專利名稱：三味骨傷制劑中重金屬的分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥檢測(cè)領(lǐng)域，特別地，涉及一種三味骨傷制劑中重金屬的分析方法。
背景技術(shù)：
三味骨傷制劑處方為馬錢子粉100重量份，自然銅75重量份，廣西血竭20重量份，其主要用于治療跌打損傷和骨折，具有活血化瘀、行氣止痛、續(xù)經(jīng)接骨的療效。目前公布的三味骨傷膠囊制法為將處方量的煅自然銅和血竭混合粉碎成細(xì)粉，與處方量的馬錢子粉配研，過(guò)篩，混勻，制成顆粒，在35-40°C下鼓風(fēng)干燥3小時(shí)，裝膠囊得到規(guī)格為0. 2g/粒的硬膠囊。三味骨傷制劑處方中含有37. 5%的自然銅，由于含礦物質(zhì)的量較大，需要對(duì)重金屬的含量進(jìn)行精確的檢測(cè)以控制其安全性?！吨袊?guó)藥典》中規(guī)定了的重金屬檢測(cè)法，但該檢測(cè)方法只能粗略的估計(jì)重金屬是否在規(guī)定的范圍內(nèi)，并且只采用了鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液作為比較，并沒 有對(duì)鉛、鎘、砷、汞、銅的含量單獨(dú)進(jìn)行考察，不能確定鉛、鎘、砷、汞、銅的含量，無(wú)法保證三味骨傷膠囊的臨床使用安全性。同時(shí)現(xiàn)有的重金屬含量檢測(cè)方法重現(xiàn)性低，準(zhǔn)確性差，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不能正確反映三味骨傷膠囊中重金屬的真實(shí)含量。為確保三味骨傷制劑的臨床使用安全性，需要對(duì)三味骨傷制劑中重金屬進(jìn)行定量檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種三味骨傷制劑中重金屬的分析方法，解決現(xiàn)有技術(shù)中三味骨傷制劑中重金屬含量無(wú)法控制，檢測(cè)準(zhǔn)確性差，重現(xiàn)性低的問(wèn)題。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種三味骨傷制劑中重金屬的分析方法，包括以下步驟將三味骨傷制劑內(nèi)容物加入到人工胃液中得到混懸液；將混懸液在恒溫水浴中進(jìn)行振蕩，振蕩頻率為135 165r/min，然后在3500 4500r/min轉(zhuǎn)速下離心,得到上清液；對(duì)上清液分別進(jìn)行砷、汞、鎘、鉛、銅含量的檢測(cè)。進(jìn)一步地,砷的含量檢測(cè)包括以下步驟I)建立砷標(biāo)準(zhǔn)曲線；2)配制砷空白溶液和砷供試品溶液；3)采用原子熒光分光光度法測(cè)定砷供試品吸收度，并根據(jù)砷標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算砷供試品中酸可溶性砷的含量。進(jìn)一步地，原子熒光分光光度法中原子化器溫度為820 850°C，氬氣流速為350 450mL/min，屏蔽氣為 750 850mL/min。進(jìn)一步地，汞的含量檢測(cè)包括以下步驟I)建立汞標(biāo)準(zhǔn)曲線；2)配制汞空白溶液和汞供試品溶液；3)采用原子熒光分光光度法測(cè)定汞供試品吸收度，并根據(jù)汞標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算汞供試品中酸可溶性汞的含量。進(jìn)一步地，原子熒光分光光度法中原子化器溫度為25(T350°C，氬氣流速為35(T400mL/min，屏蔽氣為 75(T850mL/min。進(jìn)一步地，鎘的含量檢測(cè)包括以下步驟I)建立鎘標(biāo)準(zhǔn)曲線；2)配制鎘空白溶液和鎘供試品溶液；3)采用石墨原子分光光度法測(cè)定鎘供試品吸收度，并根據(jù)鎘標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算鎘供試品中酸可溶性鎘的含量。

