專利名稱：Dmmt純度及制備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥中間體的質(zhì)量分析檢測(cè)領(lǐng)域，特別是一種DMMT純度及制備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
頭孢替安鹽酸鹽是由日本武田公司研發(fā)于1981年首次在日本上市的第二代半合成頭孢菌素。對(duì)革蘭陽(yáng)性菌的作用與頭孢唑啉接近，對(duì)革蘭陰性菌，如嗜血桿菌、大腸埃希菌、克雷伯桿菌、奇異變形桿菌等作用較優(yōu)。用于治療敏感菌所致的感染以及手術(shù)和外傷所致的感染和敗血癥等。·
頭孢替安鹽酸鹽是一種新藥，目前藥典中沒(méi)有此藥的檢測(cè)方法，文獻(xiàn)中曾報(bào)道過(guò)Grand電位滴定法和HPLC法。這幾類檢測(cè)方法僅針對(duì)頭孢替安鹽酸鹽成品含量，沒(méi)有對(duì)頭孢替安鹽酸鹽中間體DMMT (N, N- 二甲基氨基乙基-5-巰基-四氮唑)的檢測(cè)做出描述。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種DMMT純度及制備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測(cè)方法，以克服現(xiàn)有檢測(cè)方法上的缺陷，滿足企業(yè)對(duì)生產(chǎn)過(guò)程和成品質(zhì)量控制方面的要求。本發(fā)明所述的DMMT純度及制備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測(cè)方法，以色譜乙腈和磷酸鹽緩沖液為流動(dòng)相，利用高效液相色譜法檢測(cè)，純度以面積歸一法計(jì)算，含量以外標(biāo)法按峰面積計(jì)算。包括如下步驟(I)流動(dòng)相的配制色譜乙腈和磷酸鹽緩沖液按體積比1:8、充分混合，用稀磷酸調(diào)節(jié)PH值至6. (Γ6. 5，用O. 45 μ m有機(jī)過(guò)濾膜抽濾；(2)洗脫方式高效液相色譜法采用恒流速等梯度洗脫；(3)設(shè)定色譜條件色譜柱使用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，柱長(zhǎng)15 25cm，檢測(cè)波長(zhǎng)254 260nm，柱溫15 35°C，流速I 1. 2mL/min ；(4)檢測(cè)進(jìn)樣量10 20μ L ;(5)頭孢替安對(duì)照品配制濃度為O. 2^0. 3mg/mL ；(6)中間體DMMT樣品的配制濃度是O. 5 lmg/mL ；(7)頭孢替安鹽酸鹽樣品的配制濃度是O. 2^0. 3mg/mL。其中步驟(I)中磷酸鹽緩沖液的pH為6. 0-8. 0，配制為取磷酸二氫鉀溶液250ml，加O. 2mol/L氫氧化鈉溶液118ml，用水稀釋至IOOOmL,搖勻，即得。步驟(5)中頭孢替安對(duì)照品為中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。儀器配置使用高效液相色譜儀，島津LC-20A，LCsolution工作站。中間體DMMT溶液的配制精密稱取DMMT樣品12. 5mg^25mg于25ml容量瓶中，力口流動(dòng)相稀釋至刻度。制備出的頭孢替安鹽酸鹽樣品溶液的配制精密稱取頭孢替安鹽酸鹽樣品20mg^30mg于IOOml容量瓶中，加適量流動(dòng)相超聲溶解，然后稀釋至刻度。洗脫方式恒流速等梯度洗脫。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)實(shí)現(xiàn)了頭孢替安鹽酸鹽中間體和成品使用同一條件檢測(cè)，且溶液穩(wěn)定，準(zhǔn)確度高(相對(duì)誤差彡O. 3%)，精密度好(同一個(gè)樣品每隔I小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差彡O. 8% ；每隔2小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差<1. 5%)。
具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例1量取IOOmL色譜乙腈，加入900mL磷酸鹽緩沖液(pH7. 0，磷酸鹽緩沖液的配制為取磷酸二氫鉀溶液250ml，加O. 2mol/L氫氧化鈉溶液118ml，用水稀釋至IOOOmL,搖勻，即得。)混勻，抽濾。設(shè)定檢測(cè)波長(zhǎng)254nm,流速1. OmL/min,柱溫30°C,使用15cm C18色譜柱。精密稱取DMMT樣品O. 0165g于25mL容量瓶中，加入適量流動(dòng)相超聲溶解，并稀釋至刻度，進(jìn)樣20 μ L，每隔I小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差< O. 3%，每隔2小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差彡O. 8%。測(cè)得的此批樣品純度值為98. 9%，精密稱取由此DMMT生產(chǎn)出的頭孢替安鹽酸鹽樣品O. 0223g于IOOmL容量瓶中，加入適量流動(dòng)相超聲溶解，并稀釋至刻度，進(jìn)樣20 μ L，每隔I小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差< O. 5%，每隔2小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差彡1. 0%。此批頭孢替安鹽酸鹽含量為85. 9%，收率為146%。實(shí)施例2量取IOOmL色譜乙腈，加入800mL磷酸鹽緩沖液(pH6. O)混勻，抽濾。設(shè)定檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，流速1. 2mL/min,柱溫15°C，使用25cm C18色譜柱。