電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置制造方法
【專(zhuān)利摘要】本實(shí)用新型提供一種電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置,包括染色脫色盒和電泳膠鏟,染色脫色盒由盒體和盒蓋組成,盒蓋與盒體后壁通過(guò)鉸鏈相連緊密地覆蓋在盒體上,盒體中間通過(guò)隔板隔開(kāi)將染色脫色盒分成染色盒和脫色盒,電泳膠鏟由托盤(pán)和手柄組成,托盤(pán)上分布著孔隙,使托盤(pán)呈鏤空結(jié)構(gòu),手柄由水平柄和垂直柄連接而成,盒體的隔板兩側(cè)、外側(cè)壁內(nèi)側(cè)、前壁內(nèi)側(cè)或后壁內(nèi)側(cè)靠近盒底位置設(shè)有膠鏟支架,盒體外側(cè)壁和前壁頂部設(shè)有與手柄水平柄大小適配的凹槽,本實(shí)用新型具有安全性、簡(jiǎn)便性、實(shí)用性、通用性、經(jīng)濟(jì)性等性能特點(diǎn),經(jīng)不同實(shí)驗(yàn)室實(shí)際應(yīng)用證明其染色、脫色效果良好,能安全、便捷地移動(dòng)電泳凝膠,特別適合于核酸和糖的瓊脂糖凝膠電泳。
【專(zhuān)利說(shuō)明】電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及生物、醫(yī)藥、食品、化學(xué)等研究中的電泳實(shí)驗(yàn)裝置,尤其涉及一種電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]電泳是生物、醫(yī)藥、食品、化學(xué)等研究的重要實(shí)驗(yàn)技術(shù)。核酸、蛋白質(zhì)、酶、糖等的電泳實(shí)驗(yàn)皆需要對(duì)電泳凝膠進(jìn)行染色、脫色(漂洗)處理,同時(shí)還需要多次移動(dòng)凝膠(如將凝膠從染色、脫色容器移至觀察或拍照平臺(tái))。電泳凝膠的染色、脫色屬于電泳實(shí)驗(yàn)的后期處理和結(jié)果分析環(huán)節(jié),染色、脫色的效果或質(zhì)量直接影響到電泳實(shí)驗(yàn)的成敗優(yōu)劣。電泳凝膠由瓊脂糖或丙烯酰胺、N,N’-甲叉雙丙烯酰胺等單體聚合而成,容易破裂,經(jīng)過(guò)染色、脫色處理的凝膠還可能具有毒性甚至致癌性(見(jiàn)下文),不易移動(dòng),因此設(shè)計(jì)、開(kāi)發(fā)一種能夠安全、便捷地移動(dòng)凝膠的專(zhuān)門(mén)裝置對(duì)于電泳實(shí)驗(yàn)的圓滿(mǎn)完成具有至關(guān)重要的意義。電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置是電泳實(shí)驗(yàn)的核心儀器之一,它的設(shè)計(jì)和改進(jìn)對(duì)于核酸、蛋白質(zhì)、酶、糖等重要生物大分子的分析以及生物、醫(yī)藥、食品、化學(xué)等的研究均具有一定的積極意義。
[0003]瓊脂糖凝膠電泳是一種快速、簡(jiǎn)便的常規(guī)實(shí)驗(yàn)技術(shù),常用來(lái)檢測(cè)、分離、純化和鑒定DNA和RNA,在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)等領(lǐng)域研究中具有廣泛的用途。核酸經(jīng)電泳分離后必須采用核酸染料染色方能顯示出條帶用于觀察。目前應(yīng)用最廣泛的核酸染料為溴化乙錠即溴乙錠(Ethidium bromide, EB),具有靈敏度高、穩(wěn)定性好、成本低等優(yōu)點(diǎn)。溴化乙錠分子中含有一個(gè)三環(huán)平面基團(tuán),能嵌入核酸堿基分子中,在紫外光激發(fā)下可以發(fā)出橙紅色熒光?,F(xiàn)有的溴化乙錠染色方法大致分為兩種:一種是在制作瓊脂糖凝膠時(shí)直接向電泳緩沖液或凝膠中加入一定比例的溴化乙錠,電泳分離結(jié)束后直接在紫外光下觀察;另一種是在電泳分離后將凝膠放入溴化乙錠染色液中染色,再用蒸餾水脫色后置紫外光下觀察。由于溴化乙錠是一種強(qiáng)誘變劑,具有中等毒性和高致癌作用,因此,第一種染色方法雖然簡(jiǎn)便,節(jié)省了染色、脫色時(shí)間,但是電泳槽等實(shí)驗(yàn)設(shè)備受到了溴化乙錠污染,電泳緩沖液等試劑中也存在溴化乙錠殘留,污染范圍大,不利于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的維護(hù)和實(shí)驗(yàn)者健康的保障;另外,這種染色方法也不適于某些DNA片段(如DNA限制性酶切片段)大小的精確測(cè)定。第二種染色方法為大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室所采用,但是缺乏安全、簡(jiǎn)便、實(shí)用、規(guī)范的電泳凝膠染色、脫色和移動(dòng)設(shè)備。據(jù)本實(shí)用新型發(fā)明人調(diào)研,我國(guó)和俄羅斯的很多實(shí)驗(yàn)室采用白搪瓷盤(pán)、玻璃培養(yǎng)皿、塑料盒、有機(jī)玻璃盒等作為電泳凝膠染色、脫色裝置,采用普通塑料、有機(jī)玻璃、玻璃板或者塑料、橡膠手套移動(dòng)凝膠。實(shí)驗(yàn)者在將電泳凝膠放入、取出白搪瓷盤(pán)等容器過(guò)程中,很可能使手或皮膚接觸到染色液或者使染色液濺灑到衣服或?qū)嶒?yàn)臺(tái)上,對(duì)實(shí)驗(yàn)者的人身安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅。另一方面,由于溴化乙錠易被紫外線降解,因此采用普通的有機(jī)玻璃盒、塑料盒或玻璃培養(yǎng)皿等透明容器存放溴化乙錠染色液極易造成溴化乙錠光解,從而增加試劑消耗、降低染色質(zhì)量。近年來(lái),國(guó)際上開(kāi)發(fā)出了吖啶染料和花菁染料等多種新型核酸染料(如 Goldview> SYBR Green 1、Gelred、Gelgreen、Evagreen 和 Genefinder),藉以替代溴化乙錠。然而,初步研究暗示Goldview染料靈敏度較低,對(duì)皮膚、眼睛具有一定的刺激作用并且熒光容易淬滅。SYBR Green I染料雖然靈敏度和信噪比較高,但是價(jià)格昂貴、穩(wěn)定性差、容易降解,同溴化乙錠一樣需要避光保存。蔣玲艷等在2006年的《生物技術(shù)通報(bào)》上撰文指出,將SYBRGreen I直接加入電泳凝膠中進(jìn)行染色時(shí)可能造成DNA條帶的扭曲、加大。Gelred雖然毒性低且染色效果與溴化乙錠相當(dāng),但是價(jià)格昂貴,大部分實(shí)驗(yàn)室難以接受??