本發(fā)明涉及尿液有形成分分析，具體是一種尿液有形成分分析儀用質(zhì)控物/控制物質(zhì)及其制備方法，采用本方法制備的質(zhì)控物用于體外診斷（ivd）儀器上，包括尿液有形成分分析儀、血細(xì)胞分析儀等的質(zhì)量控制。

背景技術(shù)：

在臨床檢驗(yàn)中，對于尿液有形成分的檢驗(yàn)方法是先對尿液進(jìn)行離心，再取底部沉渣進(jìn)行人工鏡檢，最后得出結(jié)果。這種檢驗(yàn)方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力，且比較依賴檢驗(yàn)人員的經(jīng)驗(yàn)。因此，近幾年一種全自動的尿液有形成分分析儀逐漸取代人工鏡檢的方法對尿液的有形成分進(jìn)行檢驗(yàn)分析，全自動的尿液有形成分分析儀不需要對尿液樣本進(jìn)行離心，可以將收集的尿液樣本直接上機(jī)進(jìn)行檢驗(yàn)分析，并給出結(jié)果。

尿液有形成分分析儀需要每天用質(zhì)控物/控制物質(zhì)進(jìn)行質(zhì)量控制，用以保證檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性。目前市面上成熟的尿液有形成分分析儀的質(zhì)控物/控制物質(zhì)較少，主要是國外品牌，如sysmex、佰樂等；國內(nèi)品牌的質(zhì)控物/控制物質(zhì)受制于技術(shù)的不夠成熟，未能得到市場的認(rèn)可，目前臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室主要采用臨床樣本來充當(dāng)質(zhì)控物/控制物質(zhì)。其制作方法主要包括：

1、對細(xì)胞進(jìn)行固化處理；

2、采用非細(xì)胞物質(zhì)（如塑料顆粒）模擬尿液有形成分；

3、直接用臨床樣本充當(dāng)質(zhì)控物等。

而采用上述方法制作的質(zhì)控物/控制物質(zhì)的主要缺陷包括：

1、質(zhì)控物/控制物質(zhì)本身所包含的項(xiàng)目有限，如只包含紅細(xì)胞的質(zhì)控物，或只包含紅、白細(xì)胞的質(zhì)控物等；

2、紅細(xì)胞和白細(xì)胞的形態(tài)不規(guī)則，難以識別；

3、采用非細(xì)胞物質(zhì)（如塑料顆粒）模擬尿液有形成分，不能用于人工鏡檢；

4、直接用臨床樣本充當(dāng)質(zhì)控物/控制物質(zhì)，保存期有限等。

因此，需要對現(xiàn)有方法進(jìn)行改進(jìn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種尿液有形成分分析儀用質(zhì)控物/控制物質(zhì)及其制備方法，通過對細(xì)胞處理、處理液配方改進(jìn)，制得質(zhì)控物/控制物質(zhì)。

本發(fā)明尿液有形成分分析儀用質(zhì)控物/控制物質(zhì)的制備方法，包括(1)紅細(xì)胞模擬物的制備，(2)白細(xì)胞模擬物的制備，(3)管型細(xì)胞模擬物的制備，（4）質(zhì)控物的制備；其中：

(1)所述紅細(xì)胞模擬物的制備方法，包括如下步驟,

a)用抗凝劑收取動物血液；

b)采用離心的方法分離、收取紅細(xì)胞備用；

c)將所得紅細(xì)胞用細(xì)胞處理液進(jìn)行處理，細(xì)胞與細(xì)胞處理液的比例為1:1～1:50，處理時(shí)間為4～120小時(shí)；

細(xì)胞處理液的主要成分包括：醛類試劑0.5～10%，非離子型去垢劑0.001～4%；

d)用細(xì)胞處理液對細(xì)胞處理完后，進(jìn)行清洗，得到尿液有形成分分析儀用質(zhì)控物/控制物質(zhì)的紅細(xì)胞模擬物，加入儲存液中備用；

(2)所述白細(xì)胞模擬物的制備方法，包括如下步驟,

e)用抗凝劑收取動物血液；

f)采用靜置或離心的方法分離、收取白細(xì)胞備用；

g)將所得白細(xì)胞用溶血?jiǎng)┻M(jìn)行處理，白細(xì)胞與溶血?jiǎng)┑谋壤秊?:1～1:20，處理時(shí)間為1～60分鐘，離心收取白細(xì)胞備用；

h)將所得白細(xì)胞用細(xì)胞處理液進(jìn)行處理，細(xì)胞與細(xì)胞處理液的比例為1:1～1:50，處理時(shí)間為4～120小時(shí)；

細(xì)胞處理液的主要成分包括：醛類試劑0.5～10%，非離子型去垢劑0.001～4%；

i)用細(xì)胞處理液對細(xì)胞處理完后，進(jìn)行清洗，得到尿液有形成分分析儀用質(zhì)控物/控制物質(zhì)的白細(xì)胞模擬物，加入儲存液中備用；

