一種免疫組化原位雜交修復(fù)儀的制作方法
【專利摘要】本實(shí)用新型公開了一種免疫組化原位雜交修復(fù)儀，該修復(fù)儀包括外殼、熱蓋、時(shí)間顯示屏、溫度顯示屏、時(shí)間設(shè)置、溫度設(shè)置、開始鍵、向上鍵、向下鍵、工作燈和電源插座，時(shí)間顯示屏、溫度顯示屏、時(shí)間設(shè)置、溫度設(shè)置、開始鍵、向上鍵、向下鍵位于外殼的外表面，工作燈位于外殼的內(nèi)部，電源插座位于殼的背面，還包括集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽、金屬半導(dǎo)體和智能芯片，所述金屬半導(dǎo)體和所述智能芯片置于所述外殼的內(nèi)部，所述集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽活動置于所述外殼的內(nèi)部。熱蓋與外殼活動密封連接。該修復(fù)儀使用方便、節(jié)約修復(fù)液、縮短從加熱至規(guī)定溫度的時(shí)間、精確控制溫度。
【專利說明】一種免疫組化原位雜交修復(fù)儀
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及生物儀器方面，具體是一種免疫組化原位雜交修復(fù)儀。
【背景技術(shù)】
[0002]免疫組化和原位雜交在病理診斷中發(fā)揮著重要的作用，在其檢測過程中均需要對組織切片進(jìn)行修復(fù)。石蠟切片組織經(jīng)過福爾馬林固定后，破壞了原有的蛋白結(jié)構(gòu)，蛋白多肽之前發(fā)生交聯(lián)，封閉了抗原決定簇，抗體不能與抗原結(jié)合，如果石蠟切片不經(jīng)修復(fù)，會導(dǎo)致結(jié)果假陰性；而原位雜交需要使用蛋白酶K消化細(xì)胞核中與DNA結(jié)合的蛋白，暴露DNA，從而使探針與DNA雜交，由于經(jīng)過福爾馬林固定，蛋白的結(jié)構(gòu)已經(jīng)發(fā)生變化，蛋白酶K無法識另O，無法消化蛋白，所以必須進(jìn)行修復(fù)，使蛋白恢復(fù)原來的空間結(jié)構(gòu)。因此，修復(fù)效果是免疫組化和原位雜交的檢測的重要影響因素之一。
[0003]進(jìn)行免疫組化的修復(fù)，必須保持玻片上的標(biāo)本在修復(fù)過程中一直在浸泡在修復(fù)液中，如果標(biāo)本露出液面，則會被蒸干，標(biāo)本上的蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生了不可逆的變化，修復(fù)失敗。在加熱結(jié)束后，玻片必須浸泡在修復(fù)液中，直到修復(fù)液冷卻至室溫，才能將其取出。原位雜交修復(fù)時(shí)，必須保持玻片上的標(biāo)本在修復(fù)過程中一直浸泡在蒸餾水中。常用微波、高壓或電爐(水浴鍋)修復(fù)的方法。微波修復(fù)修復(fù)加熱到沸騰時(shí)間短，但修復(fù)液蒸發(fā)速度比高壓修復(fù)和沸騰修復(fù)都快，修復(fù)時(shí)，修復(fù)液面下降快，如果不注意，標(biāo)本可能因?yàn)槁冻鲆好娑徽舾?，從而?dǎo)致修復(fù)失?。桓邏盒迯?fù)時(shí)間相對較短，但體積大，消耗大量的修復(fù)液，不容易控制加熱的火力，如果加熱過于劇烈，標(biāo)本容易從玻片上脫落；使用水浴鍋煮沸修復(fù)，修復(fù)液蒸發(fā)緩慢，加熱結(jié)束后，液面下降不明顯，不必?fù)?dān)心標(biāo)本露出液面，但上升至所要求的溫度時(shí)間長，并且修復(fù)時(shí)間長；使用電爐修復(fù)，可在修復(fù)時(shí)調(diào)節(jié)修復(fù)火力，避光因沸騰劇烈而標(biāo)本脫落，修復(fù)時(shí)間長，并且在修復(fù)時(shí)，根據(jù)沸騰的程度，調(diào)節(jié)火力。
實(shí)用新型內(nèi)容
[0004]為了克服上述技術(shù)缺陷，本實(shí)用新型提供了一種免疫組化原位雜交修復(fù)儀。該修復(fù)儀使用方便、節(jié)約修復(fù)液、縮短從加熱至規(guī)定溫度的時(shí)間、精確控制溫度。
[0005]本實(shí)用新型的免疫組化原位雜交修復(fù)儀通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
[0006]本實(shí)用新型的一種免疫組化原位雜交修復(fù)儀包括外殼、熱蓋、時(shí)間顯示屏、溫度顯示屏、時(shí)間設(shè)置、溫度設(shè)置、開始鍵、向上鍵、向下鍵、工作燈和電源插座，所述時(shí)間顯示屏、溫度顯示屏、時(shí)間設(shè)置、溫度設(shè)置、開始鍵、向上鍵、向下鍵位于所述外殼的外表面，所述工作燈位于所述外殼的內(nèi)部,所述電源插座位于所述外殼的背面,還包括集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽、金屬半導(dǎo)體和智能芯片，所述金屬半導(dǎo)體和所述智能芯片置于所述外殼的內(nèi)部，所述集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽活動置于所述外殼的內(nèi)部。
