本實用新型涉及生物監(jiān)測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種HIV抗原抗體檢測卡。

背景技術(shù)：

艾滋病，全名為“獲得性免疫缺陷綜合癥”(Acquired Immune Deficiency Syndrome)，英文縮寫AIDS，是人體感染了人類免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)所導致的傳染病。HIV本身并不會引發(fā)任何疾病，而是當免疫系統(tǒng)被HIV破壞后，人體由于失去抵抗能力而感染其他的疾病導致死亡。

HIV的感染可通過檢測HIV特異性抗體、抗原、核酸或病毒分離培養(yǎng)加以確立，常規(guī)使用的標準診斷項目是血清學抗體檢測。從1985年第一代HIV抗體檢測試劑問世到現(xiàn)在，HIV血清學檢測試劑已經(jīng)發(fā)展到了第四代。1998年，國際上出現(xiàn)第四代HIV檢測試劑，它可同時檢測抗體和p24抗原，又稱為HIV抗原/抗體診斷試劑。

生物素-親和素系統(tǒng)(Biotin-Avidin-System，BAS)是一種具有高親和力、靈敏度高、特異性強和穩(wěn)定性好等優(yōu)點的信號放大標記技術(shù)，BAS具有高靈敏度、高特異性、高穩(wěn)定性和適用性等特點。生物素易與蛋白質(zhì)和核酸類等生物大分子結(jié)合，形成的生物素衍生物，不僅保持了大分子物質(zhì)的原有生物活性，具多價性。此外，每個親和素分子有四個生物素結(jié)合部位，可同時以多價形式結(jié)合生物素化的大分子衍生物和標記物。因此，BAS具有多級放大作用，使其在應(yīng)用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。

目前，現(xiàn)有技術(shù)已實現(xiàn)HIV抗原抗體的檢測，但樣本用量較大，大約需要60至100μL，靈敏度有待于提高。因此本實用新型人利用生物素-親和素系統(tǒng)的優(yōu)點，開發(fā)了一種HIV抗原抗體的檢測卡。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本實用新型的目的在于是：針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供一種靈敏度高，樣本用量少的HIV抗原抗體檢測卡。

為了實現(xiàn)上述實用新型的目的，本實用新型的技術(shù)方案是：

一種HIV抗原抗體檢測卡，所述檢測卡包括卡蓋、卡體和試紙條，所述卡蓋上依次設(shè)有稀釋液加樣孔、樣本加樣孔、觀測孔和安裝標示孔，所述卡體的內(nèi)部設(shè)有放置試紙條的凹槽；所述試紙條依次設(shè)有樣品墊層、膠體金層、硝酸纖維素膜和吸水層，所述樣品墊層設(shè)置有生物素標記p24抗體層，所述膠體金層表面設(shè)置有膠體金標記物層；所述硝酸纖維素膜上表面依次設(shè)有重組HIV-1/HIV-2抗原層的檢測線、親和素層的檢測線和羊抗鼠IgG抗體層的質(zhì)控線。

作為一種優(yōu)選的技術(shù)方案，所述卡蓋和卡體為卡扣連接。

作為一種改進的技術(shù)方案，所述試紙條的樣品墊層與所述卡蓋的稀釋液加樣孔和樣本加樣孔相對應(yīng)。

作為一種改進的技術(shù)方案，所述試紙條的膠體金層和硝酸纖維素膜與所述卡蓋的觀測孔相對應(yīng)。

本實用新型采用以上技術(shù)方案，與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點：

1、本專利利用“親和素-生物素放大系統(tǒng)”，顯著提高試劑檢測靈敏度，能夠檢測早期的血清陽轉(zhuǎn)，縮短了檢測的窗口期，進一步提高了輸血的安全性。

2、由于親和素與生物素間的結(jié)合具有極高的親和力，在提高靈敏度的同時，并不增加非特異性干擾，最大限度地降低試劑的非特異性作用。

3、由于檢測卡靈敏度提高，樣本用量減少，僅需50μL血清、血漿或全血即可實現(xiàn)HIV抗原抗體的檢測，并且操作簡單，檢測速度快，適用于臨床推廣。

附圖說明

附圖1為本實用新型實施例中卡蓋的結(jié)構(gòu)示意圖；

附圖2為本實用新型實施例中卡體的結(jié)構(gòu)示意圖；

附圖3為本實用新型實施例中試紙條的俯視結(jié)構(gòu)示意圖；

附圖4為本實用新型實施例中試紙條的側(cè)視結(jié)構(gòu)示意圖；

其中，1-卡蓋，11-稀釋液加樣孔，12-樣本加樣孔，13-觀測孔，14-安裝標示孔，2-卡體，21-凹槽，3-試紙條，31-樣品墊層，32-膠體金層，33-硝酸纖維素膜，331-重組HIV-1/HIV-2抗原檢測線，332-親和素檢測線，333-羊抗鼠IgG抗體質(zhì)控線，34-吸水層，341-吸水紙，342-安裝標志。

