本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及皮膚病鑒別診斷，更具體地涉及一種皮膚病鑒別診斷用的檢測(cè)盒。

技術(shù)背景

紅斑、丘疹、鱗屑類皮膚病及出現(xiàn)類似皮疹形態(tài)的皮膚病常見有尋常型銀屑病(點(diǎn)滴型、斑塊型)、多形紅斑、玫瑰糠疹、單純糠疹、環(huán)形紅斑、二期梅毒疹、軀干脂溢性皮炎、慢性濕疹、神經(jīng)性皮炎、發(fā)疹性藥疹等。從鑒別診斷角度看，典型病例根據(jù)各自臨床特點(diǎn)可以用肉眼進(jìn)行鑒別，但在臨床實(shí)踐中肉眼鑒別均有困難和不確定性。例如難以區(qū)別軀干部位不典型的點(diǎn)滴狀銀屑病與軀干玫瑰糠疹、下肢不典型斑塊狀銀屑病與下肢錢幣狀濕疹、軀干不典型二期梅毒疹與軀干部發(fā)疹性藥疹等。此時(shí)，需要借助相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查及皮膚組織病理檢查進(jìn)行鑒別。

皮膚病位于體表，病理活檢相對(duì)容易，因此是皮膚科最常用的實(shí)驗(yàn)診斷方法。但是，因組織病理取材需要切取或鉆取皮膚全層，部分患者依從性差不能很好配合，而無創(chuàng)傷性實(shí)驗(yàn)診斷更容易被患者接受。所以，探索無創(chuàng)傷性的皮疹區(qū)表皮脫落細(xì)胞診斷方法，來鑒別部分肉眼看來相似的皮膚病有極其重要的意義。

角質(zhì)形成細(xì)胞從基底層逐層演化到角質(zhì)層時(shí)，大約需要28天(即表皮通過時(shí)間)。正常皮膚最外層的角質(zhì)層為死亡的脫落細(xì)胞，無細(xì)胞核，分不清細(xì)胞結(jié)構(gòu)，由角質(zhì)蛋白性碎屑構(gòu)成。但在某些皮膚病時(shí)，中性細(xì)胞、淋巴細(xì)胞可以進(jìn)入表皮，同時(shí)因角質(zhì)形成細(xì)胞的表皮通過時(shí)間縮短，表皮角質(zhì)層出現(xiàn)角化不全(即出現(xiàn)有細(xì)胞核的鱗狀細(xì)胞)。

常見紅斑丘疹鱗屑皮膚病組織病理學(xué)有關(guān)表皮層細(xì)胞學(xué)的研究進(jìn)展^[1-2]如下：

1.尋常型銀屑病(點(diǎn)滴型與斑塊型等)組織病理的表皮層特點(diǎn)是表皮增生，在角質(zhì)層有較多角化不全細(xì)胞(即角質(zhì)形成細(xì)胞未角化完全，實(shí)質(zhì)是一種鱗狀細(xì)胞)及中性粒細(xì)胞形成的微膿腫(muro微膿腫)，兩類細(xì)胞可以相互層疊，構(gòu)成“三明治”樣結(jié)構(gòu)。以中性粒細(xì)胞微膿腫為特征是尋常型銀屑病最特征性的組織病理表現(xiàn)。

2.二期梅毒疹表皮增生，角質(zhì)層有角化不全及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)或中性粒細(xì)胞微膿腫。

3.脂溢性皮炎表皮增生，表皮角質(zhì)層的毛囊口的“唇緣”有角化不全細(xì)胞及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)及其微膿腫。

4.多形紅斑組織病理表現(xiàn)為表皮層及其角質(zhì)層有散在或融合的壞死細(xì)胞，無中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。

5.玫瑰糠疹表皮有增生、紅細(xì)胞外滲、角化不全等，角質(zhì)層無中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)或其微膿腫。

6.慢性濕疹、慢性苔蘚樣糠疹、發(fā)疹性藥疹，在它們組織病理的表皮輕重不等的增生，在角質(zhì)層都有角化不全，而無中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)或中性粒細(xì)胞微膿腫。

