全血c-反應(yīng)蛋白測(cè)量方法、裝置及樣本分析儀的制作方法
【專利摘要】本申請(qǐng)涉及全血CRP測(cè)量方法、裝置及樣本分析儀。方法包括：使全血樣本溶血，得到溶血后的全血樣本，將負(fù)載有抗C-反應(yīng)蛋白抗體的乳膠試劑加入溶血后的全血樣本，經(jīng)凝集反應(yīng)后得到生成物；光照生成物，根據(jù)生成物在不同時(shí)間段下的吸光強(qiáng)度的變化，確定出全血C-反應(yīng)蛋白濃度；計(jì)算溶血后的全血樣本中的全血細(xì)胞壓積，根據(jù)全血細(xì)胞壓積對(duì)確定出的全血C-反應(yīng)蛋白濃度進(jìn)行修正。本申請(qǐng)的有益效果是：通過(guò)先測(cè)得吸光度對(duì)應(yīng)的CRP濃度值，再由CRP濃度值計(jì)算修正的CRP濃度，使得修正結(jié)果不受吸光度或吸光度變化與CRP濃度之間的非線性關(guān)系的影響，同時(shí)，對(duì)光照后確定的全血CRP濃度，是利用全血細(xì)胞壓積進(jìn)行修正，提高了全血CRP濃度的準(zhǔn)確性。
【專利說(shuō)明】全血C-反應(yīng)蛋白測(cè)量方法、裝置及樣本分析儀

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本申請(qǐng)涉及生化檢驗(yàn)【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種全血C-反應(yīng)蛋白的測(cè)量方法、裝置及樣本分析儀。

【背景技術(shù)】
[0002]C-反應(yīng)蛋白(C-React1n Protein,CRP)是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，當(dāng)機(jī)體受到微生物入侵或組織損傷等炎癥性刺激時(shí)，CRP的濃度變化幅度增大，可升高達(dá)千倍，隨著病變消退、組織、結(jié)構(gòu)和功能的恢復(fù)，CRP濃度則降至正常水平，是可靠和靈敏的炎癥性反應(yīng)急性期反應(yīng)指標(biāo)，因此準(zhǔn)確地測(cè)量血液中CRP的濃度具有重要價(jià)值。
[0003]當(dāng)前業(yè)界測(cè)量CRP的濃度主要使用日本專利N0.11575/1983公開的一種免疫分析方法，該方法利用不溶物上的抗原或抗體與樣本上的相應(yīng)的抗體或抗原結(jié)合成凝集物的特點(diǎn)，再使用波長(zhǎng)在600nm?2400nm之間的光波照射凝集物,最后通過(guò)分析光的吸收(absorbance)或散射(scattered)程度得到抗原的參數(shù)。該方法由于其使用優(yōu)點(diǎn)已逐步成為免疫分析方法的主流，被稱為膠乳免疫散射比濁法。然而，這種方法使用的測(cè)量對(duì)象是血清，而通常在臨床檢查時(shí)采集到的是包含血細(xì)胞和血漿的全血，在采用這種方法進(jìn)行測(cè)量CRP濃度之前還需要將血液和血漿分離，因此這種方法不適合門診患者的快速簡(jiǎn)便檢測(cè)的需求。
[0004]美國(guó)專利US6030845提到一種對(duì)全血樣本進(jìn)行CRP濃度測(cè)量的方法，其采用溶血?jiǎng)?duì)全血樣本進(jìn)行溶血處理，在溶解的全血樣本中加入不能被溶解的抗體以與樣本中的抗原產(chǎn)生凝集反應(yīng)，利用一定波長(zhǎng)的光照射反應(yīng)溶液，測(cè)量凝集反應(yīng)物吸收光的變化，同時(shí)獲取全血樣本的紅細(xì)胞壓積(hematocrit,簡(jiǎn)寫為HCT)，然后通過(guò)以下公式對(duì)測(cè)量物的吸收光進(jìn)行修正，最后通過(guò)修正后的吸收光的變化來(lái)確定CRP的濃度。
[0005]A，=AXlOO/ (100-HCT%)
[0006]A代表吸收光，A’代表修正后的吸收光。