進(jìn)一步地，石墨原子分光光度法分為干燥步驟、灰化步驟和原子化步驟；干燥步驟為在11(T120°C的溫度下干燥25s ;灰化步驟為在40(T500°C的溫度下灰化20s ;原子化步驟為在185(Tl950°C的溫度下原子化5s。進(jìn)一步地，銅的含量檢測(cè)包括以下步驟I)建立銅標(biāo)準(zhǔn)曲線；2)配制銅空白溶液和銅供試品溶液；3)采用火焰原子分光光度法測(cè)定銅供試品吸收度，并根據(jù)銅標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算銅供試品中酸可溶性銅的含量。進(jìn)一步地，鉛的含量測(cè)定包括以下步驟I)建立鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線；2)配制鉛空白溶液和鉛供試品溶液；3)采用石墨原子分光光度法測(cè)定鉛供試品吸收度，并根據(jù)鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算鉛供試品中酸可溶性鉛的含量。進(jìn)一步地，石墨原子分光光度法分為干燥步驟、灰化步驟和原子化步驟；干燥步驟為在115 125°C的溫度下干燥30s ;灰化步驟為在75(T850°C的溫度下灰化20s ;原子化步驟為在165(Tl800°C的溫度下原子化5s。本發(fā)明具有以下有益效果本發(fā)明將三味骨傷制劑在胃酸中進(jìn)行溶解，并分別對(duì)三味骨傷制劑中溶于胃酸的鉛、鎘、砷、汞、銅等重金屬含量進(jìn)行定量檢測(cè)，使人體實(shí)際吸收的各種重金屬控制在WHO規(guī)定的限度范圍內(nèi)，保證了重金屬檢測(cè)的準(zhǔn)確性和三味骨傷制劑的安全性。除了上面所描述的目的、特征和優(yōu)點(diǎn)之外，本發(fā)明還有其它的目的、特征和優(yōu)點(diǎn)。下面將參照實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合說(shuō)明書對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，但是本發(fā)明可以由權(quán)利要求限定和覆蓋的多種不同方式實(shí)施。三味骨傷制劑的處方中馬錢子粉為馬錢科植物馬錢Strychnos nux-vomica L.的干燥成熟種子的炮制加工品，購(gòu)自同仁堂飲片廠；自然銅為硫化物類礦物族黃鐵礦，主要成分為二硫化鐵。廣西血竭為百合科植物劍葉龍血樹Dranaena cochinchinensis (Lour.)S. C. Chen的含脂木材經(jīng)提制得到的樹脂。本發(fā)明提供了一種三味骨傷制劑中重金屬的分析方法，將三味骨傷制劑內(nèi)容物加入到人工胃液檢測(cè)人工胃液中砷、汞、鎘、鉛、銅等重金屬含量。三味骨傷膠囊處方中含有37. 5%的自然銅，由于含礦物質(zhì)的量較大，按照《中國(guó)藥典》中的重金屬檢測(cè)法檢測(cè)，重金屬含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了《中國(guó)藥典》規(guī)定的重金屬含量限度。重金屬含量若超標(biāo)，將在體內(nèi)與蛋白質(zhì)和酶發(fā)生相互作用，使蛋白質(zhì)和酶失去活性；或者累積在器官中，造成急性或者慢性中毒。為了保證三味骨傷膠囊的安全性，本發(fā)明將三味骨傷制劑內(nèi)容物溶解于人工胃液中，檢測(cè)人體實(shí)際吸收重金屬的含量。從檢測(cè)結(jié)果中得到溶于人工胃液的重金屬含量為