傮w上看,目前推出的新型核酸染料存在染色效果欠佳、安全性不確切或價(jià)格昂貴等缺點(diǎn),難以完全替代溴化乙錠。事實(shí)上,無(wú)論采用溴化乙錠常規(guī)染料還是Goldview等新型染料對(duì)瓊脂糖凝膠(核酸)進(jìn)行染色,為保障實(shí)驗(yàn)者的人身安全、保護(hù)實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境、實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化管理起見(jiàn),設(shè)計(jì)、開(kāi)發(fā)一種安全、簡(jiǎn)便、實(shí)用、通用、經(jīng)濟(jì)的電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置都顯得十分重要和必要。在設(shè)計(jì)、開(kāi)發(fā)凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置時(shí),對(duì)于以溴化乙錠等紫外光敏感物質(zhì)為染料或者以紫外光敏感物質(zhì)為脫色液的電泳而言,應(yīng)當(dāng)充分考慮制造材料的紫外光阻隔性能。
[0004]同瓊脂糖凝膠電泳一樣,篩分型瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場(chǎng)凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、等電聚焦電泳、雙向電泳等也是重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù),在生物、醫(yī)藥、食品、化學(xué)等領(lǐng)域研究中具有一定的用途。但是,這些電泳技術(shù)也普遍缺乏規(guī)范化的凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置,影響了電泳實(shí)驗(yàn)質(zhì)量與效率的提高。特別需要指出的是,近年來(lái)糖生物學(xué)(Glycob1logy)、糖組學(xué)(Glycomics)研究受到了國(guó)際學(xué)術(shù)界的重視,糖電泳技術(shù)的應(yīng)用也日益廣泛,但是糖電泳實(shí)驗(yàn)同樣也缺乏規(guī)范化的凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置。據(jù)檢索,國(guó)內(nèi)外迄今未見(jiàn)有關(guān)糖電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)一體化設(shè)備的報(bào)道。
[0005]電泳技術(shù)誕生以來(lái),國(guó)內(nèi)外學(xué)者的研究興趣主要集中于電泳儀器在核酸、蛋白質(zhì)、酶等生物大分子分析中的應(yīng)用,對(duì)電泳儀器本身的研究主要限于電泳槽(電泳儀)、電源、電泳檢測(cè)裝置(如凝膠成像系統(tǒng))、電泳印跡儀(電泳轉(zhuǎn)移儀)、電泳洗脫儀和電泳凝膠干燥儀,而對(duì)電泳凝膠染色、脫色裝置的設(shè)計(jì)和改進(jìn)僅開(kāi)展了少量研究工作,對(duì)凝膠移動(dòng)裝置的設(shè)計(jì)和開(kāi)發(fā)也很少進(jìn)行研究,對(duì)凝膠染色、脫色或移動(dòng)裝置的制造材料(尤其是材料的光學(xué)性質(zhì)或要求)、生產(chǎn)方法亦很少研究或報(bào)道,對(duì)適用于糖電泳實(shí)驗(yàn)的凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置則尚未開(kāi)展研究工作。某些廠商雖然設(shè)計(jì)、生產(chǎn)了能夠自動(dòng)加注染色液和脫色液的電泳凝膠染色、脫色裝置,但是往往只裝備了染色容器、脫色容器、泵(電力驅(qū)動(dòng))和電動(dòng)機(jī),而普遍缺乏移動(dòng)凝膠的專(zhuān)用裝置,在將凝膠從染色、脫色容器移至電泳檢測(cè)裝置或觀察、拍照平臺(tái)時(shí)費(fèi)力耗時(shí),存在安全隱患,并且整個(gè)設(shè)備的價(jià)格十分昂貴,使用過(guò)程中還需消耗電能,一旦斷電或者電路出現(xiàn)故障整個(gè)設(shè)備將無(wú)法正常使用。魏弟等在2003年的《河北科技大學(xué)學(xué)報(bào)(社會(huì)科學(xué)版)》第3卷增刊和2005年的《實(shí)驗(yàn)技術(shù)與管理》第22卷第11期上報(bào)道了同一種電泳染色、脫色裝置,并于2005年申報(bào)了中國(guó)專(zhuān)利(專(zhuān)利號(hào):ZL200520103232.6),所述裝置是將脫色容器和EB容器置于臺(tái)階式支架上組合而成,但是沒(méi)有配備專(zhuān)用的電泳凝膠移動(dòng)裝置,也沒(méi)有涉及制造材料的光學(xué)性能(如防紫外光能力)。1980年公開(kāi)的美國(guó)專(zhuān)利4222843報(bào)道了一種自動(dòng)化的電泳凝膠染色、脫色和干燥裝置,專(zhuān)門(mén)用于血清蛋白的醋酸纖維素薄膜電泳;2005年公開(kāi)的美國(guó)專(zhuān)利6843593報(bào)道了一種電泳凝膠染色裝置,在染色過(guò)程中以外加動(dòng)力(電能)驅(qū)動(dòng)方式振蕩電泳凝膠;2007年公開(kāi)的日本專(zhuān)利JP2007010649 (A)報(bào)道了一種具有正負(fù)電極的電泳凝膠染色、脫色裝置;1996年公開(kāi)的中國(guó)專(zhuān)利ZL96241797.1報(bào)道了一種鑄、染、泳一體化的潛水式電泳裝置,將溴化乙錠直接加入電泳緩沖液中,使制膠、電泳分離、染色在同一裝置中完成;2004年公開(kāi)的中國(guó)專(zhuān)利ZL200420012524.4報(bào)道了一種由染色容器、溴化乙錠貯存容器和活性炭吸附箱組成的隔離式電泳凝膠染色與溴化乙錠處理裝置,用于連續(xù)完成染色、廢舊溴化乙錠染色液貯存、溴化乙錠吸附等環(huán)節(jié)??傮w上看,現(xiàn)有的電泳凝膠染色、脫色裝置普遍缺乏安全、簡(jiǎn)便、規(guī)范的凝膠移動(dòng)裝置,在電泳實(shí)驗(yàn)中主要采用普通塑料、有機(jī)玻璃、玻璃板或者鑷子移置凝膠,甚至直接用手(佩戴塑料、橡膠手套)抓取、挪動(dòng)凝膠,既容易使凝膠破損,也存在安全隱患,特別是在以溴化乙錠等為染料的瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)時(shí),更容易出現(xiàn)手或皮膚直接接觸溴化乙錠等致癌物或毒物的事故。
