本發(fā)明提供一種利用核磁共振氫譜測(cè)定甾醇和/或其衍生物含量的方法。

背景技術(shù)：

甾醇及其衍生物包括天然和合成的甾醇及其衍生物。天然甾醇及其衍生物包括植物和動(dòng)物甾醇及其衍生物。其中，植物甾醇(phytosterols,plant sterols)是一類以環(huán)戊烷全氫菲(甾核)為骨架的天然醇類化合物，是植物體內(nèi)構(gòu)成細(xì)胞膜的成分之一。該類化合物結(jié)構(gòu)類似于膽固醇，具有降低膽固醇、防治心血管疾病等作用，是一類安全有效的天然植物化學(xué)物。1999年，美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)就已批準(zhǔn)添加植物甾醇的食品可使用“有益健康”標(biāo)簽。2000年，美國(guó)FDA通過(guò)了對(duì)植物甾醇的健康聲明，含植物甾醇的人造奶油和色拉醬被列入功能食品，廣泛用于人群慢性病的預(yù)防。2001年美國(guó)國(guó)家膽固醇教育項(xiàng)目(ATPIII)建議：在特定人群的膳食中每日補(bǔ)充2g植物甾醇可以降低血漿中膽固醇以及低密度脂蛋白膽固醇的水平，從而降低冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。目前，歐、美、日等國(guó)已將植物甾醇作為食品添加劑廣泛用于人造黃油、烹調(diào)油等功能食品。在我國(guó)，2010年植物甾醇被批準(zhǔn)為新資源食品。

因甾醇及其衍生物分子中沒(méi)有紫外特征吸收，進(jìn)行含量測(cè)定時(shí)無(wú)法直接采用最常見(jiàn)的紫外-可見(jiàn)分光光度法。目前，測(cè)定甾醇含量的方法主要有(1)衍生化后的紫外-可見(jiàn)分光光度法。該法的樣品預(yù)處理步驟繁瑣，重現(xiàn)性較差，線性范圍窄；(2)氣相色譜法(GC)。通常采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)，需要先將樣品皂化后，再進(jìn)行TMS酯化衍生反應(yīng)，然后經(jīng)氣相色譜進(jìn)行基線分離，通過(guò)建立主要單體化合物的含量測(cè)定方法后，最后利用加和單體含量來(lái)代表有效部位總含量。該方法只能測(cè)定幾種已知甾醇的含量，忽略結(jié)構(gòu)相似的其他未知組分，使總含量的結(jié)果不夠準(zhǔn)確。也有采用核磁共振技術(shù)測(cè)定甾醇含量的報(bào)道，但所選用的定量峰，容易受到其它峰干擾，測(cè)定結(jié)果同樣不夠準(zhǔn)確。謀求一種準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便易行的甾醇含量精確測(cè)定方法十分必要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了克服現(xiàn)有測(cè)定甾醇含量方法中存在的不足之處，本發(fā)明提供一種核磁共振氫譜測(cè)定甾醇及其衍生物含量的方法，該方法利用核磁共振內(nèi)標(biāo)法，選擇特定的甾醇及其衍生物定量峰，測(cè)定甾醇及其衍生物的含量，具有快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。

為此，本發(fā)明一方面提供一種利用核磁共振技術(shù)測(cè)定甾醇和/或其衍生物含量的方法，所述方法包括以下步驟：將含甾醇和/或其衍生物的樣品溶于內(nèi)標(biāo)溶液，配制供試液，測(cè)定供試品的核磁共振氫譜，選擇甾醇和/或其衍生物的定量峰和內(nèi)標(biāo)定量峰進(jìn)行積分，分別得到甾醇和/或其衍生物的定量峰積分面積A_f及內(nèi)標(biāo)定量峰積分面積A_s，由面積A_f及面積A_s得到甾醇和/或其衍生物的含量，其中，甾醇和/或其衍生物包括選自甾醇、甾醇酯、甾醇糖苷和甾醇醚中的一種或兩種以上化合物，其特征在于所述甾醇和/或其衍生物的定量峰為3位的H峰。

