本發(fā)明涉及食品安全技術(shù)領(lǐng)域,具體地說是一種農(nóng)藥殘留快速檢測儀檢測質(zhì)量的評估方法。
背景技術(shù):
隨著食品安全越來越得到重視,國家和社會機(jī)構(gòu)投入大量資金購買各種快速檢測設(shè)備對農(nóng)藥殘留進(jìn)行分析。其中,酶抑制分光光度法是目前較為常用的一種農(nóng)藥殘留快速檢測方法,是基于吸光度的變化進(jìn)行檢測的。
雖然目前各種農(nóng)藥殘留快速檢測儀的生產(chǎn)廠家眾多,但是還沒有一個能夠?qū)r(nóng)藥殘留快速檢測儀的檢測質(zhì)量進(jìn)行評估,檢測質(zhì)量的監(jiān)管長期處于失控狀態(tài):(1)為了取得好的檢測結(jié)果,存在弄虛作假的情況,例如用“水”代替“待測樣品提取液”,無法如實反饋待測樣品的真實農(nóng)藥殘留;(2)檢測操作人員敷衍了事或者操作失誤,漏加或加錯試劑,導(dǎo)致無法如實反饋待測樣品的真實農(nóng)藥殘留;(3)檢測中的酶試劑是否失效;等等。這樣經(jīng)常導(dǎo)致同一樣品在不同檢測機(jī)構(gòu)的檢測結(jié)果完全不同,導(dǎo)致公眾對檢測機(jī)構(gòu)的信任出現(xiàn)瑕疵,也限制了農(nóng)殘檢測行業(yè)的發(fā)展。
因此,為了提升基層檢測對農(nóng)藥殘留風(fēng)險控制的能力,提高農(nóng)藥殘留檢測的管理水平,亟需開發(fā)一種農(nóng)藥殘留快速檢測儀檢測質(zhì)量的評估方法。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
針對現(xiàn)有技術(shù)的不足,本發(fā)明提供了一種農(nóng)藥殘留快速檢測儀檢測質(zhì)量的評估方法。該評估方法能夠提升基層檢測對農(nóng)藥殘留風(fēng)險控制的能力,提高農(nóng)藥殘留檢測的管理水平。
本發(fā)明為實現(xiàn)上述目的,采取以下技術(shù)方案予以實現(xiàn):
一種農(nóng)藥殘留快速檢測儀檢測質(zhì)量的評估方法,包括以下步驟:
a、獲取不同蔬菜品種的標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù):
a1、對同一蔬菜品種,采用至少三個不同來源的樣品來分別制作樣品提取液:用緩沖液浸提樣品得到樣品提取液;
a2、采用至少一臺經(jīng)校準(zhǔn)的農(nóng)藥殘留快速檢測儀,對每一個蔬菜品種的不同樣品提取液重復(fù)多次檢測得到初始吸光度值,計算出每一個蔬菜品種提取液的初始吸光度平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差一,以該初始吸光度平均值作為每一個蔬菜品種提取液的初始吸光度參考值x1;
a3、將每一個蔬菜品種的不同樣品提取液分別放入經(jīng)校準(zhǔn)的農(nóng)藥殘留快速檢測儀的檢測通道中,每一個樣品提取液分別加入酶和顯色劑,吹打混勻,反應(yīng)十分鐘,測得穩(wěn)定后的吸光度值,計算出每一個蔬菜品種提取液添加酶和顯色劑后的吸光度平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差二,以該吸光度平均值作為每一個蔬菜品種提取液添加酶和顯色劑后的吸光度參考值x2;
a4、在上述添加酶和顯色劑反應(yīng)10分鐘后的樣品提取液中加入底物,吹打混勻,檢測至少三分鐘,其中,10~15s讀取一次吸光度值,得到吸光度值-時間曲線,計算出每一個蔬菜品種提取液吸光度值與時間的線性相關(guān)系數(shù)x3;當(dāng)x3為設(shè)定值時,參比數(shù)據(jù)合格,保存參比數(shù)據(jù);
b、農(nóng)藥殘留快速檢測儀對待檢測蔬菜酶抑制率的檢測:
b1、以待檢測蔬菜制作待測樣品提取液:用緩沖液浸提待檢測蔬菜得到待測樣品提取液;
b2、將待測樣品提取液放入經(jīng)校準(zhǔn)的農(nóng)藥殘留快速檢測儀的檢測通道中檢測,獲得待測樣品提取液的初始吸光度值y1;