0.07、. 14ppm，完全低于《中國(guó)藥典》規(guī)定的重金屬含量限度。由此可知三味骨傷膠囊中的大部分重金屬并不溶解于胃液中，不能被人體吸收，因此對(duì)人體不構(gòu)成威脅?，F(xiàn)有技術(shù)中對(duì)重金屬含量的檢測(cè)都只考察藥物中含有的總重金屬含量，并沒有對(duì)人體實(shí)際吸收的重金屬含量進(jìn)行考察；這樣的檢測(cè)方法過(guò)于死板，由于三味骨傷制劑的處方中含有礦物質(zhì)，為了滿足現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)重金屬含量的限制，不得不降低礦物質(zhì)的含量，導(dǎo)致三味骨傷制劑的藥效降低。本發(fā)明將三味骨傷制劑進(jìn)行胃酸溶解后，不但能準(zhǔn)確檢測(cè)出人體實(shí)際吸收的重金屬含量，保證臨床應(yīng)用的安全性；而且放寬了對(duì)三味骨傷制劑處方中自然銅含量的限制，保證了三味骨傷制劑的藥效，從而使三味骨傷制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法更具適用性。人工胃液按照《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄XD A制備。 上述重金屬的測(cè)定方法為將三味骨傷制劑內(nèi)容物加入到人工胃液中得到混懸液，將混懸液在37 °C恒溫水浴中振蕩I小時(shí)，振蕩頻率為135 165r/min，然后在350(T4500r/min轉(zhuǎn)速下離心5min,得到上清液作為重金屬供試品；將重金屬供試品分別進(jìn)行砷、汞、鎘、鉛、銅等重金屬含量的檢測(cè)。將三味骨傷制劑內(nèi)容物溶于人工胃液中，模擬胃的消化環(huán)境，以振蕩頻率為135 165r/min進(jìn)行震蕩提取I小時(shí)后，三味骨傷制劑中的酸可溶性重金屬能完全提取出來(lái)，若繼續(xù)加大震蕩頻率或提取時(shí)間，酸可溶性重金屬含量不再上升。然后將提取液在4000r/min轉(zhuǎn)速下離心5min，離心操作可以將酸可溶性重金屬與不溶于人工胃液的重金屬完全分離出來(lái)，使離心后的上清液中酸可溶性重金屬的含量能真實(shí)反映出人體實(shí)際吸收的重金屬含量，保證了三味骨傷膠囊的人體用藥安全性。若振蕩頻率過(guò)低，則重金屬提取不完全，無(wú)法保證檢測(cè)得到的重金屬含量的準(zhǔn)確性。按照《中國(guó)藥典》中重金屬的檢測(cè)方法，只能粗略的估計(jì)重金屬是否在規(guī)定的范圍內(nèi)，并且只采用了鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液作為比較，不能準(zhǔn)確的反映三味骨傷膠囊中砷、汞、銅、鎘等重金屬的含量，可能存在安全隱患。為了更加嚴(yán)格的控制三味骨傷膠囊中重金屬的含量，保證重金屬含量檢測(cè)的準(zhǔn)確性，本發(fā)明將重金屬中的鎘、鉛和銅采用原子分光光度法進(jìn)行定量檢測(cè)，精密度高、準(zhǔn)確度強(qiáng)；重金屬中砷、汞若采用原子分光光度法檢測(cè)，吸光值太低，儀器誤差大，重現(xiàn)性不好，測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性較差，本發(fā)明采用原子熒光光譜法測(cè)定酸可溶性砷和汞的含量，原子熒光光譜法的靈敏度要比用原子吸收分光光譜法測(cè)定高幾百倍，精密度更好，檢測(cè)更準(zhǔn)確。以下砷、汞、鉛、鎘、銅單元素標(biāo)準(zhǔn)品由國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心提供。酸可溶性砷的含量測(cè)定方法按照原子熒光光譜法檢測(cè)，具體步驟為I)建立砷標(biāo)準(zhǔn)曲線；2)配制砷空白溶液和砷供試品溶液；3)采用原子熒光分光光度法測(cè)定砷供試品吸收度，并根據(jù)砷標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算砷供試品中酸可溶性砷的含量。