7.原發(fā)性皮膚t細(xì)胞淋巴瘤(曾用名蕈樣肉芽腫)，表皮層有t淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，也可由角化不全，無中性細(xì)胞浸潤(rùn)及中性細(xì)胞微膿腫。

概括起來，上述紅斑丘疹鱗屑類皮膚病具有的共同特性是表皮角質(zhì)層細(xì)胞中均有角化不全細(xì)胞即皮膚鱗狀細(xì)胞，而只有尋常型銀屑病、二期梅毒疹及脂溢性皮炎的角質(zhì)層有中性粒細(xì)胞及其微膿腫。而只有原發(fā)性皮膚t細(xì)胞淋巴瘤(曾用名蕈樣肉芽腫)，表皮層有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。我們知道，中性粒細(xì)胞核為桿狀核、分葉核、或核碎裂與核塵是其特點(diǎn)；而角化不全細(xì)胞即表皮鱗狀細(xì)胞為大圓形核或橢圓細(xì)胞核；淋巴細(xì)胞也是圓形核細(xì)胞，但細(xì)胞質(zhì)比例少，細(xì)胞也比鱗狀細(xì)胞偏小。

本發(fā)明者根據(jù)皮疹表層組織病理特點(diǎn)的不同，提供一種無創(chuàng)傷性表皮脫落細(xì)胞鑒別診斷檢測(cè)盒，采用透明膠帶粘貼皮疹區(qū)表皮脫落細(xì)胞，采取特定的取樣器鉆取粘附了皮疹區(qū)表皮脫落細(xì)胞的透明膠帶，然后對(duì)其進(jìn)行蘇木素染色和鏡檢，從而完成了本發(fā)明。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種皮膚病鑒別診斷檢測(cè)盒，包含：蘇木素染液配制原料、透明膠帶和使用說明書，所述說明書上包括如下內(nèi)容：膠帶取樣方法；蘇木素染液的配制方法、染色方法；及蘇木素染色法在紅斑丘疹鱗屑類皮膚病鑒別診斷上的應(yīng)用。

進(jìn)一步說，所述紅斑丘疹鱗屑類皮膚病分別以皮膚表層鱗狀細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞為特征。即本發(fā)明的檢測(cè)盒可用于鑒別診斷分別以皮膚表層鱗狀細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞為特征的皮膚病。

本發(fā)明檢測(cè)盒的說明書上寫明膠帶取樣方法包括如下步驟：用剪成小塊的透明膠帶粘貼皮疹區(qū)，保留數(shù)秒鐘后揭下棄去不用，另取同樣大小的透明膠帶粘貼皮疹區(qū)，保留數(shù)秒鐘后揭下，固定在載玻片上，粘有細(xì)胞的一面朝上，制成固定了皮疹區(qū)表層脫落細(xì)胞樣本的載玻片。

一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的檢測(cè)盒還包含透明膠帶取樣器，所述透明膠帶取樣器包括壓頭和手柄，所述手柄與壓頭可拆卸地連接，所述壓頭包括一體成型的頭身部和刀刃部，所述頭身部呈圓形管狀，所述刀刃部呈橢圓形管狀，所述刀刃部的側(cè)面設(shè)有側(cè)通孔。

在這個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，皮疹區(qū)表層脫落細(xì)胞的取樣方法包括如下步驟：用剪成小塊的透明膠帶粘貼皮疹區(qū)，保留數(shù)秒鐘后棄去不用，另取同樣大小的透明膠帶粘貼皮疹區(qū)，保留數(shù)秒鐘后揭下，膠面向上放在硬橡膠板上，用透明膠帶取樣器將透明膠帶鉆取一片，然后用牙簽從取樣器刀刃部的側(cè)通孔推出部分透明膠帶標(biāo)本，再用鑷子取出整個(gè)透明膠帶標(biāo)本，輕放于載玻片上，制成固定了皮疹區(qū)表層脫落細(xì)胞樣本的載玻片。

