專利名稱：平消片檢驗(yàn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥品的檢驗(yàn)方法，具體是一種平消片檢驗(yàn)方法。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有平消片檢驗(yàn)方法，雖然對(duì)平消片有比較成熟的檢驗(yàn)技術(shù)，但其檢驗(yàn)的精度仍有待提聞的余地。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種更精確的檢驗(yàn)平消片的方法。本發(fā)明是在現(xiàn)有的平消片檢驗(yàn)方法的基礎(chǔ)上所進(jìn)行的研究，做出了一種新的、t匕現(xiàn)有方法提高了的檢驗(yàn)方法。本發(fā)明包括平消片鑒定方法和馬錢子、麩炒枳殼含量測(cè)定。本發(fā)明檢驗(yàn)增加了平消片中五靈脂薄層色譜鑒別項(xiàng)及枳殼的含量測(cè)定項(xiàng)，作為控制平消片的質(zhì)量依據(jù)。五靈脂薄層色譜鑒別項(xiàng)對(duì)專屬性、耐用性方法學(xué)驗(yàn)證要求的變動(dòng)因素?zé)o明顯影響，方法靈敏度高，重現(xiàn)性好，操作方法簡(jiǎn)便，斑點(diǎn)清晰，分離效果好，經(jīng)陰性對(duì)照試驗(yàn)，陰性樣品無(wú)干擾。枳殼的含量測(cè)定項(xiàng)對(duì)準(zhǔn)確度、精密度、專屬性、范圍、耐用性、含量限度方法學(xué)驗(yàn)證要求的因素試驗(yàn)表明方法精密度好，靈敏度高，線性、范圍及回收率均符合測(cè)定要求，且陰性對(duì)照溶液對(duì)測(cè)定無(wú)干擾。`
具體實(shí)施例方式本發(fā)明平消片檢驗(yàn)方法包括平消片鑒定方法和馬錢子、麩炒枳殼含量測(cè)定。一、本發(fā)明平消片鑒定方法為:(I)取平消片置顯微鏡下觀察:單細(xì)胞非腺毛形似纖維，多碎斷，基部膨大似石細(xì)胞，木化(馬錢子粉)；作為下述各步驟使用。(2)取平消片20片，除去包衣，研細(xì)，取4g，加三氯甲烷-乙醇(體積比10: I),混合液IOml與濃氨(質(zhì)量濃度25% -28% ) 0.5ml，密塞，振搖5分鐘，放置2小時(shí)，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液；另取馬錢子對(duì)照藥材lg，加三氯甲烷-乙醇(體積比10: I)混合液IOml與濃氨(質(zhì)量濃度25% -28% )試液0.5ml，密塞，振搖5分鐘，放置2小時(shí)，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液；再取士的寧對(duì)照品、馬錢子堿對(duì)照品，加三氯甲烷制成每Iml各含Img的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5 10 iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮-乙醇-濃氨試液(體積比4: 5: 0.6: 0.4)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(3)取平消片10片，除去包衣，研細(xì)，取2g，加甲醇20ml，加熱至沸騰，回流2小時(shí)，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。另取枳殼對(duì)照藥材lg，加甲醇20ml，加熱至沸騰，回流2小時(shí)，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各6 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水(體積比10: 2: 3)的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。(4)取平消片20片，除去包衣，研細(xì)，加石油醚(質(zhì)量濃度30 60°C )50ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾渣揮干，加乙醇50ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，取上清液作為供試品溶液。另取五靈脂對(duì)照藥材lg，加石油醚(30 600C ) 50ml，超聲處理20分鐘,濾過(guò),濾渣揮干,加乙醇50ml，超聲處理20分鐘,濾過(guò),濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，取上清液作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(20: 4)為展開(kāi)劑，展至12cm，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。二、馬錢子含量，照高效液相色譜法(中國(guó)藥典附錄VID)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.01mol/L庚烷磺酸鈉與0.02mol/L磷酸二氫鉀等量混合溶液(用10%磷酸調(diào)節(jié)pH值至2.8)和乙腈(79: 21)為流動(dòng)相(200-2000ml);檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。
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對(duì)照品溶液的制備:取士的寧對(duì)照品7.5mg，精密稱定，加三氯甲烷制成每Iml含
