專利名稱：一種鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥現(xiàn)代化領(lǐng)域，具體涉及ー種鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
中藥成分復(fù)雜，特別是中藥復(fù)方往往含多類、多種成分，構(gòu)成了ー個(gè)非常復(fù)雜的系統(tǒng)。目前，新的有效部位中藥制劑和現(xiàn)代復(fù)方中藥制劑的研發(fā)不斷增多，新的エ藝及多種不同提取方式并用于藥品的研究及生產(chǎn)。隨著現(xiàn)代分析測(cè)試技木、設(shè)備儀器的迅猛發(fā)展，中藥的含量測(cè)定、色譜鑒別成為檢測(cè)的重要手段。但目前一般只建立某一指標(biāo)化學(xué)成分的含量測(cè)定或鑒別，針對(duì)上述多種新エ藝同時(shí)應(yīng)用的情況，僅建立某単一成分的含量測(cè)定或鑒別在很大程度上帯有較大的片面性。鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊具有補(bǔ)腎壯陽(yáng)，填精固真功效，用于腎陽(yáng)虛或腎陰虛引起的陽(yáng)萎、遺精、早泄等癥。鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊為膠囊劑，內(nèi)容物為黃棕色至棕褐色的顆粒和粉末；氣微香，味苦、辛、微酸。其處方是鎖陽(yáng)31g、仙茅31g、巴戟天31g、當(dāng)歸31g、蛇床子31g、肉灰蓉(蒸)31g> 韭菜子4"7g、五味子(蒸)20g、紅參l6g、牛鞭(制)l6g、狗腎(制)l6g、鹿鸞10g、黑順片10g、肉桂10g、小茴香10g、陽(yáng)起石(煅)10g、花椒10g、英絲子3lg、杜仲(鹽炒)31g、沙苑子(鹽炒)31g、黨參(蜜炙)31g、山茱萸(蒸)31g、淫羊藿31g、黃芪(蜜炎)3lg、山藥3lg、熟地黃3lg、補(bǔ)骨脂(鹽炒)20g、枸杞子20g、覆盆子20g、遠(yuǎn)志20g、蓮須20g、金櫻子20g、澤瀉10g、甘草(蜜炙)10g、茯苓10g。制法以上三十五味，鎖陽(yáng)、仙茅、巴戟天、當(dāng)歸、蛇床子、肉蓯蓉、韭菜子、五味子、紅參、牛鞭、狗腎、鹿茸、黑順片、肉桂、小茴香、陽(yáng)起石、花椒十七味，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻；其余菟絲子等十八味，加水煎煮二次，毎次3小吋，合并煎液，濾過，濾液濃縮成稠膏狀，加入上述細(xì)粉，混勻，制成顆粒，干燥，裝入膠囊，制成1000粒，即得。ロ服，一次3 5粒，
一日2 3次。方中采用淫羊藿、鹿茸、陽(yáng)起石、花椒、菟絲子、杜仲、沙苑子、補(bǔ)骨脂等滋補(bǔ)腎陽(yáng)藥，達(dá)到了滋補(bǔ)肝腎，強(qiáng)筋縮尿之功效。君藥鎖陽(yáng)、臣藥巴戟天、肉蓯蓉、淫羊藿、韭菜子補(bǔ)腎壯陽(yáng)；佐藥中的蓮須益腎固精，山藥、獲苓、澤瀉健脾寧心，滲濕利水，除腎經(jīng)濕熱，同時(shí)采用黨參、枸杞子、熟地黃、杜仲等滋陰藥，補(bǔ)益肝腎，配合當(dāng)歸、蛇床子、五味子、肉桂等藥味的滋補(bǔ)、緩瀉作用，達(dá)到藥性溫和；用甘草以調(diào)合方中諸藥藥性，為使藥也。依中醫(yī)理論，本品既滋腎陰，又補(bǔ)腎陽(yáng)，陰陽(yáng)雙補(bǔ)，溫和而持久，調(diào)節(jié)陰陽(yáng)平衡，使人達(dá)到“陰平陽(yáng)秘，精神乃治”的狀態(tài)。鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊原來檢測(cè)方法中只有顯微鑒別，是利用顯微技術(shù)對(duì)中藥進(jìn)行顯微分祈，以確定其品種和質(zhì)量的一種鑒定方法。顯微鑒定主要包括組織鑒定和粉末鑒定，利用顯微鏡來觀察藥材的組織構(gòu)造、細(xì)胞形狀及內(nèi)含物的特征、礦物的光學(xué)特性，和用顯微化學(xué)方法，確定細(xì)胞壁及細(xì)胞內(nèi)含物的性質(zhì)或某些品種有效成分在組織中的分布等，用以鑒別藥材的真?zhèn)闻c純度甚至品質(zhì)。這樣的測(cè)檢方法在很大程度上帯有較大的片面性，需 配合現(xiàn)代其它檢測(cè)方法才能更全面的反映鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊重要成份的含量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供ー種鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊的檢測(cè)方法，以解決目前顯微鑒別存在的檢測(cè)不夠全面的問題。本發(fā)明采取的技術(shù)方案是，包括如下鑒別方法和含量測(cè)定方法
(一)鑒別方法
(1)取本品鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊內(nèi)容物，置顯微鏡下觀察草酸鈣針晶纖細(xì)，成束，不規(guī)則地存在于薄壁細(xì)胞中；草酸鈣針晶束整齊或交錯(cuò)排列，長(zhǎng)40 150 i! m,直徑約4 i! m，存在于粘液細(xì)胞中；內(nèi)果皮細(xì)胞黃色，作鑲嵌狀排列，壁呈連珠狀增厚。胚乳細(xì)胞壁不均勻增厚，有較大的圓形紋孔；種皮表皮石細(xì)胞淡黃棕色，表面觀類多角形，壁較厚，孔溝細(xì)密，胞腔含暗棕色物；草酸鈣簇晶直徑20 68 ym，棱角銳尖；石細(xì)胞類方形或類圓形，壁一面菲薄；無色的結(jié)晶呈柱狀或塊狀；內(nèi)果皮細(xì)胞短纖維狀，作鑲嵌狀排列或上下層垂直相交；
(2)取本品鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊內(nèi)容物6g，加こ醚40ml，超聲處理10分鐘，功率250W，頻率40KHz，放冷，濾過，濾液置60°C水浴上揮去醚，殘?jiān)婴乘幛初ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材0. 5g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷こ酸こ酯=7 1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的熒光斑點(diǎn)；