[0006]此外,現(xiàn)有的電泳凝膠染色、脫色裝置還存在以下問(wèn)題:1)有的裝置設(shè)計(jì)過(guò)于復(fù)雜,制作工藝繁瑣,生產(chǎn)成本較高,操作難度較大,實(shí)用性偏低。2)有的裝置通用性較差,t匕如只局限于蛋白質(zhì)(如血清蛋白)電泳實(shí)驗(yàn)而不適于核酸電泳實(shí)驗(yàn),適于糖電泳實(shí)驗(yàn)的凝膠染色、脫色與移動(dòng)一體化設(shè)備迄今未見(jiàn)報(bào)道。3)有的裝置需要耗費(fèi)電能,節(jié)能性較差,而且電路一旦出現(xiàn)故障或者斷電,整個(gè)裝置將無(wú)法正常運(yùn)轉(zhuǎn)。4)有的裝置需要直接將溴化乙錠加入電泳緩沖液中,很可能導(dǎo)致緩沖液、電泳槽、樣品孔成型器等的污染,增加了污染機(jī)率和范圍;此外,在電泳分離過(guò)程中溴化乙錠可能見(jiàn)光分解,影響染色效果。另外,大多數(shù)有關(guān)電泳凝膠染色、脫色裝置的報(bào)道沒(méi)有涉及制造材料和生產(chǎn)方法。對(duì)于采用溴化乙錠等紫外光敏感染料的瓊脂糖凝膠電泳而言,電泳凝膠染色、脫色裝置必須考慮制造材料、生產(chǎn)方法對(duì)紫外光的特殊要求或影響,否則很可能因染料光解而增加實(shí)驗(yàn)成本、降低實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。據(jù)檢索,國(guó)內(nèi)外迄今尚沒(méi)有集電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)三個(gè)重要功能為一體的電泳實(shí)驗(yàn)裝置。
實(shí)用新型內(nèi)容
[0007]本實(shí)用新型目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)缺陷,提供一種安全、簡(jiǎn)便的電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置,它能對(duì)電泳凝膠進(jìn)行高效率、高質(zhì)量的染色和脫色處理,并能安全、便捷地移動(dòng)凝膠。
[0008]為實(shí)現(xiàn)上述目的,本實(shí)用新型采用以下技術(shù)方案:
[0009]電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置,包括染色脫色盒和電泳膠鏟,染色脫色盒由盒體和盒蓋組成,盒體由兩個(gè)外側(cè)壁、前壁,后壁和盒底連接組成,盒蓋一端與盒體后壁通過(guò)鉸鏈相連緊密地覆蓋在盒體上,盒蓋上設(shè)置有開(kāi)蓋鈕,盒體中間通過(guò)隔板隔開(kāi)將染色脫色盒分成染色盒和脫色盒,圍成染色盒和脫色盒的側(cè)壁上均設(shè)置有排液口 ;電泳膠鏟由托盤(pán)和手柄組成,托盤(pán)上分布著孔隙,使托盤(pán)呈鏤空結(jié)構(gòu),手柄由水平柄和垂直柄連接而成,盒體的隔板兩側(cè)、外側(cè)壁內(nèi)側(cè)、前壁內(nèi)側(cè)或后壁內(nèi)側(cè)靠近盒底位置設(shè)有用于支撐電泳膠鏟的膠鏟支架,盒體外側(cè)壁和前壁頂部設(shè)有與手柄水平柄大小適配的凹槽。
[0010]所述染色脫色盒盒體中間由多個(gè)隔板隔開(kāi),染色脫色盒被分成多個(gè)染色盒和脫色盒。
[0011]所述電泳膠鏟托盤(pán)的左側(cè)、右側(cè)和后側(cè)分別被2個(gè)托盤(pán)側(cè)壁和I個(gè)托盤(pán)后壁封閉,托盤(pán)的前側(cè)未封閉并呈斜坡?tīng)睢?br>
[0012]所述電泳膠鏟托盤(pán)前側(cè)的斜坡?tīng)罱Y(jié)構(gòu)的坡度在60°以下。
[0013]所述電泳膠鏟托盤(pán)的上表面平整光滑并與下表面平行。
[0014]所述電泳膠鏟托盤(pán)上的孔隙為圓孔狀、方孔狀或條形,鏤空結(jié)構(gòu)為孔狀、網(wǎng)狀、橫條紋狀、豎條紋狀或斜紋狀。
[0015]所述電泳膠鏟托盤(pán)上的孔隙為為圓孔狀,鏤空結(jié)構(gòu)為孔狀鏤空結(jié)構(gòu),圓孔間距為
0.2?28cm,圓孔直徑為0.2?2.0cm。
[0016]所述電泳膠鏟手柄垂直柄上連接有多個(gè)層疊設(shè)置的托盤(pán),各托盤(pán)之間留有便于將電泳凝膠卸下或鏟上各托盤(pán)的間隙。
[0017]所述染色脫色盒上的膠鏟支架距離盒底為0.3?1.0cm,距離盒蓋為2.2?
6.7cm。
[0018]本實(shí)用新型的性能特點(diǎn)或優(yōu)點(diǎn)是:
[0019]I)安全性。染色脫色盒由盒體和緊密地覆蓋在盒體上的盒蓋組成,密封性較好,能有效防止染色液、脫色液的揮發(fā),避免了試劑揮發(fā)產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染;在凝膠染色、脫色、移動(dòng)過(guò)程中,電泳膠鏟手柄的水平柄不會(huì)接觸到染色液和脫色液,確保了實(shí)驗(yàn)者的人身安全;電泳膠鏟托盤(pán)上的鏤空結(jié)構(gòu)有助于染色、脫色結(jié)束后電泳膠鏟上多余染色液、脫色液的快速排出,避免了染色液、脫色液滴灑對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)的污染以及對(duì)實(shí)驗(yàn)者的傷害;染色盒和脫色盒的排液口有助于染色液和脫色液的安全排放;電泳分離過(guò)程與染色、脫色過(guò)程互相獨(dú)立,避免了將染料(如溴化乙錠)直接加入電泳凝膠或緩沖液中造成的電泳槽、樣品孔成型器、緩沖液等的污染。
[0020]2)實(shí)用性。本實(shí)用新型的染色脫色盒和電泳膠鏟能夠順利實(shí)現(xiàn)電泳凝膠的染色、脫色等目的,電泳膠鏟還能用來(lái)移動(dòng)凝膠,有助于凝膠的觀察、拍照和分析等。本實(shí)用新型體積小巧,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活調(diào)整規(guī)格、改動(dòng)染色盒和脫色盒的數(shù)目,制作工藝簡(jiǎn)便可行,所用材料耐磨、耐腐蝕、密度較小、成本較低,經(jīng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室測(cè)試證明染色、脫色效果良好,能夠安全、便捷地移動(dòng)電泳凝膠。
