一種鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的檢測方法，本檢測方法是采用高效液相色譜法對鹽酸戊乙奎醚中雜質(zhì)3-奎寧醇進行的一種定量檢測，在檢測過程中，使用3-奎寧醇作為對照品進行定位，高效液相色譜儀和示差折光檢測器作為主要檢測設備，包含有：制備供試品溶液，待用；制備對照品溶液，待用；測定共三個步驟，該方法的實施不僅能有效的提高鹽酸戊乙奎醚藥品的安全性和有效性，同時，其專屬性、定量限與檢測限、線性、精密度、溶液穩(wěn)定性等方面均經(jīng)詳細驗證，且各項驗證結果均符合相關法規(guī)和指導原則的要求，實際檢測效果良好。
【專利說明】—種鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的檢測方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明是一種鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的檢測方法，具體涉及對鹽酸戊乙奎醚中雜質(zhì)3-奎寧醇的定量檢測方法，屬于藥物檢測領域。
【背景技術】
[0002]鹽酸戊乙奎醚是我國研制的具有自主知識產(chǎn)權的新藥，其原料藥的現(xiàn)有劑型主要為注射液，即鹽酸戊乙奎醚注射液(長托寧)，具有選擇性膽堿受體拮抗作用，不僅能有效避免阿托品產(chǎn)生的心動過速等不良反應，還具有藥效長、不良反應少等優(yōu)勢，其適應癥包括:用于麻醉前給藥以抑制唾液腺和氣道腺體分泌、用于有機磷毒物(農(nóng)藥)中毒急救治療和中毒后期或膽堿酯酶(ChE)老化后維持阿托品化等。目前，該藥已在麻醉前用藥、有機磷農(nóng)藥中毒搶救、休克、呼吸系統(tǒng)疾病、心血管疾病及戒毒治療等臨床領域中開始應用，如:專利文獻CN02134118.4披露的一種藥物化合物及其組合物和在制藥中的應用、專利文獻CN200510088052.X披露的鹽酸戊乙奎醚在制藥中的應用以及專利文獻CN200910058142.2披露的鹽酸戊乙奎醚在制備治療失血性休克疾病藥物中的應用等。
[0003]現(xiàn)有情況是，隨著我國對藥品研發(fā)中雜質(zhì)研究要求的日益嚴格和明確，尤其是對藥品副產(chǎn)物、降解產(chǎn)物等的研究以進入了一個全新階段的今天，藥品在臨床使用中是否會產(chǎn)生不良反應日益重要。當然，我們還清楚的知道，在實際臨床領域中，藥品在臨床使用過程中產(chǎn)生的不良反應，除了與藥品主成分的藥理活性有關外，還與藥品中存在的雜質(zhì)有關系，3-奎寧醇為鹽酸戊乙奎醚的雜質(zhì)之一，產(chǎn)生途徑包括起始原料殘留和降解，本發(fā)明建立了一種能準確定量檢測鹽酸戊乙奎醚中的3-奎寧醇的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的檢測方法，本檢測方法是采用高效液相色譜法，使用示差折光檢測器，用3-奎寧醇作為對照品進行定位，對鹽酸戊乙奎醚中的雜質(zhì)成分3-奎寧醇進行的定量檢測，其專屬性、定量限與檢測限、線性、精密度、溶液穩(wěn)定性等方面均經(jīng)詳細驗證，且各項驗證結果均符合相關法規(guī)和指導原則的要求，實際檢測效果良好。
[0005]本發(fā)明通過下述技術方案實現(xiàn):一種鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的檢測方法，該檢測方法的檢測限達4.4μ g/ml，即可以檢出鹽酸戊乙奎醚中高于0.018%的3-奎寧醇，實用性較強，如下所示:所述的檢測方法是使用高效液相色譜檢測系統(tǒng)對鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的含量測定，所述的高效液相色譜檢測系統(tǒng)包括高效液相色譜儀和示差折光檢測器，檢測方法包括如下步驟:
A:制備供試品溶液:將鹽酸戊乙奎醚和流動相混合配制成供試品溶液,待用，按質(zhì)量比計，鹽酸戊乙奎醚:流動相的比值為(0.01?0.04):1 ;
B:制備對照品溶液:提供3-奎寧醇對照品，將該3-奎寧醇對照品與流動相混合配制成對照品溶液，待用，按質(zhì)量比計，3-奎寧醇對照品:流動相的比值為(0.02?0.06):1000 ；
C:測定:分別吸取等量的對照品溶液和供試品溶液，注入高效液相色譜儀中進行測定，測定條件包括:
色譜柱:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；
流動相:0.2~0.8%的三氟醋酸溶液；
流速:0.5 ~1.5ml/min ；
柱溫:30~40°C ；
檢測器:示差折光檢測器。
[0006]在本發(fā)明中，在所述的步驟A中，鹽酸戊乙奎醚:流動相的質(zhì)量比為0.025:1。
[0007]在所述的步驟B中，3-奎寧醇對照品:流動相的質(zhì)量比為0.04:1000o
[0008]為更好的實現(xiàn)本發(fā)明在，所述的等量的對照品溶液和供試品溶液分別為10μ I。
[0009]進一步的在所述的步驟C中，所述的測定條件包括:
色譜柱:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；
流動相:0.5%的三氟醋酸溶液；
流速:1.0ml/min ；
柱溫:37°C ;
檢測器:示差折光檢測器，該示差折光檢測器的檢測池溫度為35°C~45°C。
[0010]優(yōu)化的，所述的示差折光檢測器的檢測池溫度為40°C。
[0011]本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比，具有以下優(yōu)點及有益效果:
(I)本發(fā)明是對鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的定量檢測，原理十分簡單，采用高效液相色譜法，用3-奎寧醇作為對照品進行定位，其專屬性、定量限與檢測限、線性、精密度、溶液穩(wěn)定性等方面均經(jīng)詳細驗證，且各項驗證結果均符合相關法規(guī)和指導原則的要求，實際檢測效果良好。
[0012](2)本發(fā)明實用性強，在實際檢測過程中，其檢測限可達4.4μg/ml，即可以檢出鹽酸戊乙奎醚中高于0.018%的3-奎寧醇的含量，檢測過程簡單、快捷。
[0013](3)本發(fā)明所述的高效液相色譜法，操作步驟簡單，其使用的檢測器為示差折光檢測器，解決了 3-奎寧醇無紫外吸收，不能采用紫外檢測器進行檢測的問題。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0014]圖1為本發(fā)明鹽酸戊乙奎醚的化學式。
[0015]圖2為本發(fā)明3-奎寧醇的化學式。
[0016]圖3為本發(fā)明流動相的液相色譜圖。
[0017]圖4為本發(fā)明對照品溶液的液相色譜圖。
[0018]圖5為本發(fā)明供試品溶液的液相色譜圖。
【具體實施方式】
[0019]下面將本發(fā)明的發(fā)明目的、技術方案和有益效果作進一步詳細的說明。
[0020]應該指出，以下詳細說明都是示例性的，旨在對所要求的本發(fā)明提供進一步的說明，除非另有說明，本文使用的所有技術和科學術語具有與本發(fā)明所屬【技術領域】的普通技術人員通常理解的相同含義。
