專利名稱：一種丹參注射液的基于組分結(jié)構(gòu)的質(zhì)量控制檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，尤其是一種用于丹參注射液的基于組分結(jié)構(gòu)的質(zhì)量控制檢測方法領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
中藥制劑的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)是由多個組分按照一定的構(gòu)成比組成的具有整體特征的成分群?，F(xiàn)代藥理學(xué)和植物化學(xué)研究結(jié)果表明，中藥制劑發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)非某單一成分起作用，而是通過多靶點(diǎn)、多成分實(shí)現(xiàn)協(xié)同作用。目前，研究人員逐漸意識到中藥制劑物質(zhì)基礎(chǔ)研究及質(zhì)量控制不能走傳統(tǒng)的尋求單體的植化途徑，以某活性成分或毒性成分的含量制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，而是要基于中藥的整體觀，以“組分”為切入點(diǎn)，闡明中藥的物質(zhì)基礎(chǔ)并最終達(dá)到符合整體特點(diǎn)的中藥質(zhì)量控制的目的。中藥物質(zhì)基礎(chǔ)“組分結(jié)構(gòu)理論”認(rèn)為中藥制劑物質(zhì)基礎(chǔ)是一個有序的整體，具有“三個層次多維結(jié)構(gòu)”，是由多種組分組成，而每一組分內(nèi)也由多個的成分一定配比構(gòu)成，組分間與組分內(nèi)都存在一定的結(jié)構(gòu)特征，這與目前以某指標(biāo)含量高低來控制中藥制劑質(zhì)量的方法相比，既實(shí)現(xiàn)了可控性，又體現(xiàn)了中藥的整體性。丹參注射液為臨床常用的中藥制劑，具有活血化瘀、理氣開竅、擴(kuò)張血管和增進(jìn)冠狀動脈血流量的作用，用于心絞痛、心肌梗死等疾病的預(yù)防和治療。丹參注射液主要含有水溶性丹參酚酸類化合物和糖類，如丹參素、原兒茶醛、咖啡酸、去丹參素丹酚酸E1、去丹參素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸等。研究顯示，這些化合物都具有一定的心腦血管保護(hù)作用。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的:本發(fā)明是要依據(jù)中醫(yī)藥整體性和系統(tǒng)性的特點(diǎn)，解決丹參注射液的質(zhì)量控制的現(xiàn)有不足，提供一種代表組分特征的多維結(jié)構(gòu)質(zhì)量控制方法。技術(shù)方案:—種丹參注射液的基于組分的質(zhì)量控制檢測方法，該方法的特征為對丹參注射液中酚酸和糖類組分的組分間組成結(jié)構(gòu)和組分內(nèi)結(jié)構(gòu)進(jìn)行控制，采用HPLC指紋圖譜、柱前衍生化HPLC及NMR技術(shù)測定代表整體性的有限成分，從而整體并系統(tǒng)性地控制丹參注射液組分及成分內(nèi)成分之間的含量比例。衡量丹參注射液質(zhì)量的最佳標(biāo)準(zhǔn)為:酚酸組分:糖類組分的含量控制范圍為(1%_95%): (90%-1%);并且丹參酚酸內(nèi)丹參素、原兒茶醛、咖啡酸、去丹參素丹酚酸E1、去丹參素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸各成分的構(gòu)成比分別為(1%-95%): (5%-95%): (1%-20%): (1%_20%):(5%-20%): (1%-50%): (5%-20%): (1%-10%): (1%-20%): (1%-20%);酚酸組分和糖類組分的含量總和大于總固形物的35-90% ;酚酸組分的含量不低于總固形物的40-80%。有益效果:中藥制劑產(chǎn)品是由眾多化學(xué)成分通過協(xié)同作用發(fā)揮效應(yīng)。中藥制劑產(chǎn)品的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)是由多組分或多成分構(gòu)成的某一組分組成，各組分之間的生物活性存在顯著差異，作用靶點(diǎn)及機(jī)制也不盡相同；組分內(nèi)各化合物結(jié)構(gòu)也存在著差異，生物活性也存在著差異，因此，這些組分及成分發(fā)揮最佳藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)構(gòu)成存在著一定的獨(dú)特性，即組分之間或組分內(nèi)化合物之間存在著獨(dú)特的組成結(jié)構(gòu)特征。丹參注射液主要包括酚酸和糖類組分，這些組分具有一定的保護(hù)心血管作用，研究顯示丹參酚酸具有神經(jīng)和腦缺血保護(hù)、保護(hù)心肌損傷、抗血栓和抑制血小板活化、改善糖尿病血管并發(fā)癥、抑制血管細(xì)胞的增殖等作用。糖類也是其功效的物質(zhì)基礎(chǔ)構(gòu)成組分之一，丹參糖類具有抗氧化活性和提高小鼠耐缺氧能力，還可通過上調(diào)prohibitin蛋白表達(dá)發(fā)揮保護(hù)H2O2致心肌細(xì)胞損傷的作用。因此，對丹參注射液的質(zhì)量控制，不能僅以丹參素或原兒茶醛來代替整體活性成分。重要的是，構(gòu)成藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的組成結(jié)構(gòu)特征被忽略。因此，基于組分結(jié)構(gòu)理論，闡明丹參注射液的酚酸和糖類組分間及組分內(nèi)的結(jié)構(gòu)特征，將實(shí)現(xiàn)對丹參注射液質(zhì)量的真正控制，保證其療效和安全性。本發(fā)明克服了現(xiàn)有的對丹參注射液產(chǎn)品質(zhì)量控制檢測方法的不足，可能成為一種丹參注射液的質(zhì)量控制檢測新方法。