[0021]3)通用性。本實(shí)用新型可用于核酸、蛋白質(zhì)、酶、糖等多種生物大分子的電泳實(shí)驗(yàn),適合于含有溴化乙錠、考馬斯亮藍(lán)、甲苯胺藍(lán)、氨基黑、萘黑、水牛黑、苯胺黑、麗春紅或快綠等染料的染色液和多種脫色液,適合于不同尺寸的電泳凝膠的染色、脫色、固定、透明等過(guò)程;既適合于瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠和新型凝膠(如瓊脂糖-聚丙烯酰胺混合凝膠、N-取代聚丙烯酰胺凝膠)等凝膠類(lèi)電泳支持介質(zhì)的染色、脫色、移動(dòng)過(guò)程,也適合于醋酸纖維素薄膜等非凝膠類(lèi)支持介質(zhì)。
[0022]4)經(jīng)濟(jì)性。本實(shí)用新型在電泳凝膠染色、脫色、移動(dòng)過(guò)程中無(wú)需耗費(fèi)電能;所用制造材料(如有機(jī)玻璃)價(jià)格較低,用量較少,加工工藝簡(jiǎn)單;染色脫色盒良好的密封性有效地防止了染色液、脫色液的揮發(fā),良好的紫外光阻隔性能有效地防止了溴化乙錠等染料的光解,節(jié)約了試劑。此外,本實(shí)用新型還具有染色和脫色實(shí)驗(yàn)重復(fù)性較好、維修方法簡(jiǎn)易等優(yōu)點(diǎn)。
[0023]進(jìn)一步,本實(shí)用新型公開(kāi)的電泳凝膠染色、脫色、移動(dòng)一體化裝置設(shè)計(jì)簡(jiǎn)約,易于制作和規(guī)?;a(chǎn)。電泳膠鏟托盤(pán)前側(cè)的斜坡?tīng)罱Y(jié)構(gòu)有助于將凝膠鏟上或卸下托盤(pán)。電泳膠鏟托盤(pán)由能夠透過(guò)可見(jiàn)光和紫外光的高透光度材料制成,在電泳凝膠染色、脫色結(jié)束后可以直接置于電泳檢測(cè)裝置中觀察、拍照、分析,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作步驟。
[0024]需要特別說(shuō)明的是,本實(shí)用新型能夠用于多糖的瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳和醋酸纖維素薄膜電泳,而其它電泳凝膠染色、脫色裝置則鮮見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。本實(shí)用新型集電泳凝膠染色、脫色、移動(dòng)三大功能為一體,適合于核酸、蛋白質(zhì)、酶、糖等生物大分子的電泳實(shí)驗(yàn),可用于篩分型瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場(chǎng)凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、等電聚焦電泳、雙向電泳、醋酸纖維素薄膜電泳等,尤其適合于采用紫外光敏感染色液(如溴化乙錠染色液)或脫色液的核酸瓊脂糖凝膠電泳與多糖瓊脂糖凝膠電泳。本實(shí)用新型在生物、醫(yī)藥、食品、化學(xué)等領(lǐng)域研究中具有廣泛的用途,可以滿(mǎn)足相關(guān)科學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)教學(xué)的需要。
【專(zhuān)利附圖】
【附圖說(shuō)明】
[0025]圖1為電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置的示意圖;
[0026]圖2為染色脫色盒的示意圖;
[0027]圖3為電泳膠鏟的示意圖;
[0028]圖4為電泳膠鏟托盤(pán)鏤空結(jié)構(gòu)的示意圖;
[0029]圖4中:A為橫條紋狀鏤空結(jié)構(gòu)的示意圖;B為網(wǎng)狀鏤空結(jié)構(gòu)的示意圖;C為豎條紋狀鏤空結(jié)構(gòu)的示意圖;D為斜紋狀鏤空結(jié)構(gòu)的示意圖;
[0030]圖中:1 一染色盒;2 —脫色盒;3—隔板;4一膠鏟支架;5—外側(cè)壁;6—前壁;7—后壁;8—凹槽;9一排液口 ;10—盒蓋;11 一開(kāi)蓋鈕;12—鉸鏈;13—托盤(pán);14一手柄,14-1 一水平柄,14-2—垂直柄;15—托盤(pán)側(cè)壁;16—托盤(pán)后壁;17—孔隙。
【具體實(shí)施方式】
[0031]下面結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行詳細(xì)描述:
[0032]如圖1所示,本實(shí)用新型包括染色脫色盒與電泳膠鏟。染色脫色盒和電泳膠鏟的手柄14由含聚碳酸酯的有機(jī)玻璃、玻璃、塑料、陶瓷、橡膠或金屬等材料制成。當(dāng)染色液、脫色液容易被紫外光降解時(shí),由有機(jī)玻璃等透明材料制作的染色脫色盒必須能夠阻隔紫外光,也可通過(guò)防紫外光處理使之具備紫外光阻隔能力,既可在材料加工過(guò)程中加入有機(jī)紫外線吸收劑等,也可在材料表面粘貼抗紫外線薄膜。電泳膠鏟的托盤(pán)13由具有高透光度的含聚碳酸酯有機(jī)玻璃、玻璃或塑料制成,能夠使可見(jiàn)光和紫外光透過(guò)。染色脫色盒用棕色有機(jī)玻璃制作為宜,電泳膠鏟用聚碳酸酯制作為宜。在采用含聚碳酸酯有機(jī)玻璃制作本實(shí)用新型時(shí),既可利用有機(jī)玻璃的熱塑性一次性澆注、擠壓、制造出染色脫色盒和電泳膠鏟,也可利用市售有機(jī)玻璃板材經(jīng)下料、打磨拋光、折彎、鉆孔、粘合和修整等步驟制作成電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置。染色脫色盒和電泳膠鏟用來(lái)對(duì)電泳凝膠進(jìn)行高效率、高質(zhì)量的染色和脫色;電泳膠鏟除了用于染色、脫色外,還在凝膠的觀察、拍照等環(huán)節(jié)中用來(lái)安全、便捷地移動(dòng)凝膠。
[0033]如圖2所示,染色脫色盒由盒體和盒蓋10組成,盒體由兩個(gè)外側(cè)壁5、前壁6,后壁7和盒底連接組成,盒蓋10 —端與盒體后壁7通過(guò)鉸鏈12相連緊密地覆蓋在盒體上,盒蓋
10上設(shè)置有開(kāi)蓋鈕11,盒體中間通過(guò)隔板3隔開(kāi)將染色脫色盒分成染色盒I和脫色盒2,盒體外側(cè)壁5和前壁6頂部設(shè)有凹槽8。凹槽8和膠鏟支架4在電泳染色、脫色過(guò)程中用來(lái)支撐電泳膠鏟。染色盒I和脫色盒2的外側(cè)壁下部靠近盒底與后壁7的位置皆設(shè)有排液口
9。所述染色脫色盒盒體中間由多個(gè)隔板3隔開(kāi),染色盒I和脫色盒2的數(shù)目可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求增減。在進(jìn)行電泳凝膠染色、脫色時(shí),通過(guò)開(kāi)蓋鈕11打開(kāi)染色脫色盒的盒蓋10,向染色盒1、脫色盒2中分別加入適量的染色液、脫色液。
