巴氏染色液及其使用方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種巴氏染色液及其使用方法，巴氏染色液由A液、B液和95％乙醇組成，A液為改良蘇木素染色液，B液由磷鎢酸、黃色伊紅、亮綠配制而成；主要是所述改良蘇木素染色液的配制方法為：將蘇木色精溶于95％乙醇，鉀明礬溶于100℃沸水中，兩者混合加入氧化劑至少攪拌50分鐘，加入冰乙酸，再至少攪拌50分鐘；B液的配制方法為：將0.2％～0.6％磷鎢酸溶液、黃色伊紅溶液、亮綠溶液按95～97％、1.5～2.5％、1.5～2.5％的質(zhì)量百分比混合。使用時(shí)將涂片在95％乙醇中固定，加相應(yīng)數(shù)量的A液和B液在特定環(huán)境里沖洗即可。具有成本低、顏色艷麗、對(duì)比清晰、著色穩(wěn)定、配制簡(jiǎn)單、操作方便，易于各類(lèi)醫(yī)療單位推廣使用等優(yōu)點(diǎn)。適用于陰道涂片雌激素水平、宮頸涂片和痰涂片分化差的小角化細(xì)胞癌顯示診斷。
【專(zhuān)利說(shuō)明】巴氏染色液及其使用方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于體外診斷試劑及試劑的使用方法，尤其是關(guān)于一種用于脫落細(xì)胞染色的巴氏染色液及其使用方法。本發(fā)明適用于陰道涂片雌激素水平、宮頸涂片和痰涂片分化差的小角化細(xì)胞癌顯示診斷。
【背景技術(shù)】
[0002]巴氏染色法是應(yīng)用較多的用于脫落細(xì)胞染色的方法，也是目前病理切片和脫落細(xì)胞染色中較好較常用的染色方法。其染色試劑包含蘇木素染色液、橙黃G6染色液、亮綠、俾氏麥褐、黃色伊紅、飽和碳酸鋰、磷鎢酸、無(wú)水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇、50%乙醇、0.25%或0.5%鹽酸等多種試劑。巴氏染色結(jié)果細(xì)胞透明度好，結(jié)構(gòu)清晰，涂片色彩豐富、鮮艷。但是，巴氏染色液多數(shù)用95%乙醇配制，試劑種類(lèi)多，成本高，染色液配制麻煩，染色步驟繁瑣，染色液易陳舊，染色效果不穩(wěn)定，在基層醫(yī)療單位推廣困難。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的缺點(diǎn)，提供一種成本低、染色液配制方便、染色步驟簡(jiǎn)單、染色效果穩(wěn)定、易在基層醫(yī)療單位推廣應(yīng)用的巴氏染色液及其使用方法。
[0004]本發(fā)明的巴氏染色液由A液、B液和95%乙醇組成，A液為改良蘇木素染色液，B液由磷鎢酸、黃色伊紅、亮綠配制而成；主要是所述改良蘇木素染色液的配制方法為:將蘇木色精溶于95%乙醇，鉀明礬溶于100°C沸水中，兩者混合加入氧化劑至少攪拌50分鐘，加入冰乙酸，再至少攪拌50分鐘出液的配制方法為:將0.2%~0.6%磷鎢酸溶液、黃色伊紅溶液、亮綠溶液按95-97%、1.5-2.5%、1.5-2.5%的質(zhì)量百分比混合。
[0005]本發(fā)明巴氏染色液的使用方法可以采取滴染和浸染方式，具體操作方法為在室溫條件下按如下步驟操作:
[0006]a、取自然干燥涂片或涂片未干時(shí)放入95%乙醇中固定；
[0007]b、滴染時(shí)，加A液4-6滴，染6-10分鐘，用75%乙醇沖洗；
[0008]C、加B液4-6滴，染2-4分鐘，水洗，鏡檢；
[0009]若采用浸染方式，用清水沖洗，清除多余染料，在75%乙醇中浸I-2分鐘，滴去多余乙醇后放入B液中染2-4分鐘，水洗，鏡檢。
