一種用高效液相色譜法測定堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的方法
【專利摘要】一種用高效液相色譜法測定堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的方法，將堿式依卡倍特鉍用甲醇溶解，配制成濃度為3mg/ml的溶液，作為供試品溶液；以供試品溶液稀釋1000倍作為1‰自身對照溶液。采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，甲醇-乙腈-磷酸鹽緩沖液為流動相，流速為1.5ml/min，柱溫為30℃，檢測波長為222nm，進樣量為10μL。一次進樣，即可有效分離，測定堿式依卡倍特鉍中的相關(guān)雜質(zhì)，檢測靈敏度高，精密度好，專屬性強，是嚴(yán)格控制該類物質(zhì)質(zhì)量的有效方法。
【專利說明】一種用高效液相色譜法測定堿式依卡倍特秘有關(guān)物質(zhì)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的分析方法，特別是堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的高效液相色譜法測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]堿式依卡倍特鉍是新型消化道潰瘍治療藥物，具有胃黏膜保護作用、蛋白酶活性抑制作用，對幽門螺旋桿菌的抑制作用，抑制胃黏膜損傷、促進潰瘍治愈的藥理作用。但是，對堿式依卡倍特鉍中的有關(guān)物質(zhì)的檢測，國內(nèi)外均未報道。因此堿式依卡倍特鉍質(zhì)量難以控制，一定程度上影響了生產(chǎn)。急待研究堿式依卡倍特鉍中有關(guān)物質(zhì)的測定方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于研究設(shè)計一種快速、有效、精密度高、重現(xiàn)性好的堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的檢測方法。
[0004]本發(fā)明提供了一種用高效液相色譜法檢測堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的方法，采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，用有機相和水相的混合溶劑作為流動相，流動相的PH為2?4，優(yōu)選PH為3。
[0005]本發(fā)明提供了一種用高效液相色譜法檢測堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的方法，流動相中的有機相為甲醇和乙腈的混合液，甲醇與乙腈的比例為25?21: 5?9，優(yōu)選比例為23: 7。有機相與水相的比例為32?28: 68?72，優(yōu)選比例為30: 70。
[0006]本發(fā)明提供了一種用高效液相色譜法檢測堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的方法，所述水相為磷酸鹽緩沖液，磷酸鹽選自磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉中的一種或其混合物。優(yōu)選磷酸二氫鉀，優(yōu)選濃度為0.01mol/lo
[0007]本發(fā)明提供了一種用高效液相色譜法檢測堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的方法，磷酸鹽緩沖液中可添加峰形改善劑，峰形改善劑選自離子對試劑:庚烷磺酸鈉、戊烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、甲基磺酸鈉、二乙胺、三乙胺、三氟乙酸中的一種或多種，優(yōu)選庚烷磺酸鈉，優(yōu)選濃度為 0.01mol/l o
[0008]本發(fā)明提供了一種用高效液相色譜法檢測堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的方法，流速為 L 3 ?L 7ml/min，優(yōu)選 1.5ml/min。
[0009]本發(fā)明提供了一種用高效液相色譜法檢測堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的方法，柱溫為 25°C?35°C，優(yōu)選 30°C。
[0010]本發(fā)明提供了一種用高效液相色譜法檢測堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的方法，檢測波長為220nm?224nm，優(yōu)選222nm。
[0011]本發(fā)明提供了一種用高效液相色譜法檢測堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的方法，進樣量為5?20ii L，優(yōu)選IOii L。
[0012]本發(fā)明提供了一種用高效液相色譜法檢測堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的方法，可按以下方法實現(xiàn):