本發(fā)明的檢測(cè)盒中，蘇木素染液配制原料為：獨(dú)立包裝的蘇木素、硫酸鋁鉀和碘酸鈉。

本發(fā)明檢測(cè)盒的說明書上寫明蘇木素染液的配制方法包括如下步驟：將蘇木素6g溶于100ml無水乙醇，將硫酸鋁鉀150g溶于2000ml蒸餾水，將上述兩種溶液與900ml甘油一起混合，最后加入冰醋酸120ml和碘酸鈉1.2g。

本發(fā)明檢測(cè)盒的說明書上寫明蘇木素染液的染色方法包括如下步驟：

(1)將固定了皮疹區(qū)表層脫落細(xì)胞樣本的載玻片用95％酒精固定，用蘇木素液染色5分鐘；

(2)用流水稍洗去蘇木素液1-3秒鐘；

(3)蒸餾水過洗1-2秒鐘；

(4)無水乙醇過洗5-10秒鐘；

(5)用中性樹膠封固染色后的樣本。

本發(fā)明基于不同皮膚病患者皮疹表層組織病理特點(diǎn)的不同，主要根據(jù)細(xì)胞核形態(tài)的不同，用透明膠帶取皮疹表層細(xì)胞，以蘇木素染色來鑒別不同種類的細(xì)胞，進(jìn)而鑒別不同的皮膚病。例如，鑒別點(diǎn)滴狀銀屑病與玫瑰糠疹；斑塊狀銀屑病與局限性慢性濕疹；不典型斑塊狀銀屑病與錢幣狀濕疹；點(diǎn)滴狀銀屑病與多形紅斑；濕疹樣皮炎與蕈樣肉芽腫；花斑癬與二期梅毒疹；以及其它分別以皮疹表層鱗狀細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞為特征的皮膚病。

本發(fā)明的有益效果

傳統(tǒng)皮膚組織病理活檢對(duì)于部分依從性差的患者較難實(shí)施，其雖然具有可觀察到表皮、真皮及皮下組織細(xì)胞全層病變的優(yōu)點(diǎn)，但缺點(diǎn)在于，僅僅在一個(gè)非常小的縱切面上觀察細(xì)胞，如果切片沒有切到病灶區(qū)域，就會(huì)遺漏病理改變。

本發(fā)明采用透明膠帶無創(chuàng)傷性取樣，患者依從性好。又采用特定的帶有側(cè)通孔的橢圓形壓孔器鉆取透明膠帶取材標(biāo)本，鉆頭的鉆刃為橢圓形，使其鉆取的透明膠帶標(biāo)本與某些橢圓形皮疹一致，最大限度地保留皮疹區(qū)標(biāo)本，排除了非皮疹區(qū)標(biāo)本，不易遺漏病理改變。鉆頭帶有的側(cè)通孔方便伸入牙簽等捅出進(jìn)入鉆頭口內(nèi)的透明膠帶標(biāo)本。

傳統(tǒng)透明膠帶粘貼皮疹區(qū)脫落細(xì)胞所用的he染色法需要20余個(gè)步驟，耗時(shí)較長(zhǎng)。鑒于本發(fā)明所觀察表皮脫落細(xì)胞主要是用細(xì)胞核的形態(tài)來鑒別細(xì)胞種類，改用以細(xì)胞核染色為主的蘇木素染色法后，與he染色法相比，不影響檢驗(yàn)結(jié)果，而所用染色時(shí)間小于he染色法二分之一，并且節(jié)約了二分之一的試劑成本，同時(shí)也提高了工作效率，縮短了出化驗(yàn)報(bào)告的時(shí)間。

使用本發(fā)明的檢測(cè)盒，至少可將尋常型銀屑病(包括斑塊狀銀屑病、點(diǎn)滴狀銀屑病)與錢幣樣濕疹、玫瑰糠疹、濕疹樣皮炎、慢性單純苔蘚樣糠疹等紅斑性疾病區(qū)別開來。

附圖的簡(jiǎn)單說明

圖1為透明膠帶取樣器的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖2為透明膠帶取樣器壓頭的俯視圖；