優(yōu)選地，在上述方法中，甾醇和/或其衍生物的含量根據(jù)以下公式(1)進(jìn)行計(jì)算：

$W_f=W_s\×\frac{A_f}{A_s}\×\frac{N_s}{N_f}\×\frac{M_f}{M_s}\×P_s---\left(1\right)$

其中：W_f為甾醇和/或其衍生物的質(zhì)量；W_s為內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量；A_f為甾醇和/或其衍生物定量峰的積分面積；A_s為內(nèi)標(biāo)物定量峰的積分面積；N_f為甾醇和/或其衍生物定量峰所包含的氫個(gè)數(shù)；N_s為內(nèi)標(biāo)物定量峰所包含的氫個(gè)數(shù)；M_f為甾醇和/或其衍生物的分子量；M_s為內(nèi)標(biāo)物的分子量；P_s為內(nèi)標(biāo)物的純度校正因子。

優(yōu)選地，上述方法中，所述的甾醇和/或其衍生物為天然的甾醇和/或其衍生物、或者合成的甾醇和/或其衍生物。所述的天然的甾醇和/或其衍生物為植物的甾醇和/或其衍生物、動(dòng)物甾醇和/或其衍生物、或者微生物甾醇和/或其衍生物。優(yōu)選所述甾醇和/或其衍生物為植物的甾醇和/或其衍生物。

優(yōu)選地，上述方法中，所述的甾醇和/或其衍生物包括選自β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、蕓苔甾醇、Δ⁵-燕麥甾醇、Δ⁷-燕麥甾醇、麥角甾醇、巖藻甾醇、馬尾藻甾醇、24-氫過(guò)氧基-24-乙烯基膽甾醇、24R,28R-環(huán)氧-24-乙基膽甾醇、24S,28S-環(huán)氧-24-乙基膽甾醇、24-氫過(guò)氧基豆甾-5,24(28)-二烯-3β-醇、24-乙烯氧基膽甾-5,23-二烯-3β-醇、豆甾-3β-羥基-5,23,25-三烯、膽甾-5,22-二烯-3β-羥基-24-酮、24-羰基-膽甾醇、24-亞甲基-膽甾醇、3β,28ξ-二羥基-24-乙基-5,23(Z)膽甾二烯；它們與棕櫚酸、亞油酸、亞麻酸、EPA、DHA、琥珀酸、煙酸、阿魏酸、綠原酸、磷脂等形成的酯；以及它們與葡萄糖、半乳糖、巖藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、甘露糖醛酸、古洛糖醛酸等形成的糖苷中的一種或兩種以上化合物。

優(yōu)選地，上述方法中，所述含甾醇和/或其衍生物的樣品為含有選自甾醇、甾醇酯、甾醇糖苷和甾醇醚中的兩種以上化合物的樣品，所述甾醇和/或其衍生物含量為甾醇和/或其衍生物的總含量。優(yōu)選地，以巖藻甾醇或其相應(yīng)衍生物、或者β-谷甾醇或其相應(yīng)衍生物的分子量作為M_f以代表總甾醇和/或其衍生物的分子量，根據(jù)所述公式(1)進(jìn)行計(jì)算。

優(yōu)選地，上述方法中，所述內(nèi)標(biāo)物為選自1,3,5-三甲基苯、對(duì)苯二酚、1,3,5-三氧六環(huán)、1,2,4,5-四氯苯，2,3,4,5-四氯硝基苯，1,4-二硝基苯，對(duì)苯二酸，對(duì)苯二甲酸二甲酯，對(duì)苯二甲酸單甲酯，苯甲酸芐酯和順丁烯二酸酐中的一種或兩種以上。

優(yōu)選地，上述方法中，內(nèi)標(biāo)溶液使用氘代溶劑配制；優(yōu)選所述氘代溶劑為選自氘代氯仿、氘代二甲基亞砜、氘代甲醇、氘代丙酮、氘代水、氘代二氯甲烷、氘代乙腈、氘代吡啶和氘代乙酸中的一種或兩種以上的混合物。

優(yōu)選地，上述方法中，所述供試品溶液的濃度為使甾醇和/或其衍生物在核磁共振氫譜中的定量峰面積為內(nèi)標(biāo)物定量峰面積的0.05至15倍范圍的濃度；優(yōu)選地，所述供試品溶液的濃度為0.1-25mg/ml。