砷標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法為將50v/v%濃度為I. 8mol/L的硫酸溶液，10v/v%濃度為50g/L硫脲，與40v/v%的水混合成稀釋液，分別量取砷單元素標(biāo)準(zhǔn)品用稀釋液稀釋得到濃度為Ong/mL的砷溶液A、lng/mL的砷溶液B、3ng/mL的砷溶液C、5ng/mL的砷溶液D、7ng/mL的砷溶液E、I Ong/mL的砷溶液F。分別吸取ImL砷溶液A卞注入原子化器中，調(diào)整光電倍增管電壓為400V，砷空心陰極燈電流為35mA，原子化器溫度為820 850°C，高度為8mm，氬氣流速為35(T450mL/min，屏蔽氣為75(T850mL/min，以lwt%鹽酸溶液作為載流液，lwt%硼氫化鈉和0. 3被％氫氧化鈉的混合溶液作為還原劑測(cè)定砷溶液A>的吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制砷標(biāo)準(zhǔn)曲線。砷空白溶液的制備量取20v/v%的人工胃液，加入50v/v%濃度為I. 8mol/L的硫酸溶液，加10v/v%濃度為50g/L的硫脲，與20v/v%水搖勻，得到砷空白溶液。砷供試品溶液的制備量取20v/v%三味骨傷制劑的上清液，加入50v/v%濃度為
I.8mol/L的硫酸溶液，加10v/v%濃度為50g/L硫脲，與20v/v%水搖勻，得到砷供試品溶液。本發(fā)明采用原子熒光分光光度計(jì)的檢測(cè)酸可溶性砷的含量，專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確性高，重現(xiàn)性好，檢測(cè)方法穩(wěn)定可靠。砷供試品溶液制備中，將供試品用硫酸溶液分解，加入硫脲，硫脲作為預(yù)還原劑能將五價(jià)砷(As5+)還原成三價(jià)砷(As3+)，同時(shí)抑制了鎳、鈷、銅等金屬離子的干擾，保證了檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定。硫脲的濃度越高，則熒光強(qiáng)度越大，本發(fā)明選擇濃度為50g/L硫脲，砷的熒光強(qiáng)度能保持基本穩(wěn)定。酸可溶性汞的含量測(cè)定方法按照原子熒光光譜法檢測(cè)，具有步驟為I)建立汞標(biāo)準(zhǔn)曲線。2)配制汞空白溶液和汞供試品溶液。3)按照原子熒光分光光度法測(cè)定汞供試品溶液的吸收度，并根據(jù)汞標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算汞供試溶液中酸可溶性汞的含量。汞標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法為分別將汞單元素標(biāo)準(zhǔn)品用濃度為I. 6mol/L的硝酸溶液稀釋得到濃度為Ong/mL的汞溶液A、0. 4ng/mL的汞溶液B、0. 8ng/mL的汞溶液C、l. 2ng/mL的汞溶液D、l. 6ng/mL的汞溶液E、2ng/mL的汞溶液F。分別精密吸取ImL汞溶液A>注入原子化器，調(diào)整光電倍增管電壓為240V，汞空心陰極燈電流為30mA，原子化器溫度為250^3500C，高度為8mm，氬氣流速為35(T400mL/min，屏蔽氣為75(T850mL/min，以1*丨％鹽酸溶液作為載流液，0. 5wt%硼氫化鈉和0. 1 丨％氫氧化鈉的混合溶液作為還原劑測(cè)定汞溶液A^F的吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制汞標(biāo)準(zhǔn)曲線。汞空白溶液的制備方法為量取20v/v%的人工胃液與80v/v%濃度為I. 6mol/L的硝酸溶液混勻得到汞空白溶液。汞供試品溶液的制備方法為量取20v/v%的三味骨傷制劑的上清液與80v/v%濃度為I. 6mol/L的硝酸溶液混勻得到汞供試品溶液。在汞供試品溶液制備中,將供試品用硝酸溶液分解,用0. 5%硼氫化鈉和0. 1%氫氧化鈉的溶液作為還原劑，將共價(jià)態(tài)汞還原成金屬汞，用惰性氣體氬氣載入石英原子化器中原子化，在汞空心陰極燈的發(fā)射光激發(fā)下產(chǎn)生原子熒光，檢測(cè)砷原子的熒光度。熒光度的大小反映了酸可溶性供試液中汞含量的大小。按照本發(fā)明的原子熒光分光光度法進(jìn)行酸可溶性汞的含量檢測(cè)，專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高，靈敏度高，迅速，能正確反映三味骨傷膠囊中酸可溶性汞的含量，重現(xiàn)性好，檢測(cè)方法穩(wěn)定可靠。酸可溶性鎘的含量測(cè)定方法按照石墨原子分光光度法檢測(cè)，具有步驟為