[0007]公知在進(jìn)行全血CRP測(cè)量的過(guò)程中，為了使測(cè)量結(jié)果與采用血清測(cè)量CRP濃度的結(jié)果具備可比性，需要對(duì)全血CRP濃度進(jìn)行修正，剔除細(xì)胞體積的對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響。該美國(guó)專利因而采用了紅細(xì)胞壓積進(jìn)行修正。然而，實(shí)驗(yàn)證明，對(duì)于有些全血樣本，采用該美國(guó)專利提供的方法進(jìn)行全血CRP測(cè)量的結(jié)果明顯偏低。
[0008]因此，需要一種在全血CRP測(cè)量過(guò)程中獲得與采用血清測(cè)量CRP濃度的結(jié)果更為一致的方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N全血CRP測(cè)量方法、裝置及樣本分析儀，以確定全血樣本中CRP的濃度。
[0010]根據(jù)本申請(qǐng)的第一方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N全血C-反應(yīng)蛋白測(cè)量方法，包括:溶血凝集發(fā)生步驟，使全血樣本溶血，得到溶血后的全血樣本，將負(fù)載有抗C-反應(yīng)蛋白抗體的乳膠試劑加入溶血后的全血樣本，經(jīng)凝集反應(yīng)后得到生成物；初始濃度計(jì)算步驟，光照所述生成物，根據(jù)所述生成物在不同時(shí)間段下的吸光強(qiáng)度的變化，確定出全血C-反應(yīng)蛋白濃度；濃度修正步驟，計(jì)算溶血后的全血樣本中的全血細(xì)胞壓積，根據(jù)全血細(xì)胞壓積對(duì)確定出的全血C-反應(yīng)蛋白濃度進(jìn)行修正。
[0011]根據(jù)本申請(qǐng)的第二方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N全血C-反應(yīng)蛋白測(cè)量裝置，包括:溶血凝集發(fā)生模塊，用于使全血樣本溶血，得到溶血后的全血樣本，將負(fù)載有抗C-反應(yīng)蛋白抗體的乳膠試劑加入溶血后的全血樣本，經(jīng)凝集反應(yīng)后得到生成物；初始濃度計(jì)算模塊，用于光照所述生成物，根據(jù)所述生成物在不同時(shí)間段下的吸光強(qiáng)度的變化，確定出全血C-反應(yīng)蛋白濃度；濃度修正模塊，用于計(jì)算溶血后的全血樣本中的全血細(xì)胞壓積，根據(jù)全血細(xì)胞壓積對(duì)確定出的全血C-反應(yīng)蛋白濃度進(jìn)行修正。
[0012]根據(jù)本申請(qǐng)的第三方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N樣本分析儀，包括:反應(yīng)池,用于為被測(cè)的已溶血全血樣本和負(fù)載有抗C-反應(yīng)蛋白抗體的乳膠試劑提供凝集反應(yīng)場(chǎng)所；光度計(jì)，用于對(duì)凝集反應(yīng)的生成物進(jìn)行光照射，根據(jù)生成物在不同時(shí)間段下的吸光強(qiáng)度的變化，確定出全血C-反應(yīng)蛋白濃度；細(xì)胞計(jì)數(shù)裝置，用于根據(jù)庫(kù)爾特原理確定溶血后的全血樣本中全血細(xì)胞的數(shù)目和體積；處理器，用于根據(jù)所述全血細(xì)胞的數(shù)目和體積計(jì)算出全血細(xì)胞壓積，根據(jù)所述全血細(xì)胞壓積對(duì)確定出的全血C-反應(yīng)蛋白濃度進(jìn)行修正；輸出裝置，用于輸出修正后的全血C-反應(yīng)蛋白濃度。
[0013]本申請(qǐng)的有益效果是:直接使用全血樣本進(jìn)行測(cè)量，無(wú)需進(jìn)行離心分離出血清，簡(jiǎn)化測(cè)量操作；其CRP測(cè)量及修正的方法是通過(guò)先測(cè)得吸光度對(duì)應(yīng)的CRP濃度值，再由CRP濃度值計(jì)算修正的CRP濃度，使得修正結(jié)果不受吸光度或吸光度變化與CRP濃度之間的非線性關(guān)系的影響，同時(shí)，對(duì)光照后確定的全血CRP濃度，是利用全血細(xì)胞壓積進(jìn)行修正，提高了全血CRP濃度的準(zhǔn)確性。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0014]圖1為本申請(qǐng)一種實(shí)施例的樣本分析儀的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0015]圖2為白細(xì)胞群、紅細(xì)胞群和血小板細(xì)胞群的分布示意圖；