[0034]如圖3所示,電泳膠鏟由托盤(pán)13和手柄14組成,托盤(pán)13的左側(cè)、右側(cè)和后側(cè)由兩個(gè)托盤(pán)側(cè)壁15和一個(gè)托盤(pán)后壁16封口,用以防止電泳凝膠從電泳膠鏟上脫落。托盤(pán)13的前側(cè)未封口并呈斜坡?tīng)?,托盤(pán)13上分布著孔隙17,使托盤(pán)13呈孔狀鏤空結(jié)構(gòu)。托盤(pán)13的上表面平整光滑,并且與下表面嚴(yán)格平行。手柄14由水平柄14-1和垂直柄14-2連接而成。在電泳分離結(jié)束后,將電泳凝膠置于電泳膠鏟的托盤(pán)13上,然后把托盤(pán)13架在染色盒I的膠鏟支架4上、手柄的水平柄14-1架在凹槽8上,注意使染色液沒(méi)過(guò)電泳凝膠的上表面。爾后關(guān)閉盒蓋10,開(kāi)始染色。染色結(jié)束后,將裝有需要脫色或漂洗的電泳凝膠的電泳膠鏟移入脫色盒2。經(jīng)過(guò)染色、脫色的電泳凝膠即可用電泳膠鏟移入電泳檢測(cè)裝置中觀察、拍照、分析。
[0035]如圖4所示,電泳膠鏟托盤(pán)13上的孔隙17呈方孔狀、圓孔狀或其它形狀,托盤(pán)13上的鏤空結(jié)構(gòu)為孔狀、橫條紋狀(圖4A)、網(wǎng)狀(圖4B)、豎條紋狀(圖4C)、斜紋狀(圖4D)或其它形狀。在進(jìn)行電泳凝膠染色、脫色時(shí),托盤(pán)13上的鏤空結(jié)構(gòu)有助于染色液、脫色液與電泳凝膠的充分接觸以及染色、脫色完成后多余染色液、脫色液的快速排出。
[0036]染色脫色盒與電泳膠鏟。染色脫色盒用于電泳凝膠的染色、脫色;電泳膠鏟用于凝膠的移動(dòng),協(xié)助完成染色、脫色、觀察、拍照等環(huán)節(jié)。染色盒與脫色盒連接成一體,中間由隔板隔開(kāi),隔板固定在染色脫色盒上,使染色盒與脫色盒不能連通,隔板的兩個(gè)側(cè)面下端均設(shè)有膠鏟支架。膠鏟支架既可以是連續(xù)的條狀材料,也可以是不連續(xù)的條狀材料,后者有助于節(jié)約膠鏟支架所用材料。染色脫色盒周?chē)?個(gè)外側(cè)壁、I個(gè)前壁和I個(gè)后壁,外側(cè)壁、前壁的上端有凹槽。染色盒和脫色盒的外側(cè)壁下部均有排液口,排液口以盡可能地靠近染色脫色盒底部為宜,便于染色液和脫色液的安全、徹底排放。染色脫色盒的前壁、后壁內(nèi)側(cè)下端也可設(shè)置膠鏟支架。染色脫色盒下面有盒底,上面有盒蓋,盒蓋上部有開(kāi)蓋鈕,盒蓋與后壁之間用鉸鏈相連。電泳膠鏟由托盤(pán)和手柄構(gòu)成,托盤(pán)的左側(cè)、右側(cè)和后側(cè)由2個(gè)托盤(pán)側(cè)壁和I個(gè)托盤(pán)后壁封口,以防電泳凝膠脫落,托盤(pán)的前側(cè)未封口并呈斜坡?tīng)?,便于將電泳凝膠卸下或鏟上電泳膠鏟的托盤(pán),托盤(pán)上分布著孔隙,使托盤(pán)呈鏤空結(jié)構(gòu),托盤(pán)的上表面平整光滑并與下表面嚴(yán)格平行,以防劃傷電泳凝膠或者影響凝膠的觀察、拍照,手柄由水平柄和垂直柄連接而成。為提高染色、脫色效率計(jì),手柄垂直柄上面可以連接多個(gè)托盤(pán),所述電泳膠鏟手柄垂直柄14-2上連接有多個(gè)層疊設(shè)置的托盤(pán)13,各托盤(pán)之間留有便于將電泳凝膠卸下或鏟上各托盤(pán)13的間隙。為確保染色脫色盒的密封性計(jì),手柄水平柄的規(guī)格與凹槽嚴(yán)格相配(凹槽的大小正好可以放置水平柄),染色脫色盒的上面緊密地覆蓋著盒蓋。
[0037]根據(jù)本實(shí)用新型的規(guī)格要求,染色脫色盒的容積大小為16.0X8.0X2.5?60.0X30.0X7.0(長(zhǎng)X寬X高,長(zhǎng)、寬、高的單位為cm,下同),優(yōu)選值為32.0X16.0X5.0。染色盒和脫色盒的總數(shù)目為2?6個(gè),優(yōu)選數(shù)為2、4個(gè)。染色脫色盒上的膠鏟支架距盒底0.3?1.0cm,距盒蓋2.2?6.7cm,其中到盒底距離的優(yōu)選值為0.5cm,到盒蓋距離的優(yōu)選值為4.5cm。染色脫色盒上凹槽縱剖面的長(zhǎng)度為1.0?3.0cm(與電泳膠鏟手柄的水平柄的縱剖面長(zhǎng)度相一致),寬度為0.1?1.0cm(與水平柄的縱剖面寬度相一致),其中長(zhǎng)度的優(yōu)選值為2.0cm,寬度的優(yōu)選值為0.2?0.5cm。電泳膠鏟托盤(pán)的面積為
7.0X7.0?29.0X29.0 (長(zhǎng)X寬,長(zhǎng)、寬的單位為cm,下同),優(yōu)選值為15.0X 15.0。托盤(pán)左偵U、右側(cè)和后側(cè)的2個(gè)托盤(pán)側(cè)壁和I個(gè)托盤(pán)后壁的高度均為0.2?1.0cm,優(yōu)選值為0.5cm。托盤(pán)的厚度(托盤(pán)上、下表面的距離)為0.1?1.0mm,優(yōu)選值為0.5mm。超薄的托盤(pán)厚度有助于提高其透光度,在電泳凝膠染色、脫色結(jié)束后可直接將凝膠和電泳膠鏟一起置于電泳檢測(cè)裝置中觀察、拍照、分析,節(jié)省了在染色或脫色容器、凝膠移動(dòng)器具以及觀察或拍照平臺(tái)之間反復(fù)移動(dòng)凝膠的繁瑣步驟。托盤(pán)前側(cè)的斜坡?tīng)罱Y(jié)構(gòu)的坡度在60°以下,優(yōu)選值為30°。托盤(pán)上的孔隙為圓孔狀、方孔狀或其它形狀,鏤空結(jié)構(gòu)為孔狀、網(wǎng)狀、橫條紋狀、豎條紋狀、斜紋狀或其它形狀,優(yōu)選的孔隙形狀為圓孔狀,優(yōu)選的鏤空結(jié)構(gòu)為孔狀鏤空結(jié)構(gòu),圓孔分布在托盤(pán)上,圓孔間距為0.2?28cm,圓孔直徑為0.2?2.0cm,其中圓孔間距的優(yōu)選值為0.5cm,圓孔直徑的優(yōu)選值為1.0cm。電泳膠纟產(chǎn)手柄的垂直柄的長(zhǎng)度為2.0?7.0cm與膠鏟支架到盒蓋的距離相一致,優(yōu)選值為4.5cm。手柄的水平柄的長(zhǎng)度為2.0?15.0cm,優(yōu)選值為10.0cm。垂直柄上的托盤(pán)數(shù)目為1-3個(gè),優(yōu)選數(shù)為I個(gè)。本實(shí)用新型所述染色脫色盒與電泳膠鏟的規(guī)格或尺寸可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整,具有很強(qiáng)的通用性,適合于不同規(guī)格或尺寸電泳凝膠的染色、脫色、移動(dòng)過(guò)程。
[0038]本實(shí)用新型的染色脫色盒所使用材料的光學(xué)性質(zhì)因電泳實(shí)驗(yàn)需求而異;電泳膠鏟的手柄由透明材料無(wú)需防紫外光處理;電泳膠鏟的托盤(pán)由具有高透光度能夠通過(guò)可見(jiàn)光和紫外光的材料制成。