I)建立鎘標(biāo)準(zhǔn)曲線。2)配制鎘空白溶液和鎘供試品溶液。3)按照石墨原子分光光度法測(cè)定鎘供試品溶液的吸收度，并根據(jù)鎘標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算鎘供試品中酸可溶性鎘的含量。鎘標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法為分別取鎘單元素標(biāo)準(zhǔn)品用0. 2wt%的硝酸溶液制成濃度為Ong/mL的鎘溶液A、lng/mL的鎘溶液B、5ng/mL的鎘溶液C、7ng/mL的鎘溶液D、10ng/mL的鎘溶液E，調(diào)整原子分光光度計(jì)燈電流為5mA，狹縫寬度為0. 5nm,波長(zhǎng)為228. 8nm,分別將銅溶液A E在11(T120°C的溫度下干燥25s，在40(T50(TC的溫度下灰化20s，在185(Tl950°C的溫度下原子化5s，以lwt%磷酸二氫銨與0. 2被％硝酸鎂的混合溶液為基體改進(jìn)劑檢測(cè)鎘溶液Al的吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制鎘標(biāo)準(zhǔn)曲線。

鎘空白溶液的制備方法為以人工胃液作鎘空白溶液。鎘供試品溶液的制備方法為三味骨傷制劑的上清液為鎘的供試品溶液。本發(fā)明采用石墨原子分光光度法檢測(cè)酸可溶性鎘的含量，精密度高，準(zhǔn)確性強(qiáng)，檢測(cè)結(jié)果可信度高。在原子分光光度計(jì)中，調(diào)整燈電流為5mA，狹縫寬度為0. 5nm，保證檢測(cè)干擾小，準(zhǔn)確度更高。鎘元素在228. 8nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，因此檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置為228. 8nm。干燥溫度為11(T120°C，將鎘溶液A E干燥的目的是去除水分，防止鎘溶液在灰化時(shí)爆沸點(diǎn)溢出，導(dǎo)致樣品損失，測(cè)量結(jié)果不準(zhǔn)確；灰化溫度為40(T50(TC，鎘原子能灰化完全，并且不會(huì)導(dǎo)致金屬原子損失。原子化溫度為185(T195(TC，能將鎘元素充分原子化，原子化溫度太低則不能使金屬原子化。酸可溶性鉛的含量測(cè)定方法按照石墨原子分光光度法檢測(cè)，具有步驟為I)建立鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線。2)配制鉛空白溶液和鉛供試品溶液。3)按照石墨原子分光光度法測(cè)定鉛供試品溶液的吸收度，并根據(jù)鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算酸供試品中酸可溶性鉛的含量。鉛線性曲線的制備方法為分別量取鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)品用2 〖％硝酸溶液制成濃度為Ong/mL的鉛溶液A、10ng/mL的鉛溶液B、20ng/mL的鉛溶液C、30ng/mL的鉛溶液D、40ng/mL的鉛溶液E、50ng/mL的鉛溶液F ;調(diào)整原子分光光度計(jì)燈電流為10mA，狹縫寬度為0. 5nm，波長(zhǎng)為283. 3nm，分別將鉛溶液A F在115 125°C的溫度下干燥30s，在75(T850°C的溫度下灰化20s，在165(Tl800°C的溫度下原子化5s，以lwt%磷酸二氫銨和0. 