具體實施方式

為了使本實用新型的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白，對本實用新型進行進一步詳細說明。應(yīng)當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本實用新型，并不用于限定本實用新型。

實施例1

如圖1和圖2所示，一種利用生物素-親和素系統(tǒng)檢測HIV抗原抗體的檢測卡，包括卡蓋1、卡體2和試紙條3，卡蓋1上設(shè)有稀釋液加樣孔11、樣本加樣孔12、觀測孔13和安裝標示孔14，卡體2的內(nèi)部設(shè)有放置試紙條3的凹槽21。試紙條3上的樣品墊層31與卡蓋1上的稀釋液加樣孔11和樣本加樣孔12相對應(yīng)；試紙條3上的膠體金層32和硝酸纖維素膜33與卡蓋1上的觀測孔13相對應(yīng)。

如圖3和圖4所示，試紙條3依次設(shè)有樣品墊層31、膠體金層32、硝酸纖維素膜33和吸水層34，樣品墊層31為聚酯膜，聚酯膜固相有生物素標記的p24抗體；膠體金層32為玻璃纖維，固相的膠體金標記物為重組HIV-1/HIV-2抗原和鼠抗p24單克隆抗體；硝酸纖維素膜33依次設(shè)有包被重組HIV-1/HIV-2抗原的檢測線331、包被親和素的檢測線332和包被羊抗鼠IgG抗體的質(zhì)控線333，重組HIV-1/HIV-2抗原的檢測線331、親和素的檢測線332和羊抗鼠IgG抗體的質(zhì)控線333依次被標注字母“T1”、“T2”和“C”。

檢測卡的使用方法：

(1)檢測

a、打開密封鋁箔袋，取出檢測卡，平放于水平桌面上。

b、用微量移液器將50μL血清、血漿或全血標本加入樣本加樣孔，等待1分鐘，加入1滴(約30μL)稀釋液進入稀釋液加樣孔。

c、在20分鐘時讀取檢測結(jié)果，30分鐘后結(jié)果無效。

(2)結(jié)果判斷

a、陰性：在觀測孔標注有字母“C”的質(zhì)控線333上形成一個紅色沉積反應(yīng)標記，在標注有字母“T1”的檢測線331和標注有字母“T2”的檢測線332上無反應(yīng)標記出現(xiàn)，表示被測樣品中無HIV p24抗原，也無HIV-1/HIV-2抗體；

b、陽性：

1、在觀測孔標注有字母“C”的質(zhì)控線333上形成一個紅色沉積反應(yīng)標記，同時在標注有字母“T2”的檢測線332上形成一個紅色沉積反應(yīng)標記，表示HIV p24抗原陽性，HIV抗原的存在意味著感染處在一個早期階段；

2、在觀測孔標注有字母“C”的質(zhì)控線333上形成一個紅色沉積反應(yīng)標記，同時在標注有字母“T1”的檢測線331上形成一個紅色沉積反應(yīng)標記，表示HIV-1/HIV-2抗體陽性；

3、在觀測孔標注有字母“C”的質(zhì)控線333上形成一個紅色沉積反應(yīng)標記，同時在標注有字母“T2”的檢測線332和標注有字母“T1”的檢測線331上各形成一個紅色沉積反應(yīng)標記，表示HIV p24抗原陽性和HIV-1/HIV-2抗體陽性，HIV抗原的存在意味著感染處在一個早期階段；

c、無效：在觀測孔標注有字母“C”的質(zhì)控線333不顯色，表示本次檢測無效。

實施例2

從中國食品藥品檢定研究院購買HIV-1p24抗原國家參考品(批號220015-20150505)，共44份，包括10份陽性、20份陰性和10份最低檢出量(靈敏度)參考品(L1～L10，抗原濃度依次為20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.313、0.156、0.0781、0U/mL)，2份抗原精密性參考品，2份抗原抗體精密度參考品。按照上述檢測卡的操作方法，檢測上述國家參考品，結(jié)果如下：

陽性參考品符合率：10份陽性參考品檢測結(jié)果未出現(xiàn)陰性，陽性符合率為10/10；

陰性參考品符合率：20份陰性參考品檢測結(jié)果未出現(xiàn)陽性，陰性符合率為20/20；

最低檢出量參考品：對于HIV抗原抗體檢測卡，最低檢出量L1-L4均檢出為陽性，L5-L10均檢出為陰性，即檢測卡的靈敏度為2.5U/mL；

抗原抗體精密度參考品：平行檢測10次，反應(yīng)結(jié)果應(yīng)均為陽性，顯色度均一。

本專利不局限于上述具體的實施方式，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員從上述構(gòu)思出發(fā)，不經(jīng)過創(chuàng)造性的勞動，所作出的種種變換，均落在本專利的保護范圍之內(nèi)。