[0016]圖3為本申請(qǐng)一種實(shí)施例的全血CRP測(cè)量方法的流程示意圖；
[0017]圖4為本申請(qǐng)一種實(shí)施例的全血CRP測(cè)量裝置的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0018]圖5為實(shí)驗(yàn)中針對(duì)相同的樣本采用血清CRP濃度測(cè)量方法、本申請(qǐng)實(shí)施例方法、及美國(guó)專利US6030845提供的方法得到的CRP測(cè)量結(jié)果；
[0019]圖6為圖5所示測(cè)量結(jié)果的對(duì)比示意圖。

【具體實(shí)施方式】
[0020]經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)于有些全血樣本，采用美國(guó)專利US6030845提供的全血CRP濃度測(cè)量結(jié)果明顯偏低于采用血清測(cè)量CRP濃度的結(jié)果，其原因是:
[0021 ] 第一，全血樣本中含有大量的白細(xì)胞或血小板，用紅細(xì)胞壓積不能得到準(zhǔn)確的修正，會(huì)導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果的偏差；
[0022]第二，吸光度或吸光度的變化與CRP濃度之間的關(guān)系通常情況下是非線性的，該美國(guó)專利采用的方案是先由吸光度值A(chǔ)計(jì)算出修正的吸光度值A(chǔ)’，再由修正的吸光度值得出對(duì)應(yīng)CRP濃度值，從而進(jìn)一步導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果的偏差。
[0023]針對(duì)上述缺陷，本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N在全血CRP測(cè)量過(guò)程中獲得與采用血清測(cè)量CRP濃度的結(jié)果更為一致的方法。
[0024]為便于說(shuō)明本申請(qǐng)，這里解釋下本申請(qǐng)涉及的術(shù)語(yǔ)“全血細(xì)胞壓積”。公知的“血細(xì)胞比容”，又稱血比容、血細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞壓積(packed cell volume,簡(jiǎn)寫PCV),是指抗凝全血經(jīng)離心后測(cè)得沉淀的紅細(xì)胞在全血中所占的容積百分比。公知的血細(xì)胞比容是與紅細(xì)胞相對(duì)應(yīng)，而本申請(qǐng)的全血細(xì)胞壓積則是和全血細(xì)胞相對(duì)應(yīng)，所謂全血，是包含白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板的混合物，因此，在本申請(qǐng)中，“全血細(xì)胞壓積”的概念則不僅限于紅細(xì)胞壓積，而是包括白細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞壓積和血小板壓積。
[0025]下面通過(guò)【具體實(shí)施方式】結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。