b3、在待測樣品提取液中分別加入酶和顯色劑,吹打混勻,反應(yīng)十分鐘,測得穩(wěn)定后的吸光度值y2;
b4、在上述添加酶和顯色劑反應(yīng)10分鐘后的待測樣品提取液中加入底物,吹打混勻,檢測至少三分鐘,其中,10~15s讀取一次吸光度值,得到吸光度值-時間曲線,計算出待測樣品提取液吸光度值與時間的線性相關(guān)系數(shù)y3和酶抑制率值;
b5、當(dāng)酶抑制率值≥50%時,為陽性;當(dāng)酶抑制率值<50%時,為陰性;
c、比對:
c1、將待測樣品提取液的初始吸光度值y1與該蔬菜品種提取液的初始吸光度參考值x1相比較,計算出y1與x1的差值絕對值;再將該差值絕對值與標(biāo)準(zhǔn)偏差一進(jìn)行比較,得到該差值絕對值超出標(biāo)準(zhǔn)偏差一的整數(shù)倍數(shù)值,以該整數(shù)倍數(shù)值為偏離幅度一;
c2、將待測樣品提取液穩(wěn)定后的吸光度值y2與該蔬菜品種提取液的吸光度參考值x2相比較,計算出y2與x2的差值絕對值;再將該差值絕對值與標(biāo)準(zhǔn)偏差二進(jìn)行比較,得到該差值絕對值超出標(biāo)準(zhǔn)偏差二的整數(shù)倍數(shù)值,以該整數(shù)倍數(shù)值為偏離幅度二;
d、得出評估結(jié)果:
d1:將偏離幅度一與預(yù)設(shè)偏離幅度一相比較,得出評估結(jié)果一;
d2:將偏離幅度二與預(yù)設(shè)偏離幅度二相比較,得出評估結(jié)果二;
d3:將待測樣品提取液的線性相關(guān)系數(shù)y3與預(yù)設(shè)值相比較;得出評估結(jié)果三。
優(yōu)選地,所述評估結(jié)果一至三均為合格與否或等級判定。
優(yōu)選地,當(dāng)評估結(jié)果均為合格時,所測得的酶抑制率值有效。當(dāng)評價結(jié)果一至三中有一個為不合格時,所測得的酶抑制率值無效。
優(yōu)選地,當(dāng)評價結(jié)果均為合格時,將待測蔬菜的檢測數(shù)據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù)中,對標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù)進(jìn)行更新。
優(yōu)選地,所述步驟b中,檢測待測樣品提取液的酶抑制率值時,以與待測樣品提取液等量的緩沖液作為空白對照組。
酶抑制率i的計算公式如下:i=(△ac-△as)/△ac×100%;其中:△ac為檢測3min空白對照組吸光度的變化;△as為檢測3min樣品溶液吸光度的變化。
優(yōu)選地,步驟d3中的預(yù)設(shè)值為[0.8,1],當(dāng)d3∈[0.8,1]時,評估結(jié)果三為合格;當(dāng)
優(yōu)選地,步驟a4中的設(shè)定值為[0.8,1],當(dāng)x3∈[0.8,1]時,參比數(shù)據(jù)合格,保存參比數(shù)據(jù);當(dāng)
優(yōu)選地,所述制作樣品提取液或制作待測樣品提取液,具體為:菜葉2g/瓜果皮4g/整株,加入10ml緩沖液,浸泡4分鐘;其中整株浸泡制作提取液的包括蔥、辣椒、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、土豆、蘑菇和番茄。
優(yōu)選地,所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液,所述酶為膽堿酯酶,所述顯色劑為二硫代二硝基苯甲酸,所述底物為神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物類似物。
優(yōu)選地,所述緩沖液為11.9g無水磷酸氫二鉀與3.2g磷酸二氫鉀,用1000ml蒸餾水溶解;所述酶為乙酰膽堿酯酶;所述底物為硫代乙酰膽堿、碘化硫代乙酰膽堿或碘化硫代丁酰膽堿。
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果如下:
本發(fā)明提供一種農(nóng)藥殘留快速檢測儀檢測質(zhì)量的評估方法,通過預(yù)先獲取不同蔬菜品種的標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù),當(dāng)操作人員對待檢測蔬菜樣品進(jìn)行檢測時,將測得的待檢測蔬菜樣品提取液的初始吸光度值、添加酶和顯色劑反應(yīng)10分鐘后穩(wěn)定的吸光度值和該蔬菜品種的標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù)一一比對,另外,將待測樣品提取液吸光度值與時間的線性相關(guān)系數(shù)y3與預(yù)設(shè)值相比對,可以對操作人員的操作是否規(guī)范作出評價,從而判定檢測獲得的酶抑制率值是否有效。本發(fā)明的評估方法能夠提升基層檢測對農(nóng)藥殘留風(fēng)險控制的能力,提高農(nóng)藥殘留檢測的管理水平。
附圖說明
圖1是實施例2中一種農(nóng)藥殘留快速檢測儀的結(jié)構(gòu)示意圖;
圖2是實施例2中一種農(nóng)藥殘留快速檢測儀的另一結(jié)構(gòu)示意圖;
圖3是實施例2中一種農(nóng)藥殘留快速檢測儀的每個檢測通道的光路結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的描述,但需要說明的是,實施例并不對本發(fā)明要求保護(hù)范圍的構(gòu)成限制。
實施例1
一種農(nóng)藥殘留快速檢測儀檢測質(zhì)量的評估方法,包括以下步驟:
a、獲取不同蔬菜品種的標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù):
a1、對同一蔬菜品種,采用至少三個不同來源的樣品來分別制作樣品提取液:用緩沖液浸提樣品得到樣品提取液;
a2、采用至少一臺經(jīng)校準(zhǔn)的農(nóng)藥殘留快速檢測儀,對每一個蔬菜品種的不同樣品提取液重復(fù)多次檢測得到初始吸光度值,計算出每一個蔬菜品種提取液的初始吸光度平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差一,以該初始吸光度平均值作為每一個蔬菜品種提取液的初始吸光度參考值x1;
a3、將每一個蔬菜品種的不同樣品提取液分別放入經(jīng)校準(zhǔn)的農(nóng)藥殘留快速檢測儀的檢測通道中,每一個樣品提取液分別加入酶和顯色劑,吹打混勻,反應(yīng)十分鐘,測得穩(wěn)定后的吸光度值,計算出每一個蔬菜品種提取液添加酶和顯色劑后的吸光度平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差二,以該吸光度平均值作為每一個蔬菜品種提取液添加酶和顯色劑后的吸光度參考值x2;
a4、在上述添加酶和顯色劑反應(yīng)10分鐘后的樣品提取液中加入底物,吹打混勻,檢測至少三分鐘,其中,10~15s讀取一次吸光度值,得到吸光度值-時間曲線,計算出每一個蔬菜品種提取液吸光度值與時間的線性相關(guān)系數(shù)x3;當(dāng)x3為設(shè)定值時,參比數(shù)據(jù)合格,保存參比數(shù)據(jù)。
本實施例中,設(shè)定值為[0.8,1],當(dāng)x3∈[0.8,1]時,參比數(shù)據(jù)合格,保存參比數(shù)據(jù);當(dāng)
b、農(nóng)藥殘留快速檢測儀對待檢測蔬菜酶抑制率的檢測:
b1、以待檢測蔬菜制作待測樣品提取液:用緩沖液浸提待檢測蔬菜得到待測樣品提取液;
b2、將待測樣品提取液放入經(jīng)校準(zhǔn)的農(nóng)藥殘留快速檢測儀的檢測通道中檢測,獲得待測樣品提取液的初始吸光度值y1;
b3、在待測樣品提取液中分別加入酶和顯色劑,吹打混勻,反應(yīng)十分鐘,測得穩(wěn)定后的吸光度值y2;
b4、在上述添加酶和顯色劑反應(yīng)10分鐘后的待測樣品提取液中加入底物,吹打混勻,檢測至少三分鐘,其中,10~15s讀取一次吸光度值,得到吸光度值-時間曲線,計算出待測樣品提取液吸光度值與時間的線性相關(guān)系數(shù)y3和酶抑制率值;