精密稱取DMMT樣品O. 0181g于25mL容量瓶中，加入適量流動(dòng)相超聲溶解，并稀釋至刻度，進(jìn)樣20 μ L，每隔I小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差< O. 4%，每隔2小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差< O. 7%。測(cè)得的此批樣品純度值為99. 1%，精密稱取由此DMMT生產(chǎn)出的頭孢替安鹽酸鹽樣品O. 0241g于IOOmL容量瓶中，加入適量流動(dòng)相超聲溶解，并稀釋至刻度，進(jìn)樣20 μ L，每隔I小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差< O. 3%，每隔2小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差<1. 1%。此批頭孢替安鹽酸鹽含量為86. 3%，收率為150%。實(shí)施例3量取IOOmL色譜乙腈，加入850mL磷酸鹽緩沖液(pH8. O)混勻，抽濾。設(shè)定檢測(cè)波長(zhǎng)260nm，流速1. OmL/min,柱溫35°C，使用15cm C18色譜柱。精密稱取DMMT樣品0. 0205g于25mL容量瓶中，加入適量流動(dòng)相超聲溶解，并稀釋至刻度，進(jìn)樣20 μ L，每隔I小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差< 0. 6%，每隔2小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差<1. 3%。測(cè)得的此批樣品純度值為98. 8%，精密稱取由此DMMT生產(chǎn)出的頭孢替安鹽酸鹽樣品0. 0218g于IOOmL容量瓶中，加入適量流動(dòng)相超聲溶解，并稀釋至刻度，進(jìn)樣20 μ L，每隔I小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差< 0. 7%，每隔2小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差<1. 2%。此批頭孢替安鹽酸鹽含量為85. 8%，收率為145%。
權(quán)利要求
1.一種DMMT純度及制備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測(cè)方法，其特征在于以色譜乙腈和磷酸鹽緩沖液為流動(dòng)相，利用高效液相色譜法檢測(cè)，純度以面積歸一法計(jì)算，含量以外標(biāo)法按峰面積計(jì)算。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的DMMT純度及制備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測(cè)方法，其特征在于包括如下步驟(1)流動(dòng)相的配制色譜乙腈和磷酸鹽緩沖液按體積比1:8、充分混合，用稀磷酸調(diào)節(jié) pH值至6. 0 6· 5，用O. 45 μ m有機(jī)過(guò)濾膜抽濾；(2)洗脫方式高效液相色譜法采用恒流速等梯度洗脫；(3)設(shè)定色譜條件色譜柱使用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，柱長(zhǎng)15 25cm，檢測(cè)波長(zhǎng)254 260nm，柱溫15 35°C，流速I 1. 2mL/min ；(4)檢測(cè)進(jìn)樣量10 20yL;(5)頭孢替安對(duì)照品配制濃度為O.2^0. 3mg/mL ；(6)中間體DMMT樣品的配制濃度是O.5 lmg/mL ；(7)頭孢替安鹽酸鹽樣品的配制濃度是O.2^0. 3mg/mL。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的DMMT純度及制備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測(cè)方法，其特征在于步驟(I)中磷酸鹽緩沖液的pH為6. 0-8. O。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥中間體的質(zhì)量分析檢測(cè)領(lǐng)域，特別是一種DMMT純度及制備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測(cè)方法。以色譜乙腈和磷酸鹽緩沖液為流動(dòng)相，利用高效液相色譜法檢測(cè)，中間體以面積歸一法計(jì)算，含量以外標(biāo)法按峰面積計(jì)算。流動(dòng)相為色譜乙腈和pH為7.0的磷酸鹽緩沖液按體積比1:8~9充分混合，用稀磷酸調(diào)節(jié)pH值至6.0~6.5，用0.45μm有機(jī)過(guò)濾膜抽濾。實(shí)現(xiàn)了頭孢替安鹽酸鹽中間體和成品使用同一條件檢測(cè)，且溶液穩(wěn)定，準(zhǔn)確度高(相對(duì)誤差≤0.3%)，精密度好(同一個(gè)樣品每隔1小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤0.8%；每隔2小時(shí)連續(xù)進(jìn)樣5次，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤1.5%)。
文檔編號(hào)G01N30/88GK103018386SQ20121051445
公開(kāi)日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年12月4日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月4日
發(fā)明者王永艷, 徐繼英, 董年亮, 宋琳琳 申請(qǐng)人:山東鑫泉醫(yī)藥有限公司