血清或血漿樣品稀釋液及其用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種血清或血漿樣品稀釋液及其用途，具體地，所述血清或血漿樣品稀釋液包括：(a)緩沖溶液；(b)白蛋白，所述白蛋白的含量為10～100g/L；(c)堿金屬氯化物；以及(d)任選的乳化劑，并且所述稀釋液pH值為6.0～8.0。本發(fā)明的稀釋液與現(xiàn)有人陰性混合血清或血漿以及小牛血清類稀釋液相比，具有檢測結(jié)果精密準(zhǔn)確、可長期穩(wěn)定保存的特點。本發(fā)明還公開了一種含有本發(fā)明稀釋液的檢測試劑盒以及本發(fā)明稀釋液在免疫分析法中的用途。
【專利說明】血清或血漿樣品稀釋液及其用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物樣品檢測【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種血清或血漿樣品稀釋液及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002]目前新型的全自動免疫分析儀因其操作簡單，自動化程度高，檢測速度快，重復(fù)性好，精密度高，可以在不需要分離的條件下，可以分別單獨定量測定存在于血清或血漿樣本中數(shù)十種具有臨床意義的微量蛋白質(zhì)。但是，臨床檢驗中許多免疫學(xué)指標(biāo)由于方法學(xué)的局限性(例如全自動免疫分析儀的檢測線性范圍較窄)和生物學(xué)差異性(檢測樣本中特種蛋白的濃度較高)，使得檢測結(jié)果往往超出線性范圍上限，需要進行一定比例稀釋才能得到精確的檢測結(jié)果。自動免疫分析儀檢測樣本量多，使用的試劑耗量大，因此樣本稀釋液成為臨床醫(yī)學(xué)診斷中最常用的的試劑之一。稀釋液的選用是否合適會直接影響結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
[0003]目前，國內(nèi)大型醫(yī)療單位和醫(yī)學(xué)科研院所使用的進口自動免疫分析儀主要有進口免疫分析儀，其都有配套專用的稀釋液。由于這些試劑進口依賴性高，成本昂貴，增加了患者醫(yī)療費用，而血液或血漿樣本免疫分析又是許多疾病臨床診斷的主要依據(jù)之一，因此，迫切需要推動進口試劑國產(chǎn)化，節(jié)省疾病診斷成本，減輕患者負擔(dān)。因此研究一種既經(jīng)濟又可靠的國產(chǎn)化自動免疫分析儀配套使用的稀釋液意義重大。
[0004]影響全自動免疫分析儀檢測血清或血漿樣本中特種蛋白結(jié)果的準(zhǔn)確度，精密度等的主要因素有:1)抗原抗體反應(yīng)體系的最適宜PH值；2)提供抗原抗體反應(yīng)的合適的膠體滲透壓(即蛋白濃度)；3)抗原抗體保持空間結(jié)構(gòu)最佳狀態(tài)所需的等滲反應(yīng)環(huán)境；4)抗原抗體反應(yīng)體系中最佳的離子強度等。稀釋液對樣本進行稀釋，勢必會改變血清或血漿中原有的體系環(huán)境，因此就需要稀釋液能維持抗原抗體所需的最佳反應(yīng)條件。
[0005]早年有報道，在臨床檢驗中，當(dāng)進口原裝稀釋液不足的情況下，有使用蒸餾水或者生理鹽水對血清或血漿樣本進行稀釋后在行檢測，但是單純的蒸餾水或者生理鹽水不能提供抗原抗體所需的最佳反應(yīng)條件，使檢測結(jié)果偏差較大，往往影響臨床疾病診斷。
[0006]2009年，劉成忠等報道，采用滅活血清或已知肌酸激酶(CK)濃度值的正常血清進行稀釋檢測血清中肌酸激酶的濃度，其檢測結(jié)果較原值無顯著性差異，但是在日常工作中用滅火血清對高值血清進行稀釋測定易受到要事先準(zhǔn)備滅活血清的限制；而用已知CK值的正常血清作為稀釋液對高值血清CK值測定中，檢測結(jié)果需要把帶入的CK值扣除掉，因此，操作結(jié)果繁瑣，在臨床檢測診斷中有諸多不便。
