本發(fā)明涉及飼料檢測
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種飼喂家禽用小麥中有效磷含量的快速測定方法和應用。
背景技術(shù)：
：磷是家禽必需的礦物元素之一，飼料中磷嚴重不足表現(xiàn)為生產(chǎn)性能低下，幼年動物患佝僂病，成年動物患軟化癥(或稱骨質(zhì)疏松癥)。家禽對磷的需要量通常采用總磷(TP)、非植酸磷(NPP)和有效磷(AP)表述(NRC,1994；雞飼養(yǎng)標準,2004)。早先認為,植物性原料中總磷的1/3為NPP,另外2/3為不能被單胃動物所利用的植酸磷，所以簡單地將NPP等同于有效磷(NRC,1994)。然而已有一些學者的研究證明,動物在某種程度上可以利用植酸磷，而其利用率因原料種類不同而有較大差異,動物對植物性飼料原料中植酸磷利用率的差異與試驗設(shè)計、研究方法、飼料原料和營養(yǎng)組成、加工過程、分析方法、動物日齡和品種等因素有關(guān)，而實驗室測得的非植酸磷并不能被動物完全利用。因而總磷和非植酸磷都不能真正反映飼料原料中磷的效價，隨著研究工作的積累，有效磷必然取代非植酸磷作為評價磷利用率的指標。鑒于此，研究開發(fā)出一種能夠在家禽飼料生產(chǎn)中應用的簡便、快速、準確評定小麥中有效磷的方法，對于實現(xiàn)配制家禽精準飼養(yǎng)和飼料原料高效利用具有重要的意義。技術(shù)實現(xiàn)要素：為了克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種飼喂家禽用小麥中有效磷含量的快速測定方法，實現(xiàn)快速、準確測定飼喂家禽用小麥中有效磷的含量，提高飼料配制的準確性，減少磷污染，節(jié)省飼料成本。同時，本發(fā)明還在于提供一種飼喂家禽用小麥中有效磷含量的快速測定方法在控制家禽小麥日糧飼料中磷含量方面的應用。為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：一種飼喂家禽用小麥中有效磷含量的快速測定方法，包括以下操作步驟：1)取已知有效磷含量的標準小麥樣品，進行近紅外光譜掃描，采集小麥950～1650nm區(qū)間內(nèi)的光譜信息；2)對光譜信息進行預處理之后，應用化學計量學軟件與已知有效磷含量的標準小麥樣品的有效磷含量進行關(guān)聯(lián)，采用偏最小二乘法建立近紅外光譜與小麥有效磷含量之間的定量模型；3)取待測小麥樣品進行近紅外光譜掃描，采集小麥950～1650nm區(qū)間內(nèi)的光譜信息，對光譜信息進行預處理之后，將處理后的待測小麥樣品近紅外光譜信息導入步驟2)建立的定量模型，得出待測小麥樣品有效磷含量。進一步的，步驟1)和步驟3)中近紅外光譜掃描的光源為汞燈；參比光源為鹵鎢燈；波長范圍950～1100nm采用硅檢測器，波長范圍110～1650nm采用二極管陣列檢測器，波長精度≤0.3nm，波長穩(wěn)定性≤0.2nm/a；掃描環(huán)境要求：溫度2～40℃，相對濕度0～85％。進一步的，為了防止樣品發(fā)生霉變影響光譜采集，將采集到的樣品置于4℃冰箱中保存，掃描樣品前，提前24小時將樣品放置在常溫環(huán)境中平衡溫度，掃描開機之后預熱1h。進一步的，步驟2)和步驟3)中采用一階導數(shù)法對近紅外光譜信息進行預處理。