0.3mg 士的寧的溶液。精密量取2ml，置IOml量瓶中，加甲醇稀釋至10ml，搖勻，即得(每Iml 含士的寧 60 ii g)。供試品溶液的制備:取平消片20片，除去包衣，精密稱定3g，研細(xì)，置具塞錐型瓶中，加入三氯甲烷20ml、濃氨試液1ml，加熱至沸騰，回流2小時(shí),放冷,再稱定重量,用三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用鋪有少量無(wú)水硫酸鈉的濾紙濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5ml，置IOml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10iU，注入液相色譜儀，測(cè)
定，即得。本品每片含馬錢子粉以士的寧(C21H22N202)計(jì)，應(yīng)為0.25 0.35mg。三、麩炒枳殼含量，照高效液相色譜法(中國(guó)藥典附錄VID)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水(20: 80)(用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為283nm。理論板數(shù)按柚皮苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備:取等量的柚皮苷、新橙皮苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含柚皮苷、新橙皮苷共80 u g的混合溶液，即得。
供試品溶液的制備:取平消片20片，除去包衣，研細(xì)，取0.25g，精密稱定，置具塞錐型瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，加熱回流1.5小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10iU，注入液相色譜儀，測(cè)
定，即得。本品每片含麩炒枳殼以柚皮苷(C27H32014)計(jì)，不得少于0.80mg ；以新橙皮苷(C 28H34015)計(jì)，不得少于 0.60mg。
權(quán)利要求
1.一種平消片鑒定方法，步驟為: (1)取平消片置顯微鏡下觀察:單細(xì)胞非腺毛形似纖維，多碎斷，基部膨大似石細(xì)胞，馬錢子粉木化；作為下述各步驟使用； (2)取平消片，除去包衣，研細(xì)，加三氯甲烷-乙醇，混合液與濃氨試液密塞，振搖，放置后濾過(guò)，濾液作為供試品溶液； 另取馬錢子對(duì)照藥材，加三氯甲烷-乙醇混合液與濃氨試液，密塞，振搖，放置后濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液； 再取士的寧對(duì)照品、馬錢子堿對(duì)照品，加三氯甲烷制成每混合溶液，作為對(duì)照品溶液； 吸取上述三種溶液分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮-乙醇-濃氨試液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； (3)取平消片，除去包衣，研細(xì)，加甲醇，加熱至沸騰，回流，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液； 另取枳殼對(duì)照藥材，加甲醇，加熱至沸騰，回流，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液； 吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； (4)取平消片除去包衣，研細(xì)，加石油醚，超聲處理，濾過(guò)，濾渣揮干，加乙醇，超聲處理，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ナ谷芙猓∩锨逡鹤鳛楣┰嚻啡芤?。另取五靈脂對(duì)照藥材，加石油醚，超聲處理，濾 過(guò)，濾渣揮干，加乙醇，超聲處理，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ナ谷芙?，取上清液作為?duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的平消片鑒定方法，在步驟(2)中:取平消片20片，除去包衣，研細(xì)，取4g，加三氯甲烷-乙醇(體積比10: I)，混合液IOml與濃氨(質(zhì)量濃度25% -28% )試液0.5ml，密塞，振搖5分鐘，放置2小時(shí)，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液； 另取馬錢子對(duì)照藥材lg，加三氯甲烷-乙醇(體積比10: I)混合液IOml與濃氨(質(zhì)量濃度25%-28%)試液0.5ml，密塞，振搖5分鐘，放置2小時(shí)，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液； 再取士的寧對(duì)照品、馬錢子堿對(duì)照品，加三氯甲烷制成每Iml各含Img的混合溶液，作為對(duì)照品溶液； 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5 10 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯丙酮-乙醇-濃氨試液(體積比4: 5: 0.6: 0.4)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的平消片鑒定方法，在步驟(3)中:取平消片10片，除去包衣，研細(xì)，取2g,加甲醇20ml，加熱至沸騰，回流2小時(shí)，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液； 另取枳殼對(duì)照藥材lg，加甲醇20ml，加熱至沸騰，回流2小時(shí)，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各6 u 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸水(體積比10: 2: 3)的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的突光斑點(diǎn)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的平消片鑒定方法，在步驟(4)中:取平消片20片，除去包衣，研細(xì)，加石油醚(質(zhì)量濃度30 60°C ) 50ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾渣揮干，加乙醇50ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，取上清液作為供試品溶液。