[0026]如圖1所示,本實(shí)施例的樣本分析儀包括:光度計(jì)、反應(yīng)池20、處理器30、細(xì)胞計(jì)數(shù)裝置40和輸出裝置50，其中，反應(yīng)池20用于為被測(cè)的已溶血的全血樣本和負(fù)載有抗CRP抗體的乳膠試劑提供凝集反應(yīng)的場(chǎng)所，光度計(jì)包括光源101，如果光源為非單色光則還可包括分光兀件，本實(shí)施例中光度計(jì)包括分光兀件，其可以是例如棱鏡102、濾光片輪、光柵103等，可根據(jù)實(shí)際需要選用合適的分光元件，光度計(jì)用于對(duì)凝集反應(yīng)的生成物進(jìn)行光照射，根據(jù)生成物在不同時(shí)間段下的吸光強(qiáng)度的變化，確定出全血C-反應(yīng)蛋白濃度，細(xì)胞計(jì)數(shù)裝置40用于根據(jù)庫(kù)爾特原理確定溶血后的全血樣本中全血細(xì)胞的數(shù)目和體積，處理器30用于根據(jù)全血細(xì)胞的數(shù)目和體積計(jì)算出全血細(xì)胞壓積,根據(jù)該全血細(xì)胞體積對(duì)確定出的全血CRP濃度進(jìn)行修正，輸出裝置器50用于輸出修正后的全血CRP濃度。
[0027]本實(shí)施例中，以常規(guī)方式從人體采集全血，將采集的全血樣本放置到反應(yīng)池20，并使全血樣本溶血?？赏ㄟ^(guò)多種方式使全血樣本溶血，例如在全血樣本中加入溶血?jiǎng)?，或者通過(guò)凍結(jié)全血樣本的方式溶血，或者利用超聲波實(shí)現(xiàn)溶血。溶血?jiǎng)┛梢允抢缛ルx子水、皂苷水溶液等，當(dāng)然，溶血?jiǎng)┑倪x擇最好是不影響后續(xù)的凝集反應(yīng)。
[0028]待全血樣本溶血后，在已溶血的全血樣本中加入負(fù)載有抗CRP抗體的乳膠試劑。可以采用常用的方式制備負(fù)載有抗人CRP抗體的乳膠試劑的制備。
[0029]當(dāng)乳膠試劑加入已溶血的全血樣本后將發(fā)生凝集反應(yīng)，得到凝集反應(yīng)生成物，使用光度計(jì)照射生成物，根據(jù)生成物被光照射的不同時(shí)間點(diǎn)的吸光強(qiáng)度變化，利用免疫透射比濁法確定出全血CRP濃度。為不影響光照效果，光源的波長(zhǎng)為血紅蛋白和溶血?jiǎng)┗静晃盏牟ㄩL(zhǎng)。免疫比濁技術(shù)是利用可溶性抗原、抗體在合適的緩沖體系中特異性結(jié)合，形成一定大小的抗原抗體大分子復(fù)合物，導(dǎo)致溶液中出現(xiàn)濁度變化，當(dāng)溶液中保持抗體過(guò)剩時(shí)，形成的復(fù)合物隨抗原量增加而增加，濁度也隨之增加，通過(guò)與一系列標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，即可計(jì)算出樣品中待檢物質(zhì)的含量。免疫透射比濁法是目前應(yīng)用最為廣泛的免疫比濁技術(shù)，當(dāng)光線透過(guò)反應(yīng)溶液時(shí)，由于溶液內(nèi)免疫復(fù)合物對(duì)光線的反射和吸收，引起透射光減少，免疫復(fù)合物越多透射光越少，可以用吸光度表示，利用現(xiàn)代光學(xué)測(cè)量?jī)x器對(duì)濁度進(jìn)行監(jiān)測(cè)從而可以計(jì)算出待檢物質(zhì)的濃度。一般地，光度計(jì)還包括計(jì)算器用于確定濃度值范圍，該計(jì)算器的功能也可集成到處理器30中一并實(shí)現(xiàn)。
[0030]在通過(guò)免疫方法確定全血CRP濃度的同時(shí)，利用細(xì)胞計(jì)數(shù)裝置40得到全血細(xì)胞的數(shù)目和體積，然后處理器根據(jù)全血細(xì)胞的數(shù)目和體積計(jì)算出全血細(xì)胞壓積。當(dāng)然這一計(jì)算過(guò)程也可以集成到細(xì)胞計(jì)數(shù)裝置中。全血細(xì)胞壓積的計(jì)算方法可以采用如下方案一或方案二實(shí)現(xiàn)。
[0031]方案一:依據(jù)庫(kù)爾特原理計(jì)算全血細(xì)胞壓積，即:根據(jù)血細(xì)胞不良導(dǎo)體的性質(zhì)，血細(xì)胞通過(guò)微孔引起電阻變化，當(dāng)血細(xì)胞連續(xù)通過(guò)小孔，就在電極兩端產(chǎn)生一連串的電壓脈沖，脈沖的個(gè)數(shù)與通過(guò)小孔的細(xì)胞數(shù)目相當(dāng)，根據(jù)庫(kù)爾特原理，脈沖的幅度可以換算成細(xì)胞體積，這樣即可得到全體血細(xì)胞數(shù)目和對(duì)應(yīng)的體積，將所有血細(xì)胞的體積進(jìn)行累加得到總體積V_Cell_Total，記測(cè)量的全血樣本的體積為V，全血細(xì)胞壓積計(jì)算方法如下:
[0032]BCT%=V-Cell-Total/V
[0033]其中，BCT%表示全血細(xì)胞壓積，V_Cell_Total表示白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板的體積累加之和，V表示未加入溶血?jiǎng)┣暗娜獦颖镜捏w積。
[0034]方案二:
[0035]分別計(jì)算白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板的細(xì)胞壓積，基本原理如下:依據(jù)庫(kù)爾特原理獲取細(xì)胞體積和細(xì)胞數(shù)目，根據(jù)不同類型血細(xì)胞體積分布的差異，可區(qū)分白細(xì)胞群、紅細(xì)胞群、血小板細(xì)胞群，如圖2所示。
[0036]計(jì)算全血細(xì)胞壓積的方法如下:
[0037]BCT%=白細(xì)胞壓積+紅細(xì)胞壓積+血小板壓積
[0038]其中，白細(xì)胞壓積=白細(xì)胞數(shù)目X白細(xì)胞平均體積，紅細(xì)胞壓積=紅細(xì)胞數(shù)目X紅細(xì)胞平均體積，血小板壓積=血小板數(shù)目X血小板平均體積。
[0039]白細(xì)胞平均體積、紅細(xì)胞平均體積和血小板平均體積可以通過(guò)阻抗信息或散射光信息或光吸收等信號(hào)換算得到，也可以是儀器輸出的結(jié)果，具體可通過(guò)常用的相關(guān)方法實(shí)現(xiàn)。
[0040]根據(jù)全血細(xì)胞壓積，處理器30對(duì)通過(guò)免疫方法確定出的全血CRP濃度進(jìn)行修正，具體修正可以采用如下公式:
[0041]Cmod=CXlOO / (100-BCT%)
[0042]其中，Cmod表示修正后的全血CRP濃度，C表示通過(guò)免疫方法確定出的全血CRP濃度，BCT%表示全血細(xì)胞壓積。
[0043]經(jīng)修正，得到修正后的CRP濃度值，可以通過(guò)輸出裝置50予以輸出，輸出的方式可以是直接在顯示屏幕上顯示出CRP的具體數(shù)值，也可以是直接將CRP數(shù)值打印出來(lái)，又或者可以是通過(guò)聲音播報(bào)的方式播報(bào)CRP數(shù)值。
[0044]基于本實(shí)施例的樣本分析儀可提供一種全血CRP測(cè)量方法,一種實(shí)施例中，全血CRP測(cè)量方法包括反應(yīng)了樣本分析儀的內(nèi)部處理流程，如圖3所示，包括以下步驟:
[0045]溶血凝集發(fā)生步驟S301，使全血樣本溶血，得到溶血后的全血樣本，將負(fù)載有抗C-反應(yīng)蛋白抗體的乳膠試劑加入溶血后的全血樣本，經(jīng)凝集反應(yīng)后得到生成物；
[0046]初始濃度計(jì)算步驟S303，光照反應(yīng)生成物，根據(jù)生成物在不同時(shí)間段下的吸光強(qiáng)度的變化，確定出全血CRP濃度；
[0047]濃度修正步驟S305，計(jì)算溶血后的全血樣本中的全血細(xì)胞壓積，根據(jù)全血細(xì)胞壓積對(duì)確定出的全血CRP濃度進(jìn)行修正，采用如下公式實(shí)現(xiàn):
[0048]Cmod=CXlOO / (100-BCT%)
[0049]其中，Cmod表示修正后的全血CRP濃度，C表示初始濃度計(jì)算步驟S303確定出的全血CRP濃度，BCT%表示全血細(xì)胞壓積。
[0050]全血細(xì)胞壓積的計(jì)算方式有如下兩種:
[0051]第一種計(jì)算方式:全血細(xì)胞壓積為白細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞壓積和血小板壓積之和，其中，白細(xì)胞壓積=白細(xì)胞數(shù)目X白細(xì)胞平均體積，紅細(xì)胞壓積=紅細(xì)胞數(shù)目X紅細(xì)胞平均體積,血小板壓積=血小板數(shù)目X血小板平均體積。白細(xì)胞平均體積、紅細(xì)胞平均體積和血小板平均體積可以通過(guò)阻抗信息或散射光信息或光吸收等信號(hào)換算得到，也可以是儀器輸出的結(jié)果，具體可通過(guò)常用的相關(guān)方法實(shí)現(xiàn)。
[0052]第二種計(jì)算方式:根據(jù)公式BCT%=V_Cell_Total/V得到，其中BCT%表示全血細(xì)胞壓積，V_Cell_Total表示白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板的體積累加之和，V表示全血樣本的體積，白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板的體積可依據(jù)庫(kù)爾特原理獲取。
[0053]上述方法各步驟的具體實(shí)現(xiàn)可參考前述對(duì)樣本分析儀的相關(guān)描述，在此不作重述。
[0054]相應(yīng)于上述全血CRP測(cè)量方法,本申請(qǐng)還提供一種全血CRP測(cè)量裝置,如圖4所示，包括:
[0055]溶血凝集發(fā)生模塊401，用于使全血樣本溶血，得到溶血后的全血樣本，將負(fù)載有抗CRP抗體的乳膠試劑加入溶血后的全血樣本，經(jīng)凝集反應(yīng)后得到生成物；
[0056]初始濃度計(jì)算模塊403，用于光照生成物，根據(jù)生成物在不同時(shí)間段下的吸光強(qiáng)度的變化，確定出全血CRP濃度；
[0057]濃度修正模塊405，用于計(jì)算溶血后的全血樣本中的全血細(xì)胞壓積，根據(jù)全血細(xì)胞壓積對(duì)確定出的全血CRP濃度進(jìn)行修正。
[0058]上述裝置的各模塊的具體實(shí)現(xiàn)可參考前述對(duì)樣本分析儀的相關(guān)描述，在此不作重述。
[0059]為保證與【背景技術(shù)】提及的采用血清進(jìn)行CRP濃度測(cè)量的結(jié)果的可比性，已通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)本實(shí)施例全血CRP濃度測(cè)量方法和其它方式檢測(cè)的方法進(jìn)行了對(duì)比分析。一種實(shí)驗(yàn)中，使用深圳邁瑞公司生產(chǎn)的BC-5390血液細(xì)胞分析儀和深圳邁瑞公司生產(chǎn)的BS-300生化分析儀，選取6例高值WBC(白血球，White Blood Cell)血液樣本，WBC計(jì)數(shù)值大于300X 19/L)，每例樣本制備三份，進(jìn)行以下測(cè)試:
[0060](I) 一份樣本在BS-300生化分析儀上進(jìn)行測(cè)試獲取血清CRP濃度值；
[0061](2)—份樣本在BC-5390血液細(xì)胞分析儀上進(jìn)行測(cè)試獲取HCT，然后按照美國(guó)專利US6030845提供的方法測(cè)量全血CRP濃度；
[0062](3) 一份樣本在本實(shí)施例的樣本分析儀中獲取全血CRP濃度值。
[0063]如圖5和圖6所示，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與美國(guó)專利US6030845提出的方法相比，本實(shí)施例的全血CRP濃度測(cè)量結(jié)果更接近作為參考值的生化分析儀獲取的血清CRP濃度值。其中，在圖6中，▲表示美國(guó)專利US6030845提出的方法的CRP測(cè)量結(jié)果，?表示本實(shí)施例提供的方法的CRP測(cè)量結(jié)果，?表示生化分析儀BS-300血清CRP測(cè)量結(jié)果。