2wt%硝酸鎂的混合溶液為基體改進(jìn)劑檢測(cè)溶液A>的吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線；鉛空白溶液的制備方法為以人工胃液作為鉛空白溶液。鉛供試品溶液的制備方法為三味骨傷制劑的上清液為鉛的供試品溶液。本發(fā)明采用石墨原子分光光度法檢測(cè)酸可溶性鉛的含量，精密度高，準(zhǔn)確性強(qiáng)，檢測(cè)結(jié)果可信度高。本發(fā)明調(diào)整石墨原子分光光度計(jì)的燈電流為10mA，狹縫寬度為0. 5nm，波長(zhǎng)為283. 3nm，使檢測(cè)器干擾更少，準(zhǔn)確性更高。干燥溫度為115 1251，將鉛溶液^\卞去除水分，防止鉛溶液在灰化時(shí)爆沸點(diǎn)溢出，導(dǎo)致樣品損失，測(cè)量結(jié)果不準(zhǔn)確；當(dāng)灰化溫度為75(T80(TC時(shí)，鉛原子能灰化完全，并且不會(huì)導(dǎo)致金屬原子損失；當(dāng)溫度達(dá)到165(T180(TC時(shí)，能將鉛元素完全原子化，以便檢測(cè)器檢測(cè)，保證測(cè)量的準(zhǔn)確性。
酸可溶性銅的含量測(cè)定方法按照火焰原子分光光度法檢測(cè)，具有步驟為I)建立銅標(biāo)準(zhǔn)曲線。2)配制銅空白溶液和銅供試品溶液。3)按照火焰原子分光光度法測(cè)定銅供試品溶液的吸收度，并根據(jù)銅標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算銅供試品中酸可溶性銅的含量。銅標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取銅單元素標(biāo)準(zhǔn)品加2wt%的硝酸溶液稀釋，得到濃度分別為0. 050 u g/mL銅溶液A，0. 200 u g/mL銅溶液B，0. 400 u g/mL銅溶液C，
0.600 u g/mL的銅溶液D，0. 800 u g/mL的銅溶液E。調(diào)整原子分光光度計(jì)乙炔流量為I. IL/min，助燃器高度為7. Omm,，狹縫寬度為0. 5nm，波長(zhǎng)為324. 7nm，分別將上述銅溶液Al在火 焰中燃燒，檢測(cè)銅溶液Al的吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制銅標(biāo)準(zhǔn)曲線。銅空白溶液的制備方法為以人工胃液作為銅空白溶液。銅供試品溶液的制備方法為重三味骨傷制劑的上清液為銅的供試品溶液。本發(fā)明采用火焰原子分光光度法檢測(cè)酸可溶性銅的含量，精密度高，準(zhǔn)確性強(qiáng)，檢測(cè)結(jié)果可信度高。原子分光光度計(jì)中乙炔流量影響火焰的溫度，當(dāng)乙炔流量為I. H/min,火焰溫度能將銅溶液中的銅充分燃燒；助燃器高度影響檢測(cè)的準(zhǔn)確性，當(dāng)助燃?xì)飧叨葹?. Omm時(shí)，線性良好，不影響檢測(cè)結(jié)構(gòu)；狹縫寬度影響光譜通帶與檢測(cè)器接收輻射的能量，如果狹縫寬度不合適，干擾線進(jìn)入光譜通帶內(nèi)，吸光度值明顯減小，影響檢測(cè)結(jié)果；當(dāng)狹縫寬度為0. 5nm時(shí)，能使吸收線和鄰近的干擾線分開，保證檢測(cè)準(zhǔn)確性。銅元素在324. 7nm波長(zhǎng)處有最大吸收，所以將原子分光光度計(jì)的波長(zhǎng)調(diào)整為324. 7nm。三味骨傷制劑為片劑、膠囊、口服液等常用劑型。根據(jù)上述砷、汞、銅、鉛、鎘等重金屬含量的檢測(cè)方法檢測(cè)得到三味骨傷制劑中重金屬的含量限度為鉛不得過(guò)百萬(wàn)分之二十；鎘不得過(guò)千萬(wàn)分之一；砷不得過(guò)百萬(wàn)分之十；汞不得過(guò)千萬(wàn)分之五；銅不得過(guò)百萬(wàn)分之二十。