優(yōu)選地，上述方法中，其中核磁共振氫譜測(cè)試的脈沖角為30-90度，弛豫時(shí)間大于或等于10s，測(cè)試溫度為20-45℃。掃描次數(shù)可以是大于等于1次。例如，測(cè)試條件可以為：脈沖角45度，弛豫時(shí)間15s，測(cè)試溫度25℃，掃描次數(shù)32次。

本發(fā)明另一方面還提供上述方法用于測(cè)定動(dòng)物、植物和/或微生物的提取物；食品；藥品；或者化妝品中的甾醇和/或其衍生物含量的用途。

本發(fā)明利用定量核磁共振氫譜測(cè)定甾醇和/或其衍生物含量的方法，甾醇和/或其衍生物定量峰選用3-H峰，相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，能夠更加精確地測(cè)定甾醇和/或其衍生物的含量。本發(fā)明通過(guò)選擇特定的定量峰，實(shí)現(xiàn)混合物中多個(gè)成分的定量分析，尤其是實(shí)現(xiàn)了總甾醇類化合物的含量測(cè)定。

具體實(shí)施方式：

以下實(shí)施例僅是示例性的，不對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍構(gòu)成限制。

實(shí)施例1：海藻中植物甾醇總含量的測(cè)定

(1)供試品溶液的制備

準(zhǔn)確稱取羊棲菜粗粉750mg，加入4.8mL蒸餾水，室溫浸潤(rùn)15min；加入12mL甲醇、6mL二氯甲烷(含0.01％BHT)，震蕩2min；加入6mL二氯甲烷震蕩30s；加入6mL水震蕩30s；5000rpm離心15min，棄上清；加入15g無(wú)水硫酸鈉，搖床1h，過(guò)濾，濃縮得總脂。向總脂中加入1mL 1M KOH/80％乙醇，室溫、避光皂化反應(yīng)15h；向反應(yīng)液中加入2mL水，用3mL乙醚萃取，共兩次；合并乙醚層，4mL水洗至中性，N₂吹干，得乙醚萃取物。

以2,3,4,5-四氯硝基苯為內(nèi)標(biāo)，氘代氯仿為溶劑，配制濃度為1.0mg/ml的內(nèi)標(biāo)溶液。準(zhǔn)確移取0.4ml內(nèi)標(biāo)溶液溶解上述干燥乙醚萃取物，充分溶解后，即得供試品溶液。

(2)核磁共振氫譜測(cè)定植物甾醇總含量的條件

采用Agilent DD2 500M核磁共振波譜儀，將供試液置于5mm核磁管中密封，按照以下條件進(jìn)行核磁共振氫譜的測(cè)定：脈沖角為45°，弛豫時(shí)間d1＝15s，掃描次數(shù)nt＝32，測(cè)定溫度25℃，窗函數(shù)lb＝0.3Hz。

選擇3-H，δ3.52(1H,m)處共振峰為供試品甾醇定量峰。甾醇定量峰與內(nèi)標(biāo)定量峰(s,δ＝7.74)完全分離，且不受其他共振峰的干擾，滿足定量要求。

將所得氫譜進(jìn)行積分處理，按照公式(1)求得供試品中甾醇含量。

$W_f=W_s\×\frac{A_f}{A_s}\×\frac{N_s}{N_f}\×\frac{M_f}{M_s}\×P_s---\left(1\right)$

其中：W_f為供試品中甾醇的質(zhì)量；W_s為內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量；A_s為內(nèi)標(biāo)物定量峰的積分面積；A_f為供試品甾醇定量峰的積分面積；N_f為供試品甾醇定量峰包含的氫個(gè)數(shù)(1)；N_s為內(nèi)標(biāo)物定量峰包含的氫個(gè)數(shù)(1)；M_f為供試品甾醇的分子量；M_s為內(nèi)標(biāo)物的分子量(260.9)；P_s為內(nèi)標(biāo)物的純度校正因子(99.3％)。