另取五靈脂對(duì)照藥材lg，加石油醚(30 60°C ) 50ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾渣揮干，加乙醇50ml，超聲處理20分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，取上清液作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(20: 4)為展開(kāi)劑，展至12cm，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
5.一種平消片中馬錢子含量測(cè)定方法，其步驟是: 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.0lmol/L庚烷磺酸鈉與0.02mol/L磷酸二氫鉀等量混合溶液(用10%磷酸調(diào)節(jié)pH值至2.8)和乙腈(79: 21)為流動(dòng)相(200-2000ml);檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm ;理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于5000 ； 對(duì)照品溶液的制備:取士 的寧對(duì)照品7.5mg,精密稱定,加三氯甲燒制成每Iml含0.3mg士的寧的溶液。精密量取2ml，置IOml量瓶中，加甲醇稀釋至10ml，搖勻，即得(每Iml含士的寧 60 V- g)； 供試品溶液的制備:取平消片20片，除去包衣，精密稱定3g，研細(xì)，置具塞錐型瓶中，力口入三氯甲烷20ml、濃氨試液Iml，加熱至沸騰，回流2小時(shí)，放冷，再稱定重量，用三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用鋪有少量無(wú)水硫酸鈉的濾紙濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5ml，置IOml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得； 測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10 yl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得; 本品每片含馬錢子粉以士的寧(C21H22N202)計(jì)，應(yīng)為0.25 0.35mg。
6.一種平消片中麩炒枳殼含量測(cè)定方法，其步驟是: 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水(20: 80)(用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為283nm。理論板數(shù)按柚皮苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000 ； 對(duì)照品溶液的制備:取等量的柚皮苷、新橙皮苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含柚皮苷、新橙皮苷共80 u g的混合溶液，即得； 供試品溶液的制備:取平消片20片，除去包衣，研細(xì)，取0.25g，精密稱定，置具塞錐型瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，加熱回流1.5小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； 測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10 yl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得;本品每片含麩炒積殼以柚皮苷(C27H32014)計(jì)，不得少于0.80mg；以新橙皮苷(C28H34015)計(jì)，不得少于0.60mg。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藥品平消片檢驗(yàn)方法。它是在現(xiàn)有的平消片檢驗(yàn)方法的基礎(chǔ)上所進(jìn)行的研究，本發(fā)明包括平消片鑒定方法和馬錢子、麩炒枳殼含量測(cè)定。鑒定步驟為取平消片，加試，濾液作為供試品溶液；另取馬錢子對(duì)照藥材濾液作為對(duì)照藥材溶液；再取士的寧混合溶液，作為對(duì)照品溶液。本發(fā)明方法靈敏度高，重現(xiàn)性好，操作方法簡(jiǎn)便，斑點(diǎn)清晰，分離效果好，經(jīng)陰性對(duì)照試驗(yàn)，陰性樣品無(wú)干擾。
文檔編號(hào)G01N21/64GK103245649SQ201310172208
公開(kāi)日2013年8月14日 申請(qǐng)日期2013年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月13日
發(fā)明者方祎 申請(qǐng)人:寧夏金太陽(yáng)藥業(yè)有限公司