[0064]美國(guó)專利US6030845的全血CRP濃度測(cè)量方法中僅考慮紅細(xì)胞壓積，且其修正結(jié)果沒(méi)有考慮吸光度或吸光度的變化與CRP濃度之間的非線性關(guān)系的影響，從而導(dǎo)致有些樣本全血CRP測(cè)定的結(jié)果明顯偏低。而本申請(qǐng)實(shí)施例的全血CRP濃度測(cè)量方法綜合考慮了白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血細(xì)胞的細(xì)胞壓積，且該測(cè)量是先測(cè)得吸光度對(duì)應(yīng)的CRP濃度值，然后再由CRP濃度值計(jì)算出修正后的CRP濃度值，從而可得到同血清CRP濃度更為一致的測(cè)量結(jié)果，因而提高了全血CRP測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。
[0065]本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，上述實(shí)施方式中各種方法的全部或部分步驟可以通過(guò)程序來(lái)指令相關(guān)硬件完成，該程序可以存儲(chǔ)于一計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)介質(zhì)中，存儲(chǔ)介質(zhì)可以包括:只讀存儲(chǔ)器、隨機(jī)存儲(chǔ)器、磁盤或光盤等。
[0066]以上內(nèi)容是結(jié)合具體的實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說(shuō)明。對(duì)于本發(fā)明所屬【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡(jiǎn)單推演或替換。
【權(quán)利要求】
1.一種全血C-反應(yīng)蛋白測(cè)量方法，其特征在于，包括: 溶血凝集發(fā)生步驟:使全血樣本溶血，得到溶血后的全血樣本，將負(fù)載有抗C-反應(yīng)蛋白抗體的乳膠試劑加入溶血后的全血樣本，經(jīng)凝集反應(yīng)后得到生成物； 初始濃度計(jì)算步驟:光照所述生成物，根據(jù)所述生成物在不同時(shí)間段下的吸光強(qiáng)度的變化，確定出全血C-反應(yīng)蛋白濃度； 濃度修正步驟:計(jì)算溶血后的全血樣本中的全血細(xì)胞壓積，根據(jù)全血細(xì)胞壓積對(duì)確定出的全血C-反應(yīng)蛋白濃度進(jìn)行修正。
2.如權(quán)利要求1所述的全血C-反應(yīng)蛋白測(cè)量方法，其特征在于，所述修正采用如下公式實(shí)現(xiàn):
Cmod=CXlOO / (100-BCT%) 其中，Cnwd表示修正后的全血.C-反應(yīng)蛋白濃度，C表示所述初始濃度計(jì)算步驟確定出的全血C-反應(yīng)蛋白濃度，BCT%表示全血細(xì)胞壓積。
3.如權(quán)利要求1或2所述的全血C-反應(yīng)蛋白測(cè)量方法，其特征在于，所述全血細(xì)胞壓積為白細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞壓積和血小板壓積之和，其中，白細(xì)胞壓積等于白細(xì)胞數(shù)目乘以白細(xì)胞平均體積，紅細(xì)胞壓積等于紅細(xì)胞數(shù)目乘以紅細(xì)胞平均體積，血小板壓積等于血小板數(shù)目乘以血小板平均體積，白細(xì)胞數(shù)目、白細(xì)胞平均體積、紅細(xì)胞數(shù)目、紅細(xì)胞平均體積、血小板數(shù)目、血小板平均體積均依據(jù)庫(kù)爾特原理獲取。
4.如權(quán)利要求1或2所述的全血C-反應(yīng)蛋白測(cè)量方法，其特征在于，所述全血細(xì)胞壓積的計(jì)算采用如下公式實(shí)現(xiàn):
BCT%=V_Cell_Total/V 其中，BCT%表示全血細(xì)胞壓積，V_Cell_Total表示白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板的體積累加之和，V表示全血樣本的體積。
5.如權(quán)利要求1所述的全血C-反應(yīng)蛋白測(cè)量方法，其特征在于，所述初始濃度計(jì)算步驟中利用免疫透射比濁法確定出全血C-反應(yīng)蛋白濃度。