(3)核磁共振氫譜測(cè)定植物甾醇總含量的方法學(xué)建立

①線性關(guān)系考察

以2,3,4,5-四氯硝基苯為內(nèi)標(biāo)，氘代氯仿為溶劑，配制濃度為1.0mg/ml的內(nèi)標(biāo)溶液。以內(nèi)標(biāo)溶液為溶劑配制7份不同濃度(0.25、0.5、1.0、2.5、5.0、7.5、10mg/mL)的巖藻甾醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液。分別精密移取0.4mL上述巖藻甾醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液，轉(zhuǎn)移至5mm核磁管中密封。按步驟(2)進(jìn)行核磁共振氫譜測(cè)定。

以巖藻甾醇與內(nèi)標(biāo)物定量峰面積的比值為縱坐標(biāo)，巖藻甾醇質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為y＝0.6057x+0.0123，相關(guān)系數(shù)r＝0.9998。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)內(nèi)標(biāo)質(zhì)量濃度為1.00mg/mL時(shí)，巖藻甾醇在0.25-10.00mg/mL的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

②定量限和檢測(cè)限考察

根據(jù)核磁共振氫譜，以信噪比S/N＝3時(shí)的測(cè)定濃度為其相應(yīng)的檢測(cè)限(LOD)，以信噪比S/N＝10時(shí)的測(cè)定濃度為其相應(yīng)的定量限(LOQ)。采用巖藻甾醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法的LOD為31.25μg/mL，LOQ為125.00μg/mL。

③精密度試驗(yàn)

取同一份供試品溶液，按步驟(2)進(jìn)行核磁共振氫譜測(cè)定，測(cè)試6次。按公式(1)，M_f以巖藻甾醇分子量412.7計(jì)，精密度的RSD為0.95％，表明該方法精密度良好。

④重復(fù)性試驗(yàn)

平行制備6份供試品溶液，按步驟(2)進(jìn)行核磁共振氫譜測(cè)定。按公式(1)，M_f以巖藻甾醇分子量412.7計(jì)，重復(fù)性的RSD為2.36％，表明該方法重復(fù)性良好。

⑤穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一份供試品溶液，按步驟(2)，分別于0、2、4、8、24、48、72小時(shí)進(jìn)行核磁共振氫譜測(cè)定。按公式(1)，M_f以巖藻甾醇分子量412.7計(jì)，各時(shí)間點(diǎn)測(cè)定結(jié)果的RSD為0.95％，表明供試品溶液在72h內(nèi)穩(wěn)定，滿足分析測(cè)試要求。

⑥回收率試驗(yàn)

采用加標(biāo)回收率方法測(cè)定回收率。稱取羊棲菜粗粉750mg，加入相等質(zhì)量的巖藻甾醇標(biāo)準(zhǔn)品，按步驟(1)平行制備6份供試品溶液，按步驟(2)進(jìn)行核磁共振氫譜測(cè)定。按公式(1)，M_f以巖藻甾醇分子量412.7計(jì)，平均回收回收率為99.71％，RSD為4.48％，說(shuō)明該方法具有較高回收率，即準(zhǔn)確性良好。

(4)海藻樣品中植物甾醇的總含量測(cè)定

分別取不同來(lái)源的海藻樣品，按步驟(1)制備供試品溶液，按步驟(2)進(jìn)行核磁共振氫譜測(cè)定，每個(gè)樣品測(cè)定3次。按公式(1)，M_f以供試品中的代表性成分巖藻甾醇分子量412.7計(jì)，得海藻樣品植物甾醇總含量，具體結(jié)果見(jiàn)表1。

表1不同來(lái)源海藻樣品中植物甾醇的總含量(n＝3)

實(shí)施例2：羊棲菜提取物中植物甾醇總含量的測(cè)定

準(zhǔn)確稱取不同批次羊棲菜提取物各2g，分別按料液比1:10加入1.5M氫氧化鉀乙醇溶液，70℃反應(yīng)1.5h，得反應(yīng)液。冷卻至室溫，加入1倍量乙醚萃取，共萃取兩次，合并乙醚層，水洗至中性，氮?dú)獯蹈桑靡颐演腿∥?。?,3,4,5-四氯硝基苯為內(nèi)標(biāo)，氘代氯仿為溶劑，配制濃度為1.0mg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液。準(zhǔn)確移取0.4mL內(nèi)標(biāo)溶液溶解上述干燥乙醚萃取物，充分溶解后，即得供試品溶液。