進一步的，步驟2)中還包括對建立的定量模型的預測性能進行評價，評價參數(shù)主要有定量模型決定系數(shù)R2cal、校正均方根差RMESS、驗證均方根差RMSEP、驗證決定系數(shù)R2val、主成分數(shù)Ranks、平均偏差Bias；篩選得到R2cal和R2val接近1、RMESS與RMSEP越小且越接近的定量模型。上述對步驟2)建立的定量模型的預測性能進行評價的具體方法為采用交互留一驗證，即從已知有效磷含量的標準小麥樣品中剔除一個樣品，用剩余的其他樣品建立數(shù)學模型，并用建立的模型預測被剔除樣品中待測組分的濃度，對模型的預測效果進行評價。其中R2cal反應模型的擬合能力，R2cal越接近1，模型的擬合性越好，其計算公式為其中：ym－樣品實際測定值平均值；yi—第i個樣品實際測定值；—采用建立的近紅外光譜定量模型的第i個樣品的預測值；RMSEE計算公式為：其中，—樣品實際測定值平均值。RMSEP表示近紅外預測值與實際測定值之間的相近程度，數(shù)值越低準確性越高。其計算公式為：平均偏差是實際測定值與近紅外預測值的系統(tǒng)偏差，其計算公式為：其中：di－第i個樣品實際測定值與預測值之差。進一步的，所述標準小麥樣品中的有效磷含量采用強飼法測得，作為標準小麥樣品的已知有效磷含量，具體操作步驟為：A：選用體重1.8kg以上、體重相近、采食正常、強飼后無異常反應、無怪癖的健康海蘭褐公雞若干只，單籠飼養(yǎng)，飼養(yǎng)溫度為15～27℃，光照強度20Lx，每日光照時間為16小時，自由飲水、禁食砂石；B：被試公雞飼喂生長蛋雞全價飼料三天以上，并且最后一段飼喂待測小麥樣品后，進行禁食排空48小時，禁食期間通過飲水每雞每日補充葡萄糖50g；C：禁食結(jié)束后強飼質(zhì)量為m(單位為g)，40～50g的待測小麥樣品，連續(xù)收集48小時的排泄物；可以采用在被試公雞的瀉殖腔口外周處縫合60ml塑料瓶蓋，瓶蓋面中央挖一圓孔及對稱的4對小孔，以便糞尿排泄物通過及縫合固定瓶蓋用，在收集排泄物期間，擰上收集排泄物的塑料瓶收集排泄物；或者采用集糞盤收集排泄物；排泄物收集過程中每日收集若干次，每次收集后立即保存在4℃以下，或者直接在60～65℃下烘干至恒重，裝瓶封存；D：按照步驟B同樣的方式飼喂被試公雞，被試公雞禁食結(jié)束后強飼與待測小麥樣品同等質(zhì)量的無磷日糧，并按照步驟C同樣的方式收集被試公雞48h的排泄物；E：分別測定步驟C中收集的48h的排泄物中磷的含量m1；和步驟D收集的48h的排泄物匯總磷的含量m2；測定質(zhì)量為m的待測小麥樣品中的總磷的含量m3；計算單位質(zhì)量(1g)待測小麥樣品的有效磷含量m有效磷＝m3-(m1-m2)/m。上述排泄物和待測小麥樣品中的總磷含量采用楊勝在《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》中公開的方法進行檢測。上述飼喂家禽用小麥中有效磷含量的快速測定方法在控制家禽小麥日糧飼料中磷含量方面的應用，具體為以采用上述測定方法檢測飼喂家禽用小麥中的有效磷含量作為指標，按照家禽日糧中對于磷含量的需求，確定小麥的用量，可有效提高日糧中磷的轉(zhuǎn)化效率，減少日糧浪費和磷污染，降低飼養(yǎng)成本。本發(fā)明飼喂家禽用小麥中有效磷含量的快速測定方法，采用近紅外光譜技術(shù)，采集小麥950～1650nm區(qū)間內(nèi)的光譜信息，快速準確的測定小麥中的磷含量，作為小麥飼喂家禽過程中的有效磷指標，具有操作簡單、準確性高的優(yōu)點，能夠為飼料配制中的磷含量提供準確的數(shù)據(jù)指導，提高家禽小麥日糧中磷的利用率，減少磷的污染，節(jié)省飼料成本。