根據(jù)上述重金屬含量的限度計(jì)算，按照三味骨傷制劑的每天最大攝入量，計(jì)算三味骨傷制劑中重金屬的含量，計(jì)算結(jié)果為三味骨傷制劑中砷、汞、銅、鉛、鎘的含量均低于WHO規(guī)定的每人每天攝入的最大含量，證明本發(fā)明的三味骨傷制劑中對(duì)重金屬含量限度的控制是安全的。實(shí)施例以下實(shí)施例中所用的儀器和材料均為市售。以下三味骨傷制劑以三味骨傷膠囊為代表進(jìn)行酸可溶性重金屬檢測(cè)，其余三味骨傷片、三味骨傷口服液等制劑中重金屬的檢測(cè)均按照三味骨傷膠囊中酸可溶性重金屬的檢測(cè)方法檢測(cè)。實(shí)施例I飛酸可溶性重金屬的提取將三味骨傷膠囊(由湖南方盛制藥提供，批號(hào)071101)的內(nèi)容物0. 3g加入到50mL人工胃液中得到混懸液，將混懸液在37°C恒溫水浴中振蕩提取lh，震蕩頻率為135 165r/min ;然后在350(T450();r/min轉(zhuǎn)速下離心5min,取上清液得分別進(jìn)行砷、萊、鎘、鉛、銅等重
金屬含量的檢測(cè)。采用原子熒光分光光度法繪制砷標(biāo)準(zhǔn)曲線并測(cè)定上清液中砷的吸收度；砷標(biāo)準(zhǔn)曲線上砷的吸收度所對(duì)應(yīng)的濃度即為三味骨傷膠囊中酸可溶性砷的濃度。砷含量=砷濃度+三味骨傷膠囊濃度。采用原子熒光分光光度法繪制汞標(biāo)準(zhǔn)去選并測(cè)定上清液中汞的吸收度；汞標(biāo)準(zhǔn)曲線上汞的吸收度所對(duì)應(yīng)的濃度即為三味骨傷膠囊中酸可溶性汞的濃度。汞含量=汞濃度+三味骨傷膠囊濃度。采用石墨原子分光光度法繪制鎘標(biāo)準(zhǔn)曲線并測(cè)定上清液中鎘的吸收度；鎘標(biāo)準(zhǔn)曲線上鎘的吸收度所對(duì)應(yīng)的濃度即為三味骨傷膠囊中酸可溶性鎘的濃度。鎘含量=鎘濃度+三味骨傷膠囊濃度。采用火焰原子分光光度法繪制銅標(biāo)準(zhǔn)曲線并測(cè)定上清液中銅的吸收度；銅標(biāo)準(zhǔn)曲線上銅的吸收度所對(duì)應(yīng)的濃度即為三味骨傷膠囊中酸可溶性銅的濃度。銅含量=銅濃度+三味骨傷膠囊濃度。采用石墨原子分光光度法繪制鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線并測(cè)定上清液中鉛的吸收度；鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線上鉛的吸收度所對(duì)應(yīng)的濃度即為三味骨傷膠囊中酸可溶性鉛的濃度。鉛含量=鉛濃度+ 三味骨傷膠囊濃度。表I為實(shí)施例1飛，對(duì)比例廣4的重金屬檢測(cè)結(jié)果。表I酸可溶性重金屬的提取參數(shù)的考察結(jié)果表
權(quán)利要求
1.一種三味骨傷制劑中重金屬的分析方法，其特征在于，包括以下步驟 將三味骨傷制劑內(nèi)容物加入到人工胃液中得到混懸液； 將所述混懸液在恒溫水浴中進(jìn)彳了振湯，振湯頻率為135 165r/min,然后在3500 4500r/min轉(zhuǎn)速下離心,得到上清液； 對(duì)所述上清液分別進(jìn)行砷、汞、鎘、鉛、銅含量的檢測(cè)。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的分析方法，其特征在于，所述砷的含量檢測(cè)包括以下步驟 1)建立砷標(biāo)準(zhǔn)曲線； 2)配制砷空白溶液和砷供試品溶液； 3)采用原子熒光分光光度法測(cè)定所述砷供試品吸收度，并根據(jù)所述砷標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算所述砷供試品中酸可溶性砷的含量。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的分析方法，其特征在于，所述原子熒光分光光度法中原子化器溫度為820 850°C，氬氣流速為35(T450mL/min，屏蔽氣為75(T850mL/min。