本發(fā)明涉及醫(yī)療領(lǐng)域，尤其涉及一種一種乙肝表面抗原血清室內(nèi)質(zhì)控品的制造和使用方法。
背景技術(shù)：
質(zhì)控品是用于體外診斷的質(zhì)量控制物質(zhì)(定值和非定值)，是一種旨在用于醫(yī)學(xué)用途的檢測系統(tǒng)中使用的物質(zhì)、材料、物品或設(shè)備，其目的是評價或驗證測量精密度、測量準(zhǔn)確度、由于試劑或分析儀器的變化檢測系統(tǒng)可能產(chǎn)生的分析偏差等性能特征。質(zhì)量控制物質(zhì)(定值和非定值)，可用于能力驗證、實驗室內(nèi)質(zhì)量控制。
在國內(nèi)已申請的相關(guān)專利中，并沒有關(guān)于乙肝質(zhì)控品的現(xiàn)有專利，即相關(guān)技術(shù)領(lǐng)域中，完整的操作方法及流程尚屬空白，沒有完整、清晰的制備及使用方法，更不能對隨機變量敏感和發(fā)現(xiàn)隨機問題并進行持續(xù)改進。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述缺陷，本發(fā)明旨在提供一種制備及使用方法完整、清晰，對隨機變量敏感、能用來發(fā)現(xiàn)隨機問題并進行持續(xù)改進的一種乙肝表面抗原血清室內(nèi)質(zhì)控品的制造和使用方法。
為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：一種乙肝表面抗原血清室內(nèi)質(zhì)控品的制造方法，包括如下步驟：
1）原料采集及篩選：
①收集乙肝表面抗原分別為陽性和陰性的血漿或血清，將乙肝陽性血漿或血清和乙肝陰性血漿或血清分開標(biāo)注，并篩選出無明顯溶血、黃疸、脂肪或污染的血漿或血清，作為預(yù)備用血漿或血清；
②對步驟①篩選過的預(yù)備用血漿或血清定感染四項（TPPA、HbSAg、HIV、HCV-IgG），篩選出結(jié)果為陰性的血漿或血清，作為備用血漿或血清；
2）稀釋血清制造：
①將1）獲得的備用血漿或血清置于55℃-60℃環(huán)境下，保溫0.5-1h，進行滅活處理；
②將步驟①滅活后的血漿或血清進行離心處理，離心轉(zhuǎn)速為3000-3500r/min，離心時間為5-10分鐘，分別獲得乙肝陽性血清和多組乙肝陰性血清；
③將每組乙肝陰性血清至少分裝5支試管，然后對乙肝陽性血清進行稀釋，直至將乙肝陽性血清稀釋至標(biāo)準(zhǔn)試劑盒的2-4倍，獲得多組備用質(zhì)控品；
④按步驟③多次反復(fù)制造，直至將每組備用質(zhì)控品按每周使用10次配夠一年的劑量；
⑤按照標(biāo)準(zhǔn)方法在備用質(zhì)控品內(nèi)加入對應(yīng)濃度的廣譜防腐劑；
3）備用質(zhì)控品的保存與監(jiān)測：
①將2）制備的備用質(zhì)控品分裝保存并標(biāo)記，保存于條件溫度不高于-20℃，濕度不大于10%的環(huán)境中；
②按每周每組檢測一支的頻率對備用質(zhì)控品進行動態(tài)跟蹤檢測，并從第三周起記錄檢測結(jié)果；
4）質(zhì)控：
①將3）中步驟②獲得的數(shù)據(jù)填表并繪圖，具體為以臨床檢驗中心的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控品作為陰性參照，繪編Levery-Jennings質(zhì)控圖，圖中采用S/CO作為縱座標(biāo)、周次作為橫座標(biāo)、13S為質(zhì)控限；
②均勻性檢測：隨機抽取10個分裝后的樣本，對每個樣本重復(fù)檢測1次，進行t分析；隨機抽取20個分裝后的樣本，對每個樣本單孔測定，本互對比，進行CV%分析；
③穩(wěn)定性檢測：每隔60天，采用3天的結(jié)果，每天對質(zhì)控品重復(fù)檢測1次，進行方差分析；每隔30天，采用1天的結(jié)果，每天對質(zhì)控品重復(fù)檢測3次，與上一次檢測數(shù)據(jù)進行進行CV%分析；