(3)所述管型細(xì)胞模擬物的制備方法，包括如下步驟,

j)收集或培養(yǎng)類似管型細(xì)胞的物質(zhì)；

k)將類似管型細(xì)胞的物質(zhì)用細(xì)胞處理液進(jìn)行處理，細(xì)胞與細(xì)胞處理液的比例為1:1～1:50，處理時(shí)間為4～120小時(shí)；細(xì)胞處理液的主要成分包括：醛類試劑0.5～10%；

l)用細(xì)胞處理液對細(xì)胞處理完后，進(jìn)行清洗，得到尿液有形成分分析儀用質(zhì)控物/控制物質(zhì)的管型細(xì)胞模擬物，加入儲存液中備用；

（4）所述質(zhì)控物/控制物質(zhì)的制備：

m）將上述制備好的紅細(xì)胞模擬物、白細(xì)胞模擬物、管型細(xì)胞模擬物按照測試需求比例混合在一起，即得包含紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型細(xì)胞的尿液有形成分分析儀用質(zhì)控物；

n）將上述制備好的紅細(xì)胞模擬物、白細(xì)胞模擬物按照測試需求比例混合在一起，即得包含紅細(xì)胞、白細(xì)胞的尿液有形成分分析儀用質(zhì)控物/控制物質(zhì)；此質(zhì)控物/控制物質(zhì)可以用于尿液有形成分分析儀或血細(xì)胞分析儀；

o）將上述制備好的紅細(xì)胞模擬物、白細(xì)胞模擬物、管型細(xì)胞模擬物單獨(dú)或任意搭配后制作成測試需求濃度的質(zhì)控物/控制物質(zhì)，用在不同的儀器上，包括尿液有形成分分析儀或血細(xì)胞分析儀。

上述方法中：

步驟a)收取動物血液為豬血、狗血、兔血、鼠血、猴血中其中的一種或幾種。

步驟e)收取動物血液為豬血、狗血、兔血、猴血中其中的一種或幾種。

步驟c)、h)和k)中，醛類試劑為甲醛、乙醛、戊二醛中的一種或幾種。

步驟k)中，類似管型細(xì)胞的物質(zhì)為單細(xì)胞生物、藻類細(xì)胞中的一種或幾種。

所述抗凝劑為現(xiàn)有技術(shù)。

本發(fā)明還包括由上述制備方法制備得到的質(zhì)控物/控制物質(zhì)。

本發(fā)明提供了多種組分的質(zhì)控物/控制物質(zhì)，通過制備紅細(xì)胞模擬物、白細(xì)胞模擬物、管型細(xì)胞模擬物，再將這幾種模擬物單獨(dú)或任意組合成所需的質(zhì)控物/控制物質(zhì)，所得質(zhì)控物/控制物質(zhì)可以用于尿液有形成分分析儀或血細(xì)胞分析儀等。本發(fā)明方法通過對細(xì)胞處理、處理液配方改進(jìn)，制得質(zhì)控物/控制物質(zhì)，可彌補(bǔ)國內(nèi)質(zhì)控物的缺失的不足。

附圖說明

圖1為實(shí)施例1中所得紅細(xì)胞處理前顯微鏡觀察圖；

圖2為實(shí)施例1中所得紅細(xì)胞處理后顯微鏡觀察圖；

圖3為實(shí)施例3中所得白細(xì)胞處理前顯微鏡觀察圖；

圖4為實(shí)施例3中所得白細(xì)胞處理后顯微鏡觀察圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明內(nèi)容作進(jìn)一步的說明，但不是對本發(fā)明的限定。

實(shí)施例1

紅細(xì)胞模擬物的制備：

（1）用抗凝劑收取豬血，抗凝劑為包含檸檬酸三鈉、檸檬酸、葡萄糖的溶液；

（2）采用離心的方法分離、收取紅細(xì)胞備用；

（3）將所得紅細(xì)胞用細(xì)胞處理液進(jìn)行處理，細(xì)胞與細(xì)胞處理液的比例為1:1～1:50，處理時(shí)間為4～-120小時(shí)；細(xì)胞處理液的主要成分包括：甲醛1%，非離子型去垢劑1%；

（4）用細(xì)胞處理液對細(xì)胞處理完后，進(jìn)行清洗，加入儲存液中，制得紅細(xì)胞模擬物。

參照圖1-2，對步驟（3）所得紅細(xì)胞處理前、后顯微鏡觀察圖，通過對比可得：

處理前：紅細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則，不一致，呈柿餅狀；

處理后：紅細(xì)胞形態(tài)規(guī)則、一致，呈球狀。

由處理前后細(xì)胞形態(tài)的變化可得，細(xì)胞處理液對細(xì)胞的形態(tài)有明顯的修飾作用，且處理后的細(xì)胞形態(tài)趨于一致的特性明顯，辨識度高，制得的紅細(xì)胞模擬物非常適合用作質(zhì)控物/控制物質(zhì)的配制。