按實(shí)施例1步驟(2)進(jìn)行核磁共振氫譜測(cè)定，每個(gè)樣品測(cè)定3次。對(duì)氫譜進(jìn)行積分處理，按照實(shí)施例1中的公式(1)，M_f以供試品中的代表性成分巖藻甾醇分子量412.7計(jì)，得羊棲菜提取物中植物甾醇的總含量，具體結(jié)果見(jiàn)表2。

表2不同批次羊棲菜提取物中植物甾醇的總含量(n＝3)

實(shí)施例3：玉米油中植物甾醇總含量的測(cè)定

準(zhǔn)確稱取不同批次玉米油各200mg，同實(shí)施例2制備得供試品溶液。

按實(shí)施例1步驟(2)進(jìn)行核磁共振氫譜測(cè)定，對(duì)氫譜進(jìn)行積分處理，按照實(shí)施例1中的公式(1)，M_f以供試品中的代表性成分β-谷甾醇分子量414.7計(jì)，得玉米油中植物甾醇的總含量，具體結(jié)果見(jiàn)表3。

表3不同批次玉米油中植物甾醇的總含量

實(shí)施例4：保健品中植物甾醇總含量的測(cè)定

取不同品牌的保健品植物甾醇片各20片，研細(xì)，精密稱取樣品粉末各2.00mg。以2,3,4,5-四氯硝基苯為內(nèi)標(biāo)，氘代氯仿為溶劑，配制濃度為1.0mg/ml的內(nèi)標(biāo)溶液。向各樣品粉末準(zhǔn)確加入0.4mL上述內(nèi)標(biāo)溶液使其充分溶解，10000rpm離心5min，取上清液作為供試液。

按照實(shí)施例1步驟(2)進(jìn)行核磁共振氫譜測(cè)定。對(duì)氫譜進(jìn)行積分處理，按照實(shí)施例1中的公式(1)，M_f以供試品中的代表性成分β-谷甾醇分子量414.7計(jì)，得植物甾醇片中植物甾醇的總含量，具體結(jié)果見(jiàn)表4。

表4市售不同品牌植物甾醇片中植物甾醇的總含量

實(shí)施例5：核磁共振氫譜測(cè)定保健品中植物甾醇總含量的方法

取不同品牌保健品植物甾醇片各20片，研細(xì)，精密稱取樣品粉末各2.00mg。以2,3,4,5-四氯硝基苯為內(nèi)標(biāo)，氘代丙酮為溶劑，配制濃度為1.0mg/ml的內(nèi)標(biāo)溶液。向各樣品粉末準(zhǔn)確加入0.4mL上述內(nèi)標(biāo)溶液使其充分溶解，10000rpm離心5min，取上清液作為供試液。

按照實(shí)施例1步驟(2)進(jìn)行核磁共振氫譜測(cè)定。選擇3-H，δ3.38(1H,m)處共振峰為供試品甾醇定量峰。甾醇定量峰與內(nèi)標(biāo)定量峰(s，δ＝8.21)完全分離，且不受其他共振峰的干擾，滿足定量要求。按照實(shí)施例1中的公式(1)，M_f以供試品中的代表性成分β-谷甾醇分子量414.7計(jì)，得植物甾醇片中植物甾醇的總含量，具體結(jié)果見(jiàn)表5。

表5市售不同品牌植物甾醇片中植物甾醇的總含量

實(shí)施例6：保健品中植物總甾醇含量的測(cè)定

取不同品牌保健品植物甾醇片各20片，研細(xì)，精密稱取樣品粉末各2.00mg。以對(duì)苯二甲酸二甲酯為內(nèi)標(biāo)，氘代氯仿為溶劑，配制濃度為1.0mg/ml的內(nèi)標(biāo)溶液。向各樣品粉末準(zhǔn)確加入0.4mL上述內(nèi)標(biāo)溶液使其充分溶解，10000rpm離心5min，取上清液作為供試液。