圖3為圖2的a-a’向視圖；

圖4為圖2的b-b’向視圖。

圖中：1、手柄；2、壓頭；21、頭身部；22、刀刃部；221、側(cè)通孔。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例和檢測(cè)例，更具體地說明本發(fā)明的內(nèi)容，并對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但這些實(shí)施例和檢測(cè)例并非對(duì)本發(fā)明的任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員在本說明書的啟示下對(duì)本發(fā)明實(shí)施中所作的任何變動(dòng)都將屬于本發(fā)明權(quán)利要求書的范圍內(nèi)。

實(shí)施例1：皮疹區(qū)表層脫落細(xì)胞取樣方法

用剪成小塊的透明膠帶粘貼皮疹區(qū)，保留數(shù)秒鐘后棄去不用，另取同樣大小的透明膠帶粘貼皮疹區(qū)，保留數(shù)秒鐘后揭下，固定在載玻片上，粘有細(xì)胞的一面朝上，制成固定了皮疹區(qū)表層脫落細(xì)胞樣本的載玻片。

實(shí)施例2：皮疹區(qū)表層脫落細(xì)胞取樣方法

用剪成小塊的透明膠帶粘貼皮疹區(qū)，保留數(shù)秒鐘后棄去不用，另取同樣大小的透明膠帶粘貼皮疹區(qū)，保留數(shù)秒鐘后揭下，膠面向上放在硬橡膠板上，用圖1所示透明膠帶取樣器將透明膠帶鉆取一片，然后用牙簽從取樣器刀刃部的側(cè)通孔推出部分透明膠帶標(biāo)本，再用鑷子取出整個(gè)透明膠帶標(biāo)本，輕放于載玻片上，制成固定了皮疹區(qū)表層脫落細(xì)胞樣本的載玻片。

實(shí)施例3：蘇木素染液的配制

在檢測(cè)前，將檢測(cè)盒中的蘇木素6g溶于100ml無水乙醇，將硫酸鋁鉀150g溶于2000ml蒸餾水，將上述兩種溶液與900ml甘油一起混合，最后加入冰醋酸120ml和碘酸鈉1.2g，配制成蘇木素染液。

實(shí)施例4：蘇木素染液的染色方法

蘇木素染液的染色方法包括如下步驟：

(1)將固定了皮疹區(qū)表層脫落細(xì)胞樣本的載玻片用95％酒精固定，用蘇木素液染色5分鐘；

(2)用流水稍洗去蘇木素液1-3秒鐘；

(3)蒸餾水過洗1-2秒鐘；

(4)無水乙醇過洗5-10秒鐘；

(5)用中性樹膠封固染色后的樣本。

檢測(cè)例1點(diǎn)滴狀銀屑病與玫瑰糠疹的皮疹區(qū)脫落細(xì)胞學(xué)比較

尋常型銀屑病中的點(diǎn)滴狀銀屑病與玫瑰糠疹同屬紅斑鱗屑類皮膚病、都好發(fā)于軀干部位，肉眼看來有很多相似之處，部分皮疹不典型的點(diǎn)滴狀銀屑病與玫瑰糠疹通過?？企w格檢查不容易鑒別。本發(fā)明者根據(jù)兩種疾病皮疹表層的組織病理特點(diǎn)不同，用透明膠帶粘貼皮疹區(qū)表層脫落細(xì)胞蘇木素染色法進(jìn)行了比較研究。

(1)研究對(duì)象2015年9月-2016年6月至本院皮膚科就診的根據(jù)臨床表現(xiàn)擬診及組織病理診斷為點(diǎn)滴狀銀屑病和玫瑰糠疹志愿受試者各30例，分別稱為銀屑病組和玫瑰糠疹組，其中銀屑病組患者男18例，女12例，年齡39.50±21.55歲；玫瑰糠疹組患者男14例，女16例，年齡32.33±23.75歲。并且一個(gè)月內(nèi)均未局部和全身使用過糖皮質(zhì)激素類藥物、鈣調(diào)磷酸酶抑制劑及抗生素類等藥物。