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的分析方法，其特征在于，所述汞的含量檢測(cè)包括以下步驟 1)建立汞標(biāo)準(zhǔn)曲線； 2)配制汞空白溶液和汞供試品溶液； 3)采用原子熒光分光光度法測(cè)定所述汞供試品吸收度，并根據(jù)所述汞標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算所述汞供試品中酸可溶性汞的含量。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的分析方法，其特征在于，所述原子熒光分光光度法中原子化器溫度為25(T350°C，氬氣流速為35(T400mL/min，屏蔽氣為75(T850mL/min。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的分析方法，其特征在于，所述鎘的含量檢測(cè)包括以下步驟 1)建立鋪標(biāo)準(zhǔn)曲線； 2)配制鎘空白溶液和鎘供試品溶液； 3)采用石墨原子分光光度法測(cè)定所述鎘供試品吸收度，并根據(jù)所述鎘標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 所述鎘供試品中酸可溶性鎘的含量。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的分析方法，其特征在于，所述石墨原子分光光度法分為干燥步驟、灰化步驟和原子化步驟；所述干燥步驟為在11(T120°C的溫度下干燥25s ;所述灰化步驟為在40(T500°C的溫度下灰化20s ;所述原子化步驟為在185(Tl950°C的溫度下原子化5s0
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的分析方法，其特征在于，所述銅的含量檢測(cè)包括以下步驟 1)建立銅標(biāo)準(zhǔn)曲線； 2)配制銅空白溶液和銅供試品溶液； 3)采用火焰原子分光光度法測(cè)定所述銅供試品吸收度，并根據(jù)所述銅標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算所述銅供試品中酸可溶性銅的含量。
9.根據(jù)權(quán)利要求I所述的分析方法，其特征在于，所述鉛的含量測(cè)定包括以下步驟 1)建立鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線； 2)配制鉛空白溶液和鉛供試品溶液； 3)采用石墨原子分光光度法測(cè)定所述鉛供試品吸收度，并根據(jù)所述鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算所述鉛供試品中酸可溶性鉛的含量。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的分析方法，其特征在于，所述石墨原子分光光度法分為干燥步 驟、灰化步驟和原子化步驟；所述干燥步驟為在115 125°C的溫度下干燥30s ;所述灰化步驟為在75(T850°C的溫度下灰化20s ;所述原子化步驟為在165(Tl800°C的溫度下原子化5s0
全文摘要
本發(fā)明提供了一種三味骨傷制劑中重金屬的分析方法，該分析方法包括以下步驟將三味骨傷制劑內(nèi)容物加入到人工胃液中得到混懸液；將混懸液在恒溫水浴中振蕩1h，振蕩頻率為135~165r/min，然后在3500~4500r/min轉(zhuǎn)速下離心5min，得到上清液；對(duì)上清液分別進(jìn)行砷、汞、鎘、鉛、銅含量的檢測(cè)。解決了三味骨傷制劑中重金屬含量難以控制，安全性不高等問(wèn)題。
文檔編號(hào)G01N21/33GK102768204SQ201210235888
公開日2012年11月7日 申請(qǐng)日期2012年7月9日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月9日
發(fā)明者張慶華 申請(qǐng)人:湖南方盛制藥股份有限公司