進一步的，在近紅外光譜檢測過程中，光譜掃描的分辨率、檢測方式、光譜掃描范圍、掃描環(huán)境等均會影響近紅外光譜檢測的準確性，并且針對不同的測定樣品，其影響作用也是不確定的，尤其是光譜的預處理方法有很多種，那么本發(fā)明中為了提高在檢測飼喂家禽用小麥中有效磷含量的準確性，創(chuàng)造性的選擇光譜掃描的參數(shù)條件，并結(jié)合一階導數(shù)法對近紅外光譜進行預處理。進一步的，在近紅外光譜掃描過程中，建立的定量模型的準確性在很大程度上決定了最終測定結(jié)果的準確性，本發(fā)明中為了提高定量模型的可靠性、穩(wěn)定性及動態(tài)適應性，采用強飼法測定標準小麥樣品中的有效磷含量。具體實施方式下面通過具體實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案進行詳細說明。實施例一種飼喂家禽用小麥中有效磷含量的快速測定方法，包括以下操作步驟：1)取10～20份有效磷含量不同的標準小麥樣品，分別采用強飼法測定標準小麥樣品中的磷含量，作為標準小麥樣品的有效磷標準含量，具體操作步驟為：A：選用體重1.8kg以上、體重相近、采食正常、強飼后無異常反應、無怪癖的健康海蘭褐公雞若干只，單籠飼養(yǎng)，飼養(yǎng)溫度為15～27℃，光照強度20Lx，每日光照時間為16小時，自由飲水、禁食砂石；B：被試公雞飼喂生長蛋雞全價飼料三天以上，并且最后一段飼喂待測小麥樣品后，進行禁食排空48小時，禁食期間通過飲水每雞每日補充葡萄糖50g；C：禁食結(jié)束后強飼質(zhì)量為m(單位為g)，40～50g的待測小麥樣品，連續(xù)收集48小時的排泄物；采用在被試公雞的瀉殖腔口外周處縫合60ml塑料瓶蓋，瓶蓋面中央挖一圓孔及對稱的4對小孔，以便糞尿排泄物通過及縫合固定瓶蓋用，在收集排泄物期間，擰上收集排泄物的塑料瓶收集排泄物；每次收集后立即保存在4℃以下，裝瓶封存；D：按照步驟B同樣的方式飼喂被試公雞，被試公雞禁食結(jié)束后強飼與待測小麥樣品同等質(zhì)量的無磷日糧，并按照步驟C同樣的方式收集被試公雞48h的排泄物；E：分別測定步驟C中收集的48h的排泄物中磷的含量m1；和步驟D收集的48h的排泄物匯總磷的含量m2；測定質(zhì)量為m的待測小麥樣品中的總磷的含量m3；計算單位質(zhì)量(1g)待測小麥樣品的有效磷含量m有效磷＝m3-(m1-m2)/m；2)取步驟1)已測得有效磷含量的標準小麥樣品，粉碎后放入小樣品杯裝載，將過量樣品裝入樣品杯中，使用直尺將多余部分刮去，并保證裝入樣品在樣品杯中表面平整，將裝滿樣品的樣品杯放置在旋轉(zhuǎn)托架上，進行近紅外光譜掃描，采集光譜范圍在950～1650nm區(qū)間內(nèi)的光譜信息，每隔5nm采集一個光譜數(shù)據(jù)，總共采集到141個光譜數(shù)據(jù)，每隔樣品重復測量2次，重復裝樣2次；掃描結(jié)束后，為減小掃描的光譜誤差，結(jié)合每次掃面的光譜信息導出光譜信息的平均值；3)對步驟2)采集到的所有的已測得有效磷含量的標準小麥樣品的光譜信息采用一階導數(shù)法進行預處理，將預處理后的光譜信息用應用化學計量學軟件與標準小麥樣品的已測得的有效磷含量進行關(guān)聯(lián)，采用偏最小二乘法建立近紅外光譜與小麥有效磷含量之間的定量模型；4)取待測小麥樣品粉碎后放入小樣品杯裝載，將過量樣品裝入樣品杯中，使用直尺將多余部分刮去，并保證裝入樣品在樣品杯中表面平整，將裝滿樣品的樣品杯放置在旋轉(zhuǎn)托架上，進行近紅外光譜掃描，采集光譜范圍在950～1650nm區(qū)間內(nèi)的光譜信息，每隔5nm采集一個光譜數(shù)據(jù)，總共采集到141個光譜數(shù)據(jù)，每隔樣品重復測量2次，重復裝樣2次，對采集到的光譜信息采用一階導數(shù)法進行預處理，將預處理后的待測小麥樣品近紅外光譜信息導入步驟3)建立的定量模型，得出待測小麥樣品有效磷含量。