本發(fā)明屬于生物非切片制片的技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種朱槿纖維快速制片的方法。

背景技術(shù)：

植物纖維普遍存在于植物體的營(yíng)養(yǎng)器官中，是植物機(jī)械組織的一部分，同時(shí)也是植物運(yùn)輸系統(tǒng)重要的組成部分，是植物物質(zhì)運(yùn)輸、維持正常生命活動(dòng)的主要場(chǎng)所。植物纖維具有多種類型，根據(jù)纖維所在的部位可以將植物纖維分為木纖維、下皮纖維、韌皮纖維、皮層纖維、中柱鞘纖維、環(huán)髓纖維；根據(jù)纖維的特殊組織形態(tài)可以將纖維分為晶鞘纖維、嵌晶纖維、含晶纖維、分隔纖維、分枝纖維等。而通常人們所說(shuō)的植物纖維主要是指木纖維，木纖維包括木質(zhì)部中除導(dǎo)管、薄壁細(xì)胞和管胞之外的一切細(xì)長(zhǎng)的厚壁組織。纖維體內(nèi)主要含有纖維素。但是韌皮纖維也是植物纖維中重要的組成部分。韌皮纖維比木纖維更容易分離出來(lái)，因此對(duì)于觀察植物纖維結(jié)構(gòu)具有重要的意義，是纖維實(shí)驗(yàn)教學(xué)的重要材料來(lái)源。

而目前國(guó)內(nèi)對(duì)于纖維的研究主要集中在對(duì)絲織品的研究以及對(duì)于纖維旋光性、著色性能等方向進(jìn)行研究尤其是對(duì)于熱帶纖維的研究已經(jīng)成為一種新研究方向。處理纖維的主要方法有堿法、酸法。其中堿法是一種古老的纖維處理方法，同時(shí)也是目前最常用的方法，堿法處理可以除去纖維中的脂肪酸和果酸使植物纖維可以分出來(lái)，還能保留木質(zhì)素。但目前采用的方法離析時(shí)間非常長(zhǎng)，易破壞纖維結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致制片效果均不佳。

在教學(xué)方面，朱槿纖維是典型的常用材料。目前，離析朱槿纖維的方法，主要采用10％重鉻酸鉀和10％硝酸離析法，但是采用該方法，離析時(shí)耗費(fèi)的時(shí)間長(zhǎng)，而獲得的纖維結(jié)構(gòu)不完整，在生物顯微鏡下很難觀察到其結(jié)構(gòu)如清晰的細(xì)胞壁以及紋孔等結(jié)構(gòu)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種朱槿植物纖維快速制片的方法，該方法離析時(shí)間短，獲得的纖維結(jié)構(gòu)完整，能夠在纖維鏡下觀察到清晰的細(xì)胞壁以及紋孔等結(jié)構(gòu)。

本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種朱槿纖維快速制片的方法，包括以下步驟：

(1)、用剪刀剪取兩年以上的老枝條，剝下樹(shù)皮，浸泡到質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為15％-25％重鉻酸鉀和8％-15％硝酸混合液中，煮沸60～90min，然后再加入質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為10％-15％過(guò)氧化氫和50％-65％醋酸混合液10～20ml，繼續(xù)煮沸處理30～60min；

(2)、將處理好的植物組織用鑷子夾到裝有自來(lái)水的培養(yǎng)皿中，用解剖針挑出植物纖維，置于干凈的載玻片中，滴入0.5～1ml的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.1％番紅染色液染色10min，然后用70％酒精洗干凈多余的番紅染色液，再滴入0.5～1ml50％的甘油，蓋上蓋玻片，完成封片；

(3)、生物顯微鏡下觀察植物纖維結(jié)構(gòu)。

步驟(1)是用所述重鉻酸鉀和硝酸的混合液處理使植物樹(shù)皮變硬之后，再緩慢加入所述醋酸和過(guò)氧化氫混合液處理一段時(shí)間，獲得完整的植物纖維。