[0039]進(jìn)一步地,對(duì)于采用紫外光敏感或者易被紫外光降解的染色液或脫色液的電泳(如以溴化乙錠為染料的核酸瓊脂糖凝膠電泳)而言,染色脫色盒既可由不透明塑料、陶瓷、橡膠或金屬等不透光材料制成,也可由具有阻隔紫外光性能或者經(jīng)過(guò)防紫外光處理的塑料、有機(jī)玻璃(含聚碳酸酯)或玻璃等透明材料制成。有機(jī)玻璃等材料的防紫外光處理方法包括添加、涂布紫外線吸收劑(包括有機(jī)紫外線吸收劑、無(wú)機(jī)超微粒紫外線吸收劑等)、光屏蔽劑、著色劑(如偶氮顏料、酞菁顏料、無(wú)機(jī)類(lèi)顏料等)、遮光層或真空鍍鋁薄膜或者粘貼抗紫外線的U-SAVE薄膜等。處理后的材料應(yīng)當(dāng)能夠完全遮擋紫外線,或者紫外光阻隔率達(dá)到70%以上。采用不透光材料或者能夠防止紫外光穿透材料制作染色脫色盒,有利于防止溴化乙錠染料被紫外光分解。染色脫色盒的優(yōu)選材料為棕色有機(jī)玻璃,電泳膠鏟的優(yōu)選材料為普通聚碳酸酯。
[0040]進(jìn)一步地,對(duì)于不采用紫外光敏感或者易被紫外光降解的染色液或脫色液的電泳而言,染色脫色盒既可由陶瓷、橡膠或金屬等材料制成,也可由塑料、有機(jī)玻璃(含聚碳酸酯)或玻璃等材料制成,所用透明材料無(wú)需防紫外光處理。染色脫色盒的優(yōu)選材料為有機(jī)玻璃,電泳膠鏟的優(yōu)選材料為聚碳酸酯。無(wú)論所用染色液或脫色液是否對(duì)紫外光敏感,電泳膠鏟的托盤(pán)均采用能夠通過(guò)可見(jiàn)光和紫外光的高透光度材料制作(透光度60%?100% ),這樣可以在染色、脫色結(jié)束后直接將載有電泳凝膠的電泳膠鏟置于電泳檢測(cè)裝置(如凝膠成像系統(tǒng))中觀察,省去了將凝膠在染色或脫色容器、凝膠移動(dòng)器具以及觀察或拍照平臺(tái)之間反復(fù)移動(dòng)的環(huán)節(jié),提高了實(shí)驗(yàn)效率,增加了實(shí)驗(yàn)安全性。
[0041]在采用有機(jī)玻璃(含聚碳酸酯)作為本實(shí)用新型的制造材料時(shí),既可以利用有機(jī)玻璃的熱塑性一次性澆注、擠壓、制造出染色脫色盒和電泳膠鏟,也可以利用市售有機(jī)玻璃板材進(jìn)行加工。有機(jī)玻璃板材的加工工藝如下:1)下料。按照染色脫色盒和電泳膠鏟的規(guī)格要求選擇恰當(dāng)?shù)挠袡C(jī)玻璃板材,并用電鋸、勾刀等工具將其裁切成合適的尺寸。在選料時(shí)必須充分考慮材料的光學(xué)性能和耐腐蝕性能等。譬如,電泳膠鏟的托盤(pán)所使用材料必須具有高透光度,能使可見(jiàn)光和紫外光通過(guò)。再如,染色脫色盒和電泳膠鏟所用材料必須不被染色液、脫色液等腐蝕或破壞。2)打磨拋光。將起伏不平的有機(jī)玻璃板材斷面用手推電刨、臺(tái)式砂帶機(jī)或砂輪等工具刨平,然后用拋光機(jī)進(jìn)行拋光。要使電泳膠鏟的托盤(pán)上表面光潔平整、上表面與下表面嚴(yán)格平行,以免在電泳凝膠染色、脫色、移動(dòng)過(guò)程中劃傷凝膠,同時(shí)也有利于保證凝膠觀察、拍照、分析時(shí)的實(shí)驗(yàn)效果。3)折彎。采用整體加熱和局部加熱方法對(duì)電泳膠鏟的手柄進(jìn)行折彎處理,優(yōu)選的處理方法為局部加熱方法。4)鉆孔。采用立式銑床、臺(tái)鉆等工具在電泳膠鏟的托盤(pán)上開(kāi)槽鉆孔,使之產(chǎn)生鏤空結(jié)構(gòu),注意保持托盤(pán)上表面的光潔平整。5)粘合。常用的粘合劑為三氯甲烷、水晶膠和SYT-1膠等。粘合處理后的染色盒、脫色盒不能出現(xiàn)漏液現(xiàn)象。6)修整成型。對(duì)染色脫色盒和電泳膠鏟進(jìn)行進(jìn)一步修整和處理,最終制作出合格的電泳凝膠染色、脫色和移動(dòng)裝置。
[0042]本實(shí)用新型的工作過(guò)程如下所述,首先打開(kāi)染色脫色盒的盒蓋,向染色盒和脫色盒中分別注入適量的染色液和脫色液,注意使液面適當(dāng)超過(guò)膠鏟支架(電泳凝膠)的上表面,然后將電泳分離后的電泳凝膠移至電泳膠鏟的托盤(pán)上,再后手持電泳膠鏟手柄的水平柄,將電泳膠鏟放入染色盒中,使托盤(pán)架在膠鏟支架上、手柄的水平柄架在染色盒的凹槽中、電泳凝膠浸于染色液中,而后蓋好染色盒的盒蓋進(jìn)行染色。染色結(jié)束后,打開(kāi)盒蓋,將裝有電泳凝膠的電泳膠鏟取出,注意使電泳膠鏟在染色液上方停留數(shù)秒以排出多余的染色液。最后將裝有需要脫色(漂洗)的電泳凝膠的電泳膠鏟移至脫色盒進(jìn)行脫色。完成染色、脫色環(huán)節(jié)的電泳凝膠即可用電泳膠鏟移至電泳檢測(cè)裝置中觀察、拍照、分析。廢舊的染色液、脫色液通過(guò)排液口排出。
[0043]實(shí)施例1:
[0044]采用有機(jī)玻璃制作出本實(shí)用新型的實(shí)物樣品,在實(shí)驗(yàn)室對(duì)其進(jìn)行測(cè)試研究。耐腐蝕性試驗(yàn)證實(shí),本實(shí)用新型實(shí)物樣品能夠長(zhǎng)期盛放核酸瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)常用的染色液和脫色液。機(jī)械強(qiáng)度試驗(yàn)證實(shí),染色脫色盒與電泳膠鏟的拉伸強(qiáng)度和沖擊強(qiáng)度合格,適于瓊脂糖凝膠的染色、脫色、移動(dòng)過(guò)程。光學(xué)試驗(yàn)證實(shí),由于本實(shí)用新型實(shí)物樣品的染色脫色盒選用能夠阻隔紫外光的淺棕色有機(jī)玻璃制成,因此具有良好的防止紫外光穿透的能力,在存放溴化乙錠染色液時(shí)不會(huì)出現(xiàn)光解現(xiàn)象,適用于以溴化乙錠為染色劑的瓊脂糖凝膠電泳;電泳膠鏟的托盤(pán)13由高透光度的有機(jī)玻璃制成,能夠透過(guò)可見(jiàn)光和紫外光。