(3)取本品鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊內(nèi)容物6g，加こ醇80ml，超聲處理30分鐘，功率250W，頻率40KHz，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml，加熱使溶解，放冷，用こ醚提取2次，毎次20 ml，合并こ醚液，置60°C水浴上揮干，殘?jiān)婴炒糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取蛇床子素對(duì)照品，加こ醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2 u 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60 90°C石油醚こ酸こ酯=4:1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的熒光斑點(diǎn)；
(ニ)含量測(cè)定方法
照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI D高效液相色譜法測(cè)定；
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；こ腈水=45 55為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為324nm ;柱溫30°C，理論板數(shù)按蛇床子素峰計(jì)算應(yīng)不低于7000 ；
對(duì)照品溶液的制備精密稱取蛇床子素對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含40呢的溶液，即得；
供試品溶液的制備取本品鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，放置2小吋，超聲處理30分鐘，功率250W,頻率40KHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10沿，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本發(fā)明方中的藥物眾多達(dá)三十五味，且大量采用淫羊藿、鹿茸、陽(yáng)起石、花椒、菟絲子、杜仲、沙苑子、補(bǔ)骨脂等滋補(bǔ)腎陽(yáng)藥，如何調(diào)節(jié)各藥物之間的平衡，至關(guān)重要，使其能達(dá)到既滋腎陰，又補(bǔ)腎陽(yáng)則是更加難得，方中的佐藥蛇床子、當(dāng)歸等對(duì)君藥、臣藥有監(jiān)制作用，以緩和藥性，卻又不影響君藥等發(fā)揮療效，所以對(duì)此方中佐藥的檢測(cè)就顯得尤其重要，本發(fā)明正是本著上述觀點(diǎn)，在中醫(yī)理論指導(dǎo)下，根據(jù)現(xiàn)在中藥檢測(cè)方法，結(jié)合現(xiàn)有的顯微鑒別，經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)得出本發(fā)明的技術(shù)方案。本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)是規(guī)范了鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊的檢測(cè)方法，解決原來只有顯微鑒別存在的檢查不全面的問題，通過對(duì)當(dāng)歸，蛇床子綜合進(jìn)行鑒別及含量測(cè)定，能更全面的檢測(cè)該藥的成分，了解其含量和穩(wěn)定性，也有助于說明藥物的藥用物質(zhì)基礎(chǔ)。
具體實(shí)施例方式鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊由吉林紫鑫藥業(yè)股份有限公司按背景技術(shù)中處方和エ藝生產(chǎn)提供。包括如下鑒別方法和含量測(cè)定方法
(1)取本品鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊內(nèi)容物，置顯微鏡下觀察草酸鈣針晶纖細(xì)，成束，不規(guī)則地存在于薄壁細(xì)胞中；草酸鈣針晶束整齊或交錯(cuò)排列，長(zhǎng)40 150 y m,直徑約4 y m，存在于粘液細(xì)胞中；內(nèi)果皮細(xì)胞黃色，作鑲嵌狀排列，壁呈連珠狀增厚。胚乳細(xì)胞壁不均勻增厚，有較大的圓形紋孔；種皮表皮石細(xì)胞淡黃棕色，表面觀類多角形，壁較厚，孔溝細(xì)密，胞腔含暗棕色物；草酸鈣簇晶直徑20 68 ym，棱角銳尖；石細(xì)胞類方形或類圓形，壁一面菲薄；無色的結(jié)晶呈柱狀或塊狀；內(nèi)果皮細(xì)胞短纖維狀，作鑲嵌狀排列或上下層垂直相交；
(2)取本品鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊內(nèi)容物6g，加こ醚40ml，超聲處理10分鐘，功率250W，頻率40KHz，放冷，濾過，濾液置60°C水浴上揮去醚，殘?jiān)婴乘幛初ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材0. 5g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 u 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷こ酸こ酯=7 1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的熒光斑點(diǎn)；
(3)取本品鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊內(nèi)容物6g，加こ醇80ml，超聲處理30分鐘，功率250W，頻率40KHz，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml，加熱使溶解，放冷，用こ醚提取2次，毎次20 ml，合并こ醚液，置60°C水浴上揮干，殘?jiān)婴炒糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取蛇床子素對(duì)照品，加こ醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2 u 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60 90°C石油醚こ酸こ酯=4:1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的熒光斑點(diǎn)；
