 0g/L、氯化 鈉 2. 0-7. 0g/L、Proclin 300 0? 1-0. 5g/L、EDTA-2K 0? 3-0. 8g/L ;所述稀釋液的 pH 值為 6. 0~7. 0,所述稀釋液的電導率為15. 0~20. 0 ms/cm，所述稀釋液的滲透壓270~320 mOsm/ kg。
[0014] 其中，所述的E0I溶血劑的組分及含量為：十四烷基三甲基氯化銨1.0-4. 0g/L、 HEPES 2. 0-10. 0g/L、硫酸鈉 1. 0-7. 0g/L、氯化鈉 2. 0-8. 0g/L ;所述 E0I 溶血劑的 pH 值為 4. 0~5. 0,所述E0I溶血劑的電導率10. 0~15. 0 ms/cm，所述E0I溶血劑的滲透壓330~380 m0sm/kg〇
[0015] 其中，所述的LH溶血劑的組分及含量為：0P-10 1.0-5. 0g/L、十二烷基三甲基氯 化銨5. 0-20. 0g/L、苯甲酸1. 0-6. 0g/L、氯化鈉15. 0-25. 0g/L、Proclin 300 0? 2-0. 9g/L; 所述LH溶血劑的pH值為2. 0~3. 0,所述LH溶血劑的電導率30. 0~40. 0 ms/cm，所述LH溶 血劑的滲透壓400~700 m0sm/kg。
[0016] 其中，所述的E0II染色液的組分及含量為：八烷基三甲基氯化銨0.5-3. 0g/L、 TRIS 2. 0-8. Og/L、甲酸 0? 5-3. Og/L、硫酸鈉 2. 0-8. Og/L、氯化鈉 4. 0-10.0 g/L、酸性紅 73 3-6mg/L ;所述EOII染色液的pH值10. 0~11. 0,所述EOII染色液的電導率為20. 0~25. 0 ms/ cm,所述E0II染色液的滲透壓為450~500 mOsm/kg。
[0017] 其中，所述的清洗液的組分及含量為：NP-10 0? 1-3. 0g/L、L-64 0? 1-2. 0g/L、硼酸 1. 0-3. 0g/L、十水合四硼酸鈉 0? 1-0. 5g/L、Proclin 300 0? 1-0. 5g/L、氯化鈉 8. 0-12. 0g/ L、無水硫酸鈉3. 0-10. 0g/L ;所述清洗液的pH值7. 0~7. 5,所述清洗液的電導率15. 0~20. 0 ms/cm，所述清洗液的滲透壓250~350m0sm/kg。
[0018] 本發(fā)明的血細胞分析儀用試劑，優(yōu)選的試劑配方如下： 所述的稀釋液的組分及含量為：磷酸二氫鉀1. 0-3. 0g/L、磷酸氫二鈉 4. 0-6. 0g/L、硫酸鈉 3. 0-5. 0g/L、氯化鈉 3. 0-5. 0g/L、Proclin 300 0? 2-0. 4g/L、EDTA-2K 0. 4-〇. 6g/L ； 進一步的，所述的E0I溶血劑的組分及含量為：十四烷基三甲基氯化銨1. 0-3. 0g/L、 HEPES 2. 0-6. 0g/L、硫酸鈉 1. 0-4. 0g/L、氯化鈉 2. 0-5. 0g/L。
[0019] 進一步的，所述的LH溶血劑的組分及含量為：0P-10 1.0-3.0g/L、十二烷基 三甲基氯化銨 8. 0-12. 0g/L、苯甲酸 2. 0-4. 0g/L、氯化鈉 18. 0-22. 0g/L、Proclin 300 0. 2-〇. 6g/L ； 進一步的，所述的EOII染色液的組分及含量為：八烷基三甲基氯化銨0. 5-2. 0g/L、 TRIS 4. 0-6. 0g/L、甲酸 0? 5-2. 0g/L、硫酸鈉 3. 0-6. 0g/L、氯化鈉 6. 0-10. 0g/L、酸性紅 73 4. 〇-6. 0mg