(2)方法兩組志愿患者分別用實(shí)施例2的方法進(jìn)行皮膚取樣，將粘有皮膚樣本的透明膠帶用實(shí)施例3的方法進(jìn)行蘇木素染色。

(3)診斷標(biāo)準(zhǔn)：蘇木素染色膠帶標(biāo)本出現(xiàn)群集狀分布中性粒細(xì)胞的為“陽(yáng)性結(jié)果”，診斷為銀屑??；未出現(xiàn)中性粒細(xì)胞或者出現(xiàn)少量散在中性粒細(xì)胞的為“陰性結(jié)果”，診斷為玫瑰糠疹。比較本發(fā)明方法診斷結(jié)果與經(jīng)典皮膚組織病理診斷結(jié)果，以組織病理診斷點(diǎn)滴狀銀屑病為金標(biāo)準(zhǔn)(即角化不全細(xì)胞的上方有中性粒細(xì)胞群集，或者角化不全與群集中性粒細(xì)胞交替出現(xiàn)呈現(xiàn)三明治樣^[1]151-153)，來統(tǒng)計(jì)處理透明膠帶粘貼法的診斷符合率。

(4)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：應(yīng)用spss13軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。比較中性粒細(xì)胞在兩組疾病中的分布采用x²檢驗(yàn)，p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

(5)結(jié)果：根據(jù)光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞核形態(tài)來判斷細(xì)胞類型，將細(xì)胞核呈現(xiàn)分葉或桿狀判定為中性粒細(xì)胞，而圓形或近圓形核為皮膚鱗狀細(xì)胞即顆粒層或棘層的角質(zhì)形成細(xì)胞，同時(shí)觀察中性粒細(xì)胞分布形態(tài)，即分散或聚集分布。結(jié)果，銀屑病組標(biāo)本中可見群集成堆的深藍(lán)色分葉核與桿狀核，為中性粒細(xì)胞群集，還可見淡藍(lán)色大圓形或橢圓形細(xì)胞核(為皮膚鱗狀細(xì)胞即角化不全細(xì)胞)；玫瑰糠疹組標(biāo)本中可見均勻分布的較大淡藍(lán)色圓形或橢圓形細(xì)胞核(為皮膚鱗狀細(xì)胞即角化不全細(xì)胞)。銀屑病組標(biāo)本中性粒細(xì)胞群集分布占93.33％(28/30)、散在分布占6.67％(2/30)、無分布為0％。而玫瑰糠疹組標(biāo)本，中性粒細(xì)胞群聚分布占0％、散在分布占10％(3/30)，無分布占90％(27/30)。將兩組中性粒細(xì)胞群聚分布率與非群聚分布率進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，x²＝56,p<0.01，差別有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見表1)。本發(fā)明方法對(duì)點(diǎn)滴狀銀屑病和玫瑰糠疹的診斷符合率分別為93.33％和100％，總診斷準(zhǔn)確率為96.67％(見表2)。

表1兩組患者中性粒細(xì)胞分布狀況

表2透明膠帶-蘇木素染色法與組織病理診斷法診斷率比較

銀屑病的診斷率(％)＝a/(a+b),玫瑰糠疹診斷率(％)＝d/(c+d),

總診斷準(zhǔn)確率(％)＝(a+d)/(a+b+c+d)。

檢測(cè)例2斑塊狀銀屑病與局限性慢性濕疹的皮疹區(qū)脫落細(xì)胞學(xué)比較

尋常型銀屑病中的斑塊狀銀屑病臨床表現(xiàn)為紅斑、斑塊、鱗屑表現(xiàn)為主。慢性濕疹的皮疹具有對(duì)稱性、劇烈瘙癢性、頑固難治性、反復(fù)發(fā)作性等特點(diǎn)。下肢斑塊狀銀屑病與下肢慢性濕疹二者都可發(fā)于下肢部位，肉眼看來有很多相似之處。治療后或不典型的斑塊狀銀屑病與不典型的慢性濕疹二者靠肉眼鑒別有一定困難。本發(fā)明者根據(jù)斑塊狀銀屑病與慢性濕疹二者皮疹表層的細(xì)胞學(xué)種類不同，研發(fā)用透明膠帶粘貼皮疹區(qū)表層脫落細(xì)胞蘇木素染色法對(duì)這兩種疾病進(jìn)行了比較研究。

