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一種評價污泥臭氧處理過程中活菌含量和組成的方法與流程

文檔序號:12450946閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種評價污泥臭氧處理過程中活菌含量和組成的方法,其特征在于,包括以下步驟:

(1)對活性污泥和臭氧處理后污泥進行均一化處理,用10倍體積的Ringer1/4溶液進行稀釋,1ml針管吹打10次;然后再用10倍體積的Ringer1/4溶液稀釋于玻璃管中,超聲波清洗機加入超純水,超聲45s,渦旋10s,共9個循環(huán),據(jù)能量密度計算,控制消耗能量在16000J·L-1。

(2)根據(jù)固體物質(zhì)含量進行適當(dāng)稀釋后進行ATP檢測:將步驟(1)處理好的污泥樣品和ATP提取劑分別置于38℃水浴中至少1min;在500μl污泥樣品中加入50μlATP提取液后,在水浴保持100s,立即測定熒光值,得到總ATP熒光值;用0.1μm無菌濾膜過濾上述測定測總ATP熒光值之后的樣品,測量濾液ATP熒光值,得到胞外ATP熒光值;活菌ATP熒光值=總ATP熒光值-胞外ATP熒光值從而得到污泥臭氧處理過程中活菌含量;采用ATP依賴性的熒火蟲發(fā)光素酶(Firefly Luoiferase)催化熒火蟲發(fā)光素(Firefly Luciferin)氧化發(fā)光反應(yīng)可作為活菌的標志快速檢測ATP含量;

(3)基于ATP檢測結(jié)果,針對步驟(2)臭氧處理前后ATP含量有變化的污泥,加入PMA并在強光照條件下處理:對步驟(1)對應(yīng)均一化處理后的污泥使用磷酸鹽緩沖液稀釋至1000mg/L,取1ml稀釋后污泥加入PMA染料至PMA終濃度為50uM,冰上暗育10min,然后650瓦強光照射下反應(yīng)10min,照射過程降溫保證反應(yīng)溫度<5℃;處理污泥,使用試劑盒進行總DNA提取,并進行16s rRNA基因PCR擴增,并對PCR擴增產(chǎn)物進行測序分析,對于測序結(jié)果使用質(zhì)控和群落組成分析,然后得出污泥臭氧處理過程中活菌組成。

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