b5、當(dāng)酶抑制率值≥50%時,為陽性;當(dāng)酶抑制率值<50%時,為陰性。
c、比對:
c1、將待測樣品提取液的初始吸光度值y1與該蔬菜品種提取液的初始吸光度參考值x1相比較,計算出y1與x1的差值絕對值;再將該差值絕對值與標(biāo)準(zhǔn)偏差一進(jìn)行比較,得到該差值絕對值超出標(biāo)準(zhǔn)偏差一的整數(shù)倍數(shù)值,以該整數(shù)倍數(shù)值為偏離幅度一;
c2、將待測樣品提取液穩(wěn)定后的吸光度值y2與該蔬菜品種提取液的吸光度參考值x2相比較,計算出y2與x2的差值絕對值;再將該差值絕對值與標(biāo)準(zhǔn)偏差二進(jìn)行比較,得到該差值絕對值超出標(biāo)準(zhǔn)偏差二的整數(shù)倍數(shù)值,以該整數(shù)倍數(shù)值為偏離幅度二。
d、得出評估結(jié)果:
d1:將偏離幅度一與預(yù)設(shè)偏離幅度一相比較,得出評估結(jié)果一;
d2:將偏離幅度二與預(yù)設(shè)偏離幅度二相比較,得出評估結(jié)果二;
d3:將待測樣品提取液的線性相關(guān)系數(shù)y3與預(yù)設(shè)值相比較;得出評估結(jié)果三。
本實施例中的所述評價結(jié)果一至三均為合格與否。
評價規(guī)則為:評價結(jié)果一至二中,檢測結(jié)果中如果差值絕對值超出2倍標(biāo)準(zhǔn)偏差,則判定不合格。步驟d3中的預(yù)設(shè)值為[0.8,1],當(dāng)d3∈[0.8,1]時,評估結(jié)果三為合格;當(dāng)
本發(fā)明的評價規(guī)則可以根據(jù)超出參考值的標(biāo)準(zhǔn)偏差的幅度設(shè)定,也可以根據(jù)偏離幅度進(jìn)行優(yōu)、良、差等級判定。
評價結(jié)果一如為不合格或差,則表示放入檢測儀器中檢測的待測蔬菜樣品提取液并不是提取自待測蔬菜,可能是以其他液體冒充(弄虛作假);或者是操作失誤導(dǎo)致張冠李戴(檢測某一蔬菜卻選擇另一蔬菜進(jìn)行比對,導(dǎo)致錯誤);等等。此時,檢測得到的酶抑制率值無效。評價結(jié)果一的原理來自于:相同蔬菜樣品提取液的初始吸光度值基本一致。
評價結(jié)果二如為不合格或差,則表示沒有按照要求加入酶和顯色劑,操作人員的操作存在失誤,從而導(dǎo)致檢測得到的酶抑制率值無效。評價結(jié)果二的原理來自于:相同蔬菜樣品的提取液加入酶和顯色劑反應(yīng)十分鐘穩(wěn)定后的吸光度值基本一致。
評價結(jié)果三如為不合格或差,則表示添加的酶試劑失效,可能是由于購買的酶試劑質(zhì)量差或操作人員保存不當(dāng)導(dǎo)致酶失活等,從而導(dǎo)致檢測得到的酶抑制率值無效。評價結(jié)果三的原理來自于:添加酶試劑的活性如果符合測試要求,則在測試的至少三分鐘內(nèi),吸光度值與時間的線性相關(guān)系數(shù)很強(qiáng),該線性相關(guān)系數(shù)非常接近于1,如≥0.8。
當(dāng)評估結(jié)果一至三均為合格時,所測得的酶抑制率值有效。當(dāng)評價結(jié)果一至三中有一個為不合格時,所測得的酶抑制率值無效。
當(dāng)評價結(jié)果一至三均為合格時,將待測蔬菜的檢測數(shù)據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù)中,對標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù)進(jìn)行更新。
步驟b中,檢測待測樣品提取液的酶抑制率值時,以與待測樣品提取液等量的緩沖液作為空白對照組。緩沖液為磷酸鹽緩沖液。可以是11.9g無水磷酸氫二鉀與3.2g磷酸二氫鉀,用1000ml蒸餾水溶解而成。
酶抑制率i的計算公式如下:i=(△ac-△as)/△ac×100%;其中:△ac為檢測3min空白對照組吸光度的變化;△as為檢測3min樣品溶液吸光度的變化。
