用于測定青蒿素含量的電位滴定法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種分析方法，尤其是涉及用于測定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：該方法為于150mL燒瓶中加入碘鹽、碳酸氫鹽或碳酸鹽、酸、乙醇及水，之后加入待測青蒿素樣品，加熱反應并冷卻后，利用全自動電位滴定儀以硫代硫酸鈉標準溶液測定并計算樣品含量即可；本發(fā)明方法簡單、成本低廉、不需要使用大型儀器即可準確測定青蒿素含量。
【專利說明】用于測定青蒿素含量的電位滴定法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種分析方法，尤其是涉及用于測定青蒿素含量的電位滴定法。

【背景技術】
[0002] 如圖1所示青蒿素是一種含有過氧橋的倍半萜內酯，于上個世紀70年代由我國科 學家從黃花蒿中分離出的一種活性單體成分，在治療腦型瘧、惡性瘧、間日瘧等疾病方面具 有高效、低毒、速效、使用安全等優(yōu)點。盡管目前單一使用青蒿素類藥物已經使得瘧原蟲產 生抗藥性，基于青蒿素類藥物的聯(lián)合療法仍然是WHO推薦的針對瘧疾的首選療法，其中青 蒿素類藥物仍然作為治療瘧疾的重要藥物之一。從80年代中期開始，國內研宄人員在青蒿 素的基礎上又相繼成功研發(fā)出青蒿琥酯、蒿甲醚和雙氫青蒿素等新藥，但這些新藥都是以 青蒿素為原料半合成制得，因此，青蒿素作為青蒿素類抗瘧藥物的原料，在抗瘧藥物的生產 中有著重要的作用。
[0003] 因此，針對青蒿素類藥物的含量測定方法研宄也得到了廣泛的關注，并開發(fā)出了 一系列的青蒿素等藥物含量測定方法，如TLC法，堿處理后紫外可見分光光度測定法，GC， HPLC-CD，HPLC-UV，HPLC-ELSD，HPLC-MS等。其中，高效液相色譜法是通用的青蒿素類藥物 的含量測定方法，堿處理后紫外可見分光光度測定法也常用于青蒿素和青蒿琥酯的含量測 定，這兩種方法也是《中國藥典》收錄的含量測定方法。
[0004] 堿處理后紫外可見分光光度測定法目前主要用于青蒿素的含量測定。其通常的操 作步驟為，通過使用NaOH處理青蒿素乙醇溶液30分鐘，使青蒿素反應生成在292nm波長 處有明顯吸收的衍生物，對衍生物在292nm波長處的吸光度進行測量并通過標準曲線法計 算出相應的青蒿素含量。該方法操作簡單，使用的儀器-紫外可見光譜儀也較為普遍。但 是，在實際測量中，特別是測定復方制劑中青蒿素類藥品或者植物提取液中的青蒿素的含 量時，往往會因為其它雜質在292nm波長處的背景干擾而導致測定結果不準確。
[0005] 高效液相色譜法（HPLC-UV/HPLC-DAD)是目前廣泛使用的青蒿素類藥物含量測定 方法之一，《中國藥典》中通常將樣品溶解后直接進樣，以外標法測定青蒿素類藥物的含量。 需要注意的是，在測定青蒿素類藥品與其他藥品制成的復方藥物中或植物提取物中的青蒿 素含量時，雖都可以采用HPLC法，但由于樣品中雜質的干擾，使得一些分析方法不能直接 使用，需要進行衍生化處理后進行測定。比如，在測定黃花蒿藥材中青蒿素的含量時，由于 青蒿素最大吸收波長在205nm左右，提取物中的其他成分比較復雜，使得直接使用紫外檢 測器（UV或DAD)檢測器測定會有一定干擾，需將青蒿素類藥品進行柱前衍生化，然后再進 行測定。青蒿素與堿反應后生成292nm處有吸收的物質，之后將其在pH5.6-6. 0定量轉化 為最大吸收波長在260nm處有吸收的物質，再使用HPLC進行測定。不對青蒿素進行衍生化 也可以使用其它檢測器直接測定，如蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD)，質譜（MS)等。HPLC法準確 可靠、重現(xiàn)性好、專屬性強，可廣泛用于青蒿素類藥物原料、制劑及生物樣品分析。但由于使 用HPLC-UV法進行含量測定復雜樣品時常需對樣品進行柱前衍生化處理，以排除干擾，而 使用MS，ELSD等檢測器則較為昂貴。而且，HPLC檢測耗時長，單個樣品檢測時間通常在10 分鐘以上，使用的甲醇、乙腈等HPLC級試劑及色譜柱等耗材價格較貴，從而使得HPLC法檢 測青蒿素類藥物成本較高。
[0006] 雖然目前青蒿素類藥物的含量測定有很多方法。但是目前所使用的測定青蒿素類 藥物含量的方法有的儀器昂貴、有的使用成本很高、有的樣品處理方法復雜、有的結果誤差 較大，往往不能滿足生產、科研中需要快速、簡單、成本低廉并能夠測定大量樣品時的需要。