[0007]2011年，余文輝等報道，利用人血漿(HBsAg、HBV-DNA和抗HIV-l/HIV-2呈陰性)自制成80%血漿稀釋液替代原裝進口稀釋液進行稀釋檢測，檢測結(jié)果與原值無顯著性差異，在臨床檢測中可用。同年戴玉柱等采用混合人陰性血清或等滲的小牛血清作為替代稀釋液；2012年曾慶洋采用男性健康陰性血清替代原裝進口稀釋液，稀釋血清樣本后對HCG濃度進行檢測，都獲得良好的檢測結(jié)果。然而由于人陰性血漿或者血清，來源不穩(wěn)定，不利于醫(yī)療機構(gòu)大量檢測中隨用隨?。磺也煌臋z測項目中，人陰性血清的要求標(biāo)準(zhǔn)并非一致，不便于作為通用稀釋液。此外，無論是人血清或血漿，還是一定濃度的小牛血清，含有高蛋白，容易滋生細菌，穩(wěn)定性欠佳，都不利于長期保存；血清或血漿樣本粘稠度都較高，采用單純采用人陰性血清或血漿、小牛血清進行稀釋，受檢測時間限制，往往難以稀釋混合均勻，導(dǎo)致檢測結(jié)果容易存在一定的偏差。
[0008]因此提供一種原材料試劑易得且價廉，同時檢測結(jié)果精確可靠，分散效果良好，可長期穩(wěn)定保存，并且可通用于不同的臨床免疫診斷項目的血清或血漿樣本稀釋液，對于臨床醫(yī)學(xué)診斷具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明的目的在于提供一種血清或血漿樣品稀釋液及其在臨床醫(yī)學(xué)診斷中用途。
[0010]本發(fā)明第一方面提供了一種血清或血漿樣品稀釋液，所述稀釋液包括:
[0011](a)緩沖溶液；
[0012](b)白蛋白，所述白蛋白的含量為10?100g/L ；
[0013](c)堿金屬氯化物；以及
[0014](d)任選的乳化劑；
[0015]并且所述稀釋液的pH值為6.0?8.0。
[0016]在另一優(yōu)選例中,所述白蛋白選自:血清蛋白、乳清蛋白、卵清蛋白。
[0017]在另一優(yōu)選例中，所述血清蛋白選自:人血清白蛋白、牛血清白蛋白、馬血清白蛋白或其組合。
[0018]在另一優(yōu)選例中，所述白蛋白為凍干粉末狀。
[0019]在另一優(yōu)選例中，所述白蛋白的含量為30?90g/L。
[0020]在另一優(yōu)選例中，所述白蛋白含量優(yōu)選為為45?75g/L。
[0021]在另一優(yōu)選例中，所述緩沖溶液選自:磷酸緩沖溶液(PB)、磷酸鹽緩沖溶液(PBS )、三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖溶液(Tr i s-HCl)或其組合。
[0022]在另一優(yōu)選例中，所述緩沖溶液的含量為0.01?0.2mol/L，優(yōu)選為0.01?0.05mol/L。
[0023]在另一優(yōu)選例中，所述堿金屬氯化物的含量為2?5g/L，優(yōu)選為3?4g/L。
[0024]在另一優(yōu)選例中，所述堿金屬氯化物選自:NaCl、KCl或其組合。
[0025]在另一優(yōu)選例中，所述乳化劑含量為0.08?0.10wt%,按稀釋液的總重量計。較佳地，乳化劑含量為0.09wt%。
[0026]在另一優(yōu)選例中，所述乳化劑選自:脂肪醇聚氧乙烯醚。
[0027]在另一優(yōu)選例中，所述乳化劑選自:E1005、E1304或其組合。
[0028]在另一優(yōu)選例中，所述稀釋液還包括選自下組的一種或多種組分:
[0029](a)金屬離子螯合物；
[0030](b)堿金屬硫酸鹽；
[0031](c)防腐劑。
[0032]在另一優(yōu)選例中，所述金屬離子螯合物的含量為0.05?0.08wt%，按稀釋液總重量計，優(yōu)選為0.06?0.07wt%o[0033]在另一優(yōu)選例中，所述金屬離子螯合物選自:EDTA、EDTA衍生物或其組合。
[0034]在另一優(yōu)選例中，所述EDTA衍生物包括:EDTA堿金屬鹽、乙二醇-雙-(3_氨基-乙醚)N-N，-四乙酸(EGTA)。
[0035]在另一優(yōu)選例中，所述堿金屬硫酸鹽的含量為0.2?0.6g/L，優(yōu)選為0.3?0.4g/L。
[0036]在另一優(yōu)選例中,所述堿金屬硫酸鹽選自:Na2S04、K2SO4或其組合。
[0037]在另一優(yōu)選例中，所述防腐劑的含量為0.03?0.08wt%,按稀釋液總重量計。優(yōu)選為 0.03 ?0.05wt%,更優(yōu)選為 0.04wt%o