制作樣品提取液或制作待測樣品提取液,具體為:菜葉2g/瓜果皮4g/整株,加入10ml緩沖液,浸泡4分鐘。其中整株浸泡制作提取液的包括蔥、辣椒、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、土豆、蘑菇和番茄,這些蔬菜品種的汁液中含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性,采取浸提是為了避免次生物質(zhì)干擾。
酶為膽堿酯酶,顯色劑為二硫代二硝基苯甲酸,底物為神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物類似物。優(yōu)選地,酶為乙酰膽堿酯酶;底物為硫代乙酰膽堿、碘化硫代乙酰膽堿或碘化硫代丁酰膽堿。
應(yīng)當(dāng)注意的是,本發(fā)明中“a、獲取不同蔬菜品種的標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù)”和“b、農(nóng)藥殘留快速檢測儀對待檢測蔬菜酶抑制率的檢測”這兩個檢測步驟中,樣品提取液和待測樣品提取液放入檢測儀中后可以不取出來添加試劑(酶、顯色劑和底物),所有試劑可以直接加入放置在檢測通道中的比色皿中,添加后吹打混勻即可。
作為本實施例的優(yōu)選方案之一:在進(jìn)行步驟“b、農(nóng)藥殘留快速檢測儀對待檢測蔬菜酶抑制率的檢測”時,農(nóng)藥殘留快速檢測儀可以是多檢測通道的,如24個檢測通道。在這24個檢測通道中可以分別放置空白對照組和待測樣品組,依次進(jìn)行初始吸光度值檢測、添加酶和顯色劑穩(wěn)定后的吸光度值檢測、添加底物后至少三分鐘的檢測。對于添加底物后的檢測,由于有24個檢測通道,底物加入第一個比色皿后開始檢測,24個通道加完以后時間已經(jīng)過去十幾秒-幾分鐘了,因此,檢測時間超過三分鐘。通過測得的吸光度值-時間曲線的線性相關(guān)系數(shù),可以分析酶試劑是否有效,并通過線性區(qū)間判斷反應(yīng)時間,判斷檢測過程的有效性。
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果如下:
本發(fā)明提供一種農(nóng)藥殘留快速檢測儀檢測質(zhì)量的評估方法,通過預(yù)先獲取不同蔬菜品種的標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù),當(dāng)操作人員對待檢測蔬菜樣品進(jìn)行檢測時,將測得的待檢測蔬菜樣品提取液的初始吸光度值、添加酶和顯色劑反應(yīng)10分鐘后穩(wěn)定的吸光度值和該蔬菜品種的標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù)一一比對,另外,將待測樣品提取液吸光度值與時間的線性相關(guān)系數(shù)y3與預(yù)設(shè)值相比對,可以對操作人員的操作是否規(guī)范作出評價,從而判定檢測獲得的酶抑制率值是否有效。本發(fā)明的評估方法能夠提升基層檢測對農(nóng)藥殘留風(fēng)險控制的能力,提高農(nóng)藥殘留檢測的管理水平。
實施例2
實施例1中所采用的經(jīng)校準(zhǔn)的農(nóng)藥殘留快速檢測儀,可以是現(xiàn)有技術(shù)中任意一種,也可以是實施例2公開的農(nóng)藥殘留快速檢測儀。
酶抑制法是根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制昆蟲中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿的活性,造成神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿的積累,影響正常神經(jīng)傳導(dǎo),使昆蟲中毒致死這一昆蟲毒理學(xué)原理進(jìn)行檢測的。根據(jù)這一原理,通過將特異性抑制膽堿酯酶(che)與樣品提取液反應(yīng),若che受到抑制,就表明樣品提取液中含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯農(nóng)藥(農(nóng)藥殘留快速檢測儀采用此方法)。
