一種養(yǎng)殖所用獸藥或消毒劑進(jìn)行實驗室評價的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種養(yǎng)殖所用獸藥或消毒劑進(jìn)行實驗室評價的方法：①上樣菌液制備；②不同濃度消毒劑制備；③上樣孵育；④結(jié)果判定：(1)MIC最小抑菌濃度比較；(2)OD450抑菌趨勢比較；(3)有效抑菌濃度費用比較；最后，結(jié)合MIC和OD450抑菌趨勢及有效抑菌濃度費用綜合評比，選出最優(yōu)消毒劑。該發(fā)明采用微量藥敏試驗對于養(yǎng)殖場防治疾病所用獸藥或消毒劑進(jìn)行實驗室評價，為正確使用藥物提供一定參考依據(jù)。
【專利說明】一種養(yǎng)殖所用獸藥或消毒劑進(jìn)行實驗室評價的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種養(yǎng)殖所用獸藥或消毒劑的檢測方法，尤其是一種養(yǎng)殖所用獸藥或消毒劑進(jìn)行實驗室評價的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]目前，采購市場獸藥及消毒藥前，可以通過微量藥敏評價出高效或?qū)τ诒攫B(yǎng)殖場有效藥物，同時對疫情防治也能提供有效獸藥。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種養(yǎng)殖所用獸藥或消毒劑進(jìn)行實驗室評價的方法。
[0004]這種養(yǎng)殖所用獸藥或消毒劑進(jìn)行實驗室評價的方法:
[0005]①上樣菌液制備:
[0006]將水樣中分離大腸桿菌，挑取單個菌落混于5mL的TSB中，37 °C烘箱靜置孵育2h，此時菌液混濁，取100 μ L菌液10倍稀釋8-10個梯度，均勻涂于TSA中37°C靜置24h后計數(shù)，然后根據(jù)計數(shù)的菌液濃度調(diào)至105CFU/mL，用于上樣菌液；
[0007]②不同濃度消毒劑制備:
[0008]根據(jù)消毒劑上使用說明的最低使用濃度和最高使用濃度，倍比稀釋實驗用濃度需包含最低和最高使用濃度，分為6個梯度；
[0009]③上樣孵育:
[0010](I)將96微孔板中第I排前6孔分別加入6種不同濃度消毒劑100 μ L，第7孔加入上樣菌液200 μ L作為陽性對照，第8孔加入該消毒劑200 μ L ;
[0011](2)第I排前6孔再加入100 μ L上樣菌液，致使每孔最終體系為200 μ L ;
[0012](3)第2排作為第I排消毒劑的平行對照，其他消毒劑也同上述方式加樣后，蓋好板蓋；然后置于37°C，靜置孵育，分別于3-6h和12-24h各取4個點觀察MIC及測定0D450值；
[0013]④結(jié)果判定:
[0014](I)MIC最小抑菌濃度比較:消毒劑的MIC與其使用說明中推薦濃度或最低使用濃度比較，若低于推薦濃度，則消毒劑效果較好，反之則較差；不同消毒劑MIC比較，MIC越低，但必須先小于推薦濃度，消毒劑效果越好；
[0015](2)0D450抑菌趨勢比較:對于MIC值相同消毒劑，可以通過0D450抑菌趨勢，分析其抑菌作用時間及穩(wěn)定性，判定優(yōu)劣；
[0016](3)有效抑菌濃度費用比較:根據(jù)有效抑菌濃度(MIC)，比較各消毒劑稀釋同樣水量，所花費的費用；
[0017]最后，結(jié)合MIC和0D450抑菌趨勢及有效抑菌濃度費用綜合評比，選出最優(yōu)消毒劑。
[0018]發(fā)明的有益效果:
[0019]該發(fā)明采用微量藥敏試驗對于養(yǎng)殖場防治疾病所用獸藥或消毒劑進(jìn)行實驗室評價，為正確使用藥物提供一定參考依據(jù)。

【具體實施方式】
[0020]實施例:
[0021]1、上樣菌液制備
[0022]將水樣中分離大腸桿菌，挑取單個菌落混于5mL的TSB中，37 °C烘箱靜置孵育2h (此時菌液混濁)，取100 μ L菌液10倍稀釋8-10個梯度，均勻涂于TSA中37°C靜置24h后計數(shù)，然后根據(jù)計數(shù)的菌液濃度調(diào)至105CFU/mL，用于上樣菌液。