[0013](I)用高效液相色譜儀，十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，紫外檢測器，以甲醇-乙腈-磷酸鹽緩沖液為流動相。
[0014](2)溶液的配制:取堿式依卡倍特鉍適量加鹽酸酸化后用甲醇溶解，配制成濃度為3mg/ml的溶液，作為供試品溶液；以供試品溶液稀釋1000倍作為1%。自身對照溶液。
[0015](3)調(diào)節(jié)檢測器靈敏度之后，對色譜體系進樣，進樣量為lOyL，流速為1.5ml/min，柱溫為30°C，檢測波長為222nm，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍。
[0016](4)待測試樣品得以分離后，不加校正因子的主成分1%。自身對照法計算有關(guān)物質(zhì)(《中國藥典》2005年版二部附錄VD)
[0017]本發(fā)明能夠有效測定堿式依卡倍特鉍的有關(guān)物質(zhì)，方法簡單快捷，分析靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確可靠?？捎糜趬A式依卡倍特鉍及含堿式依卡倍特鉍的藥物的質(zhì)量控制。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0018]圖11%。自身對照品溶液色譜圖
[0019]圖2供試品溶液色譜圖
[0020]圖3空白干擾試驗中空白溶劑色譜圖
[0021]圖4空白干擾試驗中供試品溶液色譜圖
[0022]圖5酸破壞色譜圖
[0023]圖6堿破壞色譜圖
[0024]圖7氧化破壞色譜圖
[0025]圖8光照破壞色譜圖
[0026]圖9高溫破壞色譜圖
[0027]圖10高濕破壞色譜圖
[0028]圖11未破壞樣品色譜圖
[0029]圖12定量限色譜圖
[0030]圖13檢測限色譜圖
[0031]具體實施方法
[0032]下面的實施例將對本發(fā)明作更具體的解釋，但本發(fā)明并不僅僅局限于這些實施例，同樣這些實施例也不以任何方式限制本發(fā)明。
[0033][實施例1]
[0034]取本品75mg，精密稱定，置25ml容量瓶中，加稀鹽酸0.5ml，加甲醇適量超聲10分鐘，加甲醇溶解并稀釋至至刻度，搖勻，作為供試品溶液；精密量取1ml，置IOOml量瓶中，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，搖勻，作為對照溶液。照高效液相色譜法(中國藥典2010年版二部附錄V D)試驗，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，以甲醇-乙腈-磷酸鹽緩沖液(0.01mol/l磷酸二氫鉀和0.01mol/L庚烷磺酸鈉，稀鹽酸調(diào)節(jié)pH = 3.0) (23: 7: 70)為流動相，檢測波長為222nm ;流速為每分鐘1.5ml，理論塔板數(shù)按堿式依卡倍特鉍峰計，應(yīng)不低于2000。取對照溶液IOii L注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的15?20%，再精密量取供試品溶液和對照溶液各10 ii L分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍(見圖1和圖2)。供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個雜質(zhì)的峰面積不得大于對照液的主峰面積(0.1% )，各雜質(zhì)峰面積之和不得大于對照溶液主峰面積的5倍(0.5% )。
[0035][實施例2]
[0036]為了驗證本發(fā)明方法的專屬性，對本品進行了空白干擾試驗、破壞試驗。
[0037]空白干擾試驗
[0038]空白溶劑:取稀鹽酸0.5ml，置IOml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0039]供試品溶液:稱取堿式依卡倍特鉍77.0mg，置25ml量瓶中，加稀鹽酸0.5ml，加甲醇適量超聲10分鐘，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0040]取空白溶劑及供試品溶液各10 yl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖(見圖3和圖4)。
[0041]結(jié)果:空白溶劑不干擾檢測，供試品溶液色譜圖中，溶劑峰在3min之前出峰，出峰最早的雜質(zhì)峰在4.5分鐘，不干擾；依卡倍特鉍的峰純度為999.5。
[0042]破壞試驗
[0043]酸破壞稱取堿式依卡倍特鉍13.3mg,置IOml量瓶中，加入稀鹽酸1ml，室溫放置68h，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0044]堿破壞稱取堿式依卡倍特鉍76.6mg,置25ml量瓶中，加入lmol/L氫氧化鈉溶液Iml，60°C放置2h，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0045]氧化破壞稱取堿式依卡倍特鉍10.7mg，置IOml量瓶中，加入3%雙氧水Iml超聲5分鐘，室溫放置4h，加稀鹽酸2ml超`聲10分鐘，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0046]光照破壞稱取45001x照度條件下放置10天的供試品76.6mg,置25ml量瓶中，加稀鹽酸0.5ml并加甲醇適量超聲10分鐘，用甲醇稀釋至刻度搖勻，即得。