[0007]所述熱蓋與所述外殼活動密封連接。
[0008]所述熱蓋的一邊與所述外殼的一邊扇葉連接。
[0009]所述修復(fù)儀為長方體，長度為25cm，寬度為12cm，高度為15cm。[0010]所述集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽為長方體。
[0011]所述集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽的長度為9.5cm,寬度為3.8cm,高度為9.8cm。
[0012]所述集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽的壁厚度及底部厚度為2.5mm。
[0013]本實(shí)用新型的修復(fù)儀能設(shè)置了半導(dǎo)體和智能芯片，加熱時(shí)間和加熱溫度按照程序制冷，達(dá)到設(shè)置溫度后，自動開始倒計(jì)時(shí)；倒計(jì)時(shí)結(jié)束，自動停止加熱，用戶只需要添加修復(fù)液，設(shè)置時(shí)間和溫度，按下開始鍵即可，使用方便簡潔。而且由于內(nèi)膽的外形和體積是專門根據(jù)玻片架的大小而設(shè)計(jì)，因而還具有節(jié)約修復(fù)液、縮短加熱至規(guī)定溫度所需的時(shí)間。同時(shí)由于熱蓋與外殼之間活動密封連接，還能精確控制溫度，由于修復(fù)儀根據(jù)溫度調(diào)節(jié)加熱火力，可避免火力過大引起的劇烈沸騰，降低了脫片的風(fēng)險(xiǎn)，且由于密封條件好，修復(fù)液蒸發(fā)十分緩慢，避免了標(biāo)本露出液面。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0014]圖1是本實(shí)用新型的一種免疫組化原位雜交修復(fù)儀的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例的結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0015]實(shí)施例1:本實(shí)用新型的免疫組化原位雜交修復(fù)儀的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例
[0016]圖1是本實(shí)用新型的一種免疫組化原位雜交修復(fù)儀的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例的結(jié)構(gòu)示意圖。由圖1可見，本免疫組化原位雜交修復(fù)儀包括外殼1、熱蓋2、時(shí)間顯示屏3、溫度顯示屏4、時(shí)間設(shè)置5、溫度設(shè)置6、開始鍵7、向上鍵8、向下鍵9、工作燈10和電源插座12。時(shí)間顯示屏3、溫度顯示屏4、時(shí)間設(shè)置5、溫度設(shè)置6、開始鍵7、向上鍵8、向下鍵9位于所述外殼I的外表面，工作燈10位于所述外殼I的內(nèi)部，所述電源插座12位于所述外殼I的背面。本修復(fù)儀還包括集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽11、金屬半導(dǎo)體13和智能芯片14，熱蓋2與外殼I活動密封連接，即熱蓋可以打開，當(dāng)蓋上熱蓋的時(shí)候，熱蓋與外殼形成密封空間。在本實(shí)施例中，熱蓋2的一邊與外殼I的一邊是扇葉連接。集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽11活動置于外殼I的內(nèi)部，金屬半導(dǎo)體13和智能芯片14置于外殼I的內(nèi)部。本修復(fù)儀為長方體，夕卜殼I的長度為25cm，寬度為12cm，高度為15cm。集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽11為長方體，長度為9.5cm，寬度為
3.8cm,高度為9.8cm,其壁厚度及底部厚度為2.5mm。
[0017]實(shí)施例2:本實(shí)用新型的免疫組化原位雜交修復(fù)儀應(yīng)用的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例
[0018]利用本實(shí)用新型的免疫組化原位雜交修復(fù)儀對石蠟切片進(jìn)行免疫組化按如下步驟進(jìn)行:
[0019]1.脫蠟、水化
[0020]①二甲苯替代品，3次，每次5min ；
[0021]②梯度酒精:100%、95%、75%、50%、蒸餾水各3min
[0022]2.滅酶
[0023]37°C、3%H202 浸泡 lOmin，PBS 洗滌 2 次，2min/ 次。
[0024]3.修復(fù)
[0025]免疫組化:在集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽11中加入修復(fù)液，按“溫度設(shè)置6”，再通過向上鍵