[0023]2、不同濃度消毒劑制備
[0024]根據(jù)消毒劑上使用說明的最低使用濃度和最高使用濃度，倍比稀釋實驗用濃度需包含最低和最高使用濃度(一般6個梯度)。
[0025]3、上樣孵育
[0026](I)將96微孔板中第I排前6孔分別加入6種不同濃度消毒劑100 μ L，第7孔加入上樣菌液200 μ L作為陽性對照，第8孔加入該消毒劑200 μ L0
[0027](2)第I排前6孔再加入100 μ L上樣菌液，致使每孔最終體系為200 μ L。
[0028](3)第2排作為第I排消毒劑的平行對照，其他消毒劑也同上述方式加樣后，蓋好板蓋。然后置于37°C，靜置孵育，分別于3-6h和12-24h各取4個點觀察MIC及測定0D450值。
[0029]4、結(jié)果判定:
[0030](1)MIC(最小抑菌濃度)比較:消毒劑的MIC與其使用說明中推薦濃度(或最低使用濃度)比較，若低于推薦濃度，則消毒劑效果較好，反之則較差；不同消毒劑MIC比較，MIC越低(但必須先小于推薦濃度)，消毒劑效果越好。
[0031](2)0D450抑菌趨勢比較:對于MIC值相同消毒劑，可以通過0D450抑菌趨勢，分析其抑菌作用時間及穩(wěn)定性，判定優(yōu)劣。
[0032](3)有效抑菌濃度費用比較:根據(jù)有效抑菌濃度(MIC)，比較各消毒劑稀釋同樣水量，所花費的費用。
[0033]最后，結(jié)合MIC和0D450抑菌趨勢及有效抑菌濃度費用綜合評比，選出最優(yōu)消毒劑。
【權(quán)利要求】
1.一種養(yǎng)殖所用獸藥或消毒劑進(jìn)行實驗室評價的方法，其特征是: ①上樣菌液制備: 將水樣中分離大腸桿菌，挑取單個菌落混于5mL的TSB中，37°C烘箱靜置孵育2h，此時菌液混濁，取100 μ L菌液10倍稀釋8-10個梯度，均勻涂于TSA中37°C靜置24h后計數(shù)，然后根據(jù)計數(shù)的菌液濃度調(diào)至105CFU/mL，用于上樣菌液； ②不同濃度消毒劑制備: 根據(jù)消毒劑上使用說明的最低使用濃度和最高使用濃度，倍比稀釋實驗用濃度需包含最低和最高使用濃度，分為6個梯度； ③上樣孵育: (1)將96微孔板中第I排前6孔分別加入6種不同濃度消毒劑100μ L，第7孔加入上樣菌液200 μ L作為陽性對照，第8孔加入該消毒劑200 μ L ; (2)第I排前6孔再加入100μ L上樣菌液，致使每孔最終體系為200 μ L ; (3)第2排作為第I排消毒劑的平行對照，其他消毒劑也同上述方式加樣后，蓋好板蓋；然后置于37°C，靜置孵育，分別于3-6h和12-24h各取4個點觀察MIC及測定0D450值； ④結(jié)果判定: (1)MIC最小抑菌濃度比較:消毒劑的MIC與其使用說明中推薦濃度或最低使用濃度比較，若低于推薦濃度，則消毒劑效果較好，反之則較差；不同消毒劑MIC比較，MIC越低，但必須先小于推薦濃度，消毒劑效果越好； (2)0D450抑菌趨勢比較:對于MIC值相同消毒劑，可以通過0D450抑菌趨勢，分析其抑菌作用時間及穩(wěn)定性，判定優(yōu)劣； (3)有效抑菌濃度費用比較:根據(jù)有效抑菌濃度(MIC)，比較各消毒劑稀釋同樣水量，所花費的費用； 最后，結(jié)合MIC和0D450抑菌趨勢及有效抑菌濃度費用綜合評比，選出最優(yōu)消毒劑。
【文檔編號】G01N33/00GK104198658SQ201410455308
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年9月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月10日
【發(fā)明者】喻正軍, 徐行, 曹維維, 陳基萍, 劉琥, 汪雪, 方奎, 黃剛, 陳飛飛, 劉志偉, 溫志斌, 羅芬, 張元元 申請人:廣西揚(yáng)翔農(nóng)牧有限責(zé)任公司