[0021]本發(fā)明涉及一種鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的檢測方法，該檢測方法是采用高效液相色譜法對鹽酸戊乙奎醚中雜質(zhì)3-奎寧醇進行的一種定量檢測，在檢測過程中，使用3-奎寧醇作為對照品進行定位，高效液相色譜儀和示差折光檢測器作為主要檢測設備，該方法的實施不僅能有效的提高鹽酸戊乙奎醚藥品的安全性和有效性，同時，其專屬性、定量限與檢測限、線性、精密度、溶液穩(wěn)定性等方面均經(jīng)詳細驗證，且各項驗證結果均符合相關法規(guī)和指導原則的要求，因此，其實際檢測效果表現(xiàn)良好。
[0022]以下是對本發(fā)明技術方案的進一步描述:
本檢測方法是使用高效液相色譜檢測系統(tǒng)對鹽酸戊乙奎醚中雜質(zhì)3-奎寧醇進行的定量檢測，其中，高效液相色譜檢測系統(tǒng)主要由高效液相色譜儀和示差折光檢測器組成，鹽酸戊乙奎醚和3-奎寧醇的化學式分別如圖1、圖2所示，本檢測方法的具體步驟可概括如下:A:制備供試品溶液:將鹽酸戊乙奎醚和流動相混合配制成供試品溶液,待用，按質(zhì)量比計，鹽酸戊乙奎醚:流動相的比值為(0.01?0.04):1 ；
B:制備對照品溶液:提供3-奎寧醇對照品，將該3-奎寧醇對照品與流動相混合配制成對照品溶液，待用，按質(zhì)量比計，3-奎寧醇對照品:流動相的比值為(0.02?0.06):1000 ；
C:測定:分別吸取等量的對照品溶液和供試品溶液，注入高效液相色譜儀中進行測定，測定條件包括:
色譜柱:以十八烷基硅烷鍵合硅膠作為填充劑；
流動相:包括0.2?0.5%的三氟醋酸溶液；
流速:0.5 ?1.5ml/min ；
柱溫:30?40°C ；
檢測器:示差折光檢測器，其檢測池溫度為35°C?45°C。
[0023]經(jīng)實際檢測可知，本檢測方法的檢測限可達4.4 μ g/ml，即可以檢出鹽酸戊乙奎醚中高于0.018%的3-奎寧醇。
[0024]下面以五個典型實施例來列舉說明本發(fā)明的【具體實施方式】，每個實施例所選取的鹽酸戊乙奎醚均選自不同批次，當然，本發(fā)明的保護范圍并不局限于以下實施例。
[0025]實施例1:
選取批號為110601的鹽酸戊乙奎醚，對其雜質(zhì)3-奎寧醇的含量進行檢測，如下所示:A:制備供試品溶液:在630mg的鹽酸戊乙奎醚中加25ml的0.5%的三氟醋酸溶液，其質(zhì)量比為0.025:1，配制成每Iml含鹽酸戊乙奎醚25mg的溶液，作為供試品溶液，待用；
B:制備對照品溶液:在1000 μ g 3-奎寧醇對照品中加入25ml的0.5%的三氟醋酸溶液，其質(zhì)量比為0.04:1000，配制成每Iml中含3-奎寧醇40 μ g的溶液，作為對照品溶液，待用；
C:測定:分別吸取對照品溶液和供試品溶液各10 μ 1，注入高效液相色譜儀中進行測定，其測定條件包括:
色譜柱:尺寸為150X4.6mm的十八烷基硅烷鍵合硅膠柱(耐酸型)，其填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；
流動相:0.5%的三氟醋酸溶液； 流速:1.0ml/min ；
柱溫:37°C ;
檢測器:示差折光檢測器，調(diào)節(jié)其檢測池溫度為40°C進行檢測。
[0026]圖3、圖4、圖5依次為本實施例中，0.5%的三氟醋酸溶液、對照品溶液以及供試品溶液的液相色譜圖。
[0027]經(jīng)檢測，批號為110601的鹽酸戊乙奎醚中雜質(zhì)3-奎寧醇的含量為0.090%。
[0028]實施例2:
選取批號為111101的鹽酸戊乙奎醚，對其雜質(zhì)3-奎寧醇的含量進行檢測，如下所示:A:制備供試品溶液:在260mg的鹽酸戊乙奎醚中加IOml的0.2%的三氟醋酸溶液，其質(zhì)量比為0.0104:1，配制成制每Iml含鹽酸戊乙奎醚IOmg的溶液，作為供試品溶液，待用；
B:制備對照品溶液:在500 μ g 3-奎寧醇對照品中加入25ml的0.2%的三氟醋酸溶液，其質(zhì)量比為0.02:1000，配制成每Iml中含3-奎寧醇40 μ g的溶液，作為對照品溶液，待用；
