一種三花注射液的質(zhì)量控制方法及應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及以天然提取物為原料制成的三花注射液的質(zhì)量控制方法。本發(fā)明方法包括以下步驟：1)對照品溶液的制備；2)三花注射液供試品溶液的制備；3)采用快速高效液相色譜梯度洗脫法檢測；4)圖譜辨認(rèn)。本發(fā)明將所得到三花注射液樣品的特佂圖譜采用計算相對保留時間及相對峰面積的方法確定特征圖譜的辨認(rèn)，從而建立起三花注射液的快速HPLC特佂圖譜，從色譜的整體面貌特佂上控制三花注射液質(zhì)量情況，避免了因只測定一、兩個化學(xué)成分而評價三花注射液整體質(zhì)量的片面性，能夠較全面、有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量。本發(fā)明具有方法簡便、快速、穩(wěn)定、精密度高、重現(xiàn)性好、易于掌握等特點，可以全面監(jiān)控原料、半成品和成品的質(zhì)量，通過特征圖譜的辨認(rèn)，對其進(jìn)行質(zhì)量控制和防偽，實用性突出，應(yīng)用前景廣闊。
【專利說明】一種三花注射液的質(zhì)量控制方法及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物分析【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種三花注射液的快速質(zhì)量控制方法及應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]三花注射液是中藥復(fù)方制劑，由三七總皂苷(原藥材為三七)及燈盞花素(原藥材為燈盞細(xì)辛)中藥提取物組成。三七總皂苷原料來源為五加科植物三七的根中提取出來的皂苷類成分。味甘，微苦，性溫。歸肝、胃、心、肺、大腸經(jīng)。其功能主治為止血散瘀，消腫定痛?！吨腥A本草5》收載了三七，載其功能為止血散瘀、消腫定痛。主治各種出血證，跌撲瘀腫，胸痹絞痛，癥瘕，血瘀經(jīng)閉、痛經(jīng)，產(chǎn)后瘀阻腹痛，瘡癰腫痛?！侗静菥V目》載其:止血、散血、定痛?！夺t(yī)便》載其:專治血，歸經(jīng)絡(luò)?！侗静菪戮帯份d其:三七根，止血之神藥也。無論上中下之血，凡有外越者，一味獨用亦效?！侗静萸笳妗分兄赋?三七氣味苦溫，能于血分化其血瘀?！吨灾袇⑽麂洝分休d其:三七，善化瘀血，又善止血妄行。近年來，在三七總皂苷治療心血管疾病方面進(jìn)行了較多的基礎(chǔ)與臨床研究，三七總皂苷具有多方面的生物活性，是防治心血管疾病的一種有效藥物，其作用主要表現(xiàn)在強(qiáng)心、擴(kuò)張冠狀動脈、增加冠脈血流量、改善心肌代謝、抗自由基、抗凝、鈣拮抗等方面。燈盞花素(燈盞花黃酮)是燈盞細(xì)辛(燈盞花)的有效成分，燈盞細(xì)辛為菊科植物短葶飛蓬的干燥全草。味辛、微苦，溫。入肺、胃、肝經(jīng)。其功能主治為散寒解表，祛風(fēng)除濕，活絡(luò)止痛，消積。主治感冒，風(fēng)濕痹痛，癱瘓，胃痛，牙痛，小兒疳積，骨髓炎，跌打損傷。其主要成分為黃酮，內(nèi)酯，揮發(fā)油，氨基酸等，有效成份主要是4-羥基黃芩素(Scutellarein)等。臨床上主要用于治療缺血性心臟疾病、腦血栓及腦梗塞等。兩藥合用，具有活血化瘀、通絡(luò)止痛功效，用于治療心血瘀阻，腦梗塞(缺血性腦卒中)急性期及恢復(fù)期；冠心病、心絞痛。
[0003]三花注射液作為一種中藥復(fù)方制劑，由于其復(fù)方內(nèi)部的不同藥味組合間的有機(jī)配合關(guān)系形成了復(fù)方整體綜合的治療特征，復(fù)方的質(zhì)量優(yōu)劣難以以明確的指標(biāo)進(jìn)行評價，復(fù)方的質(zhì)量不穩(wěn)定，直接引起了治療效果的不穩(wěn)定。中藥特征圖譜的研究和建立正是為了解決中藥質(zhì)量控制和監(jiān)督這一關(guān)鍵問題而采取的一種方法，它從藥材的生產(chǎn)、加工、貯存及制劑的原料、中間品、成品等各個角度和方面，進(jìn)行中藥樣品分析，通過相似性和相關(guān)性對比，發(fā)現(xiàn)質(zhì)量變異和缺陷，從而全面、特異地把握住中藥制劑的質(zhì)量命脈。
[0004]目前，三花注射液的質(zhì)量控制方法仍存在一定不足，中國專利CN1939372A公開了一種三花注射液的指紋圖譜質(zhì)量控制方法，但該方法采用2種高效液相色譜法分別測定三七總皂苷中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1以及燈盞花素中野黃芩苷的含量，操作繁瑣，檢測時間長。