[0038]在另一優(yōu)選例中，所述防腐劑選自:疊氮鈉、Proclin300、雙咪唑烷基脲、異噻唑啉酮、1-羥基吡啶-2-硫酮、乙基汞硫代硫酸鈉、對羥基苯甲酸、對羥基苯基酸乙酯、廣譜殺菌劑或其組合。
[0039]在另一優(yōu)選例中，所述稀釋液由以下組分組成:
[0040](a) 0.01 ?0.2mol/L 緩沖溶液；
[0041](b) 10 ?100g/L 白蛋白；
[0042](c) 2?5g/L堿金屬氯化物；
[0043](d) 0.08 ?0.10wt% 乳化劑；
[0044](e) 0.05?0.08wt%金屬離子螯合物；
[0045](f) 0.2?0.6g/L堿金屬硫酸鹽；和
[0046](g) 0.03 ?0.05wt% 防腐劑；
[0047]其中，質(zhì)量百分?jǐn)?shù)按稀釋液總重量計。
[0048]在另一優(yōu)選例中，所述稀釋液具有以下的一種或多種特性:
[0049](a)所述稀釋液在室溫下的電導(dǎo)率P為0.55 X IO4?0.75 X IO4 μ S/cm ；
[0050](b)所述稀釋液為待測樣本提供的滲透壓為250?380m0sm/Kg ；
[0051](c)所述稀釋液的pH為7.2?7.8。
[0052]在另一優(yōu)選例中，所述待測樣本為人血清或血漿樣品。
[0053]本發(fā)明第二方面提供了一種免疫分析方法，所述方法包括使用第一方面所述的稀釋液進行血清或血漿樣品檢測的步驟。
[0054]在另一優(yōu)選例中，所述稀釋液用于測定血清或血漿樣品中的特定蛋白含量，所述特定蛋白為能與抗體發(fā)生特異性結(jié)合的蛋白。
[0055]在另一優(yōu)選例中，所述特定蛋白包括:血清或血漿中的腫瘤標(biāo)志物、激素和感染性疾病類的免疫學(xué)指標(biāo)。
[0056]本發(fā)明第三方面提供了一種檢測試劑盒，所述試劑盒包含第一方面所述的稀釋液。
[0057]在另一優(yōu)選例中，所述試劑盒還包括說明書和用于盛裝所述稀釋液的容器。
[0058]應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文(如實施例)中具體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在
此不再一一累述。
【具體實施方式】
[0059]發(fā)明人經(jīng)過廣泛深入的研究，意外發(fā)現(xiàn)包含特定濃度的白蛋白、緩沖溶液、堿金屬氯化物和乳化劑的血清或血漿樣品稀釋液與現(xiàn)有的人陰性混合血清或血漿以及小牛血清類稀釋液相比，具有檢測結(jié)果精密準(zhǔn)確、可長期穩(wěn)定保存的特點。在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。
[0060]本發(fā)明中的緩沖溶液、白蛋白、堿金屬氯化物和堿金屬硫酸鹽的含量均按稀釋液總體積計。
[0061]本發(fā)明所述“任選的”是指稀釋液可以包括該組分也可以不包括該組分。
[0062]血清或血漿樣品稀釋液
[0063]本發(fā)明的稀釋液的成分主要包括:白蛋白、緩沖溶液和堿金屬氯化物，其中，白蛋白可選自包括人血清白蛋白、牛血清白蛋白、馬血清白蛋白等在內(nèi)的血清蛋白，較佳地選自:人血清白蛋白、牛血清白蛋白、馬血清白蛋白或其組合，更佳地為牛血清白蛋白。
[0064]稀釋液中白蛋白的含量應(yīng)與待測血清或血漿樣品中的蛋白濃度相匹配，白蛋白含量的過低或過高，容易對稀釋液的稀釋效果產(chǎn)生不利影響。
[0065]此外，合適的膠體滲透壓(即蛋白濃度)是影響血清或血漿樣本中特種蛋白檢測結(jié)果準(zhǔn)確度和精密度的主要因素之一，本發(fā)明中，白蛋白的含量優(yōu)選為10?100g/L，更優(yōu)選為30?90g/L，最優(yōu)選為45?75g/L。從而使稀釋液為待檢樣本提供了較佳的抗原抗體反應(yīng)所需膠體滲透壓環(huán)境(250?380m0sm/Kg)，從而更好地提高了稀釋后樣本檢測準(zhǔn)確度和精密度。白蛋白含量過低，稀釋液將不能提供血清樣本中原有的膠體滲透壓環(huán)境，從而導(dǎo)致稀釋后樣本中的特定蛋白的測定不準(zhǔn)確。白蛋白含量過高將提高稀釋液的生產(chǎn)成本。