[0010]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果是成本低、顏色艷麗、對(duì)比清晰、著色穩(wěn)定、配制簡(jiǎn)單、操作方便，易于各類(lèi)醫(yī)療單位推廣使用。
【具體實(shí)施方式】
[0011]本發(fā)明巴氏染色液由A液、B液和95%乙醇組成，A液為改良蘇木素染色液，B液由磷鎢酸、黃色伊紅、亮綠配制而成；主要是改良蘇木素染色液的配制方法為:將蘇木色精溶于95%乙醇，鉀明礬溶于100°C沸水中，兩者混合加入氧化劑至少攪拌50分鐘，最好攪拌一小時(shí)，加入冰乙酸，再至少攪拌50分鐘,最好攪拌一小時(shí)；B液的配制方法為:將0.2%-0.6%磷鎢酸溶液、黃色伊紅溶液、亮綠溶液按95~97%、1.5~2.5%、1.5~2.5%的質(zhì)量百分比混合。如果0.2%~0.6%磷鎢酸溶液占95%，則黃色伊紅溶液和亮綠溶液各占2.5% ;如果0.2%~0.6%磷鎢酸溶液占97%，則黃色伊紅溶液和亮綠溶液各占1.5%。
[0012]本發(fā)明巴氏染色液的使用方法可以采取滴染和浸染方式，具體操作方法為在22°C室溫條件下按如下步驟操作:
[0013]a、取自然干燥涂片或涂片未干時(shí)放入95%乙醇中固定。
[0014]b、滴染時(shí)，加A液4~6滴，染6~10分鐘，用75%乙醇沖洗。染色時(shí)間的長(zhǎng)短，根據(jù)使用環(huán)境溫度確定，使用時(shí)環(huán)境溫度越高染時(shí)間越短，使用時(shí)環(huán)境溫度越低染時(shí)間越長(zhǎng)。
[0015]C、加B液4~6滴，染2~4分鐘，水洗，鏡檢。染色時(shí)間的長(zhǎng)短，根據(jù)使用環(huán)境溫度確定，使用時(shí)環(huán)境溫度越高染時(shí)間越短，環(huán)境溫度越低染時(shí)間越長(zhǎng)。
[0016]若采用浸染方式，先用清水沖洗，清除多余染料，再在75%乙醇中浸I~2分鐘，滴去多余乙醇后放入B液染2~4分鐘，水洗，鏡檢。
【權(quán)利要求】
1.一種巴氏染色液，由A液、B液和95%乙醇組成，A液為改良蘇木素染色液，B液由磷鎢酸、黃色伊紅、亮綠配制而成；主要是所述改良蘇木素染色液的配制方法為:將蘇木色精溶于95%乙醇，鉀明礬溶于100°C沸水中，兩者混合加入氧化劑至少攪拌50分鐘，加入冰乙酸，再至少攪拌50分鐘；B液的配制方法為:將0.2%~0.6%磷鎢酸溶液、黃色伊紅溶液、亮綠溶液按95~97%、1.5~2.5%、1.5~2.5%的質(zhì)量百分比混合。
2.—種權(quán)利要求1所述的巴氏染色液的使用方法，其特征是在室溫條件下按如下步驟操作: a、取自然干燥涂片或涂片未干時(shí)放入95%乙醇中固定； b、滴染時(shí)，加A液4~6滴，染6~10分鐘，用75%乙醇沖洗； C、加B液4~6滴，染2~4分鐘，水洗，鏡檢； 若采用浸染方式，用清水沖洗，清除多余染料，在75%乙醇中浸I~2分鐘，滴去多余乙醇后放入B液中染2~4分 鐘，水洗，鏡檢。
【文檔編號(hào)】G01N1/30GK103571909SQ201310547164
【公開(kāi)日】2014年2月12日 申請(qǐng)日期:2013年10月24日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月24日
【發(fā)明者】劉恒慧, 錢(qián)品益, 李超, 王高加南, 陳麗蒙, 葛祥輝 申請(qǐng)人:溫州市康泰生物科技有限公司