[0047]高溫破壞稱取高溫60°C條件下放置10天的供試品77.1mg,置25ml量瓶中，加稀鹽酸0.5ml并加甲醇適量超聲10分鐘，用甲醇稀釋至刻度搖勻，即得。
[0048]高濕破壞稱取相對濕度為92.5%條件下放置10天的供試品73.1mg,置25ml量瓶中，加稀鹽酸0.5ml并加甲醇適量超聲10分鐘，用甲醇稀釋至刻度搖勻，即得。
[0049]未破壞樣品稱取堿式依卡倍特鉍77.0mg,置25ml量瓶中，加稀鹽酸0.5ml并加甲醇適量超聲10分鐘，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0050]取上述溶液各10 iil，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖(見圖5、6、7、8、9、10、11)。
[0051]結(jié)果匯總為表-1和表_2。高溫、高濕、光照及酸堿氧化條件下產(chǎn)生的降解雜質(zhì)，主要為保留時間約為6分鐘(相對保留時間0.27)的降解產(chǎn)物，其余雜質(zhì)在影響各條件下放置10天后，含量仍小于0.1%，且均與主峰有效分離，主峰峰純度均大于999，質(zhì)量守恒。堿式依卡倍特鉍在稀鹽酸溶液中放置68小時有少量降解、在IM堿溶液中中放置68小時基本無降解，加熱條件可降解，證明其對酸堿相對穩(wěn)定，本品氧化容易降解，高溫、光照、高濕均可加速降解，且本品有吸濕性，儲存中應(yīng)防潮避光。
[0052]表1堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)檢查方法專屬性破壞試驗主要降解雜質(zhì)分析
[0053]
相對保留時間|0.27|0.40Il.58
【權(quán)利要求】
1.一種采用高效液相色譜法測定堿式依卡倍特鉍有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于，包括以下步驟: (A)用高效液相色譜儀，十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，紫外檢測器，以甲醇-乙腈-磷酸鹽緩沖液為流動相； (B)溶液的配制:取堿式依卡倍特鉍適量加鹽酸酸化后用甲醇溶解，配制成濃度為3mg/ml的溶液，作為供試品溶液；以供試品溶液稀釋1000倍作為1%。自身對照溶液； (C)調(diào)節(jié)檢測器靈敏度之后，對色譜體系進樣，進樣量為5-20iiL，流速1.3?1.7ml/min，檢測波長為220nm?224nm，柱溫為25°C?35°C，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍; (D)待測試樣品得以分離后，不加校正因子的主成分1%。自身對照法計算有關(guān)物質(zhì)。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述甲醇-乙腈-磷酸鹽緩沖液體積比為23:7:70。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于流速為每分鐘1.5ml。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于柱溫為30°C。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于檢測波長為222nm。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于磷酸鹽緩沖液中還可以添加峰形改善劑，其選自離子對試劑庚烷磺酸鈉、戊烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、甲基磺酸鈉、二乙胺、三乙胺、三氟乙酸中的一種或多種。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于:峰形改善劑為庚烷磺酸鈉，濃度為0.0lmol/10
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:磷酸鹽選自磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉中的一種或其混合物。
9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于:磷酸鹽為磷酸二氫鉀，濃度為0.01mol/lo
【文檔編號】G01N30/02GK103713064SQ201410004760
【公開日】2014年4月9日 申請日期:2014年1月7日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月7日
【發(fā)明者】張在富, 吳浩山, 許馨文 申請人:珠海億邦制藥股份有限公司, 億邦國創(chuàng)藥物研究院(北京)有限公司