【發(fā)明內容】

[0007] 本發(fā)明的目的主要是克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種方法簡單、成本低廉、不需要 使用大型儀器即可準確測定青蒿素含量的用于測定青蒿素含量的電位滴定法。
[0008] 本發(fā)明通過如下方式實現(xiàn)：
[0009] 一種用于測定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：該方法為于150mL燒瓶中 加入碘鹽、碳酸氫鹽或碳酸鹽、酸、乙醇及水，之后加入待測青蒿素樣品，加熱反應并冷卻 后，利用全自動電位滴定儀以硫代硫酸鈉標準溶液測定并計算樣品含量即可；
[0010] 所述碘鹽為碘化鉀或碘化鈉，用量為樣品中青蒿素物質的量的5-10倍；
[0011] 所述碳酸氫鹽及碳酸鹽為碳酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸氫鉀、碳酸鉀中的任意一種，用 量為IO-IOOOmg;
[0012] 所述酸為硫酸或鹽酸；
[0013] 所述加熱溫度為O-KKTC;
[0014] 所述加熱時間為0-24小時；
[0015] 所述實驗所用使用儀器為電位滴定儀，儀器中采用電極為氧化還原電極。
[0016] 本發(fā)明具有如下效果：
[0017] 1)方法簡單：本發(fā)明的原理青蒿素中過氧橋與碘離子定量反應生成單質碘，使用 全自動電位滴定儀以硫代硫酸鈉標準溶液滴定反應產生的單質碘，依據(jù)消耗的硫代硫酸鈉 標準溶液體積計算青蒿素含量，實驗原理為氧化還原滴定。通過以下公式計算得出樣品中 青蒿素的含量。m(樣品中青蒿素質量）=(N*V*282. 33)/2,其中，N為Na2S2O3標準溶液的 物質的量濃度，V為消耗Na2S2O3標準溶液的體積，282. 33為青蒿素的分子量。在《藥學通 報》1980年15卷第8期中，朱漢松在"青蒿素的滴定分析法" 一文中報道了利用電位滴定 儀測定青蒿素含量的方法。但該方法是用NaOH溶液水解青蒿素，再通過標準HCl溶液利用 酸堿滴定測定剩余NaOH含量，計算水解反應所消耗NaOH含量，進而計算青蒿素含量。該方 法為酸堿滴定法，在實驗原理及實驗方法上與本專利中涉及內容有很大的差異。
[0018] 2)成本低廉、不需要使用大型儀器即可準確測定青蒿素含量：本發(fā)明提供的方法 的具體步驟為于150mL燒瓶中加入碘鹽、碳酸氫鹽（或碳酸鹽）、酸、乙醇及水，之后加入待 測青蒿素樣品。加熱反應并冷卻后，利用全自動電位滴定儀以硫代硫酸鈉標準溶液測定并 計算樣品含量；該方法成本低廉，只需使用硫代硫酸鈉等常用分析純化學試劑，價格便宜同 時所需的化學試劑均為分析常用試劑，容易購買獲得；操作簡單快捷，能夠在較短時間內測 定樣品中青蒿素含量。實驗只需全自動電位滴定儀，該儀器價格便宜，利于普及，同時滴定 精度較傳統(tǒng)手工滴定法精度高，由儀器自動控制，實驗數(shù)據(jù)準確可靠。
[0019] 3)本發(fā)明提供的方法能夠快速、簡單、成本低廉并能夠測定大量青蒿素類藥物含 量的方法不但能夠有利于青蒿素類藥物生產及銷售過程中的質量控制，而且在青蒿素的品 種選育、藥材收購及提取等過程中具有很重要的應用價值。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0020] 圖1為青蒿素結構式；
[0021] 圖2為青蒿素標準曲線。

【具體實施方式】
[0022] 實例一、不同反應時間下，測定青蒿素含量：
[0023] 取含量為98%的青蒿素，0. 3g碘化鉀及50mg碳酸氫鈉，加入2mL20%硫酸，IOmL 乙醇及IOmL水，70 °C反應，之后將其冷卻。在瑞士萬通905型全自動電位滴定儀上利用 0.lmol/L硫代硫酸鈉標準溶液滴定。結果如下表所示：
[0024] 表1反應時間15min
[0025]
[0026]

【權利要求】
1. 一種用于測定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：該方法為于150mL燒瓶中加 入碘鹽、碳酸氫鹽或碳酸鹽、酸、乙醇及水，之后加入待測青蒿素樣品，加熱反應并冷卻后， 利用全自動電位滴定儀以硫代硫酸鈉標準溶液測定并計算樣品含量即可。
2. 如權利要求1所述的用于測定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：所述碘鹽為 碘化鉀或碘化鈉，用量為樣品中青蒿素物質的量的5-10倍。
3. 如權利要求1所述的用于測定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：所述碳酸氫 鹽及碳酸鹽為碳酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸氫鉀、碳酸鉀中的任意一種，用量為l〇-l〇〇〇mg。
4. 如權利要求1所述的用于測定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：所述酸為硫 酸或鹽酸。
5. 如權利要求1所述的用于測定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：所述加熱溫 度為 0-100 °c。
6. 如權利要求1所述的用于測定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：所述加熱時 間為0-24小時。
7. 如權利要求1所述的用于測定青蒿素含量的電位滴定法，其特征在于：所述實驗所 用使用儀器為電位滴定儀，儀器中采用電極為氧化還原電極。
【文檔編號】G01N27/42GK104483369SQ201410755798
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月10日 優(yōu)先權日:2014年12月10日
【發(fā)明者】黃宇, 樊艷茹, 張霞, 陳靖, 馮軍 申請人:寧夏醫(yī)科大學