[0045]采用本實(shí)用新型的實(shí)物樣品對(duì)瓊脂糖凝膠電泳分離后的DNA樣品進(jìn)行染色,而后漂洗(脫色)、觀察和拍照。首先取國(guó)內(nèi)外不同廠家生產(chǎn)的DNA Marker (100bp、100bp、Ikb)各200ng,依次加入到1%瓊脂糖凝膠的3個(gè)點(diǎn)樣孔中并采用國(guó)產(chǎn)電泳儀進(jìn)行電泳分離(電壓:10V/cm)。30分鐘后電泳分離結(jié)束,將瓊脂糖凝膠移至電泳膠鏟上,放入裝有0.5 μ g/ml溴化乙錠染色液(約500ml)的染色盒I中,使染色液的液面超過(guò)瓊脂糖凝膠的上表面,蓋好盒蓋10染色15分鐘。染色完成后將載有瓊脂糖凝膠的電泳膠鏟取出,使多余的染色液滴回染色盒I中,然后將電泳膠鏟移至裝有蒸餾水的脫色盒2中漂洗5分鐘。完成染色、漂洗環(huán)節(jié)的瓊脂糖凝膠用電泳膠鏟移入國(guó)產(chǎn)凝膠成像系統(tǒng)中觀察、拍照。對(duì)照實(shí)驗(yàn)分為3組--第一組是將電泳分離后的瓊脂糖凝膠用普通塑料板移到裝有0.5 μ g/ml溴化乙錠染色液的進(jìn)口自動(dòng)染色儀中染色15分鐘,然后用電動(dòng)泵抽掉自動(dòng)染色儀中的染色液并換成脫色液(蒸餾水),漂洗5分鐘后用塑料板將凝膠移至凝膠成像系統(tǒng)中進(jìn)行觀察、拍照;第二組是將電泳分離后的瓊脂糖凝膠用手(佩戴橡膠手套)移到裝有0.5 μ g/ml溴化乙錠染色液的有機(jī)玻璃盒中染色15分鐘,然后用手移入裝有蒸餾水的有機(jī)玻璃盒中漂洗5分鐘,最終用手移至凝膠成像系統(tǒng)中觀察、拍照;第三組是將溴化乙錠直接加入瓊脂糖凝膠中(溴化乙錠終濃度:0.5 μ g/ml)進(jìn)行電泳分離,而后用手(佩戴手套)將凝膠移至凝膠成像系統(tǒng)中觀察、拍照。結(jié)果發(fā)現(xiàn),本實(shí)用新型的染色、脫色效果優(yōu)良,與3個(gè)對(duì)照組沒(méi)有明顯區(qū)別。并且,同第一對(duì)照組相比,本實(shí)用新型具有以下顯著優(yōu)點(diǎn):1)成本低廉,價(jià)格僅為自動(dòng)染色儀的1/50?1/200 ;2)無(wú)需消耗電能;3)電泳膠鏟能夠安全、便捷地移動(dòng)電泳凝膠,而自動(dòng)染色儀由于未配備規(guī)范的凝膠移動(dòng)裝置而只能用普通塑料板移動(dòng)凝膠,在將凝膠從脫色液向凝膠成像系統(tǒng)的轉(zhuǎn)移過(guò)程中出現(xiàn)諸多不便甚至產(chǎn)生安全隱患;4)電泳膠鏟的托盤(pán)13采用能夠通過(guò)可見(jiàn)光和紫外光的高透光度有機(jī)玻璃制成,在電泳凝膠脫色結(jié)束后能直接置于電泳檢測(cè)裝置中觀察、拍照、分析,而自動(dòng)染色儀所用的普通塑料板透光度有限、對(duì)可見(jiàn)光和紫外光有一定的阻隔效應(yīng),不能與電泳凝膠一起放在電泳檢測(cè)裝置中觀察、拍照、分析,降低了實(shí)驗(yàn)效率,增大了實(shí)驗(yàn)者因頻繁移動(dòng)凝膠而接觸溴化乙錠的風(fēng)險(xiǎn)。同第二對(duì)照組相比,本實(shí)用新型能夠?qū)崿F(xiàn)電泳凝膠在染色液、脫色液、凝膠成像系統(tǒng)之間的快速轉(zhuǎn)移,防止了用手移動(dòng)凝膠而使皮膚接觸溴化乙錠事故的發(fā)生;此外,由于對(duì)照的有機(jī)玻璃盒的制造材料、生產(chǎn)方法未考慮紫外光阻隔性能,因此很容易導(dǎo)致染色液光解。同第三對(duì)照組相比,本實(shí)用新型不會(huì)造成試劑、儀器和環(huán)境污染,安全可靠。
[0046]實(shí)施例2:
[0047]采用有機(jī)玻璃制作出本實(shí)用新型的實(shí)物樣品,進(jìn)行測(cè)試研究。耐腐蝕性試驗(yàn)證實(shí),本實(shí)用新型實(shí)物樣品能夠長(zhǎng)期盛放蛋白質(zhì)(含酶)聚丙烯酰胺凝膠電泳常用的染色液、脫色液和固定液等。機(jī)械強(qiáng)度試驗(yàn)證實(shí),本實(shí)用新型實(shí)物樣品的拉伸強(qiáng)度和沖擊強(qiáng)度合格,適于聚丙烯酰胺凝膠的染色、脫色、移動(dòng)過(guò)程。光學(xué)試驗(yàn)證實(shí),電泳膠鏟的托盤(pán)13由高透光度的有機(jī)玻璃制成,能夠透過(guò)可見(jiàn)光和紫外光。
[0048]采用本實(shí)用新型的實(shí)物樣品對(duì)聚丙烯酰胺凝膠電泳分離后的固氮酶組分
I(MoFe蛋白)進(jìn)行染色,而后脫色和觀察。MoFe蛋白樣品從棕色固氮菌(Azotobactervinelandii)中分離、純化得到。分別取10 μ 1、15 μ 1、20 μ I的MoFe蛋白樣品溶液和15 μ I的市售標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液(事先用樣品緩沖液處理),依次加入到聚丙烯酰胺凝膠(濃縮膠、分離膠濃度分別為5.0%、12.5%)的4個(gè)點(diǎn)樣槽中并采用國(guó)產(chǎn)電泳儀進(jìn)行電泳分離(電流:20?30mA)。電泳分離結(jié)束后,將聚丙烯酰胺凝膠移至電泳膠鏟上,放入裝有l(wèi)mg/ml考馬斯亮藍(lán)R250染色液的染色盒I中,使染色液的液面超過(guò)聚丙烯酰胺凝膠的上表面,蓋好盒蓋10染色20分鐘。染色完成后,將載有聚丙烯酰胺凝膠的電泳膠鏟取出,使多余的染色液滴回染色盒I中,然后將電泳膠鏟移至裝有脫色液(由甲醇、乙酸、蒸餾水組成)的脫色盒2中漂洗15分鐘。將完成染色、脫色環(huán)節(jié)的聚丙烯酰胺凝膠用電泳膠鏟移至觀察裝置(發(fā)光板的乳白色屏幕)上進(jìn)行觀察。對(duì)照實(shí)驗(yàn)分為2組:第一組是將電泳分離后的聚丙烯酰胺凝膠用普通玻璃板移入裝有l(wèi)mg/ml考馬斯亮藍(lán)R250染色液的玻璃培養(yǎng)皿中染色20分鐘,然后用玻璃板移到裝有脫色液的玻璃培養(yǎng)皿中漂洗15分鐘,最終用玻璃板移至觀察裝置進(jìn)行觀察;第二組是將電泳分離后的聚丙烯酰胺凝膠用普通有機(jī)玻璃板移到裝有Img/ml考馬斯亮藍(lán)R250染色液的進(jìn)口自動(dòng)染色儀中染色20分鐘,然后用電動(dòng)泵抽掉自動(dòng)染色儀中的染色液并換成脫色液,漂洗15分鐘后用有機(jī)玻璃板將凝膠移至觀察裝置上進(jìn)行觀察。結(jié)果表明,本實(shí)用新型的染色、脫色效果優(yōu)良,與2個(gè)對(duì)照組沒(méi)有顯著區(qū)別。并且,同第一對(duì)照組相比,本實(shí)用新型在脫色過(guò)程中脫色液不易揮發(fā),有利于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的保持和實(shí)驗(yàn)者健康的保護(hù),而玻璃培養(yǎng)皿中的脫色液則容易揮發(fā);此外,本實(shí)用新型在電泳凝膠移置過(guò)程中不易破壞凝膠,提高了實(shí)驗(yàn)成功率。同第二對(duì)照組相比,本實(shí)用新型造價(jià)低廉,節(jié)省電能,尤其是電泳凝膠移動(dòng)裝置能夠安全、便捷地移動(dòng)凝膠,凝膠可以直接置于電泳膠鏟上觀察、分析,有利于凝膠完整性的保持和染色、脫色效果的保障。
[0049]實(shí)施例3:
[0050]采用有機(jī)玻璃制作出本實(shí)用新型的實(shí)物樣品,進(jìn)行測(cè)試研究。耐腐蝕性試驗(yàn)證實(shí),本實(shí)用新型實(shí)物樣品能夠長(zhǎng)期盛放多糖瓊脂糖凝膠電泳常用的染色液和脫色液。機(jī)械強(qiáng)度試驗(yàn)證實(shí),本實(shí)用新型實(shí)物樣品的拉伸強(qiáng)度和沖擊強(qiáng)度合格。光學(xué)試驗(yàn)證實(shí),電泳膠鏟的托盤(pán)13具有高透光度,能夠透過(guò)可見(jiàn)光和紫外光。