C:測定:分別吸取對照品溶液和供試品溶液各10 μ 1，注入高效液相色譜儀中進行測定，其測定條件包括:
色譜柱:尺寸為150X4.6mm的十八烷基硅烷鍵合硅膠柱(耐酸型)，其填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；
流動相:0.2%的三氟醋酸溶液；
流速:1.5ml/min ；
柱溫:35°C ；
檢測器:示差折光檢測器，調(diào)節(jié)其檢測池溫度為38°C進行檢測。
[0029]經(jīng)檢測，批號為111101的鹽酸戊乙奎醚中雜質(zhì)3-奎寧醇的含量為0.041%。
[0030]實施例3:
選取批號為120201的鹽酸戊乙奎醚，對其雜質(zhì)3-奎寧醇的含量進行檢測，如下所示:A:制備供試品溶液:在IOOOmg的鹽酸戊乙奎醚中加25ml的0.8%的三氟醋酸溶液，其質(zhì)量比為0.04:1，配制成制每Iml含鹽酸戊乙奎醚40mg的溶液，作為供試品溶液，待用；
B:制備對照品溶液:在1500 μ g 3-奎寧醇對照品中加入25ml的0.8%的三氟醋酸溶液，其質(zhì)量比為0.06:1000，配制成每Iml中含3-奎寧醇60 μ g的溶液，作為對照品溶液，待用；
C:測定:分別吸取對照品溶液和供試品溶液各10 μ 1，注入高效液相色譜儀中進行測定，其測定條件包括:
色譜柱:尺寸為150X4.6mm的十八烷基硅烷鍵合硅膠柱(耐酸型)，其填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；
流動相:0.8%的三氟醋酸溶液；
流速:0.5ml/min ；
柱溫:30°C ;
檢測器:示差折光檢測器，調(diào)節(jié)其檢測池溫度為35°C進行檢測。
[0031]經(jīng)檢測，批號為120201的鹽酸戊乙奎醚中雜質(zhì)3-奎寧醇的含量為0.061%。
[0032]實施例4:選取批號為130701的鹽酸戊乙奎醚，對其雜質(zhì)3-奎寧醇的含量進行檢測，如下所示:A:制備供試品溶液:在625mg的鹽酸戊乙奎醚中加25ml的0.5%的三氟醋酸溶液，其質(zhì)量比為0.025:1，配制成制每1ml含鹽酸戊乙奎醚25mg的溶液，作為供試品溶液，待用；
B:制備對照品溶液:在1000 μ g 3-奎寧醇對照品中加入25ml的0.5%的三氟醋酸溶液，其質(zhì)量比為0.04:1000，配制成每1ml中含3-奎寧醇40 μ g的溶液，作為對照品溶液，待用；
C:測定:分別吸取對照品溶液和供試品溶液各10 μ 1，注入高效液相色譜儀中進行測定，其測定條件包括:
色譜柱:尺寸為150X4.6mm的十八烷基硅烷鍵合硅膠柱(耐酸型)，其填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；
流動相:0.5%的三氟醋酸溶液；
流速:0.8ml/min ；
柱溫:40°C ；
檢測器:示差折光檢測器，調(diào)節(jié)其檢測池溫度為45°C進行檢測。
[0033]經(jīng)檢測，批號為130701的鹽酸戊乙奎醚中雜質(zhì)3_奎寧醇的含量為0.029%。
[0034]實施例5:
選取批號為131101的鹽酸戊乙奎醚，對其雜質(zhì)3-奎寧醇的含量進行檢測，如下所示:A:制備供試品溶液:在500mg的鹽酸戊乙奎醚中加25ml的0.6%的三氟醋酸溶液，其質(zhì)量比為0.020:1，配制成制每1ml含鹽酸戊乙奎醚25mg的溶液，作為供試品溶液，待用；
B:制備對照品溶液:在1000 μ g 3-奎寧醇對照品中加入25ml的0.6%的三氟醋酸溶液，其質(zhì)量比為0.04:1000，配制成每1ml中含3-奎寧醇40 μ g的溶液，作為對照品溶液，待用；
C:測定:分別吸取對照品溶液和供試品溶液各10 μ 1，注入高效液相色譜儀中進行測定，其測定條件包括:
