本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種注射液中葡萄糖降解物的檢測方法。

背景技術(shù)：

鹽酸丁丙諾啡屬于阿片受體的部分拮抗-激動劑。臨床研究表明，鹽酸丁丙諾啡具有較強的鎮(zhèn)痛作用，其身體依賴性低于嗎啡和度冷丁，而精神依賴性與嗎啡相當(dāng)，其鎮(zhèn)痛效果優(yōu)于度冷丁。鹽酸丁丙諾啡注射液為鹽酸丁丙諾啡與葡萄糖的滅菌水溶液，為強效鎮(zhèn)痛藥，用于各類手術(shù)后疼痛，癌癥疼痛，燒傷后疼痛，脈管炎引起的肢痛及心絞痛和其他內(nèi)臟痛。

葡萄糖在酸性溶液中不穩(wěn)定，易降解成5-羥甲基糠醛(HMF)；5-羥甲基糠醛再分解為乙酰丙酸和乙酸或形成5-羥甲基糠醛聚合物。近期有文獻報道HMF的衍生物SMF(5-sulfooxymethylfurfural)和CMF(5-chloromethylfurfural)具有細胞毒性和基因毒性；在小鼠的細胞試驗中顯示，HMF是引起結(jié)腸異?；兊捏w外誘變劑和促進劑。

目前對葡萄糖注射液多采用紫外分光光度法和高效液相色譜法測定5-羥甲基糠醛，而不檢測其它降解物。5-羥甲基糠醛是極性極大的小分子化合物，在常規(guī)的色譜條件下很快被洗脫出來(接近色譜柱的死體積時間)；目前的測定方法不能將5-羥甲基糠醛與其它降解物分離開。只有建立有效的檢測方法，將5-羥甲基糠醛與葡萄糖其它未知降解物分離，才能準確控制5-羥甲基糠醛的含量。通過對葡萄糖其它降解物的定性、定量方法的建立，根據(jù)其毒性確立合理的控制限度。

另外，鹽酸丁丙諾啡注射液中葡萄糖的濃度為50mg/ml(5％)，而鹽酸丁丙諾啡的濃度為0.15mg/ml或0.3mg/ml，二者濃度相差較大。若將葡萄糖降解物誤辨為鹽酸丁丙諾啡的雜質(zhì)，則影響對產(chǎn)品質(zhì)量的評價。鑒于此，更有必要建立專屬性很強的鹽酸丁丙諾啡注射液中葡萄糖降解物的檢測方法，保證藥物質(zhì)量的可控性，從而確保用藥安全。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種鹽酸丁丙諾啡注射液中葡萄糖降解物的檢測方法，該分析方法主要用于檢測葡萄糖降解物中除5-羥甲基糠醛外的其它降解物。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取了以下技術(shù)方案：

一種鹽酸丁丙諾啡注射液中葡萄糖降解物的檢測方法，采用高效液相色譜法測定葡萄糖降解物中除5-羥甲基糠醛外的其它降解物。

采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱擔(dān)體，用有機相和緩沖鹽溶液按一定比例配成流動相，按照梯度條件洗脫。檢測波長為280-290nm，流速為0.4-1.5ml/min。以不加校正因子的主成分自身對照法計算葡萄糖降解物的含量。

本發(fā)明方法所述有機相選自乙腈或甲醇，優(yōu)選乙腈。緩沖鹽溶液為磷酸鹽緩沖液、乙酸鹽緩沖液，優(yōu)選磷酸鹽緩沖液。磷酸鹽選自磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸二氫胺、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀中的一種或多種混合物，優(yōu)選磷酸二氫鉀。緩沖鹽的濃度為0.01～1.00mol/L，優(yōu)選濃度為0.04mol/L。緩沖鹽溶液的pH值范圍為2～8，優(yōu)選為4.5。

梯度洗脫程序如表1所示，其中：A相為乙腈-磷酸鹽緩沖液體積比為10:90，B相為乙腈。

表1梯度洗脫程序

按照以上方法可以將鹽酸丁丙諾啡注射液中5-羥甲基糠醛、未知葡萄糖降解物與丁丙諾啡色譜峰進行有效分離，特別是將5-羥甲基糠醛與未知葡萄糖降解物完全分離開，可以單獨計算5-羥甲基糠醛和未知葡萄糖降解物的含量。

附圖說明

圖1為實施例1的色譜圖；

圖2為實施例2的色譜圖。

具體實施方式

下面的實施例將對本發(fā)明作更具體的解釋，但本發(fā)明并不僅僅局限于這些實施例，同樣這些實施例也不以任何方式限制本發(fā)明。

實施例1

色譜條件：采用ODS色譜柱；流動相A相為乙腈-磷酸二氫鉀緩沖液(5.44g磷酸二氫鉀溶于900ml水中用5％磷酸調(diào)pH值為4.5，用水稀釋至1000ml)體積比為10:90，流動相B相為乙腈，梯度洗脫程序如表1所示。檢測波長為284nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。

測定方法：取鹽酸丁丙諾啡注射液和5％葡萄糖注射液按上述條件測定；另取5-羥甲基糠醛對照品，精密稱定，加水溶解并稀釋制成每1ml中含10μg的溶液，作為對照品溶液。

測定結(jié)果顯示，5-羥甲基糠醛保留時間約為4.5min，遠大于色譜柱的死時間且與溶劑峰完全分離，使5-羥甲基糠醛含量計算準確。8min左右色譜峰為葡萄糖的其它降解物，與5-羥甲基糠醛峰完全分離。

實施例2

按中國藥典2010版中鹽酸丁丙諾啡注射劑項下“5-羥甲基糠醛”的檢測條件測定。

色譜條件：采用ODS色譜柱；流動相為甲醇-乙腈-2％醋酸銨溶液-冰醋酸(60:10:40:5)；流速為1.0ml/min；檢測波長為288nm；柱溫為30℃。

測定方法：取鹽酸丁丙諾啡注射液和5％葡萄糖注射液按上述條件測定；另取5-羥甲基糠醛對照品，精密稱定，加水溶解并稀釋制成每1ml中含10μg的溶液，作為對照品溶液。

測定結(jié)果顯示，5-羥甲基糠醛保留時間約為3min，與溶劑峰較接近，分離不完全，且未分離出葡萄糖的其它降解物，干擾5-羥甲基糠醛含量的計算。