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快速制備海洋小型魚類或仔稚魚中期分裂相染色體的方法與流程

文檔序號:12357371閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種快速制備海洋小型魚類或仔稚魚中期分裂相染色體的方法,其特征在于所述方法包括:1)充分了解試驗(yàn)魚的生物學(xué)特性及玻片的清洗;2)把小型試驗(yàn)魚類或仔稚魚放入秋水仙素溶液中游泳;3)取試驗(yàn)魚的鰓組織或鰭條組織進(jìn)行染色體制備;

所述的充分了解試驗(yàn)魚的生物學(xué)特性及玻片的清洗:了解試驗(yàn)魚的體型特征、營養(yǎng)組成、游泳活動(dòng)方式和生活方式,以確定取樣部位和試驗(yàn)方案,確定取樣部位及試驗(yàn)方案的標(biāo)準(zhǔn)如下:鰭條短小者在鰭條游離末端取樣,鰭條如蟬翼透明革質(zhì)或角質(zhì)則不適合取樣,改取鰓絲,鰭條脂肪含量高的應(yīng)加大低滲力度,選用0.0375M或0.05M KCl低滲液,鰓蓋開口度大的取鰓絲游離端,運(yùn)動(dòng)激烈的試驗(yàn)魚游泳水體要求1.5L以上,靜止不動(dòng)的試驗(yàn)魚魚游泳水體要求100-200ml;染色體制片的載玻片要求干凈無油污,不掛水,在染色體制備前清洗干凈;

所述的把小型試驗(yàn)魚類或仔稚魚放入秋水仙素溶液中游泳:配制含0.005%或0.01%(g/ml)秋水仙素的海水,讓試驗(yàn)魚在其中游泳4-6小時(shí),游泳水體的水溫較原暫養(yǎng)水溫提高或降低2-3℃,以刺激增強(qiáng)試驗(yàn)魚體表組織分裂增生的能力;

所述的取試驗(yàn)魚少量鰓組織或鰭條組織進(jìn)行染色體制備:取1-8mm3鰓組織或鰭條組織,立即放入0.0375M、0.05M或0.075M KCl溶液中低滲50min,再轉(zhuǎn)移至新鮮配制預(yù)冷的卡諾氏固定液中固定,每一步驟過程中都需要輕輕搖晃處理樣品的試管,使作用更充分;然后采用熱滴片法制片。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述的卡諾氏固定液為甲醇與冰醋酸的體積比為3:1的混合液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述的在卡諾氏固定液中的固定方法為更換固定液3次,每次固定15分鐘。

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