(1)研究對(duì)象2010年9月‐2015年12月至本院皮膚科就診的對(duì)臨床表現(xiàn)不典型的銀屑病進(jìn)行組織病理檢查，將組織病理診斷的斑塊狀銀屑病與慢性濕疹患者各60例分別稱為銀屑病組和慢性濕疹組，其中銀屑病組患者男37例，女23例，年齡36.40±21.50歲；慢性濕疹組患者男45例，女15例，年齡32.45±26.20歲，發(fā)病以來未使用局部和全身藥物。

(2)方法

主要試劑和材料：蘇木素染液、一抗為鼠抗人粒細(xì)胞濃縮型抗體、二抗為辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗鼠igg多克隆抗體、二氨基聯(lián)苯胺(dab)為底物顯色試劑盒，均購(gòu)自美國(guó)biogenex公司。eaf固定液配置：取冰醋酸5ml，40％甲醛10ml，無水乙醇加至100ml。

方法：兩組志愿受試者患者分別用實(shí)施例2的方法進(jìn)行皮膚取樣，將粘有皮膚樣本的透明膠帶進(jìn)行蘇木素染色及免疫組化染色，進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查。同時(shí)，將兩組志愿患者的非透明膠帶粘貼皮疹區(qū)選擇一處做皮膚組織病理檢查。

a.蘇木素染色：按實(shí)施例3的方法進(jìn)行蘇木素染色并封固后于光鏡下觀察。

b.中性粒細(xì)胞免疫組化染色：①取剩余兩張粘有脫落細(xì)胞標(biāo)本的膠帶，用eaf固定液，4℃固定15min，pbs沖洗，然后按試劑盒說明的操作步驟進(jìn)行操作。其中一張標(biāo)本作為空白對(duì)照，另外一張標(biāo)本做dab顯色和蘇木素復(fù)染，時(shí)間均為40s。②染色后脫水，中性樹脂封片，備用光鏡觀察。

(3)診斷標(biāo)準(zhǔn)：膠帶標(biāo)本蘇木素染色后顯微鏡鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)群集狀分布的中性粒細(xì)胞為“陽(yáng)性結(jié)果”，診斷為銀屑??；而未出現(xiàn)中性粒細(xì)胞或者出現(xiàn)少量散在中性粒細(xì)胞的為“陰性結(jié)果”，診斷為慢性濕疹。比較透明膠帶法診斷結(jié)果與經(jīng)典組織病理染色法診斷結(jié)果。

(4)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：應(yīng)用spss13軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。比較中性粒細(xì)胞在兩組疾病中的分布采用x²檢驗(yàn)，p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

(5)結(jié)果

a.蘇木素染色結(jié)果根據(jù)光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞核形態(tài)來判斷細(xì)胞類型，將細(xì)胞核呈現(xiàn)分葉或桿狀判定為中性粒細(xì)胞，而圓形核或近圓形核為皮膚鱗狀細(xì)胞，即相當(dāng)于皮膚組織病理染色法的角質(zhì)層角化不全細(xì)胞或顆粒層細(xì)胞。同時(shí)觀察中性細(xì)胞分布狀態(tài)，即分散或聚集分布。結(jié)果，銀屑病組標(biāo)本中可見群集成堆的深藍(lán)色分葉核與桿狀核，為中性粒細(xì)胞群集，還可見淡藍(lán)色大圓形或橢圓形細(xì)胞核(為皮膚鱗狀細(xì)胞即角化不全細(xì)胞)；慢性濕疹組標(biāo)本中可見均勻分布的較大淡藍(lán)色圓形或橢圓形細(xì)胞核(為皮膚鱗狀細(xì)胞即角化不全細(xì)胞)。銀屑病組標(biāo)本中性粒細(xì)胞群集分布占96.67％(58/60)，中性粒細(xì)胞散在分布占3.33％(2/30)，無中性細(xì)胞分布為0。而慢性濕疹組標(biāo)本，中性粒細(xì)胞群聚分布占0，中性細(xì)胞散在分布占10％(6/60)，無中性粒細(xì)胞占90％(54/60)。將兩組中性細(xì)胞群聚分布率與中性粒細(xì)胞非群聚分布率(中性細(xì)胞分散分布+無中性細(xì)胞)進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，x²＝108.63,p<0.01，表明兩組中性細(xì)胞群集發(fā)生率差別有顯著統(tǒng)計(jì)意義，見表3。