④抑菌效果檢測：取樣本2-3ml進行科學(xué)評估，用無菌吸管隨機吸取200ul分別平均注入于2塊營養(yǎng)瓊脂平板，均勻平鋪，然后將營養(yǎng)瓊脂平板置于35℃-37℃下培養(yǎng)40-50h，計數(shù)菌落數(shù)，計數(shù)方法為細(xì)菌總數(shù)（cfu/ml）=5*（2塊平皿菌落數(shù)之和/2），進行細(xì)菌滋生的風(fēng)險評估；
⑤在整個過程中必須嚴(yán)格防護，防止洗板機異常、標(biāo)本之間交叉感染、室溫下長時放置（大于2h）等異常情況出現(xiàn)；
5）持續(xù)改進：
在統(tǒng)計數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)異常時立即徹底排查失控原因，總結(jié)并改進。
采用上述方法制造的乙肝表面抗原血清室內(nèi)質(zhì)控品的使用方法，包括如下步驟：
1）儲存：所有質(zhì)控品存儲在條件溫度不高于-20℃，濕度不大于10%的環(huán)境中，存儲方式為將質(zhì)控品先放入密封容器后再將密封容器放入無霜冰箱；
2）復(fù)溶：置于15℃-25℃下15-20min，期間緩慢轉(zhuǎn)動質(zhì)控品，在解凍后搖晃質(zhì)控品至其均勻；
3）使用：將2）復(fù)溶后的質(zhì)控品按標(biāo)準(zhǔn)方法進行正常使用。
與現(xiàn)有技術(shù)比較，本發(fā)明由于采用了上述方案，具有以下優(yōu)點：制備及使用方法完整、清晰；本發(fā)明不僅將制造流程與方法詳細(xì)地進行了公開，還對質(zhì)控品的質(zhì)量進行了均勻性檢測、穩(wěn)定性檢測及抑菌效果檢測，填補了現(xiàn)有技術(shù)的空白領(lǐng)域，也使得生產(chǎn)出的質(zhì)控品質(zhì)量更為可靠；由于采用了Levery-Jennings質(zhì)控圖，圖中采用S/CO作為縱座標(biāo)、周次作為橫座標(biāo)、13S為質(zhì)控限，由于使用的是最常用的質(zhì)控圖，門檻低，可操作性強，而且因為采用的是13S質(zhì)控限，對生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的不可預(yù)知的隨機問題非常敏感，有助于在生產(chǎn)的同時不斷在細(xì)節(jié)上持續(xù)改進、優(yōu)化生產(chǎn)工藝這種方法對隨機變量尤其敏感、能用來準(zhǔn)確和快速地發(fā)現(xiàn)隨機問題并在后續(xù)和生產(chǎn)過程中進行持續(xù)改進，與同時申請的專利相比較，本發(fā)明更側(cè)重于隨機問題的發(fā)現(xiàn)和持續(xù)改進，對優(yōu)化工藝過程和產(chǎn)品質(zhì)量控制方法都有很大幫助。
具體實施方式
實施例1：
一種乙肝表面抗原血清室內(nèi)質(zhì)控品的制造方法，包括如下步驟：
1）原料采集及篩選：
①收集乙肝表面抗原分別為陽性和陰性的血漿或血清，將乙肝陽性血漿或血清和乙肝陰性血漿或血清分開標(biāo)注，并篩選出無明顯溶血、黃疸、脂肪或污染的血漿或血清，作為預(yù)備用血漿或血清；
②對步驟①篩選過的預(yù)備用血漿或血清定感染四項（TPPA、HbSAg、HIV、HCV-IgG），篩選出結(jié)果為陰性的血漿或血清，作為備用血漿或血清；
2）稀釋血清制造：
①將1）獲得的備用血漿或血清置于55℃-60℃環(huán)境下，保溫0.5-1h，進行滅活處理；
②將步驟①滅活后的血漿或血清進行離心處理，離心轉(zhuǎn)速為3000-3500r/min，離心時間為5-10分鐘，分別獲得乙肝陽性血清和多組乙肝陰性血清；