[0066]本發(fā)明的稀釋液是采用常規(guī)原料進行特定組合而形成的，不同于目前已知的人陰性血漿或者血清，其來源不穩(wěn)定，不利于醫(yī)療機構(gòu)大量檢測中隨用隨取；且不同的檢測項目中，人陰性血清的要求標(biāo)準(zhǔn)并非一致，不便于作為通用稀釋液。而本發(fā)明的稀釋液可通用于不同的臨床免疫診斷項目中，可針對不同的人血清樣本提供穩(wěn)定適宜的滲透壓，且不會對不同的檢測項目(即不同的血清樣本)造成干擾，因此具有很高的通用性。
[0067]本發(fā)明中的白蛋白優(yōu)選以凍干粉的形式加入上述稀釋液中，以提高稀釋后檢測樣本的準(zhǔn)確度和精密度。
[0068]緩沖溶液優(yōu)選為不含鈣離子和鎂離子的緩沖溶液，一類優(yōu)選的例子包括:磷酸緩沖溶液(PB)、磷酸鹽緩沖溶液(PBS)和三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖溶液(Tris-HCl)，由于緩沖溶液的過酸或過堿以及濃度大小都會對反應(yīng)體系中的熒光產(chǎn)生不利影響，導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。因此本發(fā)明緩沖溶液的含量優(yōu)選為0.01?0.2mol/L,更優(yōu)選為0.01?0.05mol/L。并且通過緩沖溶液pH值的調(diào)節(jié)使得稀釋液的pH值維持在6.0?8.0 (更佳地在7.2?7.8)，從而為抗原抗體反應(yīng)體系提供了最適宜pH值。
[0069]在本發(fā)明中，緩沖溶液可采用常規(guī)方法進行制備，例如0.0lM PBS緩沖液的配制方法包括以下步驟:
[0070]1.組份濃度:137mM NaCl, 2.7mM KCl，IOmM Na2HPO4, 2mM KH2PO4 ；
[0071]2.配制量:IOOOmL ;
[0072]3.配制方法:
[0073]I)稱量下列試劑，置于IL燒杯中；
[0074]NaC18g ；KC10.2g ；Na2HP04l.42g ；KH2PO40.27g
[0075]2)向燒杯中加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙?；[0076]3)滴加濃鹽酸將pH值調(diào)節(jié)至7.4，然后加入去離子水將溶液定容至IL;
[0077]4)高溫高壓滅菌后，室溫保存。用時隨取即可。
[0078]本發(fā)明稀釋液中堿金屬氯化物的含量優(yōu)選為2?5g/L，更優(yōu)選為3?4g/L。從而使得稀釋液的電導(dǎo)率P保持在0.55X 104?0.75X 104yS/cm之間，保證了抗原抗體反應(yīng)體系所需的最佳離子強度。一類優(yōu)選的堿金屬氯化物包括:NaCl、KCl或其組合。
[0079]由于本發(fā)明稀釋液具有如上所述的電導(dǎo)率P、滲透壓和pH值，因此對樣本進行稀釋時，稀釋液可以維持抗原抗體所需的最佳反應(yīng)條件，從而確保了血清或血漿樣本中特種蛋白檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度。
[0080]另外，本發(fā)明的稀釋液還可以包括一種以上的乳化劑，以更好地提高檢測的準(zhǔn)確性。按稀釋液的總重量計，乳化劑含量為0.08?0.10wt%，優(yōu)選為0.09%。一類優(yōu)選的乳化劑包括但不限于:脂肪醇聚氧乙烯醚。其中，脂肪醇聚氧乙烯醚包括異構(gòu)十醇聚氧乙烯醚、異構(gòu)十三醇聚氧乙烯醚等。
[0081]本文所述脂肪醇聚氧乙烯醚(AE)，又為聚乙氧基化脂肪醇，是由脂肪醇與環(huán)氧乙烷通過加成反應(yīng)而制得，其通式為R-0-(C2H40)n-H，R為飽和或者不飽和的羥基，η是環(huán)氧乙烷的加成數(shù)，也就是乳化劑分子中氧乙烯基的數(shù)目。
[0082]異構(gòu)十醇聚氧乙烯醚，即通式中的R為Cltl，其中優(yōu)選為Ε1005，即R為Cltl且η=5 ；異構(gòu)十三醇聚氧乙烯醚，即碳鏈R為C13，其中優(yōu)選為Ε1304，即R為C13且η=4。