[0005]林燕芝公開了一種三花注射劑的指紋圖譜質(zhì)量控制方法(三花注射劑質(zhì)量評價方法研究，2004年碩士論文)，該方法的不足之處在于，1、高效液相色譜分析耗時60分鐘，分析時間較長，耗能不環(huán)保。2、人參皂苷Rgl與人參皂苷Re的分離度不好，只有0.97，不能達(dá)到含測要求。3、基線漂移，且很多共有峰堆積在一起，沒有達(dá)到有效分離。[0006]因此，目前仍然缺少一種快速、有效的三花注射劑的指紋圖譜質(zhì)量控制方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的是克服上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處，提供一種快速、有效的三花注射液的質(zhì)量控制方法及應(yīng)用。
[0008]本發(fā)明采用快速HPLC梯度洗脫在一個流動相系統(tǒng)利用相同檢測波長，同時檢出復(fù)方中的兩種原料共6種成分含量，建立的特征圖譜可以全面監(jiān)控原料、半成品和成品的質(zhì)量，通過色譜特征圖譜相的比較，評價優(yōu)劣、考察穩(wěn)定性和一致性，彌補(bǔ)了原質(zhì)量控制方法的不足。
[0009]本發(fā)明涉及的三花注射液的質(zhì)量控制方法，包括以下步驟:
[0010](I)對照品溶液的制備:取野黃芩苷對照品5mg、三七總皂苷對照提取物lOOmg，精密稱定，置100ml容量瓶中，加甲醇70ml超聲處理(功率300W，頻率50kHz) 45分鐘，取出，放置室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；
[0011](2)供試品溶液的制備:取裝量差異項下的本品內(nèi)容物40mg，精密稱定，置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，用0.22 μ m微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得；
[0012](3)快速高效液相色譜檢測:精密吸取對照品溶液及供試品溶液各2μ 1，分別注入液相色譜儀，進(jìn)行HPLC檢測，色譜條件為:色譜柱為SUPELCO Ascentis? ExpressC18(5cmX4.6mm, 2.7 μ m);以乙腈為流動相A，以0.05%磷酸溶液為流動相B，梯度洗脫；流速:0.8ml / min ;柱溫:25°C ;以DAD檢測器，檢測波長為203nm ；
[0013]所述梯度洗脫步驟為:
【權(quán)利要求】
1.一種三花注射液的質(zhì)量控制方法，其特征在于:其包括以下步驟: (1)對照品溶液的制備:取野黃芩苷對照品5mg、三七總皂苷對照提取物lOOmg，精密稱定，置100ml容量瓶中，加甲醇70ml超聲處理(功率300W，頻率50kHz) 45分鐘，取出，放置室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得； (2)供試品溶液的制備:取裝量差異項下的本品內(nèi)容物40mg，精密稱定，置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，用0.22 μ m微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得； (3)快速高效液相色譜檢測:精密吸取對照品溶液及供試品溶液各2μ1，分別注入液相色譜儀，進(jìn)行HPLC檢測，色譜條件為:色譜柱為SUPELCO Ascentis? ExpressC18(5cmX4.6mm, 2.7 μ m);以乙腈為流動相A，以0.05%磷酸溶液為流動相B，梯度洗脫；流速:0.8ml / min ;柱溫:25°C ;以DAD檢測器，檢測波長為203nm ；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述三花注射液的質(zhì)量控制方法，其特征在于:所述三花注射液快速HPLC特征圖譜在203nm共檢測出14個共有色譜峰，歸屬于燈盞花素的色譜峰I個，歸屬于三七總皂苷的色譜峰13個。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述三花注射液的質(zhì)量控制方法，其特征在于:所述方法可以對三花注射液所含的三七總皂苷及燈盞花素同步作出色譜鑒定。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述三花注射液的質(zhì)量控制方法，其特征在于:所述方法可用于鑒別及定量測定三花注射液中三七總皂苷及燈盞花素的含量并制定限度范圍。
【文檔編號】G01N30/86GK103698421SQ201310648531
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年11月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月27日
【發(fā)明者】曹暉, 尚強(qiáng), 郭井妹, 張潤容, 彭招華, 陳磊, 陳昕, 李菁 申請人:麗珠醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司, 國家中藥現(xiàn)代化工程技術(shù)研究中心