[0051]采用本實(shí)用新型的實(shí)物樣品對(duì)瓊脂糖凝膠電泳分離后的淫羊藿多糖進(jìn)行染色,而后脫色和觀察。多糖樣品從箭葉淫羊藿(Epimedium sagittatum)葉片中提取、處理得到。用0.5%的瓊脂糖溶液灌制凝膠,用國(guó)產(chǎn)電泳儀進(jìn)行電泳分離(電壓:120?150V)。電泳分離結(jié)束后,將瓊脂糖凝膠移至電泳膠鏟上,放入裝有0.1 %的甲苯胺藍(lán)染色液的染色盒I中,使染色液的液面超過(guò)瓊脂糖凝膠的上表面,蓋好盒蓋10染色20分鐘。染色完成后,將載有瓊脂糖凝膠的電泳膠鏟取出,使多余的染色液滴回染色盒I中,然后將電泳膠鏟移至裝有脫色液(由乙醇、乙酸、蒸餾水組成)的脫色盒2中漂洗10分鐘。將完成染色、脫色環(huán)節(jié)的瓊脂糖凝膠用電泳膠鏟移到觀察裝置上進(jìn)行觀察。對(duì)照實(shí)驗(yàn)分為2組:第一組是將電泳分離后的瓊脂糖凝膠用手(佩戴塑料手套)移入裝有0.1 %的甲苯胺藍(lán)染色液的白搪瓷盤(pán)中染色20分鐘,然后用手移入裝有脫色液的白搪瓷盤(pán)中漂洗10分鐘,最后用手移到觀察裝置上觀察;第二組是將電泳分離后的瓊脂糖凝膠用普通有機(jī)玻璃板移到裝有0.1%的甲苯胺藍(lán)染色液的進(jìn)口自動(dòng)染色儀中染色20分鐘,然后用電動(dòng)泵抽掉自動(dòng)染色儀中的染色液并換成脫色液,漂洗10分鐘后用有機(jī)玻璃板將凝膠移至觀察裝置上觀察。結(jié)果表明,本實(shí)用新型的染色、脫色效果優(yōu)良,與2個(gè)對(duì)照組沒(méi)有顯著區(qū)別。并且,同第一對(duì)照組相比,本實(shí)用新型在電泳凝膠脫色過(guò)程中脫色液不易揮發(fā),在凝膠移動(dòng)過(guò)程中不易破壞凝膠。同第二對(duì)照組相比,本實(shí)用新型成本低廉,節(jié)省電能,能夠安全、便捷地移動(dòng)電泳凝膠。具有安全性、簡(jiǎn)便性、實(shí)用性、通用性、經(jīng)濟(jì)性等性能特點(diǎn),尤其是節(jié)省電能,在凝膠染色、脫色和移動(dòng)過(guò)程中不易使之破損,在紫外光敏感染色液(如溴化乙錠染色液)和脫色液存放時(shí)不易使之降解,除了適用于核酸、蛋白質(zhì)、酶電泳實(shí)驗(yàn)的凝膠染色、脫色(漂洗)、移動(dòng)過(guò)程外,還適用于糖電泳實(shí)驗(yàn)。
【權(quán)利要求】
1.電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置,其特征在于:包括染色脫色盒和電泳膠鏟,染色脫色盒由盒體和盒蓋(10)組成,盒體由兩個(gè)外側(cè)壁(5)、前壁¢),后壁(7)和盒底連接組成,盒蓋(10) —端與盒體后壁(7)通過(guò)鉸鏈(12)相連緊密地覆蓋在盒體上,盒蓋(10)上設(shè)置有開(kāi)蓋鈕(11),盒體中間通過(guò)隔板(3)隔開(kāi)將染色脫色盒分成染色盒(I)和脫色盒(2),圍成染色盒⑴和脫色盒⑵的側(cè)壁上均設(shè)置有排液口(9); 電泳膠鏟由托盤(pán)(13)和手柄(14)組成,托盤(pán)(13)上分布著孔隙(17),使托盤(pán)(13)呈鏤空結(jié)構(gòu),手柄(14)由水平柄(14-1)和垂直柄(14-2)連接而成,盒體的隔板(3)兩側(cè)、外側(cè)壁(5)內(nèi)側(cè)、前壁¢)內(nèi)側(cè)或后壁(7)內(nèi)側(cè)靠近盒底位置設(shè)有用于支撐電泳膠鏟的膠鏟支架(4),盒體外側(cè)壁(5)和前壁(6)頂部設(shè)有與手柄水平柄(14-1)大小適配的凹槽(8)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置,其特征在于:所述染色脫色盒盒體中間由多個(gè)隔板(3)隔開(kāi),染色脫色盒被分成多個(gè)染色盒(I)和脫色盒。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置,其特征在于:所述電泳膠鏟托盤(pán)(13)的左側(cè)、右側(cè)和后側(cè)分別被2個(gè)托盤(pán)側(cè)壁(15)和I個(gè)托盤(pán)后壁(16)封閉,托盤(pán)(13)的前側(cè)未封閉并呈斜坡?tīng)睢?br>
4.根據(jù)權(quán)利要求3項(xiàng)所述的電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置,其特征在于:所述電泳膠鏟托盤(pán)(13)前側(cè)的斜坡?tīng)罱Y(jié)構(gòu)的坡度在60°以下。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置,其特征在于:所述電泳膠鏟托盤(pán)(13)的上表面平整光滑并與下表面平行。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置,其特征在于:所述電泳膠鏟托盤(pán)(13)上的孔隙為圓孔狀、方孔狀或條形,鏤空結(jié)構(gòu)為孔狀、網(wǎng)狀、橫條紋狀、豎條紋狀或斜紋狀。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置,其特征在于:所述電泳膠鏟托盤(pán)(13)上的孔隙為為圓孔狀,鏤空結(jié)構(gòu)為孔狀鏤空結(jié)構(gòu),圓孔間距為0.2?28cm,圓孔直徑為0.2?2.0cm。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置,其特征在于:所述電泳膠鏟手柄垂直柄(14-2)上連接有多個(gè)層疊設(shè)置的托盤(pán)(13),各托盤(pán)之間留有便于將電泳凝膠卸下或鏟上各托盤(pán)(13)的間隙。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的電泳凝膠染色、脫色與移動(dòng)裝置,其特征在于:所述染色脫色盒上的膠鏟支架距離盒底為0.3?1.0cm,距離盒蓋為2.2?6.7cm。
【文檔編號(hào)】G01N1/31GK203929467SQ201420201636
【公開(kāi)日】2014年11月5日 申請(qǐng)日期:2014年4月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月23日
【發(fā)明者】楊曉華, 賴(lài)江華, 張華峰 申請(qǐng)人:西安交通大學(xué)