(ニ)含量測(cè)定方法
照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI D高效液相色譜法測(cè)定；
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；こ腈水=45 55為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為324nm ;柱溫30°C，理論板數(shù)按蛇床子素峰計(jì)算應(yīng)不低于7000 ；
對(duì)照品溶液的制備精密稱取蛇床子素對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含40呢的溶液，即得；
供試品溶液的制備取本品鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，放置2小時(shí)，超聲處理30分鐘，功率250W,頻率40KHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10沿，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
權(quán)利要求
1.一種鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊的檢測(cè)方法，包括如下鑒別方法 取本品鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊內(nèi)容物，置顯微鏡下觀察草酸鈣針晶纖細(xì)，成束，不規(guī)則地存在于薄壁細(xì)胞中；草酸鈣針晶束整齊或交錯(cuò)排列，長(zhǎng)40 150 μ m,直徑約4 μ m，存在于粘液細(xì)胞中；內(nèi)果皮細(xì)胞黃色，作鑲嵌狀排列，壁呈連珠狀增厚；胚乳細(xì)胞壁不均勻增厚，有較大的圓形紋孔；種皮表皮石細(xì)胞淡黃棕色，表面觀類多角形，壁較厚，孔溝細(xì)密，胞腔含暗棕色物；草酸鈣簇晶直徑20 68 μ m，棱角銳尖；石細(xì)胞類方形或類圓形，壁一面菲??；無色的結(jié)晶呈柱狀或塊狀；內(nèi)果皮細(xì)胞短纖維狀，作鑲嵌狀排列或上下層垂直相交； 其特征在于還包括如下鑒別方法和含量測(cè)定方法 (一)鑒別方法 Cl)取本品鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊內(nèi)容物6g，加乙醚40ml，超聲處理10分鐘，功率250W，頻率40KHz，放冷，濾過，濾液置60°C水浴上揮去醚，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材O. 5g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷乙酸乙酯=7 1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； (2)取本品鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊內(nèi)容物6g，加乙醇80ml，超聲處理30分鐘，功率250W，頻率40KHz，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml，加熱使溶解，放冷，用乙醚提取2次，每次20 ml，合并乙醚液，置60°C水浴上揮干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取蛇床子素對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各2 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60 90°C石油醚乙酸乙酯=4:1為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； (二)含量測(cè)定方法 照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI D高效液相色譜法測(cè)定； 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈水=45 55為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為324nm ;柱溫30°C，理論板數(shù)按蛇床子素峰計(jì)算應(yīng)不低于7000 ； 對(duì)照品溶液的制備精密稱取蛇床子素對(duì)照品適量，加甲醇制成每Iml含4(^g的溶液，即得； 供試品溶液的制備取本品鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，放置2小時(shí)，超聲處理30分鐘，功率250W,頻率40KHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得； 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊的檢測(cè)方法，屬于中藥現(xiàn)代化領(lǐng)域。本發(fā)明通過對(duì)當(dāng)歸，蛇床子綜合進(jìn)行鑒別及含量測(cè)定，配合原有的顯微鑒別，規(guī)范了鎖陽(yáng)補(bǔ)腎膠囊的檢測(cè)方法，解決原來只有顯微鑒別存在的檢查不全面的問題，能更全面的檢測(cè)該藥的成分，了解其含量和穩(wěn)定性，也有助于說明藥物的藥用物質(zhì)基礎(chǔ)。
文檔編號(hào)G01N30/02GK103018396SQ20131000028
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2013年1月1日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月1日
發(fā)明者殷金龍, 李坤, 徐德輝, 高艷輝, 李雪, 馬偉才, 李男男, 楊錫龍, 劉微, 朱秀峰 申請(qǐng)人:吉林紫鑫藥業(yè)股份有限公司