按照實(shí)施例1步驟(2)進(jìn)行核磁共振氫譜測(cè)定。選擇3-H峰，δ3.52(1H,m)處共振峰為定量峰。甾醇定量峰與內(nèi)標(biāo)定量峰(s，δ＝8.10)完全分離，且不受其他共振峰的干擾，滿足定量要求。按照公式(1)，M_f以供試品中的代表性成分β-谷甾醇分子量414.7計(jì)，Ns為內(nèi)標(biāo)物定量峰包含的氫個(gè)數(shù)(4)，Ms為內(nèi)標(biāo)物的分子量(194.2)；Ps為內(nèi)標(biāo)物的純度校正因子(99.9％)。計(jì)算得植物甾醇片中植物總甾醇的含量，具體結(jié)果見(jiàn)表6。

表6市售不同品牌植物甾醇片中植物甾醇的總含量

實(shí)施例7：核磁共振氫譜測(cè)定甾醇酯含量的方法

以2,3,4,5-四氯硝基苯為內(nèi)標(biāo)，氘代氯仿為溶劑，配制濃度為1.0mg/ml的內(nèi)標(biāo)溶液。精密稱取合成樣品馬尾藻甾醇3-硬脂酸酯粉末2.00mg，準(zhǔn)確加入0.4mL上述內(nèi)標(biāo)溶液使其充分溶解，得供試品溶液。

按照實(shí)施例1步驟(2)進(jìn)行核磁共振氫譜測(cè)定。選擇3-H，δ＝4.61(1H,m)處共振峰為馬尾藻甾醇3-硬脂酸酯定量峰，與內(nèi)標(biāo)定量峰(1H，s，δ＝7.74)完全分離，且不受其他共振峰的干擾，滿足定量要求。按照實(shí)施例1中的公式(1)，M_f以馬尾藻甾醇3-硬脂酸酯分子量695.2計(jì)，所測(cè)合成品中馬尾藻甾醇3-硬脂酸酯的含量為98.50％。

實(shí)施例8：甾醇糖苷含量的測(cè)定

以2,3,4,5-四氯硝基苯為內(nèi)標(biāo)，氘代二甲基亞砜為溶劑，配制濃度為1.0mg/ml的內(nèi)標(biāo)溶液。精密稱取實(shí)驗(yàn)室自制的谷甾醇-3-O-β-葡萄糖苷2.00mg，準(zhǔn)確加入0.4mL上述內(nèi)標(biāo)溶液使其充分溶解。

按照實(shí)施例1步驟(2)的條件進(jìn)行核磁共振氫譜測(cè)定。選擇3-H，δ＝3.66(1H,m)處共振峰為谷甾醇-3-O-β-葡萄糖苷定量峰，與內(nèi)標(biāo)定量峰(1H，s，δ＝8.48)完全分離，且不受其他共振峰的干擾，滿足定量要求。按照實(shí)施例1中的公式(1)，M_f以谷甾醇-3-O-β-葡萄糖苷的分子量576.9計(jì)，所測(cè)供試品中谷甾醇-3-O-β-葡萄糖苷的含量為99.23％。

本發(fā)明的利用定量核磁共振技術(shù)測(cè)定甾醇和/或其衍生物含量的方法，優(yōu)勢(shì)主要表現(xiàn)在如下幾個(gè)方面：(1)甾醇樣品擁有多組信號(hào)峰。本發(fā)明通過(guò)選擇特定信號(hào)峰作為定量峰，可對(duì)單個(gè)甾醇以及總甾醇的含量進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定，實(shí)現(xiàn)了總甾醇和/或其衍生物的定量分析。(2)鑒定和檢測(cè)可以同步進(jìn)行。本發(fā)明的方法可以同時(shí)提供物質(zhì)結(jié)構(gòu)和含量信息，特別是具有獨(dú)特的異構(gòu)體識(shí)別能力，這是現(xiàn)有技術(shù)不可比擬的。(3)實(shí)驗(yàn)消耗少，對(duì)樣品無(wú)破壞性，實(shí)驗(yàn)完成后樣品可以回收，特別適用于不穩(wěn)定化合物以及大批量樣品的測(cè)定。(4)樣品制備簡(jiǎn)單，無(wú)需事先進(jìn)行色譜分離，不需要衍生化，可操作性強(qiáng)，是一種全新的簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的分析方法。