[0083]在不妨礙本發(fā)明效果的范圍內(nèi)，本發(fā)明的稀釋液可含有適當(dāng)量的選自下組的一種或多種組分:(a)金屬離子螯合物；(b)堿金屬硫酸鹽；(c)防腐劑。
[0084]其中，按稀釋液總重量計,金屬離子螯合物的含量優(yōu)選為0.05?0.08wt%,更優(yōu)選為0.06?0.07wt%。一類優(yōu)選的金屬離子螯合物包括:EDTA、EDTA衍生物。其中，EDTA衍生物包括EDTA堿金屬鹽，如EDTA鈉鹽，以及乙二醇-雙-(3-氨基-乙醚)N-N’ -四乙酸(EGTA)0優(yōu)選EDTA鈉鹽。
[0085]按稀釋液總重量計，防腐劑的含量優(yōu)選為0.03?0.08wt%,更優(yōu)選為0.03?0.05wt%，最佳地為0.04wt%。一類優(yōu)選的防腐劑包括:疊氮鈉、Proclin300、雙咪唑烷基脲、異噻唑啉酮、1-羥基吡啶-2-硫酮、乙基汞硫代硫酸鈉、對羥基苯甲酸、對羥基苯基酸乙酯、廣譜殺菌劑(如四環(huán)素類，氯霉素，慶大霉素類)。
[0086]本發(fā)明的稀釋液與現(xiàn)有的血液稀釋劑存在以下區(qū)別:
[0087]現(xiàn)有的血液稀釋劑檢測的是全血樣本，而本發(fā)明的稀釋液用于檢測血清或者血漿樣本，而非全血樣本?，F(xiàn)有的血液稀釋劑是用于檢測全血中的血細胞，且主要針對于血細胞的計數(shù)和分類，測量血紅蛋白參數(shù)以及區(qū)分白細胞亞型等；而本發(fā)明的稀釋液是用于測定血清或者血漿中的特定蛋白的含量。
[0088]所述特定蛋白為能與抗體發(fā)生特異性結(jié)合的蛋白，包括:血清或血漿中的腫瘤標(biāo)志物、激素和感染性疾病類的免疫學(xué)指標(biāo)。
[0089]感染性疾病類的免疫學(xué)指標(biāo)，也稱傳染性類的免疫學(xué)指標(biāo)，例如乙肝表面抗原HBsAg,人類免疫缺陷病毒HIV，人乳頭狀瘤病毒HPV等。
[0090]本發(fā)明的稀釋液可適用于進口自動免疫分析儀，包括(但不限于):美國雅培公司的AXSYM、強生公司的Vitros EC1、貝克曼-庫爾特的DXI800、法國梅里埃Vidas系列、日本東曹 AIA 系列儀器(例如 AIA-2000ST、AIA-360、AIA-600I1、AIA-900、AIA-900M、AIA-900L、AIA-1800ST、AIA-2000LA 等)、羅氏 Modular EVO 免疫分析儀。
[0091]本發(fā)明稀釋液的制備方法主要包括以下步驟:
[0092](I)將各組分進行混合，得一混合溶液；
[0093](2)調(diào)節(jié)所得混合溶液的pH值，即制得本發(fā)明的稀釋液。
[0094]本發(fā)明的稀釋液在制備時，各組分的添加順序并無特別要求，只需充分混合溶解既可。一類優(yōu)選的方法包括:
[0095](I)配制 0.01-0.2mol/L 緩沖溶液，pH 值為 6.0-8.0 ；
[0096](2)向步驟(I)的緩沖液中加入白蛋白，終濃度為30_90g/L，攪拌，使其充分溶解；
[0097](3)加入堿金屬氯化物，終濃度為0.3_4g/L，攪拌，使其充分溶解；
[0098](4)加入金屬離子螯合物，終濃度為0.05-0.08wt%,攪拌，使其充分溶解；
[0099](5)加入乳化劑，終濃度為0.08-0.10wt%,攪拌，使其充分混勻；
[0100](6)加入防腐劑，終濃度為0.03-0.05wt%,攪拌，使其充分溶解；
[0101](7)用5M氫氧化鈉溶液或5M鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.2-7.8，混勻；
[0102](8)室溫靜置30min以上，2°C _8°C保存。
[0103]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的主要優(yōu)點包括:
[0104](I)將本發(fā)明的稀釋液用于檢測血清或血漿樣本中蛋白，其檢測結(jié)果準(zhǔn)確度高；
[0105](2)將本發(fā)明的稀釋液用于檢測血清或血漿樣本中蛋白，其檢測結(jié)果精密度高；
[0106](3)本發(fā)明的稀釋液具有良好的熱穩(wěn)定性；
[0107](4)本發(fā)明的稀釋液可長期穩(wěn)定保存。