如圖1~2所示,一種農(nóng)藥殘留快速檢測儀,該檢測儀包括樣品槽、控制電路、計算機(jī)/平板電腦、微型打印機(jī)和電源。電源用于支持整個儀器的運作。樣品槽用于放置比色皿,比色皿是農(nóng)藥殘留檢測試劑反應(yīng)的容器??刂齐娐酚糜谄桨咫娔X/微型計算機(jī)與其他元件的信息互通。微型打印機(jī)屬于熱敏打印機(jī),用于打印數(shù)據(jù)的檢測結(jié)果。平板電腦/微型計算機(jī)安裝控制整個農(nóng)殘儀的軟件,控制整個檢測操作流程,調(diào)控控制電路的全方位信息。
實施例1中的評估方法可以通過計算機(jī)軟件來實施,如一套專用的評估分析軟件。對于提供數(shù)據(jù)接口的農(nóng)藥殘留快速檢測儀,分析軟件可以通過計算機(jī)/平板電腦與農(nóng)藥殘留快速檢測儀相連接,直接從檢測儀中讀取并存儲不同蔬菜品種的標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù),并讀取待測蔬菜檢測數(shù)據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù)相比對,從而得出評價結(jié)果,判定酶抑制率值檢測是否有效。對于不能直接連接的檢測儀,分析軟件也可以通過人工輸入檢測數(shù)據(jù)來得出評價結(jié)果。
檢測儀中的控制電路包括光電檢測系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)和人機(jī)交互系統(tǒng)。光電檢測系統(tǒng)包括與樣品槽一一匹配的光源與光檢測器、電流控制電路和放大電路。光源通過電流控制電路與數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)電連接;光檢測器通過放大電路與數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)電連接。光源為中心波長412nm的led,電流控制電路限制通過led的電流來控制led的發(fā)光強(qiáng)度,412nmled做光源是檢測農(nóng)藥殘留的標(biāo)準(zhǔn)光源,乙酰膽堿酶在412nm具有最大吸收峰。光電檢測系統(tǒng)采用硅光電池做光檢測器。
每個通道光路結(jié)構(gòu)如圖3所示;光檢測器信號通過放大電路進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,經(jīng)數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)把模擬信號轉(zhuǎn)變成數(shù)字信號。
數(shù)據(jù)采集系統(tǒng):其核心是arm微控制器lpc1752,lpc1752是基于cortex-m3內(nèi)核的微控制器,操作頻率可達(dá)100mhz。它集成了64k的flash存儲器,16kb的ram,6路12位adc,轉(zhuǎn)換速率高達(dá)200khz,集成4個uart接口,一個usb2.0接口,一個帶獨立電池供電的rtc和多達(dá)52個io口。數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)主要完成采集/定時采集放入樣品槽的試劑的吸光度值/吸光度值變化,并存儲,通過uart、usb等通信接口上傳到平板電腦或計算機(jī)。
溫度控制系統(tǒng):樣品反應(yīng)池下面安裝發(fā)熱絲,采用數(shù)字式溫度傳感器,探測樣品反應(yīng)池的溫度,通過pid算法控制發(fā)熱絲加熱功率,實現(xiàn)恒溫37℃的樣品池,能有效保證反應(yīng)酶活性(酶活性最佳穩(wěn)定為37℃)。