上述近紅外光譜掃描光源為汞燈；參比光源為鹵鎢燈；波長范圍950～1100nm采用硅檢測器，波長范圍110～1650nm采用二極管陣列檢測器，波長精度≤0.3nm，波長穩(wěn)定性≤0.2nm/a；掃描環(huán)境要求：溫度2～40℃，相對濕度0～85％。試驗例1試驗方法：分別采用實施例所述的方法和強飼法測定五種產(chǎn)地不同的小麥樣品的有效磷含量，比較本發(fā)明方法測定飼喂家禽用小麥中有效磷含量的準確性，測定結(jié)果如下表1所示：強飼法試驗過程中每一種待測小麥樣品設(shè)置6個重復組，每個重復組至少4只雞，組間平均體重差異不超過100g，每組試驗可進行至少兩次重復測定，每次重復測定與上一次測定需要間隔10～14天供被試雞進行體能恢復，體能恢復過程中自由飲水，飼喂生長蛋雞全價飼料。表1產(chǎn)地預測值(％)實測值(％)差值山東0.2490.2280.021河南0.2350.2230.012江蘇0.2210.2340.013河北0.2140.2680.054安徽0.2590.2490.01平均0.2360.2400.022表1中，預測值為采用實施例所述方法測定的1g待測小麥樣品中有效磷百分含量；實測值為采用上述強飼法測定的1g待測小麥樣品中有效磷百分含量。由上述試驗結(jié)果可知，5種小麥樣品的變異幅度為0.01～0.02，可見本發(fā)明方法對于飼喂家禽用小麥中的有效磷含量測定結(jié)果準確。試驗例2試驗方法：采集兩種產(chǎn)地不同的小麥樣品，記為樣品1和樣品2，預測組采用實施例所述方法測定樣品1和樣品2中有效磷含量，并以該測定的數(shù)據(jù)為參考，配制飼喂雞用日糧，記為試驗日糧；對照組通過飼料數(shù)據(jù)庫查小麥的非植酸磷值，并以該數(shù)據(jù)為參考，配制飼喂雞用日糧，記為對照日糧。試驗選用1日齡AA健康肉仔雞360只，公母各半，隨機分為4組(預測組1，2和對照組1，2)，其中預測組1飼喂由樣品1配制的試驗日糧，對照組1飼喂由樣品1配制的對照日糧，預測組2飼喂由樣品2配制的試驗日糧，對照組2飼喂由樣品2配制的對照日糧，每組6個重復，每個重復15只雞。試驗雞籠養(yǎng)，自由采食飲水，常規(guī)免疫，雞舍內(nèi)溫度、濕度、光照和衛(wèi)生指標符合肉雞飼養(yǎng)標準，試驗期42天。比較對照組和預測組肉雞生產(chǎn)性能及屠宰性能的影響，結(jié)果如下表2和表3所示：表2表3上述表2和表3數(shù)據(jù)顯示，預測組1和預測組2的平均日采食量顯著低于對照組1和對照2，平均日增重明顯高于對照組1和對照組2，耗料增重比明顯高于對照組1和對照組2，屠宰性能均無顯著差異。該結(jié)果表明用本發(fā)明方法預測的小麥有效磷與使用非植酸磷數(shù)值配制的肉雞飼料相比可有效提高飼料的轉(zhuǎn)化效率，減少飼料浪費，降低養(yǎng)殖成本。由此可見，本發(fā)明方法構(gòu)建的近紅外定標模型適用于小麥有效磷的快速評定，而且能夠保證飼料配合的準確性，保障肉雞生產(chǎn)性能的發(fā)揮。當前第1頁1 2 3