色譜柱:尺寸為150X4.6mm的十八烷基硅烷鍵合硅膠柱(耐酸型)，其填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；
流動相:0.6%的三氟醋酸溶液；
流速:1.2ml/min ；
柱溫:37°C ;
檢測器:示差折光檢測器，調(diào)節(jié)其檢測池溫度為40°C進行檢測。
[0035]經(jīng)檢測，批號為131101的鹽酸戊乙奎醚中雜質(zhì)3-奎寧醇的含量為0.029%。
[0036]對上述五個實施例的檢測數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計，如表1所示:
表1
【權利要求】
1.一種鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的檢測方法，其特征在于:所述的檢測方法是使用高效液相色譜檢測系統(tǒng)對鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的含量測定，所述的高效液相色譜檢測系統(tǒng)包括高效液相色譜儀和示差折光檢測器，檢測方法包括如下步驟: A:制備供試品溶液:將鹽酸戊乙奎醚和流動相混合配制成供試品溶液,待用，按質(zhì)量比計，鹽酸戊乙奎醚:流動相的比值為(0.01~0.04):1 ； B:制備對照品溶液:提供3-奎寧醇對照品，將該3-奎寧醇對照品與流動相混合配制成對照品溶液，待用，按質(zhì)量比計，3-奎寧醇對照品:流動相的比值為(0.02~0.06):1000 ； C:測定:分別吸取等量的對照品溶液和供試品溶液，注入高效液相色譜儀中進行測定，測定條件包括: 色譜柱:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑； 流動相:0.2~0.8%的三氟醋酸溶液；
流速:0.5 ~1.5ml/min ； 柱溫:30~40°C ； 檢測器:示差折光檢測器。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的檢測方法，其特征在于:在所述的步驟A中，鹽酸戊乙奎醚:流動相的質(zhì)量比為0.025 =10
3.根據(jù)權利要求1所述的一種鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的檢測方法，其特征在于:在所述的步驟B中，3-奎寧醇對照品:流動相的質(zhì)量比為0.04:1000o
4.根據(jù)權利要求1所述的一種鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的檢測方法，其特征在于:所述的等量的對照品溶液和供試品溶液分別為10 μ I。
5.根據(jù)權利要求1所述的一種鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的檢測方法，其特征在于:在所述的步驟C中，所述的測定條件包括: 色譜柱:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑； 流動相:0.5%的三氟醋酸溶液；
流速:1.0ml/min ； 柱溫:37°C ; 檢測器:示差折光檢測器，該示差折光檢測器的檢測池溫度為35°C~45°C。
6.根據(jù)權利要求5所述的一種鹽酸戊乙奎醚中3-奎寧醇的檢測方法，其特征在于:所述的示差折光檢測器的檢測池溫度為40°C。
【文檔編號】G01N30/88GK104020245SQ201410278361
【公開日】2014年9月3日 申請日期:2014年6月20日 優(yōu)先權日:2014年6月20日
【發(fā)明者】黃紹淵, 張 浩, 張玲, 吳金偉 申請人:成都力思特制藥股份有限公司