6.一種全血C-反應(yīng)蛋白測(cè)量裝置，其特征在于，包括: 溶血凝集發(fā)生模塊，用于使全血樣本溶血，得到溶血后的全血樣本，將負(fù)載有抗C-反應(yīng)蛋白抗體的乳膠試劑加入溶血后的全血樣本，經(jīng)凝集反應(yīng)后得到生成物； 初始濃度計(jì)算模塊，用于光照所述生成物，根據(jù)所述生成物在不同時(shí)間段下的吸光強(qiáng)度的變化，確定出全血C-反應(yīng)蛋白濃度； 濃度修正模塊，用于計(jì)算溶血后的全血樣本中的全血細(xì)胞壓積，根據(jù)全血細(xì)胞壓積對(duì)確定出的全血C-反應(yīng)蛋白濃度進(jìn)行修正。
7.如權(quán)利要求6所述的全血C-反應(yīng)蛋白測(cè)量裝置，其特征在于，所述濃度修正模塊中采用如下公式實(shí)現(xiàn)對(duì)所述初始濃度計(jì)算模塊確定出的全血C-反應(yīng)蛋白濃度的修正:
Cmod=CXlOO / (100-BCT%) 其中，Cmod表示修正后的全血.C-反應(yīng)蛋白濃度，C表示所述初始濃度計(jì)算模塊確定出的全血C-反應(yīng)蛋白濃度，BCT%表示全血細(xì)胞壓積。
8.如權(quán)利要求6或7所述的全血C-反應(yīng)蛋白測(cè)量裝置，其特征在于，所述濃度修正模塊中全血細(xì)胞壓積的計(jì)算方法包括: 采用公式BCT%=V_Cell_Total/V，其中，BCT%表示全血細(xì)胞壓積，V_Cell_Total表示白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板的體積累加之和，V表示未加入溶血?jiǎng)┣暗娜獦颖镜捏w積； 或者，所述全血細(xì)胞壓積為白細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞壓積和血小板壓積之和，其中，白細(xì)胞壓積等于白細(xì)胞數(shù)目乘以白細(xì)胞平均體積，紅細(xì)胞壓積等于紅細(xì)胞數(shù)目乘以紅細(xì)胞平均體積，血小板壓積等于血小板數(shù)目乘以血小板平均體積，白細(xì)胞數(shù)目、白細(xì)胞平均體積、紅細(xì)胞數(shù)目、紅細(xì)胞平均體積、血小板數(shù)目、血小板平均體積均依據(jù)庫(kù)爾特原理獲取。
9.一種樣本分析儀,其特征在于,包括: 反應(yīng)池，用于為被測(cè)的已溶血全血樣本和負(fù)載有抗C-反應(yīng)蛋白抗體的乳膠試劑提供凝集反應(yīng)場(chǎng)所； 光度計(jì)，用于對(duì)凝集反應(yīng)的生成物進(jìn)行光照射，根據(jù)生成物在不同時(shí)間段下的吸光強(qiáng)度的變化，確定出全血C-反應(yīng)蛋白濃度；細(xì)胞計(jì)數(shù)裝置，用于根據(jù)庫(kù)爾特原理確定溶血后的全血樣本中全血細(xì)胞的數(shù)目和體積； 處理器，用于根據(jù)所述全血細(xì)胞的數(shù)目和體積計(jì)算出全血細(xì)胞壓積，根據(jù)所述全血細(xì)胞壓積對(duì)確定出的全血C-反應(yīng)蛋白濃度進(jìn)行修正； 輸出裝置，用于輸出修正后的全血C-反應(yīng)蛋白濃度。
10.如權(quán)利要求9所述的樣本分析儀，其特征在于，所述處理器中采用如下公式實(shí)現(xiàn)對(duì)確定出的全血C-反應(yīng)蛋白濃度進(jìn)行修正:
Cmod=CXlOO / (100-BCT%) 其中，Cmod表示修正后的全血C-反應(yīng)蛋白濃度，C表示所述光度計(jì)確定出的全血C-反應(yīng)蛋白濃度，BCT%表示全血細(xì)胞壓積。
【文檔編號(hào)】G01N21/82GK104515857SQ201310464298
【公開日】2015年4月15日 申請(qǐng)日期:2013年9月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月30日
【發(fā)明者】葉波, 鄭文波, 葉燚 申請(qǐng)人:深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司