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巖黃連莖的石蠟切片方法與流程

文檔序號:12548580閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種巖黃連莖的石蠟切片方法,包括樣品固定、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片與展片、脫蠟、染色以及封片,其特征在于,

在透明步驟之前,將脫水后的巖黃連莖放于體積濃度為0.8-1.2%的番紅溶液浸染8-12h;

在脫蠟之后,將載有巖黃連根的玻片進行復水,復水后再放于酒精溶液中進行分色,同時向用于分色的酒精溶液中加入體積比為1/(800-1000)的醋酸,最后放入體積濃度為0.8-1.2%的固綠溶液中染色10-20秒。

2.如權利要求1所述的巖黃連莖的石蠟切片方法,其特征在于,所述體積濃度為0.8-1.2%的番紅溶液是用2/3體積無水酒精+1/3體積TO型生物透明劑的混合液為溶劑配制而成,所述體積濃度為0.8-1.2%的固綠溶液是用體積濃度為95%的酒精溶液為溶劑配制而成。

3.如權利要求1所述的巖黃連莖的石蠟切片方法,其特征在于,將載有巖黃連莖的玻片依次放入1/2體積型生物透明劑+1/2體積無水酒精混合液、無水酒精、無水酒精、體積濃度為95%酒精、體積濃度為85%酒精、體積濃度為70%酒精中復水,每級3-5秒;再放入50%酒精中分色,3-10秒;之后再依次放入體積濃度為70%酒精、體積濃度為85%酒精中進一步處理,每級3-10秒。

4.如權利要求1所述的巖黃連莖的石蠟切片方法,其特征在于,固綠溶液染色后將載有巖黃連莖的玻片放于放入無水酒精中洗去染色劑,此級停留3-10秒;然后依次放入無水酒精、1/2TO型生物透明劑+1/2無水酒精混合液中,每級停留3-10秒;最后將載有巖黃連莖的玻片放入TO型生物透明劑中停留5-10分鐘,此步驟重復三次。

5.如權利要求1所述的巖黃連莖的石蠟切片方法,其特征在于,將固定后的巖黃連莖依次經過體積濃度為80%酒精、體積濃度為85%酒精、體積濃度為90%酒精、體積濃度為95%酒精逐級脫水,每個濃度梯度脫水45-60分鐘,再放于100%酒精中脫水兩次,每次30-45分鐘。

6.如權利要求5所述的巖黃連莖的石蠟切片方法,其特征在于,每個梯度濃度的酒精溶液在對巖黃連莖脫水過程中同時進行真空抽氣10-15分鐘。

7.如權利要求1所述的巖黃連莖的石蠟切片方法,其特征在于,對番紅溶液染色后的莖依次用1/2體積無水酒精+1/2體積TO型生物透明劑混合液以及1/3體積無水酒精+2/3體積TO型生物透明劑混合液進行透明處理,每級透明時間均為60-120分鐘;再放于純TO型生物透明劑中浸泡2次,每次浸泡60-120分鐘。

8.如權利要求1所述的巖黃連莖的石蠟切片方法,其特征在于,固定之前,去除巖黃連莖表面浮塵,垂直其中脈橫切為長5-10mm,寬3-5mm的莖段,再將莖段放入FAA固定液中固定,FAA固定液由體積濃度為70%酒精:冰醋酸:甲醛體積比為90:5:5配制而成。

9.如權利要求8所述的巖黃連莖的石蠟切片方法,其特征在于,在巖黃連莖番紅染色過程中,染色第1小時后對放有巖黃連莖的0.8-1.2%番紅溶液用超聲頻率為32-35kHz的超聲波進行超聲處理60-75秒,染色第3小時后,對放有巖黃連莖的0.8-1.2%番紅溶液用超聲頻率為28-31kHz的超聲波進行超聲處理45-60秒,染色第7小時后,對放有巖黃連莖的0.8-1.2%番紅溶液用超聲頻率為25-27kHz的超聲波進行超聲處理30-50秒。

10.如權利要求3所述的巖黃連莖的石蠟切片方法,其特征在于,用于進一步處理的70%酒精和85%酒精中分別加入體積比為1/(1000-1200)的檸檬酸、苦味酸以及草酸的混合溶液,其中混合溶液中檸檬酸:苦味酸:草酸的體積比為1:2:1。

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