表3兩組患者中性粒細(xì)胞分布狀況

b.免疫組化結(jié)果斑塊狀銀屑病組標(biāo)本中群集分布的中性粒細(xì)胞的胞漿呈粒細(xì)胞單抗染色陽(yáng)性，結(jié)合細(xì)胞核的形狀是分葉狀和桿狀者，進(jìn)一步證實(shí)此類細(xì)胞是中性粒細(xì)胞。而陰性對(duì)照標(biāo)本的細(xì)胞漿不顯色。

(6)透明膠帶細(xì)胞蘇木素染色法診斷率與皮膚組織病理診斷符合率比較：按照膠帶標(biāo)本出現(xiàn)群集狀分布的中性粒細(xì)胞為“陽(yáng)性結(jié)果”即診斷為銀屑病；出現(xiàn)少量散在中性粒細(xì)胞或無中性粒細(xì)胞為“陰性結(jié)果”即診斷為慢性濕疹。計(jì)算出透明膠帶蘇木素染色法對(duì)斑塊狀銀屑病和慢性濕疹的診斷符合率分別為96.67％和100％，鑒別診斷準(zhǔn)確率為98.33％(表4)。

表4透明膠帶-蘇木素染色法與組織病理診斷法診斷率比較

透明膠帶蘇木素染色法診斷斑塊狀銀屑病的診斷率(％)＝a/(a+b),慢性濕疹診斷率(％)＝d/(c+d),

總診斷準(zhǔn)確率(％)＝(a+d)/(a+b+c+d)。

檢測(cè)例3濕疹樣皮炎、花斑癬、苔蘚樣糠疹與神經(jīng)性皮炎皮疹區(qū)脫落細(xì)胞的檢測(cè)

本發(fā)明者對(duì)發(fā)生于軀干部位其他兩種紅斑鱗屑性皮膚?。瓭裾顦悠ぱ准吧窠?jīng)性皮炎也進(jìn)行了透明膠帶粘貼皮疹區(qū)脫落細(xì)胞、蘇木素染色法的研究。選擇12例濕疹樣皮炎患者(非抓傷皮疹)、10例花斑癬患者、3例慢性苔蘚樣糠疹患者。

顯微鏡下觀察(×400)，慢性濕疹的皮疹區(qū)標(biāo)本可見均勻分布的較大淡藍(lán)色圓形或橢圓形細(xì)胞核(為皮膚鱗狀細(xì)胞即角化不全細(xì)胞)；花斑癬的皮疹區(qū)標(biāo)本除了皮膚角質(zhì)層碎屑外，還可見圓形孢子、菌絲。慢性苔蘚樣糠疹皮疹區(qū)標(biāo)本可見皮膚鱗狀細(xì)胞即角化不全細(xì)胞與皮損碎屑；神經(jīng)性皮炎的皮疹區(qū)標(biāo)本可見均勻稀疏分布的較大淡藍(lán)色圓形或橢圓形細(xì)胞核(為皮膚鱗狀細(xì)胞即角化不全細(xì)胞)及大量分布的無細(xì)胞形狀、無核的角質(zhì)層碎屑?？傊@些皮膚病患者的表皮脫落細(xì)胞均無群集性中性粒細(xì)胞出現(xiàn)，而只是表皮碎屑、表皮鱗狀細(xì)胞及少量散發(fā)性中性粒細(xì)胞。另外，花斑癬皮疹區(qū)脫落細(xì)胞標(biāo)本還可以見到圓形孢子或菌絲。然而，無論是斑塊狀銀屑病還是點(diǎn)滴狀銀屑病，在表皮均有群集中性粒細(xì)胞出現(xiàn)。鑒于銀屑病與其他紅斑鱗屑性皮膚病這一最主要的區(qū)別特征，用本發(fā)明的檢測(cè)盒可以進(jìn)行鑒別診斷。

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