③將每組乙肝陰性血清至少分裝5支試管，然后對乙肝陽性血清進行稀釋，直至將乙肝陽性血清稀釋至標(biāo)準(zhǔn)試劑盒的2-4倍，獲得多組備用質(zhì)控品；
④按步驟③多次反復(fù)制造，直至將每組備用質(zhì)控品按每周使用10次配夠一年的劑量；
⑤按照標(biāo)準(zhǔn)方法在備用質(zhì)控品內(nèi)加入對應(yīng)濃度的廣譜防腐劑；
3）備用質(zhì)控品的保存與監(jiān)測：
①將2）制備的備用質(zhì)控品分裝保存并標(biāo)記，保存于條件溫度不高于-20℃，濕度不大于10%的環(huán)境中；
②按每周每組檢測一支的頻率對備用質(zhì)控品進行動態(tài)跟蹤檢測，并從第三周起記錄檢測結(jié)果；
4）質(zhì)控：
①將3）中步驟②獲得的數(shù)據(jù)填表并繪圖，具體為以臨床檢驗中心的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控品作為陰性參照，繪編Levery-Jennings質(zhì)控圖，圖中采用S/CO作為縱座標(biāo)、周次作為橫座標(biāo)、13S為質(zhì)控限；
②均勻性檢測：隨機抽取10個分裝后的樣本，對每個樣本重復(fù)檢測1次，進行t分析；隨機抽取20個分裝后的樣本，對每個樣本單孔測定，本互對比，進行CV%分析；
③穩(wěn)定性檢測：每隔60天，采用3天的結(jié)果，每天對質(zhì)控品重復(fù)檢測1次，進行方差分析；每隔30天，采用1天的結(jié)果，每天對質(zhì)控品重復(fù)檢測3次，與上一次檢測數(shù)據(jù)進行進行CV%分析；
④抑菌效果檢測：取樣本2-3ml進行科學(xué)評估，用無菌吸管隨機吸取200ul分別平均注入于2塊營養(yǎng)瓊脂平板，均勻平鋪，然后將營養(yǎng)瓊脂平板置于35℃-37℃下培養(yǎng)40-50h，計數(shù)菌落數(shù)，計數(shù)方法為細(xì)菌總數(shù)（cfu/ml）=5*（2塊平皿菌落數(shù)之和/2），進行細(xì)菌滋生的風(fēng)險評估；
⑤在整個過程中必須嚴(yán)格防護，防止洗板機異常、標(biāo)本之間交叉感染、室溫下長時放置（大于2h）等異常情況出現(xiàn)；
5）持續(xù)改進：
在統(tǒng)計數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)異常時立即徹底排查失控原因，總結(jié)并改進。
采用上述方法制造的乙肝表面抗原血清室內(nèi)質(zhì)控品的使用方法，包括如下步驟：
1）儲存：所有質(zhì)控品存儲在條件溫度不高于-20℃，濕度不大于10%的環(huán)境中，存儲方式為將質(zhì)控品先放入密封容器后再將密封容器放入無霜冰箱；
2）復(fù)溶：置于15℃-25℃下15-20min，期間緩慢轉(zhuǎn)動質(zhì)控品，在解凍后搖晃質(zhì)控品至其均勻；
3）使用：將2）復(fù)溶后的質(zhì)控品按標(biāo)準(zhǔn)方法進行正常使用。
實測效果為，采用本實施例所述制備及方法，可制造出失效率低于0.5%的乙肝表面抗原血清室內(nèi)質(zhì)控品，遠(yuǎn)低于市面常用的質(zhì)控品（約3%），還具備了持續(xù)改進優(yōu)化的可能性。
對所公開的實施例的上述說明，僅為了使本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)或使用本發(fā)明。對這些實施例的多種修改對本領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)人員來說將是顯而易見的，本文中所定義的一般原理可以在不脫離本發(fā)明的精神或范圍的情況下，在其它實施例中實現(xiàn)。因此，本發(fā)明將不會被限制于本文所示的這些實施例，而是要符合與本文所公開的原理和新穎特點相一致的最寬的范圍。