人機(jī)交互系統(tǒng):arm微控制器中的多個uart接口和usb接口,可以搭配各種通訊模塊如wifi,藍(lán)牙等,形成數(shù)據(jù)傳輸系統(tǒng),方便與計算機(jī)、平板電腦連接,而且也可以連接其他功能模塊如液晶屏,打印機(jī)等。用戶對農(nóng)殘儀的操作通過平板電腦或計算機(jī)進(jìn)行的。
使用農(nóng)藥殘留快速檢測儀檢測待測蔬菜的酶抑制率,包括以下步驟:
1、試劑配制:
緩沖液:分別稱取11.9g無水磷酸氫二鉀與3.2g磷酸二氫鉀,溶解于1000ml蒸餾水中。
乙酰膽堿酯酶:根據(jù)酶活力用緩沖液溶解,3min的吸光值變化δa0值應(yīng)控制在0.3以上。搖勻后在0~5℃冰箱中保存,保存期不超過4天。
底物:稱取25.0mg碘化乙酰硫代膽堿,用3.0ml緩沖液溶解,在0~5℃下保存。保存期不超過2周。
顯色劑:分別稱取160mg二硫代二硝基苯甲酸和15.6mg碳酸氫鈉,用20ml緩沖液溶解,4℃冰箱保存。
2、樣品前處理:
開始檢測前,需開機(jī)進(jìn)行儀器光源預(yù)熱,蓋上遮光蓋,確保每個孔的透射比為100%。稱取菜葉2g/瓜果皮4g/整株放入樣品杯中,加入10ml緩沖液,振蕩混勻后靜置4分鐘,待檢。其中整株浸泡制作提取液的包括蔥、辣椒、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、土豆、蘑菇和番茄,這些蔬菜品種的汁液中含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性,采取浸提是為了避免次生物質(zhì)干擾。
3、對照及樣品檢測:
空白對照組:用移液器吸取2.5ml稀釋液到對照比色皿中(對照孔每排只需添加一孔,且為第一位置)。
用移液器吸取2.5ml樣品提取液到樣品比色皿中,將比色皿放入樣品槽觀察并記錄初始吸光度值。在農(nóng)殘儀操作系統(tǒng)上輸入樣品來源、樣品名稱。
每個比色皿中都加入0.1ml酶和0.1ml顯色劑,吹打混勻,反應(yīng)十分鐘,測得樣品提取液穩(wěn)定后的吸光度值??梢?0-15s檢測一次吸光度值,也可以直接10分鐘后檢測最后的吸光度值。
每個比色皿中都加入底物,吹打混勻,檢測至少三分鐘,其中,10~15s讀取一次吸光度值,得到吸光度值-時間曲線,計算出待測樣品提取液吸光度值與時間的線性相關(guān)系數(shù)y3和酶抑制率值。
4、比對和結(jié)果:
步驟3中檢測得到的數(shù)據(jù)與預(yù)先獲取的不同蔬菜品種的標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù)相比對,將待測樣品提取液吸光度值與時間的線性相關(guān)系數(shù)y3與預(yù)設(shè)值相比對,得出評價結(jié)果。當(dāng)評價結(jié)果均為合格時,酶抑制率值有效。
不同蔬菜品種的標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù)的獲取可以參照步驟3,同一蔬菜品種,采用至少三個不同來源的樣品。當(dāng)評價結(jié)果均為合格時,酶抑制率值有效時,可以將待測蔬菜的檢測數(shù)據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù)中,對標(biāo)準(zhǔn)參比數(shù)據(jù)進(jìn)行更新。
以上對本發(fā)明實施例所提供的技術(shù)方案進(jìn)行了詳細(xì)介紹,本文中應(yīng)用了具體個例對本發(fā)明實施例的原理以及實施方式進(jìn)行了闡述,以上實施例的說明只適用于幫助理解本發(fā)明實施例的原理;同時,對于本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員,依據(jù)本發(fā)明實施例,在具體實施方式以及應(yīng)用范圍上均會有改變之處,綜上所述,本說明書內(nèi)容不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。