除另有說(shuō)明外，本發(fā)明所述的百分比均為質(zhì)量百分比，各組分含量百分?jǐn)?shù)之和為100％。

發(fā)明人在用10％重鉻酸鉀和10％硝酸的混合液處理朱槿樹(shù)皮時(shí)發(fā)現(xiàn)，僅用10％重鉻酸鉀和10％硝酸混合液處理朱槿莖段樹(shù)皮所需要消耗的時(shí)間15～20h，并且所獲得纖維的觀察效果差，部分的纖維結(jié)構(gòu)被分解，細(xì)胞壁的染色效果不清晰。然后在發(fā)明人用朱槿為材料重新所做的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)在用重鉻酸鉀和硝酸的混合液處理使植物樹(shù)皮變硬之后，再緩慢加入醋酸和過(guò)氧化氫混合液處理一段時(shí)間就可以很快的獲取完整的植物纖維。

附圖說(shuō)明

圖1-1是光學(xué)顯微鏡下觀察朱槿纖維結(jié)構(gòu)圖。

圖1-2是朱槿纖維局部圖。

圖1-3是朱槿纖維局部放大圖(40x10)。

圖2-1是朱槿纖維全景圖(100x)。

圖2-2是朱槿纖維束局部圖(100x)。

圖2-3是朱槿纖維局部圖(400x)。

圖2-4是朱槿纖維局部圖(400x)。

具體實(shí)施方式

以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)行進(jìn)一步的說(shuō)明。

實(shí)施例1

用剪刀剪取兩年以上的朱槿老枝條，剝下樹(shù)皮，將樹(shù)皮浸泡到質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為15％重鉻酸鉀和8％硝酸混合液中，煮沸60min，然后再加入質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為10％過(guò)氧化氫和50％醋酸混合液20ml，繼續(xù)煮沸處理30min。將處理好的植物組織用鑷子夾到裝有澄清自來(lái)水的培養(yǎng)皿中，用解剖針挑出植物纖維，置于干凈的載玻片中，滴入0.5～1ml質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.1％番紅染色液染色10min。然后用70％酒精洗干凈多余的番紅染色液，再滴入0.5～1ml50％的甘油，蓋上蓋玻片，完成封片。電子顯微鏡下觀察植物纖維結(jié)構(gòu)。結(jié)果如圖1-1、圖1-2、圖1-3。

實(shí)施例2

用剪刀剪取兩年以上的朱槿老枝條，剝下樹(shù)皮，將樹(shù)皮浸泡到質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為20％重鉻酸鉀和10％硝酸混合液中，煮沸90min，然后再加入質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為12％過(guò)氧化氫和60％醋酸混合液10ml，繼續(xù)煮沸處理30min。將處理好的植物組織用鑷子夾到裝有澄清自來(lái)水的培養(yǎng)皿中，用解剖針挑出植物纖維，置于干凈的載玻片中，滴入0.5～1ml質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.1％番紅染色液染色10min。然后用70％酒精洗干凈多余的番紅染色液，再滴入0.5～1ml50％的甘油，蓋上蓋玻片，完成封片。生物顯微鏡下觀察植物纖維結(jié)構(gòu)。生物顯微鏡下觀察植物纖維結(jié)構(gòu)。用此方法所得的結(jié)果與實(shí)例1所得結(jié)果相差不大。

實(shí)施例3

用剪刀剪取扶桑兩年以上的老枝條，剝下樹(shù)皮，將樹(shù)皮浸泡到質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為25％重鉻酸鉀和15％硝酸混合液中，煮沸60～90min，然后再將質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為25％重鉻酸鉀和15％硝酸混合液倒掉，再加入質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為15％過(guò)氧化氫和65％醋酸混合液10～20ml，繼續(xù)煮沸處理30～60min。將處理好的植物組織用鑷子夾到裝有澄清自來(lái)水的培養(yǎng)皿中，用解剖針挑出植物纖維，置于干凈的載玻片中，滴入0.5～1ml質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.1％番紅染色液染色10min。然后用70％酒精洗干凈多余的番紅染色液，再滴入0.5～1ml50％的甘油，蓋上蓋玻片，完成封片。生物顯微鏡下觀察植物纖維結(jié)構(gòu)。用此方法所得的結(jié)果與實(shí)例1所得結(jié)果相差不大。如圖2-1、圖2-2、圖2-3、圖2-4。