[0108]下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和份數(shù)是重量百分比和重量份數(shù)。
[0109]除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。
[0110]血清標(biāo)本:本發(fā)明實施例中所使用的血清標(biāo)本為糖類抗原CA19-9 (CarbohydrateAntigenl9_9)和人絨毛膜促性腺激素-β 亞基(human Chorionic Gonadotropin, β -HCG)的血清標(biāo)本(由上海顓橋醫(yī)院提供)。
[0111]參照樣品:選自日本東曹免疫分析儀配套專用稀釋液CA19-9樣本稀釋液(批號:1450770)和β-HCG樣本稀釋液(批號:C853591)。
[0112]在實施例和對比例中，均采用日本東曹AIA-2000ST型全自動免疫分析儀進行血清或血漿檢測分析。
[0113]分別采用參照樣品、對比例稀釋液和實施例稀釋液對不同濃度的糖類抗原CA19-9和β-HCG的血清標(biāo)本進行倍比稀釋，然后采用熒光磁微粒酶免法(具體方法參照文獻“改良熒光磁微粒酶免分析法檢測三種腫瘤標(biāo)志物及應(yīng)用，標(biāo)記免疫分析與臨床。2008，15(5):306?307轉(zhuǎn)287”)進行測定，評價各稀釋液的性能。
[0114]本發(fā)明以下實施例、對比例中的血清或血漿稀釋液通過常規(guī)方法，將各組分進行混合來制備。
[0115]下列實施例與對比例中的終濃度均為按稀釋液總重量計的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)。
[0116]實施例1
[0117]稀釋液中各組分與含量如表1所示:
[0118]表1
【權(quán)利要求】
1.一種血清或血漿樣品稀釋液，其特征在于，所述稀釋液包括: (a)緩沖溶液； (b)白蛋白，所述白蛋白的含量為10?100g/L； (c)堿金屬氯化物；以及 (d)任選的乳化劑； 并且所述稀釋液的pH值為6.0?8.0。
2.如權(quán)利要求1所述的稀釋液，其特征在于，所述白蛋白選自:血清蛋白、乳清蛋白、卵清蛋白。
3.如權(quán)利要求1所述的稀釋液，其特征在于，所述白蛋白的含量為30?90g/L。
4.如權(quán)利要求1所述的稀釋液，其特征在于，所述緩沖溶液選自:磷酸緩沖溶液(PB)、磷酸鹽緩沖溶液(PBS)、三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖溶液(Tris-HCl)或其組合。
5.如權(quán)利要求1所述的稀釋液，其特征在于，所述堿金屬氯化物的含量為2?5g/L。
6.如權(quán)利要求1所述的稀釋液，其特征在于，所述乳化劑含量為0.08?0.10wt%,按稀釋液的總重量計。
7.如權(quán)利要求1所述的稀釋液，其特征在于，所述稀釋液還包括選自下組的一種或多種組分: (a)金屬離子螯合物； (b)堿金屬硫酸鹽； (C)防腐劑。
8.如權(quán)利要求1所述的稀釋液，其特征在于，所述稀釋液具有以下的一種或多種特性: (a)所述稀釋液在室溫下的電導(dǎo)率P為0.55 X IO4?0.75 X IO4 μ S/cm ； (b)所述稀釋液為待測樣本提供的滲透壓為250?380m0sm/Kg； (c)所述稀釋液的pH為7.2?7.8。
9.一種免疫分析方法，其特征在于，所述方法包括使用權(quán)利要求1所述的稀釋液進行血清或血漿樣品檢測的步驟。
10.一種檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含權(quán)利要求1所述的稀釋液。
【文檔編號】G01N1/38GK103487313SQ201310496604
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年10月21日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月21日
【發(fā)明者】李子樵, 李亨芬 申請人:上海藍怡科技有限公司