實(shí)施例2

白細(xì)胞模擬物的制備：

（1）用抗凝劑收取豬血，抗凝劑為包含檸檬酸三鈉、檸檬酸、葡萄糖的溶液；

（2）采用靜置或離心的方法分離、收取白細(xì)胞備用；

其中靜置法收集白細(xì)胞的步驟為：將收集的豬血靜置3--6小時(shí)后，去掉上層血漿，收集血漿層與紅細(xì)胞層之間的白色層，即為白細(xì)胞層；

離心法收集白細(xì)胞的步驟為：將收集的豬血混勻后，分裝于離心瓶中，離心后，去掉上層血漿，收集血漿層與紅細(xì)胞層之間的白色層，即為白細(xì)胞層；

（3）將所取的白細(xì)胞用溶血?jiǎng)┻M(jìn)行處理，白細(xì)胞與溶血?jiǎng)┑谋壤秊?:5，處理時(shí)間為15分鐘，離心收取白細(xì)胞備用；溶血?jiǎng)┑闹饕煞职ǎ涸硭?%；

（4）將所得白細(xì)胞用細(xì)胞處理液進(jìn)行處理，細(xì)胞與細(xì)胞處理液的比例為1:20，處理時(shí)間為48小時(shí)；細(xì)胞處理液的主要成分包括：甲醛4%，非離子型去垢劑0.1%；

（5）用細(xì)胞處理液對細(xì)胞處理完后，進(jìn)行清洗，并加入儲存液中，制得白細(xì)胞模擬物。

參照圖3-4，對步驟（3）所得白細(xì)胞處理前、后顯微鏡觀察圖，通過對比可得：

處理前：細(xì)胞極度不規(guī)則，大小不一，形狀各異，且不能辨識細(xì)胞內(nèi)容物；

處理后：細(xì)胞形態(tài)規(guī)則，呈圓形，可見細(xì)胞內(nèi)容物。

由處理前后細(xì)胞形態(tài)的變化可得，細(xì)胞處理液對細(xì)胞的形態(tài)有明顯的修飾作用，且處理后的細(xì)胞形態(tài)趨于一致的特性明顯，可見細(xì)胞內(nèi)容物，辨識度高，制得的白細(xì)胞模擬物非常適合用作質(zhì)控物/控制物質(zhì)的配制。

實(shí)施例3

白細(xì)胞模擬物的制備：

（1）用抗凝劑收取豬血，抗凝劑為包含檸檬酸三鈉、檸檬酸、葡萄糖的溶液；

（2）采用靜置或離心的方法分離、收取白細(xì)胞備用；

（3）將收取的白細(xì)胞加入細(xì)胞處理液進(jìn)行處理，白細(xì)胞與細(xì)胞處理液的比例為1：1，處理時(shí)間為30分鐘；細(xì)胞處理液的主要成分包括：甲醛1%；

（4）將上述白細(xì)胞液用溶血?jiǎng)┻M(jìn)行處理，白細(xì)胞與溶血?jiǎng)┑谋壤秊?:2，處理時(shí)間為15分鐘，離心收取白細(xì)胞備用；溶血?jiǎng)┑闹饕煞职ǎ涸硭?%；

（5）將所得白細(xì)胞再用細(xì)胞處理液進(jìn)行處理，細(xì)胞與細(xì)胞處理液的比例為1:20，處理時(shí)間為48小時(shí)；細(xì)胞處理液的主要成分包括：甲醛4%，非離子型去垢劑0.1%；

（6）用細(xì)胞處理液對細(xì)胞處理完后，進(jìn)行清洗，并加入儲存液中，制得白細(xì)胞模擬物。

實(shí)施例4

管型細(xì)胞模擬物的制備：

（1）收集裸藻細(xì)胞；

（2）將裸藻細(xì)胞用細(xì)胞處理液進(jìn)行處理，細(xì)胞與細(xì)胞處理液的比例為1:20，處理時(shí)間為48小時(shí)；細(xì)胞處理液的主要成分包括：甲醛4%；

（3）用細(xì)胞處理液對細(xì)胞處理完后，進(jìn)行清洗，并加入儲存液中，制得管型細(xì)胞模擬物。

各質(zhì)控物/控制物質(zhì)的制備：

（1）將上述制備好的紅細(xì)胞模擬物、白細(xì)胞模擬物、管型細(xì)胞模擬物按照測試需求比例混合在一起，既得包含紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型細(xì)胞的尿液有形成分分析儀用質(zhì)控物/控制物質(zhì)；

（2）將上述制備好的紅細(xì)胞模擬物、白細(xì)胞模擬物按照測試需求比例混合在一起，既得包含紅細(xì)胞、白細(xì)胞的尿液有形成分分析儀用質(zhì)控物/控制物質(zhì)；此質(zhì)控物/控制物質(zhì)可以用于尿液有形成分分析儀或血細(xì)胞分析儀等；

（3）將上述制備好的紅細(xì)胞模擬物、白細(xì)胞模擬物、管型細(xì)胞模擬物單獨(dú)或任意搭配后制作成測試需求濃度的質(zhì)控物/控制物質(zhì)，用在不同的儀器上，包括尿液有形成分分析儀或血細(xì)胞分析儀等。