8、向下鍵9調(diào)節(jié)溫度，按時(shí)間設(shè)置5，再通過向上鍵8、向下鍵9設(shè)置時(shí)間，儀器開始加熱，力口熱至設(shè)定溫度時(shí)，儀器發(fā)出提示聲，這時(shí)將要修復(fù)的玻片放入集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽11中，按開始鍵7，開修復(fù)和倒計(jì)時(shí)，時(shí)間為O時(shí)間，發(fā)出提示聲，并且開始降溫程序，降至25°C時(shí)，儀器停止工作。
[0026]原位雜交:在集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽11中加入蒸餾水，將玻片放入集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽11，按“溫度設(shè)置6”，再通過向上鍵8、向下鍵9調(diào)節(jié)溫度，按時(shí)間設(shè)置5，再通過向上鍵8、向下鍵9設(shè)置時(shí)間，儀器開始加熱，加熱至設(shè)定溫度時(shí)，儀器發(fā)出提示聲，按開始鍵7，開修復(fù)和倒計(jì)時(shí)，時(shí)間為O時(shí)間，發(fā)出提示聲(這時(shí)可將玻片取出)，并且開始降溫程序，降至25°C時(shí)，儀器停止工作。
[0027]4.封閉
[0028]用10%的山羊血清或3%的小牛血清封片室溫30min。
[0029]5.孵育一抗
[0030]用封閉液稀釋抗體，4°C過夜；PBS洗滌，3次，5min/次
[0031]6.孵育二抗
[0032]取通用二抗檢測系統(tǒng)試劑盒中的A液，滴加在標(biāo)本上，將玻片放入濕盒，室溫孵育40min, PBS洗片，3次，每次lOmin，甩盡玻片上的水滴，平放于濕盒中。
[0033]7.DAB顯色和蘇木素復(fù)染
[0034]滴加預(yù)備好的顯色劑DAB工作液約50 μ L，室溫孵育5~lOmin，顯微鏡下觀察顯色情況，顯色結(jié)果后用蒸餾水沖洗玻片，終止顯色。
[0035]8.封片
[0036]同時(shí)按常規(guī)步驟進(jìn)行了微波修復(fù)、高壓修復(fù)、煮沸修復(fù)，對四者所用液體的體積和時(shí)間進(jìn)行了比較。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，不同修復(fù)方法所用的液體體積和所用時(shí)間如下表1所示:
[0037]表1
【權(quán)利要求】
1.一種免疫組化原位雜交修復(fù)儀，包括外殼、熱蓋、時(shí)間顯示屏、溫度顯示屏、時(shí)間設(shè)置、溫度設(shè)置、開始鍵、向上鍵、向下鍵、工作燈和電源插座，所述時(shí)間顯示屏、溫度顯示屏、時(shí)間設(shè)置、溫度設(shè)置、開始鍵、向上鍵、向下鍵位于所述外殼的外表面，所述工作燈位于所述外殼的內(nèi)部，所述電源插座位于所述外殼的背面，其特征在于，還包括集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽、金屬半導(dǎo)體和智能芯片，所述金屬半導(dǎo)體和所述智能芯片置于所述外殼的內(nèi)部，所述集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽活動置于所述外殼的內(nèi)部。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的免疫組化原位雜交修復(fù)儀，其特征在于，所述熱蓋與所述外殼活動密封連接。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的免疫組化原位雜交修復(fù)儀，其特征在于，所述熱蓋的一邊與所述外殼的一邊扇葉連接。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的免疫組化原位雜交修復(fù)儀，其特征在于，所述修復(fù)儀為長方體，長度為25cm,寬度為12cm,高度為15cm。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的免疫組化原位雜交修復(fù)儀，其特征在于，所述集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽為長方體。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的免疫組化原位雜交修復(fù)儀，其特征在于，所述集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽的長度為9.5cm,寬度為3.8cm,高度為9.8cm。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的免疫組化原位雜交修復(fù)儀，其特征在于，所述集成加熱系統(tǒng)內(nèi)膽的壁厚度及底部厚度為2.5mm。
【文檔編號】G01N33/68GK203759024SQ201420140680
【公開日】2014年8月6日 申請日期:2014年3月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月26日
【發(fā)明者】歐冬兒, 李艷慧 申請人:廣州市外顯子生物技術(shù)有限公司