圖1丹參注射液多維結(jié)構(gòu)質(zhì)量控制示意2丹參注射液中酚酸類成分指紋圖譜，(其中1.5-羥甲基糠醛；2.丹參素鈉；3.原兒茶醛；4.咖啡酸；5.去丹參素丹酚酸El; 6.去丹參素丹酚酸E2; 7.丹酚酸D; 8.迷迭香酸；9.丹酚酸B; 10.丹酚酸A;ll，丹酚酸C)圖3250ml: 16g規(guī)格丹參注射液酚酸成分HPLC指紋圖譜圖4250ml: 12g規(guī)格丹參注射液酚酸成分HPLC指紋圖譜圖5丹參注射液糖類水解HPLC圖(1.甘露糖2.葡萄糖3.半乳糖)圖6丹 參糖類組分核磁脈沖序列7丹參糖類組分化學(xué)位移8丹參糖類組分面積積分圖
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的用于丹參注射液的基于組分結(jié)構(gòu)的質(zhì)量控制檢測方法進(jìn)行詳細(xì)說明:實(shí)施例 質(zhì)量控制檢測方法步驟一:測定丹參注射液中的丹參總酚酸含量，對各酚酸成分進(jìn)行定性定量表征1.儀器:高效液相色譜系統(tǒng)=AgilentllOO美國安捷倫科技公司(配置真空脫氣機(jī)，自動進(jìn)樣器，四元泵，VWD G1314A, DAD G1315B ；Agilent ChemStation A10.02 色譜工作站)；2.色譜條件色譜柱:ShiseidoCapcell pak MG C18 (4.6 X 250mm, 5 μ m)色譜柱及 ShiseidoMG C18保護(hù)柱(4.6X12.5mm，5 μ m);流動相為乙腈(A)-0.075%磷酸水，洗脫程序?yàn)?乙腈(A)0-17min，5%A-12%A;17_42min，12%A-18%A ;42_46min，18%A_18%A ;46_58min，18%A-27%A ；58-65min,27%A-27%A ;65_75min，27%A_50%A ;75_85min，50%A_80%A。流速為
1.0mL/min ;檢測波長為270nm ;柱溫為30oC ;進(jìn)樣體積為IO μ L。3.對照品溶液的配制:精密稱取丹參素、原兒茶醛、咖啡酸、去丹參素丹酚酸E1、去丹參素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸共10個酚酸類成分對照品:
權(quán)利要求
1.一種丹參注射液的基于組分的質(zhì)量控制檢測方法，具體方法為對丹參注射液中總酚酸組分和糖類組分的組分間結(jié)構(gòu)和各組分內(nèi)結(jié)構(gòu)兩個層面進(jìn)行檢測控制，其特征為采用如下具體步驟: 測定丹參注射液中丹參總酚酸內(nèi)各酚酸具體的組成、比例和總酚酸含量； 測定丹參注射液中糖類組成和含量； 測定丹參注射液固體物中糖類組分和含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參注射液的基于組分的質(zhì)量控制檢測方法，其特征在于用丹參素、原兒茶醛、咖啡酸、去丹參素丹酚酸E1、去丹參素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸為對照品，用HPLC色譜法來測定總酚酸內(nèi)各酚酸具體的組成、t匕例和總酚酸含量。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參注射液的基于組分的質(zhì)量控制檢測方法，其特征在于采用甘露糖，葡萄糖，半乳糖為對照品，用HPLC色譜法來測定糖類組成和含量。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述丹參注射液的基于組分的質(zhì)量控制檢測方法，其特征在于采用磁共振NMR技術(shù)來測定 注射液中固體物內(nèi)糖類的組成和含量。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述丹參注射液的基于組分的質(zhì)量控制檢測方法，其特征為，在該注射液內(nèi)的酹酸組分:糖類組分的含量控制范圍為(1%_95%): (90%-1%);并且丹參酹酸內(nèi)丹參素、原兒茶醛、咖啡酸、去丹參素丹酚酸E1、去丹參素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸各成分的構(gòu)成比分別為(1%-95%): (5%-95%): (1%-20%): (1%_20%): (5%-20%): (1%-50%): (5%-20%): (1%-10%): (1%-20%): (1%-20%);酚酸組分和糖類組分的含量總和大于總固形物的35-90% ;酚酸組分的含量不低于總固形物的40-80%該注射液的質(zhì)量最佳。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種丹參注射液的基于組分結(jié)構(gòu)的質(zhì)量控制檢測新方法。本發(fā)明通過丹參注射液內(nèi)表征整體性質(zhì)的酚酸組分和糖類組分來判定質(zhì)量的優(yōu)劣，最佳的標(biāo)準(zhǔn)為酚酸組分糖類組分含量為(1%-95%):(90%-1%)；并且丹參酚酸內(nèi)丹參素、原兒茶醛、咖啡酸、去丹參素丹酚酸E1、去丹參素丹酚酸E2、丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、丹酚酸D、迷迭香酸各成分的構(gòu)成比分別為(1%-95%):(5%-95%):(1%-20%):(1%-20%):(5%-20%):(1%-50%):(5%-20%):(1%-10%):(1%-20%):(1%-20%)；酚酸組分和糖類組分的含量總和大于總固形物的35-90%；酚酸組分的含量不低于總固形物的40-80%。
文檔編號G01N24/08GK103245687SQ201310164760
公開日2013年8月14日 申請日期2013年5月7日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月7日
發(fā)明者賈曉斌, 封亮, 王桂有 申請人:江蘇省中醫(yī)藥研究院